系统性红斑狼疮患者调节性T细胞CD305表达降低且IL-10分泌减少

目的检测系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血调节性T细胞(Treg)的比例及其CD305的表达,分析CD305对Treg功能的影响。方法募集SLE患者25例及年龄、性别相匹配的正常人16例。提取外周血单个核细胞(PBMC),流式细胞术检测外周血Treg的数量以及其表面CD305的表达。应用5(6)-羧基二乙酸荧光素琥珀酰亚胺酯(CFSE)检测SLE患者Treg对初始T(Tn)细胞的增殖抑制功能。应用单克隆抗体交联CD305进一步观察其对Treg分泌白细胞介素10 (IL-10)、转化生长因子β(TGF-β)的影响。结果与健康对照相比, SLE患者外周血Treg数量变化不明显,但增殖抑制功能显著降低。活动期SLE患者Treg表面CD305表达明显下调。交联CD305可以抑制Treg对Tn细胞的增殖抑制功能,减少IL-10的分泌,对TGF-β的分泌未见显著影响。结论 SLE患者Treg表面CD305下调抑制Treg功能,在SLE的发生发展中起一定作用。     

蠕虫感染通过调节免疫细胞影响炎症性肠病的研究进展北大核心CSCD

炎症性肠病(IBD)是一种慢性、反复性发作的肠道炎症反应失调性疾病。蠕虫及其虫源性蛋白对多种IBD动物模型具有预防和治疗作用,主要通过调节淋巴细胞的分化诱导2型辅助T(Th2)细胞免疫应答,并联合调节性T细胞(Treg)和调节性B细胞(Breg)抑制Th1细胞和Th17细胞免疫反应来有效抑制肠道炎症并进行组织修复。此外,蠕虫还可以调节固有免疫细胞如髓源性抑制细胞、巨噬细胞和树突状细胞(DC)的功能来影响IBD的发生及发展。     

血管生成抑制素对胃癌细胞的影响

目的探讨血管生成抑制素对胃癌细胞增殖和游走的影响及对胃癌细胞分泌血管内皮生长因子A和C(VEGF-A和VEGF-C)的影响并分析其作用机制。方法采用MTT法和划线法观察0、0.5、1.0、1.5μg/ml浓度的血管生成抑制素对胃癌细胞增殖和游走的影响。免疫组化的方法检测0、0.5、1.0、1.5μg/ml浓度的血管生成抑制素对胃癌细胞内血管内皮生长因子(VEGF)-A和VEGF-C的影响。结果 MTT法显示不同浓度的血管生成抑制素对胃癌细胞增殖无明显影响(p0.05),同样,划线法测得的胃癌细胞迁移距离同对照组相比无明显差异(p0.05)。但免疫组化法结果显示,0.5、1.0、1.5μg/ml浓度的血管生成抑制素组胃癌细胞VEGF-A和VEGF-C的表达同对照组相比明显减少(p0.05)。结论血管生成抑制素明显减少胃癌细胞内的VEGF-A和VEGF-C的分泌,但对胃癌细胞的增殖和游走无明显作用。     

根皮素对小鼠T淋巴细胞体外活化、周期、Ca~(2+)离子内流以及凋亡的影响

目的:研究根皮素(Ph)对小鼠T淋巴细胞中期活化、细胞周期、Ca~(2+)离子内流以及凋亡的影响,探讨将其发展为免疫干预药物的可能性.方法:双色荧光抗体染色结合流式细胞术(FCM)分析Ph对多克隆刺激剂(ConA)刺激下的小鼠T淋巴细胞CD25表达的影响;PI染色法检测Ph对T淋巴细胞周期的影响;Fluo-4/AM染色结合FCM分析Ph对T淋巴细胞Ca~(2+)离子内流的影响;calcein/Co~(2+)技术检测Ph对T淋巴细胞线粒体通透性转换(MPT)的影响,并用DIOC_6(3)染色检测其对线粒体膜电势(MMP)的影响.结果:Ph(40,60,80 μmol/L)对ConA刺激的T淋巴细胞CD25表达有显著的抑制作用(P＜0.01＝;Ph能抑制T淋巴细胞Ca~(2+)离子内流(P＜0.01＝;细胞周期分析显示,Ph能将T淋巴细胞抑制在S期;且Ph能够诱导和加速MPT,并导致MMP的显著下降.结论:Ph对小鼠T淋巴细胞活化和Ca~(2+)内流具有显著的抑制作用,并能将细胞抑制在S期,能通过线粒体途径诱导T淋巴细胞凋亡,可望发展成为一种新的免疫抑制药物.     

Toll样受体4和巨噬细胞移动抑制因子对血管内皮细胞生物活性的影响

目的:探讨Toll样受体4(TLR4)和巨噬细胞移动抑制因子(MIF)对ECV304内皮细胞增殖、黏附及炎症因子水平的影响。方法:ECV304细胞经TLR4 MIF单克隆抗体(mAb)和脂多糖(LPS)处理后,通过3H-TdR掺入实验、黏附实验和放射免疫分析研究细胞增殖、黏附和细胞因子水平。结果:LPS(10 mg/L)明显促进ECV304细胞TLR4的表达,而抗MIF mAb(10、50 mg/L)明显抑制其表达。抗MIF(50 mg/L)和抗TLR4mAb(1 mg/L)明显抑制了ECV304细胞的增殖,而LPS(10 mg/L)明显促进增殖。抗MIF mAb明显抑制了人外周血淋巴细胞对ECV304细胞的黏附,而LPS和抗TLR4 mAb对黏附无显著影响。抗MIF、抗TLR4 mAb明显抑制ECV304细胞TNFα的分泌,并呈剂量依赖,而LPS作用相反。与对照组相比,LPS(1 mg/L,48 h)可以促进ECV304细胞IL-8的分泌,抗MIF mAb(50 mg/L,48 h)可以明显抑制IL-8的分泌(P0.05)。但是抗TLR4 mAb(1 mg/L)对ECV304细胞IL-8的分泌无明显影响。结论:LPS、抗TLR4及抗MIF mAb对血管内皮细胞TLR4表达及活性有显著影响。     

雷藤舒在类风湿关节炎中免疫调节机制的研究

探讨(5R)-5-羟基雷公藤内酯醇(雷藤舒)体外在类风湿关节炎(RA)中的免疫调节机制。①CCK-8法检测24h、48h、72h等3个时间段不同浓度雷藤舒对小鼠L929成纤维细胞毒性的影响;②通过3 H胸腺嘧啶脱氧核苷(3 H-TdR)掺入实验,研究雷藤舒对RA患者外周血及滑液中单个核细胞增殖的影响;③流式细胞术检测雷藤舒对RA患者外周血和滑液中Th1细胞、Th17细胞增殖的影响;④ELISA法检测雷藤舒对RA患者外周血及滑液中单个核细胞分泌IFN-γ、TNF-α、IL-17的影响;⑤MTT法研究雷藤舒对RA患者滑膜成纤维细胞(FLS)增殖的影响。结果①雷藤舒≤100nmol/L时在3个时间段(24h、48h、72h)对L929无细胞毒性(P>0.05);②雷藤舒抑制RA患者外周血和滑液中单个核细胞增殖(P<0.05);③雷藤舒抑制Th1(P<0.05)细胞增殖,对Th17细胞增殖有抑制趋势但无统计学意义(P>0.05);④雷藤舒抑制RA患者外周血和滑液中单个核细胞分泌TNF-α、IFN-γ、IL-17水平;⑤雷藤舒抑制RA患者FLS增殖(P<0.05)。雷藤舒对L929细胞无毒性,通过抑制RA患者单个核细胞、Th1、Th17增殖,抑制外周血和滑液中PBMC和SFMC分泌TNF-α、IFN-γ、IL-17,抑制FLS增殖,进而调节RA免疫反应。     

抗苗勒氏管激素与男性生殖内分泌相关疾病研究进展

抗苗勒氏管激素(AMH)又称苗勒管抑制物质,为转化系统成员。在男性,AMH由未成熟的支持细胞分泌,促进男性胎儿苗勒管(Müllerian)管的退化,并参与睾丸发育和精子发生过程。AMH可影响促性腺激素释放激素(GnRH)、垂体分泌的卵泡刺激素(FSH)和黄体生成素(LH)、睾丸间质细胞分泌的睾酮(T)和抑制素B,从而通过影响下丘脑-垂体-性腺轴(HPG轴)引起男性生殖内分泌相关疾病。     

肿瘤源性因子对肿瘤相关免疫抑制细胞的影响

肿瘤相关树突状细胞(TADC)、髓系来源抑制细胞(MDSC)和肿瘤相关巨噬细胞(TAM)等免疫抑制细胞在肿瘤免疫逃逸过程中能够诱导免疫抑制反应.肿瘤源性因子不仅影响这些细胞的分化和功能,而且影响这些细胞的迁移.这些在肿瘤免疫中的研究进展能够为发展新的抗肿瘤免疫治疗策略提供依据.     

运动改善注意缺陷多动障碍儿童抑制功能的meta分析

目的:探讨运动对ADHD儿童抑制功能的影响。方法:检索Pubmed、Web of Science、theCochrane Library、EMbase建库至2021年5月有关运动对ADHD儿童抑制功能影响的文献,采用Reviewer Manager 5.3软件进行meta分析。结果:纳入11篇文献,共12项研究,研究对象累计644例。分析显示,运动对改善ADHD儿童抑制功能有积极影响(SMD=0.74,95%CI:0.36～1.11,P<0.001)。亚组分析显示,长期规律进行以开式运动技能为主、中至高强度运动的患儿,抑制功能的改善均优于对照组(SMD=0.84、0.95、0.56,95%CI:0.40～1.28、0.52～1.38、0.13～1.00,均P<0.05);小运动量(SMD=1.04,95%CI:0.35～1.72,P<0.01)和大运动量(SMD=0.57,95%CI:0.04～1.10,P<0.05)对患儿抑制功能的影响均优于对照组。结论:运动可改善ADHD儿童的抑制功能,开式动作技能为主的、中至高强度的长期规律运动可显著提升患儿的抑制功能。     

不同类型中药制剂逆转结直肠癌T细胞免疫抑制及其靶分子的比较研究

目的比较研究不同类型抗瘤中药制剂对结直肠癌所致T细胞免疫抑制的影响,寻找能有效逆转结直肠癌T细胞免疫抑制的抗瘤中药制剂组方。方法分别制备三氧化二砷(As2O3)、川芎嗪(LHC)、黄芪(AMB)、氧化苦参碱(MOX)、猪苓多糖(PUPS)、青蒿琥酯(ART)等6种中药制剂作用后的小鼠结直肠癌Colon26细胞再培养上清;MTT法检测中药制剂作用后对Colon26所致T细胞转化抑制的影响,直接免疫荧光FCM法检测对IL-2Rα及CD3ε+ζ+表达抑制的影响;定量ELISA法测定上清中TGF-β1、VEGF、IL-4、IL-6、IL-10和PGE2含量;多元相关分析中药制剂逆转结直肠癌T细胞免疫抑制的相应靶分子。结果 AMB、PUPS及ART对T细胞转化抑制的下调程度较强(下调约50%),维持时间较长;ART对IL-2Rα表达抑制的下调作用最强(下调约50%),维持时间较长;AMB对CD3ε+ζ+表达抑制的下调作用最强,不但可完全消除表达抑制,还可进一步促进表达,维持时间亦较持久。对Colon26肿瘤细胞所致转化抑制及CD3ε+ζ+表达抑制的逆转,LHC的作用靶分子为TGF-β1和IL-10,其他5种中药制剂的靶分子均为TGF-β1。对IL-2Rα表达抑制的逆转,除AMB以外其他5种中药制剂的靶分子均为TGF-β1。结论通过阻碍肿瘤细胞分泌TGF-β1、IL-10等免疫抑制分子,以逆转肿瘤细胞产生的T细胞免疫抑制,应是中药制剂的新型抗瘤机制之一。     

表皮生长因子、肾上腺素及前列腺素E_2对大鼠离体黄体细胞孕酮分泌的影响

用放射免疫分析法测定了离体培养的雌性大鼠黄体细胞孕酮分泌及表皮生长因子(EGF)、肾上腺素(E)、前列腺素E_2(PGE_2)对孕酮分泌的影响。结果表明:表皮生长因子(2～200ng)抑制黄体细胞孕酮的基础分泌及hCG诱导孕酮分泌,并呈量效关系;肾上腺素在50μg/ml时刺激孕酮分泌;表皮生长因子能阻断肾上腺素的促进作用;前列腺素E_2则抑制黄体细胞孕酮分泌,既抑制基础分泌又抑制hCG诱导的孕酮分泌。     

微环境中调节性T细胞与乳腺癌关系的研究进展

乳腺癌肿瘤免疫微环境是乳腺癌细胞与免疫细胞、免疫分子之间相互作用的场所,对乳腺癌的发生发展及预后产生重要影响.调节性T细胞(Tregs)作为一类具有免疫抑制功能的T淋巴细胞亚群,可通过抑制T细胞的功能,抑制机体抗肿瘤免疫,促进肿瘤的发生发展.研究显示,乳腺肿瘤免疫微环境中Tregs在乳腺癌发生、发展以及靶向治疗中发挥着重要作用.     

芳维A酸乙酯对体外培养小鼠肾小球系膜细胞增殖、凋亡及TGF-β1分泌的影响

目的研究芳维A酸乙酯(AE)对体外培养小鼠肾小球系膜细胞(GMC)增殖、凋亡及TGF-β1表达的影响。方法采用MTT法检测芳维A酸乙酯(AE)、全反式维A酸(atRA)对GMC增殖的影响;采用流式细胞仪检测AE干预后GMC的凋亡情况;采用ELISA法检测AE干预后GMC培养上清液中TGF-β1的含量。结果与正常组对比,AE干预组GMC增殖受到抑制(P<0.05),且当浓度在10~(-8)到10~(-5)mol/L范围内时,作用成剂量依赖性。AE能够诱导GMC的凋亡,正常组、10~(-7)mol/L、10~(-5)mol/L的AE干预组的GMC细胞凋亡率分别为(1.13±0.36)%、(9.52±0.99)%和(27.23±2.88)%。AE能够抑制GMC的TGF-β1分泌,与空白对照组,AE干预组TGF-β1表达降低(P<0.05)。AE抑制GMC增殖、诱导GMC凋亡及抑制GMC TGF-β1分泌的作用明显强于atRA。结论AE可以抑制体外GMC增殖并能诱导凋亡,其抑制增殖的作用可能与TGF-β1表达降低有关。AE可干预狼疮性肾炎病理病理进程。     

复方鳖甲软肝方药物血清对大鼠肝星形细胞增殖细胞核抗原表达的影响

目的:探讨复方鳖甲软肝方药物血清对大鼠肝星形细胞(HSC)增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响.方法:运用免疫细胞化学和图像分析技术方法,从离体的角度对不同时相、小同浓度复方鳖甲软肝方药物血清干预状态下,HSC内PC-NA的表达进行半定量分析,观察复方鳖甲软肝方药物血清对离体大鼠HSC增殖的影响.结果:复方鳖甲软肝方药物血清可明显抑制HSC中PCNA的表达.结论:本研究提示复方鳖甲软肝方具有抑制HSC增殖的功能,进而起到抑制肝纤维化发生、发展的作用.     

肿瘤微环境中髓系来源抑制细胞对T细胞免疫活性抑制的分子机制

髓系来源抑制细胞(MDSC)根据其起源和功能而命名,由巨噬细胞、树突状细胞(DC)及粒细胞等细胞的前体细胞组成。肿瘤免疫逃逸与肿瘤微环境中MDSC介导的抗肿瘤免疫抑制相关,肿瘤微环境中的MDSC主要通过抑制T细胞的免疫活性来发挥免疫抑制作用。根据MDSC与T细胞之间的接触方式,肿瘤微环境中的MDSC抑制T细胞免疫功能的分子机制可分为直接抑制和间接抑制两类,其中MDSC通过产生细胞因子影响T细胞功能和细胞之间膜受体配体相互作用发挥抑制T细胞功能的方式为直接抑制,而MDSC通过影响T细胞代谢从而影响T细胞功能及通过其他细胞发挥抑制T细胞功能的方式为间接抑制。制定针对MDSC的治疗策略时,需综合考虑上述多种分子机制共存的可能性。     

Obestatin、Ghrelin与血糖调节

肥胖抑制素(obestatin)和生长激素释放肽(ghrelin)能互相拮抗,参与血糖的调节.其中obestatin与GPR-39(G-protein-coupled receptor 39)结合抑制摄食和胃肠排空、促进胰岛β细胞功能,影响胰岛素的分泌;而ghrelin与生长激素促分泌受体(GHSR1a)结合,促进食欲...     

二氟甲基鸟氨酸对HeLa细胞及其端粒酶活性的影响

探讨二氟甲基鸟氨酸(DFMO)对人宫颈鳞癌细胞系HeLa细胞生长特性、凋亡和端粒酶活性的影响。采用细胞记数、形态观察、流式细胞术(FCM)分析、DNA电泳和端粒重复扩增技术(TRAP)，观察DFMO对HeLa细胞生长、凋亡和端粒酶活性的影响。DFMO能显著抑制HeLa细胞生长，诱导细胞凋亡，G1期细胞增多、S期细胞减少，细胞内端粒酶活性明显被抑制。外源性腐胺(Pu)的加入可阻止DFMO引起的上述变化。DFMO可抑制HeLa细胞的生长，诱导HeLa细胞凋亡；抑制HeLa细胞内端粒酶活性。DFMO引起的HeLa细胞生长抑制及凋亡诱导与端粒酶活性被抑制有关，这可能是抗肿瘤的分子机制之一。     

内皮型一氧化氮合酶基因多态性与临床疾病

内皮型一氧化氮合酶 (e NOS)催化生成的一氧化氮 (NO)具有舒张血管、抑制血管平滑肌细胞增殖、抑制血小板和白细胞粘附等功能 ,因此 e NOS基因多态性可能与心血管等疾病的发生发展密切相关。     

SNS-032诱导弥漫性大B淋巴瘤OCI-LY-19细胞株凋亡及其作用机制的研究

 目的： 研究SNS-032对弥漫性大B淋巴瘤细胞株OCI-LY-19凋亡的影响并探讨其作用机制。方法：应用MTS法观察不同浓度的SNS-032对OCI-LY-19细胞活力的影响;用PI单染法观察SNS-032对OCI-LY-19细胞诱导死亡的影响;Annexin V/PI双染流式细胞术分析不同浓度SNS-032对OCI-LY-19细胞凋亡的影响;Western blotting检测细胞凋亡相关蛋白和细胞增殖相关蛋白的表达情况。结果：SNS-032明显抑制OCI-LY-19细胞活力,半数抑制浓度为0.358 μmol/L;随SNS-032作用时间延长与浓度升高,凋亡细胞数逐渐增多;SNS-032可以时间与剂量依赖性地引起凋亡相关蛋白聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶(PARP)的切割,caspase-3前体(procaspase-3)、caspase-9前体(procaspase-9)、X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)与髓样细胞白血病1(Mcl-1)的表达下降,而cleaved caspase-3和cleaved caspase-9表达明显增加;与细胞增殖相关的蛋白丝/苏氨酸激酶(Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)、信号转导子及转录激活子5 (STAT5)、磷酸化STAT5（p-STAT5）、细胞外信号调节激酶(ERK)和磷酸化ERK(p-ERK)表达下降,而ERK总蛋白无明显变化。结论：SNS-032能抑制弥漫性大B淋巴瘤细胞株OCI-LY-19的生长,诱导其凋亡,可能的机制是抑制了相关抗凋亡蛋白的表达,激活了caspase级联反应,同时抑制了与细胞增殖相关的JAKs/STATs、MEK/ERK和PI3K-Akt信号转导通路的表达与活化。     

过表达Raf激酶抑制蛋白(RKIP)抑制人肝星状细胞增殖

目的研究Raf激酶抑制蛋白(RKIP)对LX-2人肝星状细胞增殖的影响。方法用重组质粒pc DNA3.1-RKIP转染LX-2细胞,G418筛选并培养稳定转染的细胞。MTT法和集落形成试验检测过表达RKIP对LX-2细胞增殖、集落生成的影响;Western blot法检测RKIP、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、1型胶原蛋白(Col1)、基质金属蛋白酶1(MMP-1)、MMP-2及胞外信号调节激酶/丝裂原激活蛋白激酶(ERK/MAPK)信号通路相关蛋白的表达水平。结果与对照细胞相比,过表达RKIP明显抑制LX-2细胞增殖和集落形成,下调Col1、α-SMA、MMP-1和MMP-2蛋白表达,降低ERK/MAPK磷酸化水平。结论过表达RKIP抑制LX-2细胞的增殖,其机制与抑制ERK/MAPK信号通路有关。