miR-433-3p靶向HP1BP3抑制胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力

目的：探究微小RNA-433-3p(miR-433-3p)对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响，以及miR-433-3p靶向异染色质蛋白1结合蛋白3(HP1BP3)对胃癌细胞的调控作用。方法：将人胃癌细胞系HGC-27和AGS分为阴性对照（NC）mimic组、miR-433-3p mimic组、NC siRNA (si-NC)组和HP1BP3 siRNA (si-HP1BP3)组，分别转染NC mimic、miR-433-3p mimic、si-NC和si-HP1BP3。RT-qPCR检测miR-433-3p在HGC-27和AGS细胞中的表达；CCK-8法和细胞集落形成实验检测细胞增殖；划痕愈合实验检测细胞迁移；Traswell实验检测细胞侵袭；Western blot检测HP1BP3蛋白表达。结果：与NC mimic组相比，miR-433-3p mimic组HGC-27和AGS细胞中miR-433-3p表达升高。过表达miR-433-3p抑制HGC-27和AGS细胞的增殖、迁移和侵袭，抑制HP1BP3蛋白表达；敲减HP1BP3抑制HGC-27和AGS细胞的增殖和迁移。结论：miR-433...     

钙网蛋白通过调节线粒体功能和线粒体合酶促进胃癌细胞转移

目的：探讨钙网蛋白(CALR)在胃癌组织中的表达水平及其调节AGS、HGC-27细胞转移的作用机制。方法：收集65例胃癌患者肿瘤组织样本和16例大网膜转移组织样本，采用免疫组织化学法检测胃癌及大网膜转移组织中CALR的表达水平；通过小干扰RNA(siRNA)下调AGS和HGC-27细胞中CALR的表达，通过慢病毒转染技术过表达AGS和HGC-27细胞中的CALR，采用Transwell实验和细胞划痕实验检测CALR表达对AGS、HGC-27细胞侵袭和迁移的影响；采用活性氧(ROS)和线粒体三磷酸腺苷(ATP)荧光探针检测AGS、HGC-27细胞ROS水平和ATP荧光强度；采用线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)检测AGS、HGC-27细胞线粒体膜电位水平；Western blot法检测CALR、肌浆/内质网Ca²⁺转运ATP酶A2(ATP2A2)、ATP酶Na⁺/K⁺转运亚基Beta 3(ATP1B3)和ATP合酶-偶联因子6(ATP5J)的蛋白表达水平；建立胃癌裸鼠腹腔移植瘤模型，探究CALR在体内对HGC-27细胞增殖...     

miR-26a下调COX-2的表达抑制胃癌AGS细胞增殖和侵袭

目的探讨miR-26a在胃癌组织和胃癌AGS细胞中表达量的改变及其对胃癌AGS细胞增殖和侵袭的影响。方法采用Real-time PCR法检测18例患者胃癌组织及对应的癌旁组织中miR-26a的表达。胃癌AGS细胞分别转染miR-NC和miR-26a,采用Western blot法检测转染前后细胞中COX-2的表达水平,同时采用CCK-8和克隆形成实验检测转染后AGS细胞的增殖和侵袭情况。结果 miR-26a在胃癌组织中的表达明显低于癌旁组织(P0.01);COX-2在乳腺癌组织和细胞中的表达明显高于癌旁组织(P0.01)。转染miR-26a后,胃癌AGS细胞内COX-2的表达量显著下调。CCK-8和克隆形成实验结果显示,过表达miR-26a能明显抑制胃癌AGS细胞的增殖和侵袭(P0.01)。结论 miR-26a抑制胃癌AGS细胞的增殖和侵袭可能与下调COX-2的表达相关。     

细胞周期蛋白K促进食管鳞癌细胞增殖的机制研究

目的:探讨细胞周期蛋白K(CCNK)促进食管鳞状细胞癌(ESCC)发生发展的机制。方法:对中国ESCC高发区155例患者的转录组数据及GSE53625数据库进行CCNK基因差异表达分析;通过转染慢病毒分别在KYSE150、KYSE30及KYSE180细胞中构建CCNK基因稳定敲减(CCNK-SH)和阴性对照(NC)细胞株;利用集落形成实验和CCK-8法检测敲减CCNK基因对ESCC细胞增殖的影响;应用流式细胞术检测敲减CCNK基因对ESCC细胞周期的影响;分析155例ESCC患者转录组数据,对CCNK差异表达基因进行信号通路富集;应用免疫荧光染色检测DNA损伤的指标γ-H2AX;分析155例ESCC患者转录组数据和RT-qPCR实验验证CCNK基因与DNA损伤修复相关基因表达的情况。结果:CCNK基因在ESCC组织中高表达(P<0.01);与NC组相比,CCNK-SH组细胞增殖和集落形成能力显著降低(P<0.01);敲减CCNK基因能够将ESCC细胞阻滞于G₂/M期(P<0.01);免疫荧光染色结果显示,与NC组相比,CCNK-SH组γ-H2AX...     

miR-376a、KLF15在胃癌中的表达及对胃癌AGS细胞增殖的影响

目的探讨过表达Cdh1蛋白对高糖诱导的视网膜Müller细胞株GFAP表达的影响。方法通过GEPIA公共数据库分析胃癌中KLF15的表达,通过OncomiR公共数据库分析miR-376a在胃癌中的表达。在AGS细胞系中分别转染miR-376a模拟物和miR-376a抑制物,qRT-PCR和Western blot法检测KLF15的表达,采用CCK-8法检测转染后AGS细胞的增殖能力。通过在线预测工具(TargetscanHuman 7.2, miRDB)预测KLF15是否为miR-376a的靶基因。结果在胃癌中,miR-376a表达升高,KLF15表达水平下降(P0.05);在AGS细胞系中,转染miR-376a模拟物后,miR-376a表达升高,KLF15表达下降(P0.05),AGS细胞的增殖显著升高;转染miR-376a抑制物后,miR-376a的表达水平下降,KLF15表达水平显著升高(P0.05),AGS细胞的增殖能力显著降低。生物信息学分析结果显示KLF15是miR-376a的靶基因之一。结论 miR-376a调节胃癌AGS细胞的增殖能力与下调KLF15的表达相关。     

circKIF4A通过靶向miR-3666调控胃癌AGS细胞增殖、迁移和侵袭研究

【摘要】　目的　探讨circKIF4A 对胃癌AGS 细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其对miR-3666 的靶向调控作用。方法　qRT-PCR 法检测胃癌组织和癌旁组织中circKIF4A、miR-3666 的表达量; 体外培养人胃癌细胞AGS, si-NC、si-circKIF4A、miR-NC、miR-3666 mimics、si-circKIF4A + anti-miR-NC、si-circKIF4A + anti-miR-3666 分别转染至AGS 细胞; CCK-8、平板克隆形成实验、划痕实验与Transwell 实验分别检测细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭; 双荧光素酶报告实验检测circKIF4A 与miR-3666 的靶向关系。结果　胃癌组织中circKIF4A的表达量升高(P< 0. 05), miR-3666 的表达量降低(P< 0. 05); 转染si-circKIF4A 或转染miR-3666 mimics 均可降低细胞活力和划痕愈合率(P<0. 05), 克隆形成数和侵袭细胞数减少(P< 0. 05); circKIF4A 能够靶向调控miR-3666; 共转染si-circKIF4A 和anti-miR-3666 可恢复转染si-circKIF4A 对AGS 细胞生物学行为的作用。结论　干扰circKIF4A 表达可通过靶向miR-3666 而抑制胃癌细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭。     

毛蕊异黄酮抑制胃癌干细胞样细胞的增殖、迁移与侵袭并诱导凋亡

目的：探索毛蕊异黄酮对胃癌干细胞样细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响及其分子机制。方法：用肿瘤干细胞成球培养法从胃癌AGS细胞中获得AGS干细胞样细胞（AGS-CSC）。分别应用0、30、60和120μmol/L的毛蕊异黄酮处理AGS-CSC后，采用集落形成实验和CCK-8分析法测量细胞增殖情况；划痕愈合实验和Transwell迁移实验检测细胞迁移；Transwell侵袭实验检测细胞侵袭；TUNEL染色和Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡；JC-1染色评估细胞线粒体膜电位情况；Western blot检测线粒体凋亡通路相关蛋白的表达情况。结果：毛蕊异黄酮可剂量依赖性抑制AGS-CSC细胞增殖、迁移和侵袭，降低线粒体膜电位，并增加凋亡水平。Western blot结果显示，毛蕊异黄酮以剂量依赖性上调促凋亡蛋白Bax的表达，同时下调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达，促进细胞色素C的释放，并增加cleaved caspase-3和-9的表达水平。结论：毛蕊异黄酮能抑制胃癌干细胞增殖、迁移与侵袭，并能激活线粒体凋亡途径。     

高表达活化白细胞黏附因子对AZ-521胃癌细胞系增殖能力的影响

目的:探讨活化白细胞黏附分子(Activated leukocyte cell adhesion molecule,ALCAM),即CD166对AZ-521胃癌细胞系增殖能力的影响。方法:以pLOX-CWBmi1-CD166慢病毒质粒感染胃癌细胞株AZ-521,采用荧光定量PCR以及Western blot分别测定CD166 mRNA和蛋白表达情况;采用CCK-8测定细胞增殖情况;采用吉姆萨染色测定细胞克隆形成数。结果:pLOX-CWBmi1-CD166慢病毒质粒感染胃癌细胞株AZ-521后CD166 mRNA和蛋白水平均明显增加(P<0.05);细胞增殖能力明显增加(P<0.05);细胞克隆形成数量明显增多(P<0.05)。体内成瘤实验显示,CD166过表达小鼠肿瘤体积明显大于对照细胞(P<0.05)。结论:CD166可促进AZ-521胃癌细胞系增殖。     

IL-37通过调控LINC01554/miR-223-3p轴抑制卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭北大核心CSCD

目的:探讨IL-37对卵巢癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响及作用机制。方法:RT-qPCR检测33例卵巢癌组织和癌旁正常组织LINC01554和miR-223-3p表达,Pearson相关性分析分析卵巢癌组织LINC01554和miR-223-3p表达的相关性。体外培养卵巢癌细胞Caov-3,经10、50、100 ng/ml IL-37干预后,CCK-8和克隆形成实验检测细胞增殖,划痕实验检测细胞迁移,Transwell检测细胞侵袭,Western blot检测细胞E-cadherin和N-cadherin蛋白表达,RT-qPCR检测细胞LINC01554和miR-223-3p表达。分别转染LINC01554过表达载体、LINC01554小干扰RNA或miR-223-3p模拟物至Caov-3细胞,上述方法观察过表达LINC01554、100 ng/ml IL-37对敲减LINC01554或过表达miR-223-3p的Caov-3细胞增殖、迁移和侵袭的影响。双荧光素酶报告基因实验验证LINC01554和miR-223-3p的靶向关系。结果:卵巢癌组织中LINC01554表达低于癌旁正常组织(P<0.05),而miR-223-3p表达高于癌旁组织(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,卵巢癌组织LINC01554与miR-223-3p表达呈负相关(r=−0.9772,P<0.05)。Caov-3细胞经50、100 ng/ml IL-37干预后,细胞OD值、集落形成数、划痕愈合率、侵袭数及N-cadherin蛋白表达降低(P<0.05),而E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05)。50、100 ng/ml IL-37促进Caov-3细胞LINC01554表达(P<0.05),而抑制miR-223-3p表达。过表达LINC01554降低Caov-3细胞OD值、集落形成数、划痕愈合率、侵袭数及N-cadherin蛋白表达(P<0.05),而促进E-cadherin蛋白表达。LINC01554可靶向结合miR-223-3p,且过表达LINC01554促进Caov-3细胞miR-223-3p表达。敲减LINC01554或过表达miR-223-3p均可减轻IL-37对Caov-3细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用。结论:IL-37可能通过调控LINC01554/miR-223-3p轴抑制卵巢癌细胞Caov-3增殖、迁移和侵袭。     

Mi R-31在胃癌组织中低表达并抑制HGC-27细胞增殖、迁移与侵袭

目的研究miR-31在胃癌患者中的表达,探讨miR-31对胃癌HGC-27细胞增殖、侵袭和转移的影响。方法收集胃癌患者标本39例,同时收取相应的癌旁组织20例。通过荧光定量PCR方法检测各组织中miR-31的表达水平。以脂质体为载体将miR-31模拟物转染至HGC-27细胞,CCK-8方法检测细胞增殖能力变化,Transwell实验检测HGC-27细胞侵袭和迁移能力变化。结果 miR-31在胃癌组织中的表达水平明显低于癌旁组织,P0.01。过表达miR-31能够显著抑制HGC-27细胞的增殖,显著抑制HGC-27细胞的侵袭和迁移能力(P0.01)。结论 MiR-31在胃癌中低表达,并抑制胃癌细胞系HGC-27的增殖、迁移和侵袭。     

MiR-33a在胃癌组织中低表达并抑制HGC-27细胞增殖、迁移与侵袭

目的探讨miR-33a在胃癌患者中的表达,探讨miR-33a对胃癌HGC-27细胞增殖、侵袭和转移的影响。方法收集胃癌患者标本39例,同时收取相应的癌旁组织20例。通过荧光定量PCR方法检测各组织中miR-33a的表达水平。以脂质体为载体将miR-33a模拟物转染至HGC-27细胞,CCK-8方法检测细胞增殖能力变化,Transwell实验检测HGC-27细胞侵袭和迁移能力变化。结果 miR-33a在胃癌组织中的表达水平明显低于癌旁组织,过表达miR-33a能够显著抑制HGC-27细胞的增殖,显著抑制HGC-27细胞的侵袭和迁移能力。结论 miR-33a可能对胃癌有治疗作用。     

长链非编码RNA LINC01105调控肝癌对胸腺素α1耐药

目的：初步探究长链非编码RNA LINC01105调控肝癌对胸腺素α1耐药的机制。方法：qRT-PCR检测肝细胞癌（HCC）组织和细胞LINC01105和miR-6769b-5p表达；荧光素酶报告实验检测LINC01105和miR-6769b-5p的靶向关系；qRT-PCR检测敲低LINC01105后miR-6769b-5p表达；CCK-8检测敲低LINC01105和miR-6769b-5p后不同浓度胸腺素α1处理下HCC细胞存活率；流式细胞术检测敲低LINC01105和miR-6769b-5p后，胸腺素α1处理下HCC细胞周期分布情况；构建小鼠肝癌异种移植模型，检测小鼠体内LINC01105和miR-6769b-5p调控对胸腺素α对HCC敏感性的影响。结果：HCC组织和细胞中LINC01105均呈高表达，而miR-6769b-5p均呈低表达；LINC01105可靶向抑制miR-6769b-5p mRNA表达；敲低LINC01105或过表达miR-6769b-5p可促进HCC对胸腺素α1的敏感性，并阻滞HCC细胞由S期进入G1期，而敲低LINC01105后抑制miR-6769b-5p表...     

RNA干扰抑制磷脂酰肌醇3-激酶p110β的表达增加氟尿嘧啶诱导人胃癌细胞凋亡的能力

目的探讨沉默磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)p110β因子的表达增加氟尿嘧啶(FU)诱导人胃癌细胞凋亡的能力。方法运用RNA干扰(shRNA)技术构建携带靶向抑制PI3Kp110β分子的慢病毒载体LV-sh PI3Kp110β并感染人胃癌细胞株AGS(sh PI3Kp110β组),未转染的细胞为空白对照组(Con组),转染无义序列的对照慢病毒载体LV-shRNA为阴性对照组(sh NC组),荧光显微镜观察慢病毒的感染效率,RT-PCR和Western blot方法验证慢病毒感染后PI3Kp110β mRNA和蛋白在Con、shNC和shPI3Kp110β各组细胞中的表达水平,并用嘌呤霉素筛选PI3Kp110β静默的稳转细胞。在稳转细胞中和对照细胞中加入不同浓度FU分别作用24、48和72 h,通过MTT法检测Con、shNC和shPI3Kp110β各组细胞在加入氟尿嘧啶后细胞增殖的情况,并用Western blot方法检测可能涉及的凋亡相关信号分子的变化。结果慢病毒干扰RNA(shRNA)感染人胃癌细胞株AGS后,能有效下调PI3Kp110β在细胞内的表达水平并成功筛选PI3Kp110β静默的AGS稳转细胞;FU可抑制AGS细胞的增殖,其作用呈现浓度的依赖性;在该细胞中下调PI3Kp110β的表达可增加该细胞对FU抑制细胞生长的敏感性;下调胃癌细胞AGS内shPI3Kp110β分子的表达可显著增加FU诱导凋亡相关蛋白PARP的裂解,抑制Bcl-2蛋白的表达,从而促进胃癌细胞的凋亡。结论 PI3Kp110β shRNA转染人胃癌细胞AGS可有效下调该细胞中PI3Kp110β的表达,增加5-Fu抑制人胃癌细胞生长及促进其凋亡的敏感性,促进凋亡信号通路相关蛋白的活化。     

lncRNA XIST通过靶向miR-3666调控胃癌细胞增殖、侵袭转移机制北大核心CSCD

目的:探讨lncRNA XIST对胃癌细胞增殖、侵袭转移的影响及分子机制。方法:收集武汉市第四医院30例胃癌患者癌组织及癌旁组织,培养正常胃黏膜上皮细胞MRG-1、胃癌细胞SGC-7901和AGS,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测lncRNA XIST和miR-3666表达水平;通过敲减胃腺癌细胞AGS中lncRNA XIST表达以及下调miR-3666表达水平,分析lncRNA XIST及miR-3666对胃癌细胞的调控作用,将细胞AGS分为si-NC组、si-XIST组、miR-NC组、miR-3666组、si-XIST+antimiR-NC组、si-XIST+anti-miR-3666组;MTT检测细胞增殖情况;Transwell检测细胞迁移和侵袭;流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告实验检测lncRNA XIST和miR-3666的靶向关系。结果:与癌旁组织和正常胃黏膜上皮细胞MRG-1比较,胃癌组织和AGS、SGC-7901细胞中XIST表达水平升高,miR-3666表达水平降低(P<0.05)。敲除lncRNA XIST或过表达miR-3666,AGS细胞增殖能力减弱,迁移和侵袭能力降低,细胞凋亡率升高(P<0.05)。lncRNA XIST靶向调控miR-3666,抑制miR-3666逆转了XIST基因敲除对胃癌AGS细胞增殖、运动性及凋亡的影响。结论:敲除lncRNA XIST可通过上调miR-3666抑制胃癌细胞增殖、迁移和侵袭,并促进细胞凋亡。     

miR-140靶向抑制PD-L1逆转胃癌间充质干细胞诱导的胃癌细胞免疫微环境中生存

为探讨上调miR-140表达的胃癌间充质干细胞(gastric cancer mesenchymal stem cell, GC-MSC)对胃癌细胞免疫微环境中生存的影响并探讨其机制,以贴壁细胞培养法分别从胃癌组织及癌旁组织中分离GC-MSC及胃间充质干细胞(gastric mesenchymal stem cell, GMSC)。qRT-PCR检测GC-MSC及GMSC中miR-140的差异表达;通过miR-140模拟物(miR-140 mimics)上调GC-MSC中miR-140的表达,CCK8法及FACS检测GC-MSC诱导的HGC-27细胞生存及凋亡情况,ELISA检测miR-140 mimics转染GC-MSC干预HGC-27细胞诱导PBMC分泌炎性因子的变化;以qRT-PCR及Western blotting检测miR-140 mimics/GC-MSC干预下胃癌HGC-27细胞PD-L1及PD-1表达水平的变化;双荧光素酶报告基因实验验证miR-140与PD-L1直接靶向调控关系。结果显示,miR-140在GC-MSC中的表达量显著低于GMSC(P<0.001);...     

miR-551b-3p在胃癌组织中低表达并抑制胃癌细胞系HGC-27的增殖、迁移和侵袭

目的探讨miR-551b-3p在胃癌中的表达变化情况,及其对胃癌细胞功能的影响。方法用real-time PCR的方法检测60例胃癌组织及其对应的癌旁组织中miR-551b-3p的表达量,使用miR-551b-3p模拟物(miR-551b-3p mimic)转染胃癌细胞系HGC-27,CCK-8法检测细胞增殖;划痕愈合实验检测细胞迁移;Transwell法检测细胞侵袭。结果 1)miR-551b-3p在胃癌癌症组织中的表达明显低于癌旁组织(P0.05)。2)过表达miR-551b-3p mimic可以明显减弱胃癌细胞系HGC-27的增殖、迁移和侵袭能力。结论 miR-551b-3p在胃癌组织中低表达,并且抑制胃癌细胞系HGC-27的增殖、迁移和侵袭,可能与胃癌发生发展密切相关。     

MicroRNA-29b重组慢病毒表达载体的构建及其抑制胃癌细胞系的迁移和增殖

目的构建has-miR-29b重组慢病毒的表达载体,并观察其对胃癌细胞系迁移和增殖能力的影响。方法将PCR扩增的miR-29b前体序列和pMIR载体经双酶切后连接产生pMIR-miR-29b慢病毒表达载体。pMIR-miR-29b、Packaging Plasmid(s)和pVSV-G质粒共转染包装细胞系293TN,包装产生慢病毒。使用收获的慢病毒颗粒感染胃癌细胞系HGC-27,72 h后利用real-time PCR检测miR-29b在HGC-27内的表达水平,Western blot检测其靶基因MCL-1的表达。划痕实验和细胞增殖实验分别观察在HGC-27细胞中过表达miR-29b后细胞迁移能力及增殖能力的变化。结果成功构建了miR-29b重组慢病毒的表达载体,感染胃癌细胞HGC-27后,能够成功过表达miR-29b。在HGC-27细胞中过表达miR-29b,其靶基因MCL-1的表达明显被抑制,并且Lenti-29b组与对照组Untreat组和Lenti-vector组相比,Lenti-29b组的迁移能力显著降低(P<0.01);Lenti-29b组与Lenti-vector组相比,Lenti-29b组在...     

红景天甙通过抑制PI3K / AKT 通路促进人胃癌AGS 细胞凋亡

目的:研究红景天甙对人胃癌AGS细胞凋亡的作用及机制。方法:不同浓度红景天甙处理AGS细胞,CCK-8法检测红景天甙对AGS细胞增殖的影响;Hoechst33342核染色观察凋亡形态学变化,流式细胞术检测凋亡细胞数变化,Western blot检测凋亡蛋白和PI3K/AKT通路蛋白表达变化;PI3K/AKT激动剂胰岛素样生长因子-1(IGF-1)预处理AGS细胞,流式细胞术和Western blot检测AGS细胞凋亡改变。结果:红景天甙呈浓度依赖性抑制AGS细胞增殖,导致细胞核固缩增多,凋亡细胞数增加,抗凋亡蛋白Bcl-2下调,促凋亡蛋白Bax、cleaved-Caspase-3、cleaved-Caspase-9、cleaved-PARP上调,p-PI3K和p-AKT活性下降;IGF-1干预处理后,明显减弱红景天甙促凋亡效应。结论:红景天甙抑制胃癌细胞增殖,并通过抑制PI3K/AKT信号通路显著促进胃癌细胞的凋亡。     

SRSF9/SRp30c通过调控GRβ对胶质瘤细胞增殖和迁移的影响

目的:探讨富含丝氨酸-精氨酸剪切因子9/富含丝氨酸-精氨酸蛋白30c(SRSF9/SRp30c)和糖皮质激素受体β(GRβ)在胶质瘤细胞中的表达及两者之间的关系。方法:用小干扰RNA(siRNA)靶向干扰胶质瘤U87细胞中SRSF9的表达,同时用慢病毒将短发卡RNA(shRNA)转染细胞,构建SRSF9敲减的U87稳转细胞株,通过荧光显微镜观察并检测转染情况。通过RT-q PCR和Western blot法检测SRSF9/SRp30c和GRβ的表达水平,CCK-8和细胞集落形成实验检测细胞的增殖能力,划痕实验检测细胞的迁移能力。结果:用2种方法敲减SRSF9后,SRSF9/SRp30c表达均降低,GRβ的表达水平也随之下降,差异有统计学意义(P0.05)。荧光显微镜观察结果表明,成功构建了稳转细胞株,转染效率超过80%。CCK-8实验和细胞集落形成实验的结果表明U87细胞在敲减SRSF9后,细胞活力和集落形成能力降低,差异有统计学意义(P0.05);划痕实验结果表明U87细胞在敲减SRSF9后,迁移能力明显减弱,差异有统计学意义(P0.05)。结论:SRSF9/SRp30c可通过调控GRβ促进胶质瘤细胞的增殖和迁移。     

敲低中心体蛋白55(CEP55)的表达抑制肝癌细胞体外增殖和迁移

目的探究敲低中心体蛋白55(CEP55)基因对肝癌细胞体外生长和迁移能力的影响。方法利用RNA干涉技术构建CEP55干涉的慢病毒质粒,通过病毒包装、感染和抗性筛选,获得CEP55基因沉默的SNU-739和BEL-7404人肝癌细胞稳定细胞株,并采用Western blot法对CEP55的敲低效果进行验证。敲低CEP55的表达后,采用平板集落形成实验和CCK-8法检测肝癌细胞增殖能力,划痕实验检测细胞迁移能力。结果与对照组比,稳定干涉CEP55的慢病毒感染SNU-739和BEL-7404细胞CEP55的表达明显降低。敲低CEP55的表达后,SNU-739和BEL-7404细胞的增殖能力受到抑制,迁移能力明显降低。结论敲低CEP55可以显著抑制肝癌细胞在体外的增殖和迁移。