雪胆素片抗炎镇咳作用的实验研究

目的：对雪胆素片抗炎、镇咳作用进行实验研究。方法：通过观察雪胆素片对小鼠耳廓肿胀、大鼠足趾肿胀的影响研究其抗炎作用;通过小鼠氨水引咳法,观察其镇咳作用。结果：雪胆素片对二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀以及角叉菜胶所致的大鼠足趾肿胀有一定的抑制作用;对氨水致咳的小鼠有明显的镇咳作用。结论：雪胆素片具有抗炎、镇咳的作用,为其临床用于治疗支气管炎,急性扁桃体炎等疾患提供了实验依据。     

右美托咪定通过抑制脊髓星形胶质细胞活化改善甲醛诱导的急性炎性痛

目的 探讨右美托咪定（DEX）在0.1%甲醛诱导的急性炎性痛中的作用。 方法 将30只ICR雌性小鼠随机分成生理盐水对照（NS）组、甲醛（F）组、右美托咪定+甲醛（DEX+F）组。向右后爪足底注射25 μl 0.4%甲醛建立小鼠急性炎性痛模型,在甲醛注射前1 h,DEX+F组小鼠腹腔注射DEX,NS组和F组小鼠腹腔注射等体积生理盐水。以小鼠舔咬足累计时间评价自发痛行为。采用免疫组织化学法和Western blotting检测脊髓星形胶质细胞标记物胶质纤维酸性蛋白（GFAP）的表达。 结果 自发痛评分结果显示,与NS组相比, F组小鼠出现典型的双相痛反应;与F组相比,DEX+F组小鼠的第Ⅰ时相痛（P<0.001）和第Ⅱ时相痛（P<0.001）累计时间明显减少。免疫组织化学结果显示,与NS组相比,F组小鼠脊髓后角GFAP阳性细胞数目明显增多（P<0.001）;与F组相比,DEX+F组小鼠脊髓后角GFAP阳性细胞数目明显减少（P<0.001）。Western blotting结果显示,与NS组相比, F组小鼠脊髓GFAP表达明显增加（P<0.05）;与F组相比,DEX+F组小鼠脊髓GFAP表达明显减少（P<0.05）。 结论 DEX可能是通过抑制小鼠脊髓星形胶质细胞的活化从而改善甲醛诱导的急性炎性痛。     

罗格列酮通过减少Th17细胞极化减轻LPS诱导的小鼠急性肺损伤

目的探讨罗格列酮(RSG)对急性肺损伤(ALI)小鼠的作用及可能的机制。方法 24只BALB/c小鼠,随机分为对照组(control)、模型组(LPS)、罗格列酮干预组(RSG)和GW9662拮抗组(GW9662),每组6只。分别检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎性细胞分类计数和炎性因子水平、HE染色观察肺组织病理改变,Q-PCR和Western blot分别检测Th17细胞核转录因子RORγt及PPARγ的mRNA和蛋白表达。结果与对照组比较,模型组BALF中性粒细胞比例和炎性因子水平均显著增高(P0.05);肺组织RORγt高表达(P0.05)。接受罗格列酮干预小鼠PPARγ明显增高,炎性反应指标均较模型组减轻(P0.05),同时伴有RORγt表达降低。GW9662显著拮抗罗格列酮的保护作用,小鼠肺组织炎性反应显著,RORγt基因的mRNA和蛋白水平均较罗格列酮组回升(P0.05)。结论罗格列酮可通过活化PPARγ,进而抑制Th17细胞的分化,减轻由LPS诱导的小鼠急性肺损伤。     

人参皂苷衍生物AD-1通过抑制NLRP3炎症小体活化改善TNBS诱导的小鼠急性IBD

目的：初步探讨人参皂苷衍生物AD-1对三硝基苯磺酸（TNBS）诱导的小鼠急性炎症性肠病（IBD）的影响及相关机制。方法：将6～8周龄的C57BL/6雄性小鼠随机分为正常对照组、乙醇对照组、模型组、治疗组和阳性对照组,后3组于造模前7 d采用1%TNBS乙醇溶液涂抹皮肤进行预敏化处理,造模日采用2.5%TNBS乙醇溶液灌肠建立小鼠急性IBD模型。AD-1和阳性对照药5-ASA于TNBS造模后第2天进行灌胃给药,连续灌胃4 d,第6天处死小鼠。取小鼠结肠,HE染色观察结肠组织的病理变化;RT-PCR和Western blot方法检测小鼠结肠组织的促炎细胞因子、紧密连接蛋白和NLRP3炎症小体的表达水平;ELISA法检测小鼠血清中IL-1β、IL-18水平。结果：AD-1能降低小鼠DAI评分,明显改善TNBS诱导的急性IBD小鼠结肠长度缩短的情况（P<0.01）;治疗组小鼠结肠组织炎症病理明显改善,结肠组织促炎细胞因子IL-6、TNF-α、IL-1β、IL-18及NLRP3表达水平明显低于模型组（P<0.05或P<0.01）;紧密连接蛋白的表达水平高于模型组（P<0....     

二甲双胍对脂多糖致炎性反应小鼠的抗炎作用

目的探究二甲双胍(Met)对脂多糖(LPS)致炎性小鼠的抗炎效应。方法 ICR小鼠分为对照组、LPS组、二甲双胍高、中和低剂量组(400, 200和100 mg/kg)。对照组和LPS组腹腔注射0.9%氯化钠溶液,其余3组注射不同剂量的二甲双胍;0.5 h后,除对照组外,其余4组腹腔注射等体积的LPS致小鼠炎性反应,6 h后测量小鼠的脾指数;ELISA检测小鼠血清中炎性因子IL-6、TNF-α和IL-10的表达;RT-PCR检测小鼠肝脏组织IL-6、TNF-α和IL-10 mRNA表达的变化;HE染色检测小鼠肝脏组织炎性反应变化。结果相对于LPS组,二甲双胍用药组小鼠的脾指数降低(P0.05);外周血IL-6和TNF-α及肝脏组织中IL-6和TNF-αmRNA的表达明显下降(P0.05);而外周血IL-10及肝脏组织中IL-10 mRNA显示上升(P0.05);二甲双胍高剂量组可明显减轻由LPS所致小鼠肝脏的炎性反应。结论二甲双胍对于LPS致炎性小鼠具有一定的抗炎活性。     

甲醛致小鼠急性炎性疼痛时脊髓溴结构域结合蛋白4的表达上调

目的探讨溴结构域结合蛋白4(BRD4)在小鼠脊髓中的表达及其在急性炎性疼痛中的作用。方法 36只雌性昆明小鼠,随机分成3组,即对照组;甲醛组:小鼠予以右侧后肢足底皮下注射25μL 1%甲醛溶液;甲醛+吲哚美辛组:小鼠腹腔注射吲哚美辛(20 mg/kg)1 h后注射甲醛溶液,每组12只。立即观察小鼠的自发疼痛行为;用免疫荧光方法检测BRD4在脊髓的细胞定位;免疫组化和Western blot检测双侧脊髓BRD4的表达。结果 BRD4在小鼠脊髓后角浅层主要定位于神经元;甲醛可诱导小鼠出现明显的双相性自发痛;吲哚美辛预处理可明显减轻甲醛诱导的第二相疼痛;与对照组相比,甲醛组小鼠双侧脊髓BRD4的表达明显上调(P0.05);吲哚美辛干预组双侧脊髓BRD4的表达下调(P0.05)。结论脊髓后角浅层BRD4的表达上调可能参与了急性炎性疼痛的调节。     

β-制动蛋白2在炎性痛小鼠脊髓背角的表达及作用

目的:通过建立不同类型的炎性痛模型,观察β-制动蛋白2(Arrb2)在炎性痛小鼠疼痛发展过程中的作用。方法:在WT小鼠和Arrb2^-/-小鼠建立由卡拉胶(carrageenan)诱导急性炎性痛模型和弗氏完全佐剂(CFA)诱导慢性炎性痛模型,通过von Frey纤维丝法测定不同时间点的机械缩足反应阈值(PWT);利用Western Blot技术观察Arrb2在急性痛和慢性痛中的表达;在脊髓背角采用鞘内给药的方式,通过von Frey纤维丝法检测小鼠给予μ受体选择性激动剂(DAMGO)后短期和长期的PWT。结果:与WT小鼠相比,Arrb2^-/-小鼠在急性痛状态下痛敏恢复程度较慢,而在慢性痛早期表现出显著的抑痛作用。Western Blot结果显示：在急性痛模型下,脊髓背角Arrb2蛋白表达无明显变化,而在慢性痛模型下,Arrb2蛋白表达下降。最后,鞘内注射DAMGO实验表明,在急性痛模型下,敲除Arrb2后鞘内注射DAMGO短期无显著作用,后期可诱发吗啡耐受样痛敏;在慢性痛状态下,敲除Arrb2后鞘内注射DAMGO则在短期和长期均表现出镇痛作用的...     

MAPK4 敲除对内毒素诱导小鼠急性肺损伤的影响

目的:观察MAPK4敲除对内毒素诱导小鼠急性肺损伤的影响并探讨其意义。方法:利用脂多糖(LPS)腹腔注射野生型(WT)和MAPK4基因敲除(MAPK4-/-)小鼠分别诱导小鼠急性肺损伤(ALI)模型;观察记录小鼠生存情况、小鼠体重变化和肺脏脏器指数变化; HE染色观察肺脏组织病理学变化情况; Real-time PCR检测肺脏组织中相关炎性因子mRNA表达水平变化; Western blot检测相关信号途径分子表达变化。结果:相比WT小鼠,生存分析结果显示MAPK4-/-小鼠的生存时间明显增长; HE染色显示MAPK4-/-小鼠肺脏组织炎性细胞浸润和肺泡间质增厚明显减少,病理性损伤明显减轻; Real-time PCR结果显示促炎因子IL-1β和TNF-α的mRNA表达水平明显降低,而抑炎因子TGF-β的mRNA表达水平明显增加(P 0. 05); Western blot结果显示p-AKT和p-JNK的表达明显下调(P0. 01)。结论:MAPK4敲除可减轻小鼠ALI模型的肺部损伤,其机制可能与Akt和JNK信号途径传递变化相关,提示其在ALI的病理发生中有重要调控作用。     

黄连素对金黄色葡萄球菌急性肺损伤的保护作用及相关机制研究

目的 探讨黄连素(berberine,BBR)对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)诱导小鼠急性肺损伤的保护作用及相关机制.方法 对小鼠行气道滴注SA构建急性肺损伤模型和体外刺激巨噬细胞RAW264.7感染模型.通过苏木精伊红染色方法(hematoxylin-eosin staining,HE)检测各组小鼠肺组织病理变化,Western印迹检测细胞中核转录因子P65蛋白和磷酸化分子p-P65蛋白,以及各样本中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白介素-6(interleukin-6,IL-6)的表达以评估黄连素对SA诱导的急性肺损伤的作用.结果 黄连素预处理可减轻SA诱导的急性肺损伤,减缓肺组织病理改变以及降低肺组织和细胞中炎性因子IL-6和TNF-α的表达并抑制p-P65蛋白的活化,但对P65的表达无影响.结论 黄连素可通过抑制P65炎症信号通路的发生进一步抑制炎性因子的释放从而对SA诱导的急性肺损伤起到保护作用.     

萘普酮的解热,镇痛及抗炎作用

1、萘普酮,阿斯匹林及消炎痛对小鼠经醋酸诱导的血管通透性亢进的抑制作用,其ED_(50)分别为9.38mg/kg,26.25mg/kg及0.829mg/kg。 2、对致霉菌素,角叉菜胶及急性佐剂诱导的炎肿的抑制作用:25mg/kg的萘普酮的抗炎效力优于75mg/kg的阿斯匹林P<0.05。(大鼠)     

HSP70/CD80 DNA疫苗通过调节趋化因子及受体对哮喘小鼠气道炎症的影响

目的 观察HSP70/CD80 DNA疫苗通过调节趋化因子及趋化因子受体对急性哮喘小鼠气道炎症和气道高反应性的治疗作用.方法 以卵清蛋白(OVA)致敏小鼠,建立小鼠急性哮喘模型,同时肌肉注射HSP70/CD80 DNA疫苗.观察小鼠气道反应性,外周血IgE,肺组织炎症和黏液分泌情况,CCL5和CCL17在气道表达情况.Real-time PCR检测肺组织CCR5和CCR4基因表达.结果 与对照小鼠相比,急性哮喘小鼠的气道反应性明显增高,血清IgE含量明显升高(P＜0.05),肺组织炎细胞浸润明显(P＜0.05),大量黏液形成.HSP70/CD80 DNA疫苗治疗小鼠后,能有效减轻气道高反应性,降低血清IgE含量,降低抑制气道炎细胞浸润,减少黏液分泌(P＜0.05);且CCL5在气道上皮呈阳性表达,CCL17呈阴性(P＜0.05);肺组织CCR5基因表达增加和CCR4表达减少(P＜0.05).结论 HSP70/CD80 DNA疫苗可通过增强CCL5在气道上皮中的表达,减少CCL17表达;上调CCR5抑制CCR4,使CCR5/CCR4升高,从而恢复Th 1/Th2平衡,起到治疗哮喘的作用.     

急性饮酒对小鼠海马 CA1区锋电位的影响

观察研究急性饮酒前后,小鼠海马区锋电位（Spike）的放电频率及峰峰间期等的变化,描述并分析清醒状态及急性饮酒后小鼠海马区神经元电信号的特征差异,评价急性饮酒对小鼠海马区记忆功能的影响。以 ICR 小鼠为实验对象,分成急性饮酒组（P 组）和生理盐水对照组（C 组）。在小鼠海马 CA1区植入8通道微电极阵列,利用神经信号处理采集系统 Cerebus 记录急性饮酒前后小鼠海马 CA1区神经电信号,分析比较海马区神经元放电频率以及锋电位间隔直方图（Interspike Interval Histograms ,ISI）的变化。P 组与 C 组比较,P 组平均放电率小于 C 组;与清醒状态下比较,急性饮酒后小鼠海马区神经元放电频率变低,然后随着时间逐渐增强,慢慢恢复;ISI 值从较为集中变为较为分散。急性饮酒后小鼠海马区神经元自发放电在放电频率、ISI 等神经信号的特征方面存在明显差异。急性饮酒可抑制小鼠海马区神经元放电,抑制小鼠记忆功能。     

香附、藿香挥发油抗炎、镇痛、解热作用的实验研究

目的:观察香附、藿香挥发油的抗炎、镇痛及解热作用,为香附、藿香挥发油的功效和临床更合理用药提供药理依据。方法:急性炎症模型采用角叉菜胶致大鼠足肿胀、蛋清致大鼠足肿胀、二甲苯致小鼠耳廓肿胀法;镇痛实验采用小鼠热板法和小鼠醋酸扭体法;解热实验采用2,4-二硝基苯酚致大鼠发热模型,观察香附及藿香挥发油的抗炎、镇痛和解热作用。结果:香附挥发油(0.018ml.kg-1、0.009ml.kg-1)组和藿香挥发油(0.014ml.kg-1、0.007ml.kg-1)组对角叉菜胶和蛋清诱发的大鼠足肿胀有一定程度的抑制作用而香附挥发油(0.046ml.kg-1、0.024ml.kg-1)和藿香挥发…     

CXCR1/2拮抗剂G31P对大剂量顺铂所致小鼠急性肝损伤的保护作用

目的利用趋化因子受体拮抗剂G31P探讨CXC趋化因子在大剂量顺铂(DDP)所致小鼠急性肝损伤中的作用及其可能的作用机制。方法利用大剂量DDP(15 mg/kg体质量)诱导小鼠急性肾功能衰竭的动物模型,C57BL/6小鼠被随机分为DDP用药组、DDP+G31P用药组(G31P用药组)和生理盐水(NS)对照组。15 mg/kg体质量DDP单次腹腔内注射,500μg/kg体质量G31P每日皮下注射1次,连用3 d,等量NS对照。分别取每组小鼠各10只,观察其用药后的反应及生存时间。取对照组小鼠及DDP用药后3、6、24、48 h的DDP用药组和G31P用药组小鼠各10只,称重后内眦静脉取血检测肝、肾功能。剖腹取肝组织,制备10%肝组织匀浆检测其中髓过氧化物酶(MPO)及白细胞介素6(IL-6)的含量,HE染色进行肝组织形态学观察。结果 DDP用药后1周内,70%的DDP用药组小鼠死亡,而G31P用药组小鼠全部存活。DDP用药后48 h小鼠出现急性肾功能衰竭,G31P可有效预防DDP所致的小鼠肾损害。DDP用药3～6 h后,小鼠外周血谷丙转氨酶(ALT)增高,并出现肝细胞变性、灶状坏死及炎细胞浸润;G31P能有效预防大剂量DDP所致的肝细胞坏死及炎细胞浸润。此外,DDP用药后6 h,G31P用药组小鼠肝组织MPO及IL-6的含量显著低于DDP用药组小鼠(P<0.01)。结论 G31P通过抑制中性粒细胞在肝组织内浸润及MPO和IL-6在肝组织内的释放从而对DDP所致的肝损害有保护作用,提示CXC趋化因子在大剂量DDP所致肝肾损害中发挥重要作用。     

天抗(TK)对脂多糖诱导小鼠炎症模型的抗炎作用及其机制

目的研究天抗(TK)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠炎症模型的抗炎作用及机制研究。方法将42只昆明小鼠随机分为正常对照(NC)组、模型对照(LPS)组、地塞米松(DXM)组、天抗低(TK-L)、中(TK-M)和高(TK-H)剂量组(0.2,0.8和3.2 g/kg)。各组分别灌胃给药7 d后,腹腔注射30 mg/kg的LPS诱导小鼠急性炎性模型,6 h后处死小鼠,检测小鼠脾脏指数,ELISA测定小鼠血清中IL-1β、IL-6和TNF-α的表达水平;生化法检测小鼠血清中SOD和MDA的表达;qRT-PCR检测小鼠脾脏TLR4、MyD88、TRAF6、p65、IL-1β、IL-6和TNF-αmRNA的表达水平;Western blot检测小鼠脾脏TLR4、MyD88、TRAF6、p-p65和p65蛋白表达水平。结果与LPS组相比,TK组小鼠的脾脏指数明显降低,血清和脾脏组织中IL-1β、IL-6、TNF-α和MDA水平显著下降,SOD水平明显升高,小鼠脾脏组织的TLR4、MyD88、TRAF6和p-p65等蛋白及mRNA表达水平均明显降低。结论天抗对LPS诱导的小鼠急性炎症模型具有抗炎作用,其作用机制可能是通过TLR4/MyD88/NF-κB(p-65)信号通路抑制炎症因子的释放。     

高脂饲养C57BL/6J小鼠肾周脂肪组织炎性反应的评估

目的评估高脂饲养C57BL/6J小鼠肾周脂肪组织炎性反应。方法将小鼠随机分为对照组(control组,n=6)和高脂饲养组(HFD组,n=6)。用RT-qPCR检测肾周脂肪组织中TNF-α、CD11c、IL-1β、IL-10、TGF-β1、CD206等mRNA的表达;免疫组织化学法检测肾周脂肪组织及肾实质F4/80、CD68、LCA的水平。结果与对照组比较,HFD组小鼠肾周脂肪组织TNF-α、IL-1β等mRNA相对含量升高(P0.05);HFD组的肾周脂肪巨噬细胞标志物F4/80,CD68及炎细胞广谱标志物LCA的表达均呈高表达(P0.05)。结论高脂饲养的C57BL/6J小鼠肾周脂肪组织确实存在明显的炎性反应。     

肝细胞生长因子对急性失代偿性心力衰竭模型小鼠的保护

背景：肝细胞生长因子是一种心肌营养因子,具有很强的抑制心肌细胞凋亡与心室重构,促血管内皮细胞有丝分裂作用。 目的：观察肝细胞生长因子对急性失代偿性心力衰竭模型小鼠的保护作用。 方法：将50只昆明小鼠随机分为5组：正常对照组、慢性心力衰竭组、急性失代偿性心力衰竭组、慢性心力衰竭治疗组、急性失代偿性心力衰竭治疗组。采用尾静脉注射阿霉素建立慢性心力衰竭小鼠模型,第7周尾静脉注射细菌脂多糖制作急性失代偿性心力衰竭模型,随后慢性心力衰竭治疗组、急性失代偿性心力衰竭治疗组同时给予尾静脉注射肝细胞生长因子干预。 结果与结论：与慢性心力衰竭组比较,慢性心力衰竭治疗组心室壁厚度、左室射血分数值明显增加,白细胞介素6减少,脑钠肽下降,Bax蛋白表达减少,Bcl-2蛋白表达增加,心肌细胞凋亡明显减少(P < 0.01或0.05)。与急性失代偿性心力衰竭组比较,急性失代偿性心力衰竭治疗组心室壁厚度、左室射血分数值明显增加,脑钠肽表达下调,白细胞介素6明显下降,Bcl-2蛋白表达增加,Bax蛋白表达减少(P < 0.01或0.05)。说明肝细胞生长因子通过抗炎性因子作用,抗心肌细胞凋亡作用明显改善急性失代偿性心力衰竭小鼠的心脏功能。     

肝细胞特异性Sirt1缺失加重小鼠肝脏炎性反应

目的探究沉默信息调节因子1 (Sirt1)基因的缺失对小鼠肝脏炎性反应的影响及其作用机制。方法每周记录在高脂喂养下的野生型C57BL/6J雄性小鼠和肝脏特异性Sirt1敲除(Sirt1-LKO)雄性小鼠的体质量,用Western blot和q-PCR检测炎性因子的表达;给小鼠腹腔注射20 mg/kg LPS,用生存曲线来反映小鼠对炎性反应的敏感性。结果与对照组WT小鼠相比,Sirt1-LKO小鼠表现为体质量明显减轻(P<0.05)。另外,生存曲线KaplaneMeier图显示Sirt1-LKO小鼠对LPS刺激呈现低敏感性(P<0.05)。Sirt1-LKO小鼠原代肝细胞中NF-κB蛋白水平增高(P<0.05),及NF-κB下游靶基因炎性因子Tnfα和IL6明显上调(P<0.05)。结论肝细胞特异性Sirt1缺失加重肝脏炎性反应。     

CRF2受体拮抗剂Astressin2B减轻葡聚糖硫酸钠诱导的小鼠实验性结肠炎

<正>炎性肠病的研究多集中在遗传、免疫及微生物等方面,近年发现神经肽也参与该病发生,其中促肾上腺皮质激素释放因子(corticotrophin-releasing factor,CRF)不仅在脑组织中存在,周围组织也有表达,后者与炎性反应发生有关[1],溃疡性结肠炎肠道炎性组织中CRF的表达增高,CRF基因敲除小鼠或CRF2受体缺陷小鼠肠道炎性反应减轻[2],提示周围型CRF信号系统活化与肠道炎性的发生有关,Astressin2B是     

由肠道菌群变化研究资木瓜总苷对K/BxN小鼠血清转移性关节炎的治疗作用

为探究肠道菌群改变与RA发生的联系及资木瓜总苷(total saponins of Chaenomelesspeciosa, TSCS)通过其变化对RA的治疗作用,建立K/BxN小鼠血清转移性关节炎模型,ELISA检测关节组织炎性因子水平;Illumina Miseq测序平台对小鼠粪便进行16S rRNA V3-V4区测序,利用GraphPad Prism 6.01软件分析肠道菌群结构差异、丰度变化及其与小鼠关节组织炎性因子水平的相关性。结果显示,TSCS能有效缓解关节炎小鼠踝关节肿胀程度并降低关节局部炎性因子水平;模型组小鼠肠道菌群丰度降低,TSCS组、肥大细胞缺乏组小鼠肠道菌群丰度增高;乳酸杆菌(Lactobacillus)、幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)、梭菌ⅩⅣa(ClostridiumⅩⅣa)、微小杆菌属(Exiguobacterium)、毛螺菌(Lachnospiracea_incertae_sedis)与炎性因子水平改变有显著相关性。由此,肠道菌群失调或可诱导关节组织炎性因子水平增高,引起疾病的发生,而TSCS通过改善肠道微生态、调节肠道菌群丰度起治疗关节炎的作用。