LDH法用于检测LAK细胞杀伤活性的可行性探讨

ＬＤＨ法用于检测ＬＡＫ细胞杀伤活性的可行性探讨李翠玲崔正言李淑贞张玲ＬＤＨ（乳酸脱氢酶）释放法检测细胞毒活性具有自然释放低、操作简便、测定迅速客观、不需接触同位素等优点，但其方法学研究多集中于检测ＮＫ活性，该法是否也适用于检测ＬＡＫ活性呢？我们系统地...     

采用2—氯腺苷改善MTT法检测淋巴细胞激活和杀伤功能

目的 :研究 2 氯腺苷 ( 2 ClA)特异性杀伤巨噬细胞对MTT法检测淋巴细胞激活试验和细胞毒试验的影响。方法 :运用细胞培养技术 ,培养小鼠脾淋巴细胞和腹腔巨噬细胞。通过MTT法检测 2 ClA处理和未处理的淋巴细胞的激活以及特异性活化后对肿瘤细胞的杀伤 ,同时还检测 2 ClA对巨噬细胞的毒性作用。结果 :2 ClA对巨噬细胞有很强的杀伤作用 ,采用MTT法检测淋巴细胞的活化和杀伤活性时 ,2 ClA处理组的OD值要明显低于未经 2 ClA处理的对照组 (P <0 0 5 )。结论 :2 ClA通过特异性杀伤巨噬细胞可以消除巨噬细胞在MTT法检测淋巴细胞激活和杀伤试验中所产生的影响 ,使检测更为准确。     

生化发光法检测NK细胞活性及其临床应用

<正> 目前,国内外检测NK细胞活性多数采用同位素~(51)铬释放试验、~(125)碘标法或氚标法等,其优点是灵敏度较高,操作简便,但易污染环境,影响工作人员健康。 1982年 Heberer等应用虫荧光素酶生物化学发光现象,发现NK细胞活性与虫荧光素酶生物化学发光密切相关。本文报道应用虫荧光素酶,检测NK细胞杀伤肿瘤靶细胞K_(562)前后的ATP(三磷酸腺苷)的动态变化,借以检测NK细胞免疫活性。     

免疫监视及自然抗瘤机制的评价

一、引言:过去认为,一个人每天可产生许多新的肿瘤细胞,因而提出免疫监视和自然抗瘤机制以解释机体如何防止肿瘤发生.鉴于每天必须杀伤大量肿瘤细胞,故认为这种假设的免疫监视和自然抗瘤机制是强有力的.通过研究,阐明了体内确实存在着几种免疫的和自然的抗瘤机制;但也发现,被每种机制杀伤的肿瘤类型是有一定限制性,因而这些机     

LDH释放法与形态学法测定细胞毒的对比研究

<正> 细胞介导的细胞毒试验不但能测定机体的细胞免疫功能,而且是探讨某些疾病的病理机制的重要手段。其测定方法有:同位素法、形态学法和酶释放法等,目前以前两者最常用。但同位素法因试剂、检验仪器和同位素污染等问题,其应用存在一定局限性;而形态学法往往需要两人同时进行双盲计数,费工费时;酶释放法克服了上述两种方法的主要缺点,但因其应用受靶细胞所含胞质酶的种类及量限制,并且影响酶活     

采用2-氯腺苷改善MTT法检测淋巴细胞激活和杀伤功能1

目的研究2-氯腺苷(2-ClA)特异性杀伤巨噬细胞对MTT法检测淋巴细胞激活试验和细胞毒试验的影响.方法运用细胞培养技术,培养小鼠脾淋巴细胞和腹腔巨噬细胞.通过MTT法检测2-ClA处理和未处理的淋巴细胞的激活以及特异性活化后对肿瘤细胞的杀伤,同时还检测2-ClA对巨噬细胞的毒性作用.结果2-ClA对巨噬细胞有很强的杀伤作用,采用MTT法检测淋巴细胞的活化和杀伤活性时,2-ClA处理组的OD值要明显低于未经2-ClA处理的对照组(P＜0.05).结论2-ClA通过特异性杀伤巨噬细胞可以消除巨噬细胞在MTT法检测淋巴细胞激活和杀伤试验中所产生的影响,使检测更为准确.     

应用改良~(125)Ⅰ—UdR释放试验测定杀伤T细胞的细胞毒作用

自Brunner等介绍以~(51)Cr标记靶细胞的同位素释放法测定杀伤T细胞(CTL)的细胞毒作用以来,~(51)Cr释放法已成为测定CTL杀伤能力的常规。但~(51)Cr标记靶细胞的自发释放(SR)率高(1～2%/小时),不适用于较长培育时间的细胞毒试验。近年来~(111)In-oxine标记靶细胞被介绍来代替~(51)Cr标记,其优点为SR低(0.25     

新城鸡瘟病毒诱导人粘附性单个核细胞产生一氧化氮与细胞毒性

本文采用Griess试剂、间接免疫荧光法和同位素释放等方法,发现新城鸡瘟病毒Losota系（NDV-L）与人外周血粘附性单个核细胞（a-MCs）作用2～4h后,可稳定地吸附在a-PBMCs表面,并使其释放一氧化氮（NO）,释放量与阳性对照组（BCG-LPS作用的a-PBMCs）相近;采用~3H-TdR释放法测定NDV-L作用的a-PBMCs对K_(562)靶细胞的细胞毒活性,发现具有明显的杀伤效应,且该杀伤效应与NO的产生有一定的依赖性。     

天然细胞毒测定-LDH释放法

近年来,体外细胞毒技术的不断发展,有力地推动了细胞免疫的研究。因细胞介导细胞毒(CMC)作用在肿瘤及一些病毒性感染疾病中具有重要意义而日益受到重视。CMC的测定方法甚多,一般可归纳为同位素法、形态学法、酶释放法及其它。上述方法都能反映出效应细胞的杀伤活性,但各     

一种改良的人外周血NK活性检测法-全血法

外周血天然杀伤(NK)细胞活性可反映机体免疫监视功能水平,常用的方法检测为分离单个核细胞(PBMC)的同位素释放法。但以分离的PBMC为效应细胞可能因体内外周血中NK细胞所处的环境及状态而差别较大;分离后可能改变淋巴细胞群间的比例;且操作繁琐,不易被临床广泛应用。本文报道应用同位素释放改良法检测正常人和肝细胞     

大蒜素对大鼠NK细胞肿瘤杀伤活性的影响

目的: 研究大蒜素对体外培养的大鼠NK细胞肿瘤杀伤活性的影响,并初步分析其可能机制。方法: 免疫磁珠分选法分离大鼠脾脏NK细胞,流式细胞仪检测不同浓度的大蒜素对NK细胞的增殖和凋亡的影响,ELISA检测大鼠脾脏NK细胞IFN-γ的分泌水平,乳酸脱氢酶(LDH)法检测大鼠脾脏NK细胞对小鼠淋巴瘤Yac-1细胞的杀伤活性。结果: 大蒜素对体外培养的NK细胞有明显的促进增殖和抑制NK细胞自然凋亡的作用,并能提高NK细胞分泌IFN-γ的水平和增强对Yac-1细胞的杀伤毒性,且在一定的浓度范围内呈剂量依赖性,其中30 mg/L是大蒜素的相对适宜浓度。结论: 大蒜素可能通过上调NK细胞分泌IFN-γ的水平,增强其体外肿瘤杀伤能力。     

高糖合并温热下小鼠巨噬细胞对BGC—823人胃癌细胞的杀伤作用

应用自然杀伤试验-LDH释放改良法测定昆明种小鼠腹腔巨噬细胞对BGC-823人胃癌细胞的自然杀伤作用.结果显示,在巨噬细胞与胃癌细胞的混合培养液中加入不同浓度的糖(160mg/dl和300mg/dl)增加了巨噬细胞对胃癌细胞的杀伤作用(P<0.05);同时,实验表明,在温热条件下(39℃～41℃)未见巨噬细胞对胃癌细胞的杀伤作用随培养温度的升高而提高,因而认为主要是因高糖条件下提高了肿瘤细胞的热敏感性和降低了肿瘤细胞的pH,从而促进了巨噬细胞对肿瘤细胞的杀伤作用.     

LDH释放法测NK细胞毒的方法学研究

普遍用于检测NK细胞毒的方法是~(51)Cr释放法,此法缺点主要是自然释放率高和同位素的危害等。LDH释放法虽有许多优点,但影响因素甚多,使用者少。我们对LDH释放法应用的最适条件进行了系统的研究,在该文中我们通过实验认为,效靶细胞比例10∶1,效应细胞浓度为5×10~6,孵育时间为22小时是测定系统的最适条件。同时认为应设立效应细胞自然释放对照孔,以监测效应细胞的自身状态。     

用微量血凝法测定DNA抗体以诊断系统性红斑狼疮(SLE)

近代用于测定 DNA 抗体的方法有多种,包括免疫沉淀试验,补体结合试验、DNA 包被颗粒的絮状反应、同位素标记抗原结合试验和波动血凝试验等。本文报道了一种鞣酸化红细胞微量血凝法用于     

霍乱肠毒素A和B亚单位对人和小鼠NK细胞杀伤靶细胞的影响

<正> 大量研究资料证实,自然杀伤细胞(NK细胞)具有非特异地杀伤肿瘤细胞的作用;并有较广的抗瘤谱,能杀伤同系、同种或异种的肿瘤细胞,对淋巴瘤和白血病的瘤细胞杀伤能力最强。但对实体瘤的瘤细胞作用较差,甚至无杀伤作用。NK细胞杀伤靶细胞是先与靶细胞接触、融合,然后释放细胞溶素(cytolysin),也称穿孔素(PFP)或NK毒性因子(NKCF),发挥杀伤作用。     

胃癌单克隆抗体-羟基喜树碱免疫偶合物的制备及其细胞毒特征

采用共价交联法将胃癌单克隆抗体RSF_9与羟基喜树碱进行交联,交联物中每分子抗体可引入13±4.2分子的药物,而抗体活性保持85％以上。体外细胞毒试验显示交联物RSF_9-HCPT对胃癌细胞的杀伤是游离药物的4.7倍,而对非靶细胞的杀伤只有游离药物的1/11,表明交联物对胃癌靶细胞具较强的选择性杀伤作用。     

孕早期人母-胎免疫耐受机制的研究

目的：探讨孕早期母胎免疫耐受调节机制。方法;应用流式细胞仪分析（ＦＡＣＳ）蜕膜及孕妇外周血淋巴细胞亚群;采用改进的乳酸脱氢酶释放试验测定蜕膜淋巴细胞细胞对Ｋ５６２的自然杀伤活性;同时以滋养鲺蜕膜淋巴细胞共同培养,研究平体免疫系统对滋养细胞抗原免疫应管状态。结果：蜕膜组织中Ｄ５６＾＋ＮＫ细胞含量高于孕妇及对照组外周血ＣＤ５６＾＋细胞比例（Ｐ〈０．０５）,蜕膜组织中ＮＫ细胞杀伤活性明显低于孕妇及对照组     

自然杀伤(NK)细胞缺陷病及其动物模型

1973年,Takasugi等和Herberman等分别报告了人和小鼠淋巴细胞未经免疫过程即能自然地杀伤某些肿瘤细胞,随后得到了大量实验支持,从而免疫系统的自然杀伤(NK)细胞功能被确定下来。NK功能与机体免疫监视、防御、调节以及自身免疫病有密切关系。近年来对NK功能的研究已成为免疫学研究的重要课题之一。     

小鼠小肠上皮内淋巴细胞的提取与抗原表型测定和功能的初步研究

目的建立一种提取小肠上皮内淋巴细胞的方法，并对其功能进行初步研究。方法采用机械分离法和Percoll非连续密度梯度离心法提取小鼠小肠上皮内淋巴细胞，经间接荧光染色后用流式细胞仪检测表型。应用乳酸脱氢酶法检测其自然杀伤功能。结果应用该法可获得小鼠小肠上皮内淋巴细胞2×10     

BCG活化大鼠腹膜及脾NK细胞的活性

免疫疗法用于治疗人和实验动物的恶性肿瘤已有20余年历史,其中卡介苗(BCG)应用较为广泛。本文使用~(51)Cr短期释放试验研究不同途径注射大剂量BCG(1mg/只)后,大鼠腹腔渗出细胞、脾脏细胞的自然杀伤活性;并用碳酸铁、抗体标记及萤光激活细胞分类仪研究自然杀伤细胞(NK)的细胞核型。本研究还发现BCG可同时活