Toll样受体3在病毒感染及细胞凋亡中的生物学功能

Toll样受体3（TLR3）作?《舅碦NA识别受体在机体抗病毒天然免疫中发挥十分重要的作用。TLR3识别配体后通过含TIR结构域的转接蛋白（TRIF）途径活化转录因子NF-κB和干扰素调节因子3（IRF3）,诱导炎症细胞释放炎症因子并介导炎症反应,同时诱导I型干扰素的释放,介导抗病毒天然免疫。在一些病毒感染中TLR3通过诱导组织损伤介导病毒的扩散从而加重疾病的严重程度。部分肿瘤细胞也表达TLR3,活化的TLR3介导细胞凋亡、抑制细胞增殖,提示TLR3可能是肿瘤免疫治疗的新靶点。［关键词］ Toll样受体3;信号转导;病毒;肿瘤;细胞凋亡     

Toll样受体4(TLR4)的内吞通路及其调控机制研究进展

Toll样受体(TLR)是一类天然免疫受体,TLR4信号通路主要分为髓样分化因子88(My D88)依赖通路和β干扰素诱导的含TIR结构域接头蛋白(TRIF)/TRIF相关的接头分子(TRM)依赖通路,激活后分别诱导促炎因子和1型干扰素的产生,有助于机体清除病原体。但是,不受控制的TLR4激活也会导致自身免疫性疾病和炎症性疾病等。因此,TLR4表达水平的有序调控对于维持机体免疫平衡具有重要意义。TLR4在细胞中的生物合成、定位、转移和内吞等过程是决定其功能的重要环节,其中TLR4的循环和转移是一种受多种因素调控的动态的复杂过程。本文就TLR4信号通路及其内吞调控研究进展进行综述。     

TLR2和TLR4的TLR/IL-1 receptor结构与功能

Toll样受体(Toll like receptor,TLR)是架接固有免疫和适应性免疫的桥梁。迄今为止,已鉴定的人TLR有10种,分别命名为TLR1~TLR10,TLR是一种Ⅰ型跨膜蛋白,由胞外富含亮氨酸重复序列(LRR)结构域,胞内保守的Toll/IL-1受体(TIR)结构域和跨膜结构域构成。TLRs在识别病原体相关分子模式后,其信号的特异转导主要取决于TLRs的TIR功能域与下游接头分子的TIR功能域的特异相互作用。然而,TLR2和TLR4的TIR功能域在其与下游接头分子Mal和MyD88相互作用、以及TLRs同源或异源二聚化方面的作用模式存在明显的差异。本文就TLR2和TLR4的TIR结构与功能进行简要综述,有助于我们进一步了解TLR TIR功能域与下游接头分子的相互作用。     

TLR4活化对肝癌细胞H7402生物学特征的影响

目的:分析TLR4在肝癌细胞H7402的表达水平,研究其活化对肿瘤细胞生物学功能、炎症应答以及对化疗药物治疗的影响。方法:RT-PCR方法检测肝癌细胞TLR4基因、细胞凋亡和细胞周期相关基因的表达水平。LPS作用于肝癌细胞后,利用MTT法检测细胞增殖,AnnexinV/PI双染法检测细胞凋亡,荧光定量PCR法检测肿瘤相关细胞因子的表达水平,流式细胞术检测肿瘤细胞表面淋巴细胞受体的配体及CyclinD1表达,Western blot检测Bcl-xl表达水平。结果:TLR4在人肝癌细胞系HepG2、H7402、PLC/PRF/5中都有表达,LPS能促进肝癌细胞系的增殖,抵抗顺铂的抗肿瘤作用。进一步的机制研究表明,LPS能上调肝癌细胞周期相关分子CyclinD1、凋亡相关分子Bcl-xl的表达,并下调Fas的表达、上调肿瘤相关的炎症因子的表达。结论:LPS诱导肝癌细胞H7402表达炎症因子、促进肿瘤细胞的增殖,导致肿瘤细胞对化疗药顺铂产生抵抗作用。     

TLR家族分子信号转导新进展

TLR(Toll-like recepter)家族成员以胞内区高度进化保守的TIR结构域(Toll/IL-1R domain)为特征,可通过胞外区的亮氨酸重复序列(leucine-rich repeat,LRR)功能区识别各种病原体相关分子模式(pathogen associated molecular pattern,PAMP)引发机体免疫应答。TLR识别配体后由MyD88、Mal、TRIF、TRAM等含TIR的接头蛋白介导,通过MyD88依赖途径或MyD88非依赖途径进行信号转导,不同的接头蛋白决定了不同TLR的信号转导途径,本文针对各含TIR的接头蛋白对TLR信号转导通路研究进展作一综述。     

FAP-1与细胞凋亡抑制

凋亡或细胞分化紊乱在肿瘤生成中起着重要作用,Fas(MPO-1/FasR/CD95)是肿瘤坏死因子/神经生长因子受体(TNR/NGFR)超家族中的一员,是介导细胞凋亡的一种重要的细胞表面分子。Fas胞质区(C端)的15个氨基酸为负性调节区,其最末端的3个氨基酸残基(SLV)对FAP-1的PDZ3(GLGF)结构域起了关键作用。 FAP-1是一种250kD的蛋白质酪氨酸磷酸酯酶(PTP),由N端(膜结合区)、C端(催化区)和6个PDZ结构域组成。它与Fas在胞浆区结合后,能影响凋亡信号的传导,从而阻止Fas诱导的细胞凋亡。1995年,FAP-1首次被发现与FasC端15个氨基酸结合,从而抑制Fas信号的转导。而在拮抗Fas介导的细胞毒性作用的组织或细胞系中均有FAP-1的高表达,而提高FAP-1在T细胞系中的表达可以部分抑制Fas诱导的凋亡。从而推定FAP-1是Fas信号转导中的负性调节因子。FAP-1广泛表达     

由不同接头分子介导的Toll样受体信号通路

Toll样受体(Toll-likereceptors,TLRs)是一类重要的模式识别受体(patternrecognitionreceptors,PRR)。Toll样受体信号通路既激活先天性免疫又对获得性免疫应答的启动发挥重要作用。一类包含TIR结构域的接头分子如MyD88、TIRAP、TRIF、TRAM可募集到不同Toll样受体的TLR胞质区,转导特异的信号通路。依据信号通路中接头分子的不同,Toll样受体信号通路一般分为MyD88依赖型信号通路和MyD88非依赖型/TRIF依赖型信号通路。     

CD14参与固有免疫应答抵御感染的研究进展

CD14是一种糖基磷脂酰肌醇锚定蛋白,作为细胞表面和内体中Toll样受体(TLR)的辅受体,在细菌、病毒、真菌等感染过程中具有关键作用。CD14主要通过髓样分化因子88(My D88)依赖型信号通路、β干扰素诱导的含TIR结构域接头蛋白(TRIF)依赖型信号通路、Ca2+/活化T细胞核因子(NFAT)信号通路参与机体固有免疫应答。CD14与多种疾病相关,在宿主抵御感染中具有双重作用。如在实验性脓毒症中,抑制CD14具有保护作用,但在肠道感染模型中,抑制CD14增加组织损伤。本文主要围绕CD14表达调控及其参与机体固有免疫应答抵御感染中的信号转导机制进行综述。     

TLR家族分子信号转导新进展

TLR（Toll—like reeepter）家族成员以胞内区高度进化保守的TIR结构域（Toll／IL-1R domain）为特征，可通过胞外区的亮氨酸重复序列（leucine-rich repeat，LRR）功能区识别各种病原体相关分子模式（pathogen associated molecular pattern，PAMP）引发机体免疫应答。TLR识别配体后由MyD88、Mal、TRIF、TRAM等含TIR的接头蛋白介导，通过MyD88依赖途径或MyD88非依赖途径进行信号转导，不同的接头蛋白决定了不同TLR的信号转导途径，本文针对各含TIR的接头蛋白对TLR信号转导通路研究进展作一综述。     

TLR接头蛋白研究进展

Toll样受体(TLR)是近年来备受关注的一类病原体识别受体,能选择性地识别侵入机体的病原微生物所携带的病原相关分子模式(PAMPs),继而激活信号级联放大,产生免疫应答.目前研究发现,TLR识别相应配体后,由一类包含TLR结构域的接头蛋白MYD88、MAL、TRIF、TRAM和SARM通过MYD88依赖途径或MYD8...     

虎纹捕鸟蛛毒素对脑缺血模型大鼠海马肿瘤坏死因子凋亡通路的影响

背景:虎纹捕鸟蛛毒素经离子通道分析技术证明是一种作用于突触前膜的N型钙离子通道阻断剂。目的:观察新型钙通道拮抗剂虎纹捕鸟蛛毒素对全脑缺血再灌注损伤模型大鼠海马组织肿瘤坏死因子凋亡通路中肿瘤坏死因子α、肿瘤坏死因子受体Ⅰ、肿瘤坏死因子受体相关死亡结构域、Fas相关死亡结构域蛋白、Caspase 8表达的影响。方法:采用Pulsinelli"四血管阻断法"构建全脑缺血结合蛛网膜下腔置管大鼠模型,通过留置的PE10管注入虎纹捕鸟蛛毒素或生理盐水。应用电镜、RT-PCR实验技术检测全脑缺血再灌注损伤大鼠海马CA1区锥体细胞超微结构和胞内线粒体形态变化及对海马组织中肿瘤坏死因子α、肿瘤坏死因子受体Ⅰ、肿瘤坏死因子受体相关死亡结构域、Fas相关死亡结构域蛋白、Caspase 8等肿瘤坏死因子凋亡通路相关因子基因表达。结果与结论:虎纹捕鸟蛛毒素能维持全脑缺血再灌注脑损伤大鼠线粒体基本形态且能不同程度降低肿瘤坏死因子凋亡通路中促凋亡因子肿瘤坏死因子α、肿瘤坏死因子受体Ⅰ、肿瘤坏死因子受体相关死亡结构域、Fas相关死亡结构域蛋白、Caspase 8 mRNA表达。提示天然活性多肽虎纹捕鸟蛛毒素作为一种新型N-型电压依赖性钙通道阻断剂,能有效阻断胞外Ca2+的大量内流,使细胞内游离钙降低,减少由于细胞内钙超载而引起的一系列病理损害,从而保护神经细胞,减轻缺血缺氧海马神经细胞的损伤。     

Notch1与TLR2相互作用调控CD14~+单核细胞功能在冠状动脉粥样硬化性心脏病中的作用

目的观察Notch1/2分子和Toll样受体(TLR)在冠心病患者中的表达变化,探讨Notch信号通路与TLR2的相互作用对CD14~+单核细胞的调控作用。方法本研究入组稳定性心绞痛(SA)22例、不稳定性心绞痛(UA)34例、急性心肌梗死(AMI)27例,同时入组31例健康对照者。实时定量PCR法检测PBMC中Notch1/2以及TLR1-10 mRNA的相对表达量。分选CD14~+单核细胞,应用Notch信号通路抑制剂DAPT和/或TLR2激动剂Pam3Csk4刺激培养24 h,检测TLR2和Notch信号通路相关分子的表达变化,ELISA法检测上清中促炎细胞因子的表达变化,Western blot法检测细胞中抗髓样分化因子88(MyD88)和TIR结构域接头分子(TRIF)的水平。结果 Notch1 mRNA的相对表达量在AMI组显著升高,Notch2 m RNA的相对表达量在各组间的差异无统计学意义。TLR4、TLR7、TLR9 mRNA的相对表达量在SA组、UA组和AMI组中均显著高于NC组,TLR2 mRNA的相对表达量在AMI组中显著高于NC组、SA组和UA组。DAPT刺激可降低CD14~+单核细胞中TLR2 m RNA的相对表达量,对TLR4、TLR7和TLR9 mRNA的表达无显著影响。Pam3Csk4刺激可升高AMI患者CD14~+单核细胞中Notch1 mRNA的相对表达量,Notch信号通路相关分子Hes1和Hes5 mRNA的相对表达量亦显著升高。DAPT刺激还可抑制AMI患者中TLR2介导的炎症信号通路的应答,降低Pam3Csk4刺激后AMI患者CD14~+单核细胞培养上清中白细胞介素(IL)-6、IL-8和肿瘤坏死因子-α的表达,这一过程主要通过影响TIR结构域接头分子表达及核因子-κB的磷酸化而实现。结论 Notch1和TLR2的相互作用可能发挥调控冠心病患者CD14~+单核细胞功能的作用。     

Daxx分子特性与应激

Fas死亡结构域相关蛋白（Fas death domain-associated protein, Daxx）是一种高度保守核蛋白,具有4个不同结构域,在细胞凋亡和转录调控中发挥重要作用。Daxx存在两个与其生物学功能密切相关的核定位信号,为Daxx与多种蛋白相互作用所必需。Daxx与氧化应激、心肌缺血等病理生理过程密切相关,提示Daxx在心血管系统中的起重要作用。     

Fas/Fasl凋亡系统与妇科肿瘤研究进展

细胞凋亡是一种受细胞外环境和细胞内遗传物质调控的细胞自杀性死亡方式,又称程序性细胞死亡。肿瘤细胞也存在凋亡,Fas/FasL系统是肿瘤细胞凋亡的重要途径之一,通过影响肿瘤细胞的Fas/FasL表达可以诱导其凋亡。研究Fas/FasL系统与妇科肿瘤的关系,有助于阐明妇科肿瘤发生发展机制,为妇科肿瘤的治疗提供一种新的思路。     

模式识别受体NLRC3的生物学效应及在免疫相关疾病中的研究进展

固有免疫系统是宿主抵御病原微生物攻击的第一道防线。可以快速识别并产生免疫反应，清除致病微生物。然而，强烈的免疫反应可能会导致过度炎症，甚至自身免疫性疾病。含胱天蛋白酶活化和募集结构域核苷酸结合寡聚结构域样受体3(NLRC3)位于细胞质中，是固有免疫系统的重要负调节因子，可以抑制体内过度的免疫反应。NLRC3既能够通过影响核因子κB(NF-κB)和干扰素基因刺激因子(STING)相关信号通路，减少促炎细胞因子的产生；还能通过干扰含pyrin结构域核苷酸结合寡聚结构域样受体家族蛋白3(NLRP3)炎性体复合体的组装和活性来抑制炎症反应。此外，还可以通过调控磷脂酰肌醇激酶3/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/mTOR)等通路影响细胞的代谢、增殖、凋亡等生物学行为。NLRC3对细胞功能的这些调控作用，与感染性疾病、自身免疫性疾病和肿瘤等多种免疫相关性疾病的发生发展密切相关，通过调控NLRC3的表达可能成为治疗这些疾病的一个有效途径。     

Toll样受体与配体复合物结构的研究进展

Toll样受体(TLR)是一类模式识别受体,通过识别病原微生物的保守结构分子模式,触发先天免疫反应和基本的抗原特异适应性免疫。一些TLR结合配体复合物及胞内外结构域的晶体结构已经通过X射线晶体衍射分析确定。尽管配体结合位点各有不同,但是TLR家族胞外结构域均为马蹄状结构,其配体复合物的"m"外形也极度相似,C末端中心汇聚对胞内Toll/白细胞介素1受体(TIR)结构域紧靠一起非常重要,是启动下游信号的必需步骤。本文主要总结了TLR胞内外功能结构域及配体复合物的结构。     

Toll样受体4介导的抗病毒固有免疫研究进展

Toll样受体(TLR)是一类模式识别受体(PRR),人TLR分布在细胞表面或细胞内。不同TLR识别病原体的不同结构成分后,启动固有免疫反应。其中,TLR4在TLR家族中占有重要地位。它除了识别细菌的脂多糖(LPS)外,还可识别一些病毒的蛋白如水泡性口炎病毒的G糖蛋白、呼吸道合胞病毒的F蛋白。病毒包膜糖蛋白也是TLR4识别的配体。TLR4通过髓样分化因子88(My D88)和β干扰素TIR结构域衔接蛋白(TRIF)途径活化下游核因子κB(NF-κB)、干扰素调节因子3(IRF3)转录因子,产生细胞因子/趋化因子和1型干扰素等,在抗病毒免疫反应、免疫细胞分化及调节、发病机制、药物及疫苗研制等方面具有重要意义。     

肿瘤坏死因子样凋亡微弱诱导剂在肿瘤研究中的进展

肿瘤坏死因子样凋亡微弱诱导剂(TWEAK)作为肿瘤坏死因子超家族的新成员可表达在多种细胞表面,也表达在多种肿瘤细胞和组织中,可诱导人肠腺癌细胞系HT29、人口腔鳞状细胞癌HSC3等肿瘤细胞凋亡,介导HepG2、HLE和SK-Hep-1等肿瘤细胞增殖,诱导巨噬细胞在肿瘤浸润区的杀伤活性,潜在介导肿瘤血管。     

结核分枝杆菌诱导宿主巨噬细胞凋亡机制初探

目的探讨结核杆菌感染中巨噬细胞凋亡的信号传导通路及分子机理。方法用透射电镜、荧光染色对凋亡细胞的形态特征进行分析；琼脂糖凝胶电泳检测巨噬细胞DNA片段化水平；流式细胞术测定不同时期小鼠巨噬细胞凋亡率、膜表面Toll样受体2(TLR2)和胞内Bcl-2蛋白的水平。结果结核杆菌强毒力株H37Rv感染组的巨噬细胞凋亡率在1～7d内逐渐升高，至7d时最高可达32．2％，感染的9～11d以后，凋亡率逐渐降低；H37Rv感染组Bcl-2水平于感染9～11d后逐渐升高，与卡介苗(BCG)组比较差异有统计学意义；H37Rv感染组和BCG组的巨噬细胞膜表面的ⅡB．2水平均高于正常对照组；各组组内不同时期的TLB2水平无明显变化。结论结核杆菌H37Rv株在感染的早期对宿主巨噬细胞有较强的致凋亡作用，而Bcl-2表达的增加能显著抑制这种凋亡。结核杆菌在体内感染过程中，TLR2蛋白可能与巨噬细胞凋亡及Bcl-2表达无关。     

水飞蓟宾抑制Fas/FasL信号通路对肺结核大鼠炎症损伤及巨噬细胞凋亡的影响

目的：探究水飞蓟宾对肺结核（TB）大鼠肺部炎症损伤、巨噬细胞凋亡的影响,及对死亡受体Fas及其配体FasL的调控作用。方法：采用尾静脉注射结核分枝杆菌（Mtb）法制备TB大鼠模型,并随机分为模型组、水飞蓟宾组、Fas过表达重组蛋白（pcDNA-Fas）组、pcDNA-Fas阴性对照（pcDNA-NC）组、水飞蓟宾+pcDNA-Fas组,每组15只,另取15只大鼠为正常对照组。抗酸染色检测肺组织感染情况;HE染色观察肺组织病理变化;ELISA法检测肺组织TNF-α、IL-6表达;Annexin VFITC/PI双染结合流式细胞术检测肺泡巨噬细胞凋亡率;Western blot检测Fas、FasL、caspase8、caspase3、巨噬细胞炎症蛋白-2(MIP-2)表达水平。结果：与正常对照组相比,模型组大鼠肺组织炎症因子表达、肺泡巨噬细胞凋亡率升高,肺组织Mtb感染及干酪样坏死严重,Fas/FasL介导的caspase8/3凋亡途径活化（P<0.05）。与模型组相比,水飞蓟宾组大鼠肺组织炎症因子表达、肺泡巨噬细胞凋亡率降低,肺组织Mtb感染及干酪样坏死缓解,Fas/FasL介导的...