庚型肝炎病毒致病性的动物实验研究

为进一步了解庚型肝炎病毒 (ＨＧＶ)的致病性 ,对 3只国产猕猴 (Ｍａｃａｃａｍｕｌａｔｔａ)于接种人ＨＧＶＲＮＡ阳性血清后进行了长达 2 0周的随访观察。现将结果报告如下。材料与方法3只猕猴购自我国广西壮族自治区 ,其中 2只为雄猴 ,1只为雌猴 ,年龄为 2～ 3岁。实验感染前采其静脉血 ,检测血清丙氨酸转氨酶 (ＡＬＴ)、血浆ＨＧＶＲＮＡ、外周血单个核细胞 (ＰＢＭＣ)中ＨＧＶＲＮＡ ,并用光镜和免疫组化法检测肝活检标本。给猕猴接种的血清系取自一名ＨＧＶＲＮＡ阳性的急性非甲～非戊型肝炎患者 ,对该份血清作 10倍稀释后 ,用逆转录…     

肝细胞肝癌组织中丙型肝炎病毒核心区基因及其表达 …

目的 采用多种方法检测丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）核心区基因和表达产物在肝细胞肝癌（ＨＣＣ）组织中的分布及其在ＨＣＣ发生和发展中的作用。方法 对３９例ＨＣＣ患者进行免疫组化和原位杂匀的检测。ＩＳ－ＲＴ－ＰＣＲ法用于检测并定位ＨＣＶ－ＲＮＡ。微切组织的ＲＴ－ＰＣＲ法分别检测癌与癌旁组织中的ＨＣＶ－ＲＮＡ,以便能够控制扩增产物的来源。同时还进行 血清学ＥＬＩＳＡ和ＲＴ－ＰＣＲ的检测。结果 血清ＥＬＩＳＡ的阳     

胃癌细胞HCG阳性的免疫组化研究

胃癌细胞ＨＣＧ阳性的免疫组化研究张佃乾，李祥周绒毛膜促性腺激素（ＨＣＧ）的生物学特性及其在非生殖系肿瘤中的出现，近年来逐渐被人们所认识。本文应用免疫组化检测技术对胃癌细胞ＨＣＧ阳性表达与胃癌的类型、肿瘤分化程度、侵犯深度及淋巴结转移数量等情况进行了对...     

庚型肝炎病毒致病性的初步研究

目的 探讨庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）的致病性。方法 应用ＲＴ－ｎＰＣＲ检测３６８例肝炎患者血清ＨＧＶ ＲＮＡ和血清酶的变化,并对其中１例单独庚型肝炎肝硬化病例进行肝脏活组织是检测。结果 在７１例急性黄疸型肝炎中检出单纯性ＨＧＶ ＲＮＡ阳性７例,１５５例慢性肝炎中检出单纯性ＨＧＶ ＲＮＡ阳性２２例,５１例肝硬化中检出单纯ＨＧＶ ＲＮＡ阳性３例。其中１例肝穿组织免疫组化证实为ＨＧＶ ＮＳ ５Ａｇ阳性。结论 争性黄疸型肝炎及乙、丙型肝炎病毒携带者,其慢性肝炎、肝硬化和肝癌中均可检出ＨＧＶ ＲＮＡ,ＨＧＶ感染可为单独感中与乙／丙型肝炎病毒混合或重叠感染,肝脏病理和免疫组化检查证实庚型肝炎病毒是一种嗜肝病毒,其定位主要存在于细胞浆内,可引起慢性病毒性肝炎甚至肝硬化。庚型肝炎病毒很可能具有致病性。     

丁型肝炎病毒感染树肝组织中Fas和ICE表达的初步研究

我们采用免疫组化技术检测感染丁型肝炎病毒 (ＨＤＶ )树肝组织中ＨＤＡｇ、Ｆａｓ和ＩＣＥ表达 ,并应用免疫组化双重染色分析病毒抗原、Ｆａｓ和ＩＣＥ表达之间的关系。1　材料和方法1 1　标本来源　 30份感染ＨＤＶ树肝组织 ,取自本科建立的感染ＨＤＶ树经免疫组化和原位杂交证实ＨＤＶ在肝细胞中稳定复制、表达 ,且伴ＡＬＴ升高。1 2　ＨＤＡｇ检测　采用ＳＰ法 ,ＳＰ检测试剂盒购自情士德生物工程有限公司 ,ＨＤＶ多克隆抗体由本室用ＨＤＶＡｇ合成肽免疫家兔制备而成 ,工作浓度 1∶12 0 ,ＨＤＶＲＮＡ原位杂交检测试剂盒购自华西…     

HCV感染树肝细胞初步探讨

为探讨ＨＣＶ感染后是否能直接致细胞病变 ,本研究用ＨＣＶＲＮＡ阳性血清直接接种培养的树肝细胞 ,然后检测感染后ＨＣＶ复制指标 ,并观察感染细胞形态学的变化。树购自中国科学院昆明动物研究所 ,5～ 8月龄 ,体重 110～ 140克 ,雌雄不限 ,双只关养。ＲＴ ＰＣＲ法检测证实ＨＣＶＲＮＡ为阳性的血清 ,ＥＬＩＳＡ法检测抗ＨＶＣ ＩｇＧ阳性 ,其它肝炎病毒标志物均阴性。免疫组化试剂盒购自福州迈新生物技术开发公司 ,抗ＨＣＶＮＳ3及ＨＣＶＮＳ5单克隆抗体 ,由北京医科大学肝病研究所提供 ;原位杂交试剂 :Ｄｉｇ标记的ＨＣＶ正链寡核苷…     

卵巢囊腺癌抑癌基因p16检测及其意义

进一步探讨新型抑癌基因Ｐ１６与人类卵巢癌发生发展的关系。方法：采用Ｓ－Ｐ免疫组化方法对母系ＨＯ－８９１０细胞系，高转移ＨＯ－８９１０ＰＭ，ＮＳＭＯ模型和转移瘤以及６９全卵巢癌腺癌手术标本石蜡组织进行Ｐ１６检测。结果。母素ＨＯ－８９１０细胞与高转移ＨＯ－８９１０ＰＭ细胞，ＮＳＭＯ模型及转移瘤均具有Ｐ１６阳性表达，表达强度均以转移细胞为弱。     

丙型肝炎病毒感染外周血单个核细胞的进一步研究

本文用三项不同技术 ,同时检测 2 0例慢性丙型肝炎患者血清和外周血单个核细胞 (ＰＢＭＣ)中的ＨＣＶＲＮＡ和ＨＣＶＮＳ5抗原 ,以进一步了解ＨＣＶ感染ＰＢＭＣ的状况 ,并对不同方法的检测结果进行比较分析。1　病例来源　 2 0例慢性丙型肝炎患者为同济医大附属协和医院住院或门诊病人 ,男性 13例 ,女性 7例 ,年龄在 14～ 6 5岁之间。诊断依据 1995年全国传染病会议修订的标准。甲、乙、戊型肝炎病毒感染指标均阴性。 15例健康成人作为对照。2　方法　用ＲＴ ＰＣＲ检测血清ＰＢＭＣ中的ＨＣＶＲＮＡ ,试剂盒系浙江温州伊利康生物技术有限…     

庚型肝炎病毒感染中国恒河猴血清学和肝组织学的动 …

目的 探讨庚型肝炎（ＨＧ）发生,发展规律及庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）的致病机理。方法 用１例临床和病理确诊的单独ＨＧＶ ＲＮＡ阳性的慢性肝炎患者血清１次或多次分别静脉攻击中国恒河猴,观察攻击前,后动物血清学和肝组织学的动态变化,同时用ＨＧＶ ＮＳ５区抗原制备的单克隆抗体进行肝脏组织免疫组化检测,并于感染后第１８个月体免疫１只雄性猴,取各种脏器观察组织学结构。结果 动物感染后第３０天血清ＡＬＴ,ＡＳＴ开     

乙二胺修饰法标记生物素化HBVDNA探针及其应用

采取将核酸用乙二胺作化学修饰后标记生物素的方法制备了生物素化ＨＢＶＤＮＡ探针．该探针的检测敏感性达到０．２５ｐｇ。用它作斑点杂交检测血清ＨＢＶＤＮＡ，结果４１份ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ阳性的血清有３６份显示斑点阳性；在９份ＨＢｓＡｇ阳性而ＨＢｅＡｇ阴性的血清中，有２份显示斑点阳性；而在５份ＨＢｓＡｇ阴性的正常人血清中未检出ＨＢＶＤＮＡ。     

重型乙型肝炎患者β_2－微球蛋白的检测及意义

对３１例重型乙型肝炎患者用放射免疫分析法检测血清中β＿２－Ｍ含量，并用免疫组化ＡＢＣ法检测肝内β＿２－Ｍ、ＨＢＡｇ和Ｔ细胞亚群的表达与分布。结果发现重型肝炎血清中β＿２－Ｍ含量显著增高，且与病情轻重相关；肝内浸润细胞中ＣＤ８￣＋细胞占优势，提示肝内β＿２－Ｍ、ＨＢｓＡｇ表达及ＣＤ８￣＋细胞的浸润与细胞损伤有关。     

重型乙型肝炎患者β2—微球蛋白的检测及意义

对３１例重型乙肝炎患者用放射免疫分析法检测血清中β２－Ｍ含量，并用免疫组化ＡＢＣ法检测肝内β２－Ｍ、ＨＢＡｇ和Ｔ细胞亚群的表达与分布。结果发现重型肝炎血清中β２－Ｍ含量显著增高，且与病情轻重相关；肝内浸润细胞中ＣＤ＾８＋细胞占优势，提示肝内β２－Ｍ、ＨＢｓＡｇ表达及ＣＤ＾８＋细胞的浸润与细胞损伤有关。     

视黄酸通过TLR4/NF-κB通路对脂多糖诱导血管炎症与氧化应激的影响

目的 研究视黄酸(RA)对脂多糖(LPS)诱导的血管炎症与氧化应激的保护作用并探讨其作用机制。 方法 SD大鼠给予RA和TLR4抑制剂连续口腔灌胃2周后,除对照组外,LPS组、RA 3 mg/kg组、RA 15 mg/kg组和TLR4抑制剂组（TAK-242, 3 mg/kg）,通过腹腔注射LPS (10 mg/kg)以建立血管炎症模型。血管张力测定系统检测血管舒张功能,硝酸还原酶法检测大鼠血清中一氧化氮（NO）的含量,ELISA法检测血清中IL-18、IL-1β、TNF-α、IL-6和GSH-px的水平,WST-1法和TBA法分别检测血清中超氧化物歧化酶（SOD）活力、丙二醛（MDA）,DHE荧光探针检测血管活性氧(ROS)的水平,免疫组化法检测血管 NF-κB p65的表达,免疫印迹法检测血管TLR4、eNOS和p-eNOS的表达。 结果 与LPS组相比,RA能够改善血管舒张功能,增加p-eNOS和NO的水平,减少血清炎症因子IL-18、IL-1β、TNF-α、IL-6的含量,降低血清中MDA和ROS的生成,升高血清中SOD的生成和GSH-px的释放量,并且下调血管TLR4和NF-κB p65的表达水平。另外,RA对LPS诱导的血管炎症与氧化应激的影响与TLR4抑制剂作用相似。 结论 RA对LPS诱导的血管炎症与氧化应激具有抑制作用,其可能通过TLR4/NF-κB p65信号通路发挥作用。     

FIZZ1在吸烟大鼠COPD模型肺组织的表达及与气道炎症的相关性研究

目的:探讨FIZZ1在吸烟大鼠慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型肺组织内的表达及其与COPD慢性气道炎症的相关性。方法:选用70只雄性Wistar大鼠,采用单纯吸入香烟烟雾的方法制造大鼠COPD模型,HE染色观察大鼠肺组织病理变化鉴定造模成功。采用免疫组化定性分析及Western blot定量检测COPD大鼠肺组织中FIZZ1在不同时点的蛋白表达。对支气管肺泡灌洗液(BALF)行炎症细胞计数。酶联免疫吸附法(ELISA)检测不同时点BALF及血清中白细胞介素4(IL-4)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量。结果:HE染色显示模型组大鼠在第20周之后炎症反应呈慢性过程,并逐渐呈现COPD的病理特征。免疫组化结果显示在模型组中,FIZZ1蛋白表达随着炎症反应的加剧而显著增强,且在COPD病变组织处表达相对较强;Western blot进一步证实了免疫组化的检测结果(P0.05)。与对照组比较,模型组大鼠BALF中炎症细胞总数、中性粒细胞绝对数和淋巴细胞绝对数在第4周开始均显著升高(P0.05)。一定范围内,与对照组比较,模型组大鼠BALF及血清中炎症因子IL-4和TNF-α升高(P0.05)。结论:FIZZ1作为一种肺组织特异性炎症介质,可能参与了COPD炎症反应的发生与发展,其机制可能与诱导炎症细胞浸润和炎症因子分泌有关。     

HBV血清免疫学标志和PHSAR与HBV DNA关系的研究

随ＰＣＲ技术的推广应用 ,以ＨＢＶＤＮＡ作为判断ＨＢＶ感染、病毒的复制状态、传染性及监测抗病毒疗效的一个重要标志 ,越来越受到人们的重视。本研究应用ＰＣＲ和ＥＬＩＳＡ ,对 1484例ＨＢＶ感染者的ＨＢＶＤＮＡ和人血清白蛋白受体 (ＰＨＳＡＲ)进行了检测 ,旨在探讨ＨＢＶ血清免疫学标志物 (ＨＢＶ Ｍ )常见模式、ＨＢＶＤＮＡ和ＰＨＳＡＲ三者之间的相互关系及其临床检测的意义。1　材料和方法1.1　材料　ＨＢＶ血清免疫学标志物 (ＨＢＶ Ｍ )阳性血清标本 1484份 ,来自 1996 0 9～ 2 0 0 0 0 7本院门诊和住院乙肝患者 ,其中男性 1…     

肾移植术后巨细胞病毒抗原检测及其临床意义

目的 建立一种早期、快速诊断人巨细胞病毒（ｈｕｍａｎ ｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ,ＨＣＭＶ）感染的抗原检测方法,以了解肾移植术后受者的ＨＣＭＶ感染情况并探讨其临床意义。方法 利用抗ＨＣＭＶ前早期抗原和早期抗原的单克隆抗体,建立了免疫组化Ｅｎｖｉｓｉｏｎ＾ＴＭ二步法。用于检测外周血多形核白细胞（ＰＭＮＬ）中ＨＣＭＶ抗原（前早期抗原和早期抗原）,诊断ＨＣＭＶ活动性感染。结果 检测肾移植术后受者８６     

病毒性肝炎肝细胞凋亡及与肝纤维化的关系

目的 研究病毒性肝炎肝细胞凋亡及与肝纤维化的关系。方法 以原位末端标记及免疫组化检测４０例慢性病毒性肝炎（ＣＨ）肝组织细胞调亡相关线状断裂ＤＮＡ以及Ｆａｓ抗原、转化生长因子β１（ＴＧＦ－β１）、Ⅲ型前胶原肽（ＰⅢＰ）在肝组织中的表达;以酶联免疫吸附测定（ＥＬＩＳＡ）检测血清可溶性Ｆａｓ（ｓＦａｓ）及ＴＧＦ－β１。结果 ＣＨ肝细胞ＤＮＡ损伤与肝组织Ｆａｓ抗原、ＴＧＦ－β１表达及血清ｓＦａｓ、ＴＧＦ－     

用重组结构区抗原检测抗丙型肝炎病毒IgM抗体方法的建立

目的检测抗丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）结构区蛋白ＩｇＭ抗体。方法采用丙型肝炎病毒Ｃ，Ｅ１，Ｅ２区重组抗原混合包被和分别包被酶标板；用兔抗人γ链血清处理人血清标本，再用固相包被羊抗兔抗体吸附兔抗人γ链－人ＩｇＧ复合物，建立了抗－ＨＣＶＩｇＭ检测方法。结果对７６例丙型肝炎病人血清进行抗－ＨＣＶＩｇＭ检测，同时与逆转录－巢式聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测结果进行比较，两者具有相关性（Ｐ＜０００５）；ＩｇＭ抗体组成分析结果表明采用全片段Ｃ、Ｃ＋Ｅ２区抗原血清标本中的抗－ＨＣＶＩｇＭ检出率分别可达９６６％和１００％。结论ＨＣＶ的Ｃ、Ｅ２重组抗原用于抗－ＨＣＶＩｇＭ检测具有较高的敏感度和特异性。     

血清CG、HA RIA在慢性HBsAg携带者中的应用价值

应用ＲＩＡ的方法对 40 2例慢性ＨＢｓＡｇ携带者进行了血清甘胆酸 (ＣＧ)、透明质酸 (ＨＡ)检测 ,旨在探讨慢性ＨＢｓＡｇ携带者肝脏功能的变化及其临床意义。资料和方法一、对象 :(一 )实验组 :按 1995年 5月北京第五次全国传染病寄生虫学术会议讨论修订的《病毒性肝炎防治方案 (试行 )》标准选择的慢性ＨＢｓＡｇ携带者 40 2例 (男 2 74,女 12 8) ,年龄 11～78岁 ,平均 39.5岁。检测ＣＧ、ＨＡ的同时均做了ＨＢｅＡｇ和ＨＢｓＡｇ·ＩｇＭ复合物ＲＩＡ。(二 )正常对照组 :10 3例 (男 83 ,女 2 0 ) ,年龄 19～ 5 2岁 ,平均 32 3岁。均系…     

肝细胞内HBcAg和HBsAg分布的演变特点

本文报道用免疫组化（ＡＢＣ）法检测２９例慢性乙型肝炎患者肝活检组织中ＨＢｃＡｇ和ＨＢｓＡｇ分布的动态演变，结合血清ＨＢｅＡｇ和ＨＢＶ ＤＮＡ的演变探讨其病毒学意义。ＨＢｃＡｇ、ＨＢｅＡｇ和ＨＢＶ ＤＮＡ全阳性反映ＨＢＶ高复制相，全阴性为非复制相，不一致为两相之间的过渡型（低复制相）。肝细胞内ＨＢｃＡｇ由核浆型为主演变为核型或浆型为主乃至阴性意味着ＨＢＶ从高复制相转入低复制相乃至非复制相，同时伴有血