抗恶性疟单抗独特型决定簇的第二单克隆抗体的制备和鉴定

本文以分泌抗恶性疟疾红内期抗体的小鼠杂交瘤细胞系94D1诱生的腹水,通过Protein A-Sepharose cL-4B亲和层析法,纯化IgG,并以此作为免疫原皮下多点免疫Wistar大鼠。加强免疫后3天取脾与小鼠Sp2/0瘤细胞进行异种间的细胞融合,经间接ELISA法检测筛选和5次克隆化,最终得到一株生长稳定,连续分泌特异抗体的异种杂交瘤细胞系41RF5。经过多次冷冻和复苏以及体外连续传代培养6个月,其稳定性与小鼠×小鼠杂交瘤细胞相近。选择8株单抗和Sp2/0 IgG作为包被抗原,即6株抗恶性疟单抗:21E3、92D4(IgG2b)、93A3(IgG_1)、94B5(IgG_1)、94C_3(IgG_1)和94D1(IgG2b),1株抗猪尾猴疟原虫(Plas mc-dium inui)红内期单抗32A12(IgG_1)和1株抗登革热Ⅲ型病毒单抗215D3(Ig-G2b),用间接ELISA法对41RF5特异性进行鉴定,结果显示,41RF5单抗只与94D1呈阳性反应,与其余各种包被抗原均呈阴性反应,表明41RF5具有良好的抗94D1单抗独特型决定簇的特异性,41RF5培养上清中特异的抗体效价为1:1,28O。     

抗肝癌大鼠单克隆抗体3A5的特性及其平阳霉素偶联物的抗肿瘤活性

以人肝癌BEL－7402细胞免疫LOU／C大鼠，取其脾细胞与大鼠IR983F骨髓瘤细胞融合，获得稳定分泌抗人肝癌单克隆抗体3A5杂交瘤细胞株。ELISA交叉反应检测3A5对人肝癌BEL－7402、7721和Q3细胞皆呈强阳性，对人胚肺2BS细胞、人口腔鳞癌KB细胞和小鼠正常肝细胞等呈阴性。免疫电镜研究显示，肝癌细胞对单抗3A5胶体金粒的内化为44％，而B细胞为185，平均每个肝癌细胞含有金颗粒族数为0．89，KB细胞为0．22，相差4倍，肝癌细胞对胶体金颗粒的内化能被预先加入的单抗3A5特异性地封闭，将单抗3A5与平阳霉不进行偶联，用克隆生成法观察偶联物和游离平阳霉素对肿瘤细胞的杀伤作用，当药物与细胞接触为1小时，单抗3A5与平阳霉素偶联物对肝癌细胞有选择性杀伤作用，按IC50比较，偶联物对靶细胞肝癌细胞的杀伤作用（IC50＝0．0075μgmol/L)比对非靶细胞KB细胞的作用（IC50＝0．70μmol/L）约强100倍，偶联物对靶细胞的作用比游离平阳霉素（IC50＝0．31μmol/L)约强50倍。     

抗O型口蹄疫病毒单克隆抗体相对亲和力的测定

目的:对3株O型口蹄疫病毒单克隆抗体(4A9、4C3、9F12)的相对亲和力进行测定.方法:用纯化的O型口蹄疫病毒作为包被抗原建立一种检测方法,将3株单克隆抗体(4A9、4C3、9F12)制备腹水并纯化,并用建立的检测方法测定3株单克隆抗体(4A9、4C3、9F12)的相对亲和力.结果:检测方法中抗原、酶标抗体的最佳稀释度分别为1∶800和1∶10 000,单抗的相对亲和力分别为:4A9约在5.242 μg/ml(1∶600),4C3约在0.763 μg/ml(1∶5 000),9F12约在0.127 μg/ml(1∶40 000),即9F12＞4C3＞4A9.结论:用建立的ELISA方法测定了3株O型口蹄疫病毒单克隆抗体(4A9、4C3、9F12)的相对亲和力,将为进一步研究口蹄疫病毒而选取合适的单抗提供理论依据.     

大鼠抗大肠癌单克隆抗体与博来霉素A6偶联物的抗肿瘤作用

用人盲肠癌Hce-8693细胞免疫Lou/c大鼠,取其脾细胞与大鼠骨髓瘤IR983 F细胞进行融合,获得杂交瘤株R19,分泌IgG2b型单克隆抗体。 用Dextran T-40为中介体的方法连接R19单抗与博来霉素A6(A6)。抗体,De-     

5-羟色胺及其受体亚型在慢性前列腺炎大鼠脊髓的差异性表达

目的研究5-HT和5-HT2A、5-HT2C、5-HT5A和5-HTR7受体(5-HTR2A、5-HTR2C、5-HTR5A和5-HTR7)在慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征(CP/CPPS)大鼠T13~S1脊髓节段的差异性表达。方法将SD大鼠随机分为对照组、45 d、60 d和90 d模型组,用自身免疫法构建CP/CPPS模型。用免疫组织化学及RT-PCR法检测脊髓T13~L2、L3~L4和L5~S1节段5-HT及各受体的表达。结果 CP/CPPS大鼠自发性疼痛行为学评分显著高于对照组(P0.05)。5-HT在各模型组大鼠脊髓3个节段表达均下降。在T13~L2节段,5-HTR2A、5-HTR5A的表达持续上调(P0.05),5-HT2C、5-HTR7先升高后下降(P0.05);在L3~L4节段各受体表达均先升高后下降(P0.05);在L5~S1节段,5-HT2C、5-HTR5A的表达持续上调(P0.05),5-HTR2A、5-HTR7先升高后下降(P0.05)。结论 5-HT及5-HTR2A、5-HTR2C、5-HTR5A和5-HTR7在不同时程CP/CPPS大鼠脊髓出现差异性表达,提示5-HT及其受体参与了CP/CPPS的中枢调控,其具体机制有待进一步的研究。     

6A8 α-甘露糖苷酶也表达于细胞膜

目的 制6A8α-甘露糖苷酶羧基端单抗并进行鉴定,以确定6A8-α基露糖苷酶在细胞的表达部位。方法 用基因重组技术构建6A8cDNA3′端DNA片段的重组表达载体,在原核细胞表达其编码蛋白,杂交瘤技术制备单抗以3D5细胞为靶细胞,间接免疫荧光染色后,用激光共聚焦显微镜及流式细胞仪鉴定单抗。结果 6A8cDNA3′端DNA在原核细胞获得表达,制备了抗6A8α-甘露糖苷酶羧基端的单抗,观察到6A8α甘露糖苷酶不仅表达于3D5细胞胞浆,也表达于胞膜。结论 成功地制德了抗6A8α-甘露糖苷酶羧基端单抗,6A8-α-甘露糖苷酶不仅表达于3D5细胞胞浆中,也表达于胞膜。     

抗阴道毛滴虫单克隆抗体的制备及其特性

用杂交瘤技术建立了6株能稳定分泌抗阴道毛滴虫单克隆抗体的细胞株,选取其中3株进行了分析。3株单抗的效价分别是:ⅣA12B1和ⅣA22B1为250000ⅡB2A1为1250000。ⅣA12B1和ⅡB2A为IgG3抗体,ⅣA2281为IgGl抗体。位点分析及免疫酶染色发现,ⅣA12B1和ⅣA22B1抗同一抗原决定簇,所针对的抗原主要分布于膜上;ⅡB2A1针对的抗原主要分布于胞浆中。3株单抗针对的抗原均为糖蛋白。特异性试验发现,这3株单抗与人白细胞、阴道上皮细胞、白色念珠菌、大肠杆菌及人毛滴虫均无交叉反应。用制备的单克隆抗体,建立了试断滴虫性阴道炎的胶乳凝集试验(LAT)。研究表明,LAT是一种敏感、特异、简单和快速的方法。     

抗巨噬细胞移动抑制因子抗体在油酸致急性肺损伤发病中的干预作用

目的:探讨抗巨噬细胞移动抑制因子单克隆抗体(anti-MIFMAb)在油酸诱导的大鼠急性肺损伤(ALI)中的干预作用,及其对巨噬细胞移动抑制因子(MIF)和细胞间粘附分子-1(ICAM-1)表达的影响。方法:雄性Wistar大鼠静脉注射油酸复制ALI为油酸组,静脉注射生理盐水为对照组,大鼠先给予抗-MIF单抗腹腔注射后再给予油酸静脉注射为抗-MIF单抗干预组。静注后4h,3组大鼠分别测定动脉血氧分压(PaO₂),肺泡通透指数等肺损伤指标;用ELISA法测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中可溶性细胞间粘附分子-1(sICAM-1)水平;用原位杂交检测MIF和ICAM-1mRNA表达水平;用免疫组化双重套染方法检测巨噬细胞浸润程度与MIF表达的关系。结果:油酸组PaO₂低于对照组和干预组,肺通透性指数高于对照组和干预组(P<0.01),BALF中sICAM-1水平显著高于对照组和干预组(P<0.01)。油酸组肺组织MIF和ICAM-1表达明显高于对照组和干预组(P<0.01),经抗-MIF单抗干预ICAM-1表达变化不明显,但MIF表达显著下调,巨噬细胞浸润减少且肺损伤指标改善。结论:MIF和ICAM-1在介导巨噬细胞对组织的粘附、浸润和ALI的发生发展中起重要作用,抗-MIF单抗主要通过阻断MIF表达,减少巨噬细胞浸润而起肺保护作用。     

单链尿激酶型纤溶酶原激活剂单克隆抗体的制备及应用

用 99%纯度的单链尿激酶型纤溶酶原激活剂 (scuPA )免疫BALB/c小鼠制备了 4株能稳定分泌抗scuPA的IgG1类单克隆抗体 (McAb )的杂交瘤细胞系G7、E8、D1和A9。检测了这四株单抗的特异性 ,它们与组织型纤溶酶原激活剂 (t PA )无反应 ,与双链尿激酶型纤溶酶原激活剂 (uPA )的结合力很弱。其中G7细胞株单抗与单、双链结合的差异最大。取纯化G7单抗制备亲和层析柱。用此柱直接从培养上清纯化scuPA ,得到的scuPA纯度为 96 3% ,回收率为 85 4% ,纯化倍数 5 0倍左右 ,比活 1 2 9× 10 5。纯化方法简单、操作方便、避免了因步骤繁杂造成的scuPA的降解 ,同时降低了成本。     

DC单抗调节供、受体大鼠免疫功能和抑制排斥反应的研究

目的：研究体内应用大鼠DE单抗WZD3对大鼠免疫状态的影响，在此基础上应用DE单抗同时处理供、受体，进行同种异体心脏移植，研究单抗诱导供、受体间双向移植耐受可能机理，为联合应用单抗和耐受性Dc诱导移植免疫耐受奠定基础。方法：用不同剂量WZD3处理SD(受体)和Wistar(供体)大鼠，两周后观察单向、双向混合淋巴细胞培养结果和经ConA或LPS刺激脾细胞产生的细胞因子水平变化。选择合适WZD3剂量同时对供、受体大鼠体内注射，进行异体异位心肺联合移植，术后观察移植器官存活时间和器官排斥终点时受体脾细胞分泌细胞因子水平。结果：高剂量(8mg/kg体重)WZD3对大鼠单向、双向MLC以及脾细胞产生IL-2和TNF有明显抑制作用，且能明显延长移植心脏存活时间；中剂量(4mg/kg体重)和低剂量(2mg/kg体重)WZD3对上述指标有轻度或无抑制作用。结论：采用高剂量WZD3能下调大鼠免疫功能；同时处理供、受体大鼠，能诱导供、受体间双向免疫耐受，明显延长移植器官存活时间，其机制可能与清除DE、下调Th1细胞功能有关。     

分化抗原5C5在人免疫细胞的表达

目的　明确 5C5蛋白为分化抗原 ,检测其在人免疫细胞的表达 ,以及它的信号传导作用。方法　用 5C5蛋白免疫小鼠 ,制备抗 5C5蛋白的单抗。用反义技术制备 5C5蛋白表达抑制的 3D5细胞。用免疫荧光染色和Western印迹确定 5C5单抗的特异性。用胞膜蛋白免疫沉淀和流式细胞术确定其分化抗原的性质。用双色免疫荧光染色流式细胞术检测 5C5分化抗原在多种人免疫细胞的表达。用Fura 3 AM试剂作探针 ,用激光共聚焦显微镜观察胞内Ca2 + 浓度的变化。结果　制备了抗 5C5蛋白的特异性单抗。用 5C5单抗作探针 ,从 3D5细胞膜免疫沉淀到 1条相对分子质量 (Mr)为 19× 10 3的蛋白带 ,并在活 3D5细胞见阳性免疫荧光染色。 5C5分化抗原在人周围血CD19+ 、CD14 + 、CD4 + 、CD8+ 和CD5 6 + 细胞的表达率分别为 (33.4 7± 7.9) %、(86 .13± 6 .7) %、(15 .79± 7.1) %、(18.11±12 .77) %和 (11.76± 7.4 7) % ,在人免疫细胞株的表达率分别为 5 8.0 % (Nalm6 )、72 .7% (3D5 )、5 3.6 %(BJAB)、6 1.0 % (Daudi)、6 .9% (SKW6 )、6 .3% (Jurkat)、5 .8% (Peer)、2 1.3% (K5 6 2 )和 39.1% (U937)。3D5细胞在 5C5单抗刺激下 ,胞内Ca2 + 浓度逐渐增高 ,可达 2倍左右 ,对照小鼠Ig则无此作用。结论5C5蛋白为一个分化抗原 ,在人周     

雌二醇对去卵巢大鼠下丘脑5-HT_(1A)和5-HT_(2A)受体亚型mRNA表达的影响

观察17β-雌二醇(17β-estradioI,E2)对去卵巢大鼠下丘脑5-HT1A和5-HT2A受体mRNA表达的影响的时间效应。实验动物分为假去卵巢对照组(OVX+S组)和去卵巢组(OVX)。去卵巢组大鼠又分为雌激素处理组(OVX+E+组)和无雌激素处理组(OVX+E-组),分别在处理后3、6、9和12 d时,采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法观察5-HT1A和5-HT2A受体mR-NA在大鼠下丘脑的表达。结果显示:5-HT1A和5-HT2A受体mRNA在所有大鼠下丘脑均有表达;5-HT1A受体mRNA在3、6和9 d的OVX+E-组大鼠下丘脑的表达水平明显高于同时间点的OVX-E+组,而5-HT2A受体mRNA在6、9和12 d的OVX+E-组下丘脑的表达量也显著高于同时间点的OVX+E+组。本文结果表明去卵巢后大鼠下丘脑5-HT1A和5-HT2A受体亚型mRNA表达水平升高,17β-雌二醇可下调两种受体的表达。     

给大鼠注入抗CD4单抗可抵抗链球菌细胞壁诱导的关节炎

T 淋巴细胞被认为在类风湿关节炎病变中起重要作用。该文对CD4~+T 细胞在链球菌细胞壁(SCW)诱导的关节炎中的作用做了研究。先将抗大鼠CD 4单克隆抗体(W3/25)与SCW 同时注入大鼠,2天后再给大鼠注一次单抗,结果注入抗CD4单抗的大鼠均未发生关节炎,而注射抗人CD74单抗(BOM22)的对照组大鼠则均出现了关节炎病变。后又将注射单抗改在关节炎病变进     

慢性应激抑郁模型大鼠脑内5-HT1A和5-HT2A受体的变化

为了在5-羟色胺受体水平研究抑郁症的机制和三环类抗抑郁药物(TCAs)阿米替林的药理学机理,将24只SD雄性大鼠随机均分为三组,即对照组、抑郁组、阿米替林治疗组.应用[3H]8-OH-DPAT、[3H]Ketanserin作为标记配基,采用放射性配体受体结合法,分别测定大鼠海马5-HT1A受体、大脑皮层5-HT2A受体结合.结果显示抑郁大鼠海马 [3H]8-OH-DPAT 特异性结合(18.78±5.62 fmol/mg prot),较正常对照组(26.12±5.52fmol/mg prot )明显下降(P＜0.05).抑郁大鼠大脑皮层[3H]Ketanserin特异性结合(112.58±4.21fmol/mg prot),较正常对照组(86.28±4.24fmol/mg prot)明显增加( P＜0.05).阿米替林治疗3周后,可使抑郁大鼠海马5-HT1A受体与大脑皮层5-HT2A受体结合恢复正常.提示 海马5-HT1A受体结合下降、大脑皮层5-HT2A受体结合增加可能与抑郁症病因有关;海马5-HT1A受体、大脑皮层5-HT2A受体是阿米替林发挥抗抑郁作用的环节.     

重组人α2a型干扰素单克隆抗体的研制、特性鉴定及初步应用

应用常规方法建立了5株稳定分泌抗重组人α2a 型干扰素单克隆抗体的小鼠杂交瘤细胞系1B8、2B6、3F1、4G5和5G10,并对其免疫学特性进行了较系统的鉴定.5株单抗均为 IgG1,特异性强,与重组人α1 型、γ型干扰素以及受体菌菌体蛋白成分无交叉反应.间接 ELISA 测定小鼠腹水单抗效价1:320,000～1:10,240,000,其中3F1和5G10单抗对重组人α2a 型干扰素具中和活性(中和效价均为1:10,000)。竞争结合 ELISA 证实5株单抗针对3种不同表位。用3F1和5G10单抗建立的夹心 ELISA 能检测到60pg/ml的重组人α2a 和α2b 型干扰素。3F1单抗用于制备亲和层析柱纯化重组人α2a 型干扰素结果与进口单抗NK2相当。     

补体C5b-9复合物刺激大鼠肾小球系膜细胞合成NO的机制探讨

目的:探讨人C5b-9复合物刺激大鼠肾小球系膜细胞(MC)合成一氧化氮(NO)的机制。方法:用人C5b-9复合物刺激培养的大鼠肾小球MC诱生肿瘤坏死因子α(TNFα)和白细胞介素1β(IL-1β),并用抗TNFα或抗IL-1β单克隆抗体进行处理。在上述基础上,分析处理3 h、6 h及24 h时与NO升高有关的某些指标的变化。结果:经C5b-9复合物刺激6、24 h后的MC(C5b-9组)产生TNFα明显高于对照组,并能被TNFα单抗逆转。用C5b-9复合物刺激MC未见IL-1β的产生。另用C5b-9刺激3 h时可见MC表达iNOS mRNA,而在刺激6 h和24 h时,MCiNOSmRNA表达,MC内cGMP含量及培养上清液中NO³_-/NO²_-含量均显著高于对照组。不过,C5b-9刺激时加用TNFα单抗处理,这些指标在6 h、24 h时均较C5b-9组低。结论:C5b-9复合物早期(3 h)能诱导MC表达iNOS mRNA,而6h后NO的升高则与MC释放的TNFα作用有关。     

识别HIV-1 P_(24)蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

以细胞培养的HIV-1全病毒抗原免疫,通过鼠-鼠杂交瘤技术获得3株分泌单克隆抗体(以下简称单抗)的杂交瘤细胞系(21A、51G、47B)。免疫印迹结果显示3株单抗均能识别病毒的核心元原-P_(24)蛋白。ELISA阻断抑制试验提示,3株单抗分别识别两个不同的抗原决定簇。进而为HIV-1病毒抗原的研究和制备以双抗体夹心法检测P_(24)抗原的试剂打下基础。     

激发型CD28单抗直接激发的T细胞及其表型

1.用羊抗鼠IgG(20μg/ml)包被96孔细胞培养板,再加入游离的激发型CD28单抗(终浓度为5 μg/ml);2.用激发型CD28单抗(10 μg/ml)直接包被96孔细胞培养板,然后分别加入10~5个/孔经E-花结实验获取的人外周血T细胞(PBTC),其中CD3+T>95％。逐日观察细胞的生长状态并绘制生长曲线,用3H-TdR掺入法分析PBTC的增殖效应,用FITC标记的单抗经流式细胞仪(FCM)分析细胞CD3、CD4、CD8、CTLA-4、4-1BB及OX40的表达。逐日细胞计数的结果表明,经羊抗鼠IgG包被后加入游离激发型CD28单抗或直接用激发型CD28单抗包被,均能引发PBTC的活化与增殖效应,激发3 d时的刺激指数(SI)大于9,细胞CD3、CD4、CD8、CTLA-4、4-1BB及OX40的阳性表达率(x±s,％)分别为98.6±0.2、74.4±3.1、22.5±2.0、2.1±0.4、18.4±2.2、35.2±3.5。与XGB7(作为APC)刺激的T细胞相比,经CD28单抗直接激发的T细胞,CD4+/CD8+T细胞的比值及OX40+T细胞的百分率升高(P<0.01),但不表达负性调节分子CTLA-4。     

粘附蛋白单抗解除烧伤休克大鼠微静脉白细胞的粘附作用

目的运用白细胞粘附分子LFA-1单抗和血管内皮细胞粘附分子ICAM-1单抗预防烧伤休克,探讨微静脉白细胞粘附和嵌塞于毛细血管的作用机理.方法30只体重为190-220gWistar大鼠,随机分为盐水组、LFA-1单抗组、ICAM单抗组及LFA-1和ICAM-1联合组.麻醉大鼠,一侧颈动脉和颈静脉分别插管,盐水组和单抗组按0.2mL/100g体重在烫伤前15min分别从肌肉注入盐水和单抗.用80℃热水烫伤大鼠腰部以下躯体30s,复制烧伤休克模型,按Gray法制备大鼠脊斜肌活体微循环观察标本,用装备有Leitz长距离镜头的显微电视放大装置观察微循环的变化,电视测微仪测量细静脉的口径和血管长度、白细胞粘着数选择60μm长度的微静脉进行定量,用红细胞跟踪相关仪测量血流速度,依公式流量＝流速/1.6×3.14×口径2/4,计算出血液流量,观察存活时间.结果烧伤后1h盐水组大鼠微静脉粘着的白细胞开始增多,烧伤后3h更加明显达(14.4±2.5)个(/60μm,下同);LFA-1组粘附的白细胞数较盐水组少,烧伤后3h为(4.3±1.0)个;而ICAM组粘附的白细胞数更少,烧伤后3h为(1.2±1.5)个;LFA-1和ICAM联合组则接近正常水平为(0.8±0.6)个,4组动物烧伤后各时间点白细胞粘着数变化有显著性差异.烧伤后1h各组大鼠V3的流速有不同程度的减慢,盐水组下降得最快联合抗体组下降得最慢,烧伤后各组动物的血管口径变化不大,故血流量的变化与血液流速基本一致.烧伤后1h各组动物血压都有所下降,烧伤后3h下降更为明显,而盐水组下降的幅度最大,盐水组、LFA-1组、ICAM-1组和联合单抗组动物的存活时间分别为(7.6±1.6)h、(11.9±3.0)h、(17.1±7.3)h和(17.3±6.8)h,单抗组动物存活时间明显比盐水组长,联合单抗组存活时间最长,且有一例存活超过24h.讨论烧伤休克早期,白细胞大量附壁滚动,进一步粘着于微静脉和嵌塞于毛细血管,这不仅带来微循环的紊乱,还可能释放出TNF、自由基,溶酶体酶、白三烯等炎症介质,引起组织细胞损害和器官功能障碍,因此解除白细胞的粘着和嵌塞对防治烧伤休克有着重要的意义.微循环的研究表明,烧伤休克在血压下降之前血流的切应力尚无明显变化,但此时已有明显的白细胞附壁粘着,提示有白细胞-内皮细胞粘附力的增加,但休克时LFA-1的表达量并不一定增加而可能通过构型的改变使粘附功能增强.本实验应用LFA-1和ICAM-1单抗预防烧伤休克时微循环障碍,结果表明LFA-1和ICAM-1单抗都能减少微静脉白细胞的粘着嵌塞,后者好于前者而两者联合使用得到更满意的结果.单抗还能提高血流速度和增加血流量,减缓动物血压的下降趋势,对保护烧伤休克的组织器官起到积极的作用.从而延长动物的存活时间.但仍不能存活24h.结论使用粘附蛋白单抗能阻断微静脉白细胞与内皮细胞的粘附,减少白细胞嵌塞于微静脉和毛细血管,达到改善烧伤休克微循环和保护组织细胞的作用,从而延长动物的存活时间.     

连续单一应激后大鼠海马5-HT_(1A)受体活性与糖皮质激素受体表达的关系

目的:观察连续单一应激(SPS)大鼠海马糖皮质激素受体(GR)变化与5-HT1A受体的关系,探讨创伤后应激障碍的发病机制。方法:选用雄性成年Wistar大鼠45只,将大鼠随机分为对照组、模型组和阻断组,每组15只。模型组和阻断组给予SPS应激,其中阻断组大鼠在接受SPS前用55-HT1A受体阻断剂WAY100635预处理。采用免疫组织化学和免疫印迹技术测定海马GR水平,采用逆转录-聚合酶链式反应检测GRmRNA表达变化。结果:(1)免疫组织化学结果显示,模型组大鼠海马GR表达高于对照组(P0.01),阻断组则低于模型组(P0.05);(2)WesternBlot结果显示,模型组大鼠海马GR相对表达高于对照组(P0.01),阻断组低于模型组(P0.01);(3)RT-PCR结果表明,与对照组比较,模型组大鼠海马GRmRNA表达增强(P0.01);与模型组比较,阻断组表达量降低(P0.05)。结论:SPS海马GR表达变化与5-HT1A受体有关。