巨噬细胞浸润及细胞间粘附分子-1表达在油酸致大鼠急性肺损伤发病中的作用

目的:探讨巨噬细胞浸润及细胞间粘附分子-1(ICAM-1)表达在油酸诱导的大鼠急性肺损伤(ALI)中的作用。方法:雄性Wistar大鼠静脉注射油酸复制ALI为油酸组,静脉注射生理盐水为对照组。静注后4h,测定血气(左心PaO₂)、肺泡通透指数等肺损伤指标。支气管肺泡灌洗液(BALF)中巨噬细胞比和可溶性细胞间粘附分子-1(sICAM-1)水平。用原位杂交检测ICAM-1mRNA表达水平和免疫组化双重套染方法检测巨噬细胞浸润程度与ICAM-1表达的关系。结果:油酸组PaO₂低于对照组、肺泡通透性指数高于对照组(P＜0.01),BALF中巨噬细胞比例,sICAM-1水平显著高于对照组(P＜0.01)。油酸组肺组织ICAM-1表达明显高于对照组,且肺组织中巨噬细胞浸润数、ICAM-1表达水平和肺损伤指标呈显著正相关。结论:巨噬细胞浸润在油酸致急性肺损伤中起重要作用,ICAM-1参与介导了巨噬细胞对组织的粘附、浸润和ALI的发生发展。     

慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺泡巨噬细胞促进气道上皮细胞增殖及黏蛋白和炎症因子分泌的机制

目的 通过慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠模型探讨肺泡巨噬细胞对气道上皮细胞增殖和分泌的影响及其相关机制。方法 支气管肺泡灌洗术收集烟熏和脂多糖诱导造模的COPD大鼠肺泡巨噬细胞与16HBE气道上皮细胞共培养。使用外泌体分离试剂盒提取大鼠肺泡巨噬细胞外泌体，PCR检测外泌体差异表达的微小RNA(miRNA)。采用miR-380模拟物(miR-380 mimic)过表达miR-380,小干扰RNA(siRNA)敲低16HBE细胞囊性纤维化跨膜转导调节因子(CFTR)。CCK-8法检测细胞增殖，Transwell^TM迁移实验检测16HBE细胞迁移；Western blot法检测黏蛋白5AC(MUC5AC)、 MUC5B、 MUC2、 CFTR的表达，ELISA检测16HBE细胞上清液肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)含量。结果 COPD大鼠肺泡巨噬细胞促进16HBE细胞的增殖和迁移，上调16HBE细胞黏蛋白和TNF-α、 IL-6的表达。COPD组大鼠肺泡巨噬细胞外泌体中miR-380明显上调。过表达miR-380及敲低CFTR均可下调16HBE细...     

中药大黄对重症急性胰腺炎肺损伤大鼠肺泡巨噬细胞凋亡的影响

目的:研究中药大黄对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肺泡巨噬细胞凋亡影响并探讨其作用机制。方法:牛磺胆酸钠建立大鼠SAP模型;流式细胞术检测大黄对SAP大鼠肺泡巨噬细胞损伤的影响;ELISA法检测大黄治疗的SAP大鼠肺泡巨噬细胞中TNF-α、NO含量;qRT-PCR法检测大黄治疗的SAP大鼠肺泡巨噬细胞中TNF-α、iNOS mRNA水平;Western blot检测大黄治疗的SAP大鼠肺泡巨噬细胞中p-JAK2、p-STAT3蛋白表达。结果:成功建立大鼠SAP模型;大黄治疗后,模型大鼠肺泡巨噬细胞中TNF-α、NO含量、TNF-α、iNOS mRNA表达及p-JAK2、p-STAT3蛋白表达均显著降低(P0.05)。结论:中药大黄可促进SAP大鼠肺泡巨噬细胞凋亡,其机制可能与失活JAK2/STAT3信号通路、抑制炎症因子分泌有关,可能为大黄的临床应用提供依据。     

p38蛋白激酶对大鼠肺泡巨噬细胞活化机制的调控

目的:探讨p38蛋白激酶对LPS诱导大鼠肺泡巨噬细胞激活机制的作用。方法:提取细胞核蛋白,采用Western印迹分析p38蛋白激酶水平。用放射免疫法检测细胞上清TNF-α、IL-8的含量。结果:LPS显著增加肺泡巨噬细胞TNF-α、IL-8的合成,呈剂量依赖性诱导p38的活化。特异性p38蛋白激酶抑制剂SB203580能显著降低LPS诱导的肺泡巨噬细胞核蛋白p38的含量及细胞上清TNF-α、IL-8水平。结论:LPS刺激肺泡巨噬细胞释放炎性细胞因子TNF-α、IL-8受p38蛋白激酶调控。     

Ficolin通过激活补体加重poly(I:C)联合LPS诱导的急性肺脏损伤北大核心CSCD

目的:探究纤维胶凝素(ficolin)在poly(I:C)联合LPS刺激诱导的急性肺损伤中的作用及机制。方法:6~8周龄SPF级C57BL/6小鼠和ficolin基因敲除小鼠分别随机分组,连续2 d滴鼻50μg/d poly(I:C),然后50μg/d滴鼻LPS 1 d,构建poly(I:C)和LPS联合刺激诱导的急性肺损伤小鼠模型,单独刺激或滴鼻PBS为对照组;HE染色检测肺组织病理变化;流式细胞术检测每组小鼠肺组织中性粒细胞和巨噬细胞的比例变化;Western blot检测每组小鼠肺组织和RAW264.7细胞中C3的表达变化和活化情况。结果:成功建立了poly(I:C)联合LPS刺激诱导的急性肺损伤小鼠模型。联合刺激组小鼠肺脏病理损伤加重,肺泡融合和弥漫性损伤,大量炎症细胞浸润;其中中性粒细胞和间质巨噬细胞比例显著提高,肺泡巨噬细胞比例显著降低。联合刺激增加小鼠肺组织和RAW264.7细胞中补体C3的表达和酶解活化,而敲除ficolin可明显降低联合刺激诱导的C3活化,并减少间质巨噬细胞募集和肺泡巨噬细胞耗竭,改善急性肺损伤。结论:Ficolin可通过激活补体加重poly(I:C)联合LPS刺激介导的肺脏炎症和急性肺损伤,是重症肺炎潜在的治疗靶点。     

抗巨噬细胞移动抑制因子抗体在油酸致急性肺损伤发病中的干预作用

目的:探讨抗巨噬细胞移动抑制因子单克隆抗体(anti-MIFMAb)在油酸诱导的大鼠急性肺损伤(ALI)中的干预作用,及其对巨噬细胞移动抑制因子(MIF)和细胞间粘附分子-1(ICAM-1)表达的影响。方法:雄性Wistar大鼠静脉注射油酸复制ALI为油酸组,静脉注射生理盐水为对照组,大鼠先给予抗-MIF单抗腹腔注射后再给予油酸静脉注射为抗-MIF单抗干预组。静注后4h,3组大鼠分别测定动脉血氧分压(PaO₂),肺泡通透指数等肺损伤指标;用ELISA法测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中可溶性细胞间粘附分子-1(sICAM-1)水平;用原位杂交检测MIF和ICAM-1mRNA表达水平;用免疫组化双重套染方法检测巨噬细胞浸润程度与MIF表达的关系。结果:油酸组PaO₂低于对照组和干预组,肺通透性指数高于对照组和干预组(P<0.01),BALF中sICAM-1水平显著高于对照组和干预组(P<0.01)。油酸组肺组织MIF和ICAM-1表达明显高于对照组和干预组(P<0.01),经抗-MIF单抗干预ICAM-1表达变化不明显,但MIF表达显著下调,巨噬细胞浸润减少且肺损伤指标改善。结论:MIF和ICAM-1在介导巨噬细胞对组织的粘附、浸润和ALI的发生发展中起重要作用,抗-MIF单抗主要通过阻断MIF表达,减少巨噬细胞浸润而起肺保护作用。     

二氧化硅致肺泡巨噬细胞自噬对其自身分泌肿瘤坏死因子-α和转化生长因子-β的影响

目的:研究自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)对二氧化硅(SiO_2)诱导的肺泡巨噬细胞自噬的激活,是否对自身分泌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和转化生长因子-β(TGF-β)产生影响。方法:收集SD雄性大鼠肺泡巨噬细胞灌洗液,将其随机分为对照组,SiO_2刺激组(SiO_2组),自噬抑制剂组(3-MA组)。采用体外暴露肺泡巨噬细胞染尘法,染尘成功后12 h给予10 mmol/L 3-MA干预。分别于干预后6、18、24 h和36 h用胰酶消化并收集体外培养的肺泡巨噬细胞。采用H-E染色观察肺泡巨噬细胞形态学改变;免疫细胞化学检测肺泡巨噬细胞中TNF-α和TGF-β的定位表达;免疫印迹检测肺泡巨噬细胞中TNF-α和TGF-β的蛋白定量。结果:SiO_2组与对照组相比肺泡巨噬细胞体积增大,胞质丰富,部分细胞胞质内可见矽尘吞噬颗粒。3-MA组较SiO_2组肺泡巨噬细胞形态改变减轻。与对照组相比,SiO_2组各时间相肺泡巨噬细胞中TNF-α和TGF-β的蛋白表达显著升高,于SiO_2刺激后6 h开始升高,18 h达高峰,24 h与36 h回落,但仍高于对照组水平。3-MA组可以显著下调SiO_2组对应时间点肺泡巨噬细胞中TNF-α和TGF-β的表达。结论:自噬抑制剂3-MA抑制肺泡巨噬细胞自噬后可以下调肺泡巨噬细胞中TNF-α和TGF-β的表达及释放,进而促进炎症损伤的修复。     

微管相关蛋白1轻链3及Beclin-1在硅沉着病大鼠肺泡巨噬细胞中的表达

目的观察自噬相关蛋白——微管相关蛋白1轻链3(LC-3)、Beclin-1在硅沉着病大鼠肺泡巨噬细胞中的表达,从细胞自噬角度探讨硅沉着病形成的分子机制。方法 50只成年雄性SD大鼠随机分为2组(n=25):对照组和硅沉着病模型组,每组再分5个时相组。采用非暴露气管灌注二氧化硅(SiO2)粉尘混悬液法(50g/L)建立大鼠硅沉着病模型。分别于造模后1、3、7、14及28 d分批处死5只大鼠,进行原位支气管肺泡灌洗,获取肺泡巨噬细胞,进行培养纯化和富集后用于后续研究。HE染色及透射电子显微镜观察肺泡巨噬细胞形态学改变;免疫细胞化学法检测LC-3、Beclin-1的表达及分布;免疫印迹法检测LC-3、Beclin-1的蛋白表达量。结果与对照组相比模型组肺泡巨噬细胞体积较大,胞质丰富,部分细胞内可见硅沉着吞噬颗粒,电镜下可见自噬体形成;模型组LC-3、Beclin-1在各时间点的表达较对照组均增多(P0.05),1 d即开始增多,随着时间的延长表达逐渐增多,至14 d时达高峰(P0.05),28d时回落,但仍高于对照组的表达。结论在硅沉着病大鼠肺泡巨噬细胞中有自噬的激活,肺泡巨噬细胞自噬参与了大鼠硅沉着病的病理进程。     

p38 MAPK在周期性机械牵张诱导肺泡巨噬细胞表达HMGB1中的作用

目的： 研究p38 MAPK在周期性机械牵张诱导肺泡巨噬细胞(AM)表达高迁移率族蛋白B1(HMGB1)中的作用。方法：大鼠AM随机分为A、B、C 3组,A组为对照组;B组细胞施加20%牵张应变,牵张时间为4 h;C组细胞的牵张模式与B组相同,在牵张前用p38 MAPK特异性抑制剂SB203580(40 μmol/L)预处理2 h。利用RT-PCR法检测HMGB1 mRNA的表达,Western blotting检测HMGB1蛋白表达和p38 MAPK的活性。结果：与对照组相比,AM施加20%牵张应变可诱导HMGB1蛋白和mRNA表达明显增加、p38 MAPK活性明显增高(均P<0.05),SB203580可显著抑制牵张应变的这种诱导作用(均P<0.05)。结论：周期性机械牵张可能通过p38 MAPK信号通路,调节肺泡巨噬细胞HMGB1 mRNA和蛋白的表达。     

转化生长因子β1对香烟诱导的大鼠肺泡巨噬细胞γ-谷氨酰半胱氨酸合酶表达的影响

目的:探讨转化生长因子(TGF)-β1对香烟诱导的大鼠肺泡巨噬细胞?-谷氨酰半胱氨酸合酶(γ-GCS)和活化蛋白(AP)-1亚单位c-fos mRNA及其蛋白表达的影响.方法:通过支气管肺泡灌洗获取大鼠肺泡巨噬细胞,随机分为对照组、香烟组和TGF-β1组.TGF-β1组加入终浓度为3μg/L的TGF-β1,2 h后除对照组外,余2组均加入香烟烟雾提取物,对照组加入磷酸盐缓冲液.分别用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和免疫细胞化学方法检测肺泡巨噬细胞中γ-GCSh(重链亚单位)及c-fos mRNA和蛋白的表达.结果:香烟组γ-GCSh和c-fos mRNA及其蛋白表达水平显著高于对照组(分别P＜0.05,P＜0.01).TGF-β1组γ-GCSh mRNA及其蛋白表达水平明显低于香烟组(均P＜0.01);而c-fos mRNA及其蛋白表达水平明显高于香烟组(均P＜0.01).结论:转化生长因子-β1参与香烟所致慢性阻塞性肺疾病肺氧化/抗氧化失衡的发病机制.     

蝉拟青霉对大鼠腹腔及肺泡巨噬细胞的激活作用

目的:探讨蝉拟青霉菌丝体水提取物对大鼠腹腔、肺泡巨噬细胞的激活作用。方法:大鼠随机分为4组:正常对照组(Ⅰ)、环磷酰胺组(Ⅱ)、蝉拟青霉组(Ⅲ)、环磷酰胺加蝉拟青霉组(Ⅳ),各组大鼠在同等条件下饲养,连续皮下注射相应药物26d。用生理盐水灌洗大鼠的腹腔和肺泡,收集腹腔与肺泡巨噬细胞(PMΦ、AMΦ)37℃培养2 h,用生化方法测定巨噬细胞内酸性磷酸酶(ACP)和乳酸脱氢酶(LDH)的活力,并进一步观察巨噬细胞摄取中性红的能力。结果:蝉拟青霉菌丝体水提取物使正常大鼠PMΦ、AMΦ内ACP、LDH活力显著升高,并能拮抗由于使用环磷酰胺所致的降低作用;而且能显著增强大鼠PMΦ、AMΦ的吞噬能力。结论:蝉拟青霉对腹腔、肺泡巨噬细胞具有激活作用。     

CCK-8对内毒素休克大鼠肺泡巨噬细胞吞噬及p38MAPK表达的影响

目的研究八肽胆囊收缩素(CCK-8)对脂多糖(LPS)引起的内毒素休克(ES)大鼠肺泡巨噬细胞吞噬功能、支气管肺泡灌洗液(BALF)中MDA含量变化以及大鼠肺泡巨噬细胞p38MAPK表达的改变.方法使用生理多道记录仪,观察尾静脉注入LPS(8mg/kgiv)复制的大鼠ES模型、LPS注入前10min尾静脉注入CCK-8(40μg/kgiv)、单独注入CCK-8(40μg/kgiv)或生理盐水(对照)的四组大鼠血压的改变,于LPS注入2h进行支气管肺泡灌洗,获BALF,从中分离肺泡巨噬细胞,检测吞噬白色念珠菌能力的改变,以吞噬率和吞噬指数表示;分离正常大鼠肺泡巨噬细胞,体外刺激30min后,免疫组化观察p38MAPK表达的变化.结果[HTSS〗CCK-8可逆转LPS引起的大鼠平均动脉血压的下降.LPS注入2h肺泡巨噬细胞吞噬能力显著增强,吞噬指数由对照组的2.43±0.41增加到3.80±0.60(P＜0.05),CCK-8抑制LPS诱导的肺泡巨噬细胞吞噬能力增强,但与对照组相比,CCK-8可增强吞噬能力.LPS组BALF中MDA含量显著增加(P＜0.05),CCK-8±LPS组MDA含量明显低于LPS组.免疫组化显示LPS可激活p38MAPK,CCK-8可增强p38MAPK的表达.讨论和结论LPS致BALF中MDA含量增高,提示LPS刺激下肺泡巨噬细胞激活,吞噬功能增强,引起一系列过强的炎症反应.CCK-8可明显减少BALF中MDA含量,抑制LPS引起的巨噬细胞吞噬功能的增强,但本身可增强巨噬细胞吞噬功能,其机制可能与p38MAPK途径有关.p38MAPK为多种信号传导途径的交汇点.CCK-8可能通过激活p38MAPK途径调节ES大鼠的免疫功能,二者可能存在微妙的平衡.     

微小RNA-146a在大黄素对脂多糖诱导的肺泡巨噬细胞炎症反应中的作用

目的：探讨微小RNA-146a(miR-146a)在大黄素对脂多糖(LPS)诱导的肺泡巨噬细胞炎症反应中的作用。方法将体外去致热源培养的大鼠肺泡巨噬细胞株NR8383分为空白对照组、LPS处理组和大黄素+LPS处理组,细胞培养6 h后收集细胞,采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测细胞中miR-146a的表达,Western blot法检测细胞中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)的表达。结果与空白对照组相比较,LPS作用后细胞中miR-146a、TNF-α和IL-6表达量明显升高;与LPS处理组相比较,大黄素+LPS处理组中miR-146a表达量显著上调,而TNF-α和IL-6表达量显著下调。结论大黄素可上调肺泡巨噬细胞中miR-146a的表达,大黄素可抑制巨噬细胞中TNF-α和IL-6的表达,miR-146a可能参与调控大黄素抗肺泡巨噬细胞炎症反应过程。     

碳纳米管对肺组织病理损伤

目的:探讨碳纳米管对肺组织的病理损伤.方法:雄性SD大鼠鼻腔滴注0.5 mg/ml的单壁碳纳米管(SWNTS)和多壁碳纳米管(MWNTS)颗粒悬液25 d,双蒸水滴注作为对照,取大鼠肺组织.采用光学显微镜和透射电子显微镜观察2种碳纳米管材料对肺组织的病理损伤.结果:SWNTS染毒组,观察到肺泡壁增厚,部分肺泡隔断裂,肺泡融合成肺大泡,肺间质有炎症细胞浸润,较高倍数下可以观察到肺组织中沉积有疑似SWNTS颗粒;在肺泡Ⅱ型上皮细胞中,板层体溶解,出现空泡化;在肺泡巨噬细胞中,次级溶酶体增多,细胞核染色质异常;MWNTS染毒组肺组织损伤情况与SWNTS染毒组相似,但较SWNTS染毒组要轻.结论:鼻腔滴注SWNTS和MWNTS均引起肺组织的病理学损伤和超微结构变化.相同的质量浓度下,SWNTS毒理效应强于MWNTS.     

平阳霉素诱导大鼠肺纤维化过程中肺泡巨噬细胞 增殖和凋亡的实验观察

目的 :以往的工作表明 ,平阳霉素 (ＢＬＭＡ5)诱导大鼠肺纤维化的早期 ,肺内ＮＯ增多 ,内源性ＮＯ的增多具有促肺纤维化形成的作用。已公认 ,在肺纤维化形成过程中 ,肺泡巨噬细胞异常释放的多种细胞因子具有促肺成纤维细胞增殖和合成胶原纤维的作用。为探讨内源性ＮＯ含量变化对肺泡巨噬细胞可能的影响 ,本实验观察注平阳霉素大鼠肺内ＮＯ增多期 (注平阳霉素后 1 4ｄ)和肺纤维化形成期 (注平阳霉素后 30ｄ)大鼠支气管肺泡灌洗液中细胞数量、增殖和凋亡情况。方法 :ＳＤ大鼠 2 4只 ,分为注平阳霉素后1 4ｄ组 (简称ＢＬＭＡ51 4ｄ组 )、注平阳…     

转化生长因子β1对香烟诱导的大鼠肺泡巨噬细胞γ-谷氨酰半胱氨酸合酶表达的影响

目的：探讨转化生长因子（TGF）-β1对香烟诱导的大鼠肺泡巨噬细胞γ-谷氨酰半胱氨酸合酶（γ-GCS）和活化蛋白(AP)-1亚单位c-fos mRNA及其蛋白表达的影响。方法:通过支气管肺泡灌洗获取大鼠肺泡巨噬细胞，随机分为对照组、香烟组和TGF-β1组。TGF-β1组加入终浓度为3 μg/L的TGF-β1,2 h后除对照组外，余2组均加入香烟烟雾提取物,对照组加入磷酸盐缓冲液。分别用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）和免疫细胞化学方法检测肺泡巨噬细胞中γ-GCSh(重链亚单位)及c-fos mRNA和蛋白的表达。结果:香烟组γ-GCSh和c-fos mRNA及其蛋白表达水平显著高于对照组(分别P<0.05,P<0.01)。TGF-β1组γ-GCSh mRNA及其蛋白表达水平明显低于香烟组(均P<0.01)；而c-fos mRNA及其蛋白表达水平明显高于香烟组(均P<0.01)。结论:转化生长因子-β1参与香烟所致慢性阻塞性肺疾病肺氧化/抗氧化失衡的发病机制。     

不同亚群肝脏巨噬细胞在猪血清诱导大鼠免疫性肝损伤中作用

目的:我们前期研究发现在正常大鼠肝脏中存在2个巨噬细胞亚群,本实验将探讨猪血清诱导免疫性肝损伤大鼠肝脏巨噬细胞的构成及作用。方法:(1)制作大鼠免疫性肝损伤模型。(2)肝脏病理组织学及免疫荧光研究。(3)流式细胞技术研究并分离肝脏巨噬细胞。(4)实时定量PCR检测肝脏巨噬细胞、炎症及纤维化相关细胞因子及Ki67(细胞增殖抗原,MKI67)的表达。结果:(1)猪血清腹腔注射组(IPS组)大鼠肝内大量纤维间隔形成,α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)阳性的肌成纤维细胞增生,ED2(CD163,表面抗原分化簇163)阳性细胞增多。(2)免疫荧光及印度墨注射后显示IPS组肝脏中巨噬细胞大小不一,自身荧光强弱不等,在肝内分布不同;GdCl3仅可清除体积大、自身荧光强的细胞。(3)自大鼠肝脏分离出2个巨噬细胞亚群,即ED2染色强阳性、自身荧光强的细胞(ED2high/AFhigh)和ED2染色弱阳性、自身荧光弱的细胞(ED2dim/AFdim),与对照组相比IPS组2个亚群细胞数量均显著增多。(4)ED2high/AFhigh细胞中主要表达与炎症相关的细胞因子,ED2dim/AFdim细胞则主要表达与纤维化相关的细胞因子。(5)ED2dim/AFdim细胞Ki67表达显著高于ED2high/AFhigh细胞,IPS组巨噬细胞Ki67表达显著高于对照组。结论:猪血清诱导免疫性肝脏损伤大鼠肝脏中亦存在2个巨噬细胞亚群,它们在肝脏损伤发病中发挥不同的作用,ED2dim/AFdim细胞增殖活跃,主要表达与纤维化相关的基因,可能在猪血清诱导的肝纤维化形成中起着重要作用。     

异丙酚通过NLRP3/IL-1β信号通路影响脂多糖诱导的肺泡巨噬细胞M1/M2表型分化

目的研究异丙酚对脂多糖诱导的肺泡巨噬细胞的免疫应答影响及相关机制进行初步探讨。方法分离大鼠原代肺泡巨噬细胞(AMs),并将细胞分为4组:对照组(control组:常规培养AMs),脂多糖组(LPS组:加入终质量浓度为1 000 ng/L脂多糖),异丙酚组(P组:加入终浓度为25μmol/L异丙酚),脂多糖+异丙酚组(LPS+P组:加终质量浓度为1 000 ng/L的LPS和25μmol/L异丙酚)。4组细胞常规培养24 h后,应用ELISA检测4组细胞培养上清液中IL-1β、IL-10、TNF-α的含量;细胞流式实验检测4组细胞表面F4/80、CD16/32、CD206分子表型所占比例;免疫磁珠分选F4/80+细胞,并利用RT-PCR检测细胞中iNOS、CD206的mRNA表达变化;最后应用RT-PCR及Western blot实验检测4组细胞中NLRP3/IL-1β信号通路中NLRP3、IL-1β及Caspase-1的mRNA及蛋白表达变化。结果 ELISA实验显示,异丙酚能够明显抑制LPS所诱导的AMs对促炎因子IL-1β、TNF-α的分泌,且促进细胞对抑炎因子IL-10的分泌;细胞流式及RT-PCR实验结果显示,异丙酚能够明显抑制LPS所诱导的AMs向M1型巨噬细胞分化,并促进细胞向M2型巨噬细胞分化;RT-PCR及Western blot实验结果显示,异丙酚能够明显抑制LPS所诱导的AMs中NLRP3/IL-1β信号通路中NLRP3、IL-1β及Caspase-1的m RNA及蛋白表达。结论异丙酚能够通过下调NLRP3/IL-1β信号通路抑制LPS所诱导的AMs向M1表型的分化,并促进细胞向M2表型的分化。     

米诺环素抑制蛛网膜下腔出血大鼠脑组织小胶质细胞/巨噬细胞活化改善血管病变

目的研究米诺环素对实验性大鼠蛛网膜下腔出血(SAH)所致神经炎症及脑血管病变的影响。方法单线穿刺法制备大鼠SAH模型;用神经功能评分检测各组大鼠的神经损害程度;ELISA检测大鼠皮层细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)的水平;Western blot法检测脑组织小胶质细胞/巨噬细胞标志物离子钙结合接头蛋白分子1(Iba-1)的水平;HE染色检测脑血管壁的形态学变化。结果成功制备实验性SAH大鼠模型;米诺环素治疗后SAH大鼠神经功能得到明显改善、脑组织中TNF-α和IL-1β水平下降、小胶质细胞/巨噬细胞活化受到抑制、血管痉挛和血管壁损伤得到明显缓解。结论米诺环素抑制SAH大鼠脑组织小胶质细胞/巨噬细胞活化改善血管病变。     

脂多糖对吸烟大鼠肺泡巨噬细胞增殖细胞核抗原及肺泡Ⅱ型上皮细胞Fas/FasL系统表达的影响

目的:研究脂多糖(LPS)对吸烟大鼠肺泡巨噬细胞(AM)增殖细胞核抗原(PCNA)及肺泡Ⅱ型上皮细胞Fas/FasL系统表达的作用。方法:应用免疫组织化学SABC法和免疫荧光标记技术,检测不同时期LPS对吸烟大鼠肺泡巨噬细胞PCNA表达和肺泡Ⅱ型上皮细胞Fas/FasL系统表达的影响。结果:吸烟大鼠AM上PCNA表达在第3、4月达高峰,LPS刺激的各组PCNA表达明显高于不加LPS组(P＜0.01);肺泡Ⅱ型上皮细胞Fas/FasL系统表达在加入LPS组表达显著高于未加LPS组(P＜0.01),且与AM上PCNA表达的变化相平行。结论:吸烟引起气道AM增殖速率加快,AM在肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤与修复过程中起重要作用。