调节肽

巴甫洛夫在一生中用很大精力研究神经系统对机体功能的调控作用,他的“神经论”思想一直深深地影响着医学的各个领域。英国人 Bayliss 和 starling 重复了巴甫洛     

P-糖蛋白结合肽的筛选及合成肽鉴定

目的 筛选人膀胱癌P-糖蛋白特异性结合肽并合成鉴定.方法 利用表达获得的P-糖蛋白胞外段融合蛋白为靶蛋白,采用酶联板法筛选噬菌体随机12肽库,化学合成该特异性肽序列,免疫细胞化学方法进行鉴定.结果 从噬菌体随机肽库中筛选获得了与P-糖蛋白特异性结合的噬菌体阳性克隆,测序获得特异性结合肽序列.免疫细胞化学结果显示特异性合成肽可与耐药细胞BIU-87/ADM结合,而与敏感细胞BIU-87不结合.结论 筛选获得的结合肽具有一定的亲和力,可与特定的肿瘤细胞结合,表现出一定的肿瘤特异性;P-糖蛋白结合肽的筛选,为人膀胱癌多药耐药的靶向治疗结论提供实验依据.     

活性肽的新探索

新的活性肽不断地被发现,对已知多肽激素的功能又有了新的认识。重要的生物学基础研究课题如生长发育、细胞分化、大脑     

激肽释放酶与激肽体系

哺乳类动物的血浆和组织中都存在着激肽体系,它包括凝血因子Ⅻ(仅血浆体系才有)、前激肤释放酶、激肤释放酶、激肤释放酶抑制剂、激肤原、激欣降解酶等等.     

内毒素结合肽模拟肽P11的体外活性研究

目的 对从噬菌体展示随机肽库筛选获得的内毒素结合肽模拟肽进行体外拮抗内毒素活性鉴定.方法 采用FMOC固相合成法化学合成内毒素结合肽模拟肽P11,并进行拮抗内毒素活性和细胞毒性测定.结果 亲和ELISA检测显示P11与LPS有较高的亲和力,通过生长曲线和流式细胞学分析细胞周期显示P11对人U937细胞生长无明显影响.流式细胞检测显示P11呈剂量依赖性抑制FITC-LPS与人外周血单核细胞(PBMC)结合.细胞因子生成抑制实验显示10 μg/ml P11可显著抑制LPS诱导PBMC和U937细胞TNF-α mRNA转录和蛋白表达.结论 体外活性鉴定结果表明化学合成的模拟肽P11可抑制LPS诱导的炎性反应.     

点突变p53肽诱导肽特异性CTL的研究

目的探索点突变ｐ５３肽诱导细胞免疫应答的可能性,为其作为肽疫苗用于肿瘤免疫治疗提供实验依据。方法人工合成小鼠点突变ｐ５３肽Ｐ１３２Ｆ（ＬＮＫＬＦＦＱＬ,１３２Ｃｙｓ→Ｐｈｅ突变）,与不完全弗氏佐剂（ＩＦＡ）或ＲＩＢＩ佐剂（ＲＡＳ）混合,皮下免疫Ｃ５７ＢＬ／６小鼠,分离脾细胞体外用肽再刺激,诱导细胞毒Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ）,并以５１Ｃｒ释放法检测其杀伤活性。结果Ｐ１３２Ｆ肽加上ＩＦＡ或ＲＡＳ免疫小鼠,均能诱导肽特异性ＣＤ８＋ＣＴＬ;低剂量重组白细胞介素２（ｒＩＬ－２）能增强肽免疫效果。结论所用突变的ｐ５３蛋白具有免疫原性,提示来源于突变ｐ５３的抗原肽有可能作为肽疫苗用于临床肿瘤免疫治疗     

吞噬促进肽

在生物的种系进化上,吞噬作用是一种比较古老的防御机能,也是研究得很早的一种免疫反应。1883年Metchnikoff就已比较详细地报道了吞噬现象的许多方面。一个世纪以来,免疫学得到了突飞猛进地发展,对于吞噬现象的认识也在不断深化,但还有许多问题仍很模糊,例如关于吞噬功能的调节就是其中之一。在这一领域的研究报道是很     

内源性抗生素肽

内源性抗生素肽是指由基因编码的、动物(包括人类)细胞产生的抗菌分子,具广谱抗微生物活性,有的还有选择性肿瘤细胞毒性。其分子较小,肽链多在100个氨基酸以下。迄今已从不同种属动物(电虫、被囊动物、两栖动物、鸟类、哺乳动物等)发现近100种。其基本的抗菌机制是:抗菌肽分子插入菌体外膜形成离子通道,胞外离子以依赖电压的方式进入胞内,引起菌细胞水肿而死亡。传统抗生素耐药菌株对其多无抗性。     

缩胆囊肽

脑内含有某些肽类物质,它们是数十年来已知的外周激素,这一认识引起了神经生物学和内分泌学相应的变革。现在认为,所有外周肽类激素看来也可在中枢神经系统内产生,至少可以说在某一发育阶段是这样。反过来也一样,原来由脑分离出来的某些肽类物质,现在认为是外周激素。缩胆囊肽显然是属于前一类中的一种激素。脑和肠道之间存在着特别密切的关系,多数脑肽也起着肠道激素的作用。其中经典     

MHC-肽四聚体的研究进展

四聚体技术是一种可直接对抗原特异的T淋巴细胞进行标记的新方法.MHC-肽四聚体可被用于抗原特异的T细胞的表位分析,T细胞的直接分离与克隆,T细胞功能检测以及作为激活T细胞的刺激物和进行原位染色等方面的研究.     

治疗爱滋病的T肽

<正> 瑞典和美国的研究者发现,爱滋病病毒包膜糖蛋白(gp 120)中的一个肽段Ala-Ser-Thr-Thr-Thr-Asn-Tyr-Thr(T肽)可在体外抑制爱滋病病毒,阻遏病毒包膜与CD_4受体结合。曾用此T肽治疗4例近末期爱滋病患者,第1周静脉滴注1mg,每日两次,随后改为连续3周每日两次滴注2mg。     

内源性鸦片样肽的前体及新的鸦片样肽

自从Hughes(1975)发现内源性鸦片样物质(Endogenous Opiate like Substa-nces,OLS)以来,近几年来关于它的生理功能、合成和降解的研究都取得了较大的进展,并已有一些专题综述。本文拟就OLS的前体及新发现的具有鸦片样活性的物质作一简要介绍。     

MHC-肽四聚体的研究进展

四聚体技术是一种可直接对抗原特异的T淋巴细胞进行标记的新方法。MHC-肽四聚体可被用于抗原特异的T细胞的表位分析,T细胞的直接分离与克隆,T细胞功能检测以及作为激活T细胞的刺激物和进行原位染色等方面的研究。     

激素肽的研究展望

<正> 大多数激素肽由一个前体蛋白裂解形成,编码多肽激素前体蛋白的mRNA经翻译,在核糖体内合成前原激素,前原激素进入内质网后蛋白质的“前”片段被移除,所余激素原转运至高尔基氏器,在高尔基氏器内,进行进一步的蛋白质裂解和其它翻译后修饰过程,然后激素被包入分泌颗粒,作好在适当的刺激下,从细胞释放的准备,多数情况下,激素原的裂解是蛋白水解作用并发生于成对硷性氨基酸残基部位,但是,对于要求C—末端氨基化的多肽处理过程则较为复杂。RNA拼接部位的改换,是引起激素肽多样化的重要途径,因此,一个单一的基因可以产生一个以上的编码多肽前体的mRNA。这最初是在降钙素和降钙素基因相关肽的研究中     

从噬菌体随机肽库筛选CD137结合肽

目的应用噬菌体随机七肽库筛选与人CD137特异结合的肽序列。方法以重组人CD137作为筛选分子，对噬菌体展示随机七肽库进行亲和淘选。经过5轮淘选后，共随机挑选23个噬菌斑并对其进行了扩增和测序，据此推导随机多肽的氨基酸序列。经夹心ELISA进一步鉴定噬菌体克隆与CD137的结合力。^3H-TdR法检测了噬菌体展示多肽对抗CD137Ab刺激的人外周血淋巴细胞增殖反应影响。结果5轮淘选所得的噬菌体回收率逐步提高，显示淘选过程对随机肽库有一定的富集效果。通过对阳性克隆的测序和序列比较分析，得到RPTQGAF、RPTQVAL、RPTQVAF的相似序列和与CD137L具有同源SRS序列的SRSRVRY、HRRPSRS肽序列，ELISA结果显示这5个克隆都有良好的与CD137的结合力。RPTQGAF、RPTQVAL、RPTQVAF和SRSRVRY4个噬菌体展示肽均能在体外抑制抗CD137Ab刺激的淋巴细胞增殖反应。结论通过对噬菌体随机肽库的淘选，得到与CD137结合的相关多肽，为进一步研究CD137与配体结合的特异性位点及其拮抗性多肽药物设计提供了实验依据和结构基础。     

突变肽库的构建及其应用--噬菌体展示短肽的改造

1990年, 由Parmley和Smith[1]提出并建立的噬菌体展示技术(phagedisplaytechnique, PDT)是以噬菌体或噬菌粒为载体, 表达蛋白、单链抗体、酶及短肽。由此衍生的多种噬菌体展示库, 可用于研究蛋白质之间或蛋白与非蛋白之间相互作用, 如抗原与抗体的相互作用。然而, 在对噬菌     

利用噬菌体随机肽库筛选表达Aβ靶向肽的噬菌体

目的抗Aβ神经毒性的Aβ靶向肽噬菌体的筛选。方法分别合成Aβ1-10序列组成的短肽并将其生物素化;以生物素化Aβ1-10为靶分子,用噬菌体展示技术及液相亲和捕获法筛选出特异性高亲和力的噬菌体;采用生物传感分析技术,通过结合特异性实验和短肽竞争性抑制实验,检测所筛选的噬菌体与靶分子之间的亲和动力学关系。结果经过对靶分子Aβ1-10的3轮筛选,筛出了与Aβ1-10特异性结合的单克隆噬菌体;生物传感分析技术结果进一步表明,靶分子（Aβ1-10）与所筛选噬菌体之间的结合具有高度特异性。结论筛选出了展示特异性高亲和力结合Aβ1-10短肽的噬菌体。     

利用噬菌体肽库筛选TNF-α表位的相关短肽

目的 从噬菌体肽库筛选TNF－α相关短肽，为临床上治疗肿瘤奠定基础。方法 用可溶性TNF受体Ⅰ（sTNFR Ⅰ）筛选噬菌体随机12肽库，利用细胞毒效应进行生物学效应筛选，再进行单链DNA测序。结果 分别得到若干模拟跨膜型TNF－α（TM－TNF－α）和模拟分泌型TNF－α（S－TNF－α）细胞毒效应的短肽，选择细胞毒效应最好的模拟TM－TNF－α短肽进行人工合成，体外实验显示此肽段对S－TNF－α耐受肿瘤细胞系HL－60具有明显细胞毒效应，且主要引起靶细胞凋亡。另外，利用激光共聚焦显微镜证实该合成肽段不能诱导NF－κB发生核转位。结论 获得模拟TM－TNF－α的短肽，为TM－TNF－α用于临床抗瘤治疗提供新线索。     

用噬菌体随机肽库筛选刺激细胞生长的活性小肽

目的 筛选刺激NFS－60细胞生长的活性小肽。方法 以G－CSF依赖细胞系NFS－60为靶细胞，筛选随机6和15肽库，经3轮筛选后，随机挑取60个噬菌体克隆进行生物学活性和结合活性鉴定。结果 得到6个刺激NFS－60细胞生长的阳性噬菌体克隆。经细胞ELISA检测，这6个小肽都可与NFS－60细胞结合，并且这6个小肽与细胞结合的量，都与所加入的噬菌体的量成正比，经测序未找到共同序列。结论 从随机噬菌体肽库中筛到的活性小肽，可以模拟某些生长因子的活性部位，来刺激靶细胞的生长。     

人过敏毒素C5a反义肽与其正义肽的相互作用研究

目的　证实过敏毒素C5a与其反义肽分子间是否确实存在选择性相互识别作用 ,进一步以反义肽分子设计的思路 ,寻找过敏毒素C5a拮抗反义多肽的依据。方法　选择人过敏毒素C5a与其受体 (C5aR)相互作用的两个功能区域 ,按照反义肽分子设计的模型 ,分别设计合成其对应的反义肽 ,并利用生物分子相互作用分析 (BIA)技术 ,对C5a正、反义间相互作用进行分析。结果　在设计合成的 4条反义肽中 ,有一条反义多肽与全长C5a以及其对应的正义肽分子间均存在选择性相互作用 ,其解离平衡常数值分别为 6 .6 2× 10 - 6 M、4 .5 0 8× 10 - 6 M。结论　过敏毒素C5a及其反义肽分子间确实存在选择性相互作用 ,从反义肽的思路寻找C5a生物学效应的拮抗多肽 ,进行新药的设计和开发是可能的。