rhIL-1β、rhIL-2和rhIL-6对体外培养海马神经胶质细胞c-fos表达的影响

采用免疫组织化学方法观察了重组人白细胞介素-1β、重组人白细胞介素-2和重组人白细胞介素-6对体外培养大鼠海马神经胶质细胞c-fos表达的影响。结果证明，培养12d的海马神经胶质细胞与重组人白细胞介素-1β（100U／ml）、重组人白细胞介素-2（200U／ml）和重组人白细胞介素-（200U／ml）一起孵育2h后出现FOS-免疫反应阳性的细胞核，随着所给剂量的逐渐加大，FOS反应阳性胞核数量也逐渐增多．图象分析的结果显示，FOS反应阳性胞核的平均光密度亦随剂量的逐渐加大而逐渐增加．本研究的结果提示：重组人白细胞介素-1β、-2及-6均能诱导体外培养大鼠海马神经胶质细胞c-fos的表达。说明三者对体外培养的海马神经胶质细胞具有生物学作用。推测c－fos表达可能是这些细胞因子发挥生物效应的重要中间途径。     

rhIL－6、rhGM－CSF和rhEPO对人骨髓造血干细胞的调节作用

重组人白细胞介素６（ｒｈＩＬ－６）和重组人粒—单细胞集落刺激因子（ｒｈＧＭ－ＣＳＦ）与正常人造血干细胞培养１周后，ｒｈＩＬ－６组干细胞数增至４．７±０．７倍；ｒｈＧＭ－ＣＳＦ组增至９．３±１．０倍；ｒｈＩＬ－６＋ＧＭ—ＣＳＦ组增至１３．４±３．３倍。与对照组比较，Ｐ均＜０．０１．造血干细胞ＣＦＵ－Ｅ集落分析：ｒｈＩＬ－６组未见ＣＦＵ－Ｅ集落形成；ｒｈＩＬ－６＋ＥＰＯ组则ＣＦＵ－Ｅ集落明显高于ｒｈＥＰＯ组，ｐ＜０．０１．造血干细胞ＣＦＵ－Ｍｉｘ集落分析：ｒｈＩＬ－６组和ｒｈＧＭ－ＣＳＦ组可见ＣＦＵ－ＧＭ浆落，无ＣＦＵ＋Ｍｉｘ集落形成；ｒｈＩＬ－６＋ＧＭ－ＣＳＦ组有ＣＦＵ－Ｍｉｘ集落形成；ｒｂＩＬ－６＋ＧＭ－ＣＳＦ＋ＥＰＯ联合应用，有ＣＦＵ－ｎ，ｍ，Ｍ，Ｅ混合集落数增多。实验结果提示ｒｈＩＬ－６对造血干细胞有直接的刺激作用，主要刺激粒—单系组细胞增殖。ｒｈＩＬ－６与ｒｈＥＰＯ有协同作用，能促进ｒｈＥＰＯ刺激红系祖细胞的作用。ｒｈＩＬ－６与ｒｈＧＭ－ＣＳＦ亦有协同作用，可以刺激多能干细胞形成混合集落。     

人血小板生成素cDNA转染COS-7细胞及表达产物对小鼠骨髓巨核细胞的作用

将克隆全长１．１ｋｂ血小板生成素（ＴＰＯ）ｃＤＮＡ构建重组ＰＣＩｎｅｏＴＰＯ表达载体，利用ＬｉｐｏｆｅｃｔｉｎＴＭ介导转染ＣＯＳ－７细胞中，对阳性克隆ＣＯＳ－７细胞的ＤＮＡ、ｍＲＮＡ和培养上清分别进行ＰＣＲ扩增Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ、斑点杂交和ＴＰＯ夹心ＥＬＩＳＡ检测，观察表达产物对小鼠骨髓巨核细胞的作用。结果表明：全长１．１ｋｂＴＰＯｃＤＮＡ转染ＣＯＳ－７细胞获得表达，最高表达量可达４８．２８Ｕ／ｍｌ，其产物使骨髓巨核细胞集落形成单位（ＣＦＵ－ＭＫ）集落数增加４倍，巨核细胞增大至４２．１０±６．７０μｍ（Ｐ＜０．０１）；动态观察骨髓ＣＦＵ－ＭＫ集落数于实验第８天达最高峰，约持续２ｄ，第１０天后开始下降。提示ＴＰＯｃＤＮＡ转染ＣＯＳ－７细胞表达产物对骨髓巨核细胞生成有刺激活性     

胸腺因子D对飞行员IL—6诱生水平的影响

利用ＭＴＴ比色法和ＥＬＩＳＡ法研究了飞行员白细胞介素６（ＩＬ－６）活性的变化及胸腺因子（ＴＦＤ）对飞行员ＩＬ－６诱生水平的影响。结果表明：飞行员的血清ＩＬ－６诱生水平分别为１１．２±４．６Ｕ／ｍｌ和１０．１４±２．４６ｎｇ／ｍｌ，均明显高于地勤人员，而且ＴＦＤ可以在体外明显降低飞行员的ＩＬ－６诱生水平。     

脑星形胶质细胞分泌IL—6的体外研究

关于ＩＬ－６介入中枢神经系统的作用尚不十分清楚。本文对星形胶质细胞在体外分泌ＩＬ－６的作用进行了研究。１材料与方法１．１胶质细胞原代培养取鼠龄１～２ｄ的新生Ｗｉｓｔａｒ大鼠脑组织，去除脑膜，用含１０％ＦＣＳ的ＤＭＥＭ高糖培基（葡萄糖含量６ｍｇ／ｍｌ）...     

输精管结扎家兔细胞因子水平的实验研究

体重２．５￣３．０ｋｇ的日本大耳白兔，分为输精管结扎组（ＶＧ）和假手术对照组（ＳＯＧ）。术后４、８、１２、１８、２２ｍｏ经耳静脉采血，检测巨噬细胞（Ｍψ）培养上清中白细胞介素１（ＩＬ－１）活性和外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）培养上清中白细胞介素２（ＩＬ－２）、白细胞介素６（ＩＬ－６）活性及血浆肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）含量。结果表明：①ＩＬ－１活性和ＴＮＦ含量，术后第８ｍｏ ＶＧ均高于ＳＯＧ，术后４、８     

携带hIL-2cDNA的逆转录病毒载体的构建及其在人肝癌细胞中的特异表达研究

将人白细胞介素２（ｈＩＬ-２）ｃＤＮＡ克隆到逆转录病毒载体ＭＮＳＭ的ＰＬ位点　，分别构建了转录受ＳＶ４０早期启动子和人甲胎蛋白增强子调控的重组逆转录病毒载体ＭＮＳＩ和ＭＮＳＩＡ。用脂质体转染法将ＭＮＳＩ和ＭＮＳＩＡ分别转导ＰＡ３１７包装细胞，测质粒转染率为（５～２０）×１０~(－３)克隆／μｇＤＮＡ·１０~６细胞，病毒感染率为（５．４～４５０）×１０~４ＣＦＵ／ｍｌ。重组病毒在４μｇ／ｍｌ ｐｏｌｙｂｒｅｎｅ存在条件下感染人肝癌细胞、肾癌细胞和黑色素瘤细胞，Ｎｅｏ~Ｒ克隆经Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析证明ｈＩＬ－２ｃＤＮＡ转入人肿瘤细胞并整合，　Ｒ　ＮＡ斑点杂交及ＩＬ－２活性表达分析证明，人甲胎蛋白增强子可促进异源启动子启动ｈＩＬ－２ｃＤ－ＮＡ在合成甲胎蛋白的人肝癌细胞中高效特异转录和表达。该研究对肝癌特异性免疫增强基因治疗有重要意义。     

白细胞介素1,肿瘤坏死因子α和脂多糖对人脐静脉内皮细胞表达 …

目的 观察细胞因子白细胞介素１（ＩＬ－１）β、肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）α和脂多糖（ＬＰＳ）是否诱导人脐静脉内皮细胞表达单核细胞趋化蛋白１（ＭＣＰ－１）ｍＲＮＡ及蛋白。方法 选取生长汇合的人脐胸脉内皮细胞,在其培养基中分别加入终浓度为２ｎｇ／ｍｌ的ＩＬ－１β、２０ｎｇ／ｍｌ的ＴＮＦβ和１００ｎｇ／ｍｌ的ＬＰＳ,３７℃共育４ｈ后,按照一步法提取其总ＲＮＡ,用γ－＾２２Ｐ标记的寡核苷酸ｄｏｔ ｂｌｏｔ分析     

IL—2对神经元NMDAR1m RNA表达和细胞内钙浓度的影响

Ｎ－甲基－Ｄ－天门冬氨酸（ＮＭＤＡ）受体和细胞内游离钙浓度（［Ｃａ２＋］ｉ）的变化与神经元的兴奋性关系密切。本文报道以大鼠大脑皮层神经元为研究对象，通过Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交并以Ｆｕｒａ－２作为Ｃａ２＋荧光指示剂，观察了外源性白细胞介素－２（ＩＬ－２）对ＮＭＤＡ受体１型亚单位（ＮＭＤＡＲ１）ｍＲＮＡ表达量及［Ｃａ２＋］ｉ的影响。结果显示：不同浓度的ＩＬ－２（１～２００Ｕ／ｍｌ）作用于原代培养的胚胎大鼠大脑皮层神经元６小时后其ＮＭＤＡＲ１ｍＲＮＡ表达量明显增加，并与ＩＬ－２浓度呈正相关关系。当其浓度为２５～２００Ｕ／ｍｌ时，ＮＭＤＡＲ１ｍＲＮＡ表达量增加４４．３％～２１９．７％（Ｐ＜０．０５）。ＩＬ－２（１～２００Ｕ／ｍｌ）与新生大鼠大脑皮层神经元共同孵育５～１０分钟后，［Ｃａ２＋］ｉ增加２７．１％～９４．２％（Ｐ＜０．０５）。钙通道阻断剂ｎｉｆｅｄｉｐｉｎｅ可完全阻断ＩＬ－２引起的［Ｃａ２＋］ｉ升高，而ＮＭＤＡ受体拮抗剂ＭＫ－８０１无此作用。本文结果提示：外源性ＩＬ－２具有兴奋性神经调质样作用，可能参与或介导了神经兴奋毒性作用和惊厥性疾病的发生与发展过程。     

病毒性肝炎患者IL－1、IL－6和TNFα活性的检测

检测了甲、乙型病毒性肝炎患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣｓ）ＩＬ－１、ＩＬ－６和ＴＮＦα的诱生活性及其血清中活性。结果表明，乙型慢性活动性肝炎（ＣＡＨ）、乙型肝炎后肝硬化（ＨＣ）和乙型重型肝炎（ＳＨ）ＰＢＭＣｓ经脂多糖诱导后，ＩＬ－１活性分别为３５３１．１±８８２．７Ｕ／ｍ１、２７６９．７±７３０．４±Ｕ／ｍｌ和５３２９．３±１０８９．３Ｕ／ｍｌ，高于正常对照组（Ｐ＜０．０５或（０．０１）；ＩＬ－６诱生活性分别为３８．９０±１４．７５Ｕ／ｍ１、２．４５±１８．８５Ｕ／ｍｌ和７１．９５±２８．０５Ｕ／ｍｌ（与正常对照组相比，ｐ＜０．０５或＜０．０１）；ＴＮＦα诱生活性在乙型慢性迁延性肝炎（ＣＰＨ）、ＣＡＨ、ＨＣ和ＳＨ中分别为３３．２３±７．２５Ｕ／ｍｌ、６．９９±１．８４Ｕ／ｍ１、４．２９±２．１７Ｕ／ｍｌ和８６．７０±２４．１８Ｕ／ｍｌ，与对照组相比Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１。各型患者血清中ＩＬ－１、ＩＬ－６和ＴＮＦα活性均有不同程度的增高。文中对ＳＨ患者ＩＬ－１、ＩＬ－６和ＴＮＦα之间的相互关系进行了探讨。     

IL—6对大鼠急性髓系白血病R2细胞的增殖抑制及分化诱 …

重组人白细胞介素６（ｒｈＩＬ－６）可抑制大鼠急性髓系白血病（ＡＭＬ）Ｒ２细胞的体外生长（ＩＣ５０ １００ｎｇ／Ｌ），并在１０ｎｇ／Ｌ￣１μｎ／Ｌ的剂量范围内诱导Ｒ２细胞向终末方向分化。诱导后的Ｒ２细胞具有单核巨噬细胞的形态特征；且非特异性酯酶（ＮＳＥ）及酸性醋酸酯酶（ＡＮＡＥ）的活性增强，而过氧化物酶（ＰＯＸ）的活性却一直很低。经典型的ＤＮＡ梯状条带及凋亡小体证实，≥１μｇ／Ｌ ｒｈＩＬ－６亦可诱     

肿瘤坏死因子β诱导淋巴细胞化学发光及其增殖的研究

目的：探讨活性氧参与ｒｈＴＮＦβ诱导淋巴细胞活化作用的机理。方法：采用化学发光（ＣＬ）和顺磁共振法（ＥＳＲ）研究ｒｈＴＮＦＢ诱导人外周血淋巴细胞产生活性氧（ＯＲ）的动态变化及其增殖作用。结果：①用１０－２０００Ｕ／ｍｌ的ｒｈＴＮＦβ处理１×１０６ｍｌ－１淋巴细胞均可诱发Ｌｙ－ＣＬ,其中以１００Ｕ／ｍｌ　ｒｈＴＮＦβ处理１８～２０ｍｉｎ的ＣＬ峰值（ＲＬＩ）为最高,所诱发的ＯＲ主要为ＯＨ·;②以１５～６２Ｕ／ｍｌ的ｒｈＴＮＦβ处理淋巴细胞７２ｈ,可明显地产生活化效应,这与ＴＮＦＢ诱发淋巴细胞早期产生Ｌｙ－ＣＬ的强度相一致。结论：适当剂量的ｒｈＴＮＦβ可诱导人外周血淋巴细胞产生ＯＲ并促进其增殖。     

枸杞子水提取物对白细胞介素6和肿瘤坏死因子产生的影响

研究了枸杞子水提取物（ＬＢｒ）对全血培养细胞白细胞介素６（ＩＬ－６）和肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）产生的影响。结果表明，ＬＢｒ单独不能诱导ＴＮＦ产生，ＬＢｒ０．５μｇ／ｍｌ可明显促进ＬＰＳ诱导的ＴＮＦ产生，但ＬＢｒ１０μｇ／ｍｌ则对ＬＰＳ诱导的ＴＮＦ产生无明显作用ｉＬＢｒ０．５μｙ／ｍｌ不仅可促进ＬＰＳ诱导的ＩＬ－６产生，单独亦可诱导ＩＬ－６产生，但ＬＢｒ１０μｇ／ｍｌ则对ＩＬ－６的产生无明显调节作用。     

大鼠急性肺损伤时外周血和肺灌洗液中几种炎症介质浓度的动态变化

体外研究表明，肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）［１－２］、白细胞介素１β（ＩＬ－１β）［３］、白细胞介素６（ＩＬ－６）［４］、粒细胞－巨嗜细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）［５］、粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）［６］等炎性细胞因子，可延迟中性粒细胞（ＰＭＮ）凋亡。本实验着重研究肺灌洗液和循环血中ＴＮＦ、ＩＬ－１β和ＩＬ－６含量的变化，以及内源性抗炎因子—可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅰ、Ⅱ（ｓＴＮＦＲⅠ、Ⅱ）的动态变化及规律，以探索上述细胞因子浓度的变化与ＰＭＮ凋亡、过度炎症反应、继发性肺组织损伤之间的内在关系。…     

人粒细胞集落刺激因子在家蚕细胞及幼虫中的高效表达

含信号肽序列的ｈＧ－ＣＳＦｃＤＮＡ基因克隆于Ｍ１３ｍｐ１８中，测序表明其基因序列与高活性ｈＧ－ＣＳＦｃＤＮＡ一致。将ｈＧ－ＣＳＦ基因插入家蚕核型多角体病毒（ＢｍＮＰＶ）转移载体ｐＢＥ２８４，经与野生型病毒ＤＮＡ共转染家蚕细胞后，通过体内同源重组的方式构建了重组病毒ＢｍＮＰＶ－Ｇ－ＣＳＦ，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交表明重组病毒ＤＮＡ中含Ｇ－ＣＳＦ基因片段。重组病毒感染单层ＢｍＮ细胞后第四天表达量达１． ２×１０６ＣＦＵ／ｍｌ培养液，Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ分析可见分子量为１９×１０３左右一条带。家蚕幼虫感染重组病毒后第四天表达量达１．４×１０７ＣＦＵ／ｍｌ血淋巴（ｈｅｍｏｌｙｍｐｈ）。     

IL-6对大鼠急性髓系白血病R2细胞的增殖抑制及分化诱导作用

重组人白细胞介素６（ｒｈＩＬ－６）可抑制大鼠急性髓系白血病（ＡＭＬ）Ｒ２细胞的体外生长（ＩＣ５０１００ｎｇ／Ｌ），并在１０ｎｇ／Ｌ～１μｇ／Ｌ的剂量范围内诱导Ｒ２细胞向终末方向分化。诱导后的Ｒ２细胞具有单核巨噬细胞的形态特征；且非特异性酯酶（ＮＳＥ）及酸性醋酸酯酶（ＡＮＡＥ）的活性增强，而过氧化物酶（ＰＯＸ）的活性却一直很低。经典型的ＤＮＡ梯状条带及凋亡小体证实，≥１μｇ／ＬｒｈＩＬ－６亦可诱导Ｒ２细胞凋亡。我们认为，Ｒ２细胞是研究ＩＬ－６信号转导通路及ＡＭＬ细胞分化机制的一个很好模型。     

分化诱导剂对人单核样白血病J6—2细胞凝集素结合及[^125I…

将Ｊ６－２细胞分别分化诱导剂ＧＭ３（５０μｍｏｌ／Ｌ、ＤＭＳＯ８１．２％）处理６天、ＴＰＡ（１００ｎｇ／ｍｌ）处理３天，观察它们对１１种凝集素结合反应的影响。结果表明，经ＧＭ３处理后，Ｊ６－２细胞对凝集素结全反应增强的只有ＵＥＡ（－至＋，变弱的只有ＢＡＳ（＋＋至－），其余的都无变化。     

rhIL—6促进致死性辐射损伤小鼠凝血及早期造血功能的恢复

目的：观察ｒｈＩＬ－６对小鼠造血功能的影响。方法：应用致死性６０Ｃｏ－γ射线辐射Ｂａｌｂ／ｃ小鼠，造成骨髓型辐射损伤模型。照射后用ｒｈＩＬ－６皮内注射给药６ｄ（２μｇ／只，２次／ｄ），通过检测出凝血时间（ＢＴ，ＣＴ）、凝血酶原时间（ＰＴ）、外周血ＰＬＴ和ＷＢＣ，以及骨髓造血细胞体外培养ＣＦＵ－Ｍｉｘ和脾脏ＣＦＵ－Ｓ的数目，研究了ｒｈＩＬ－６对骨髓型辐射损伤小鼠早期造血功能恢复的效应，并进行了机理的探讨。结果：ｒｈＩＬ－６处理组小鼠的ＢＴ，ＣＴ和ＰＴ均较对照组显著缩短（Ｐ＜０．０１）；外周血ＰＬＴ和ＷＢＣ分别较对照组提高１３０％和１６５％。骨髓造血细胞体外培养ＣＦＵ－Ｍｉｘ和脾脏ＣＦＵ－Ｓ计数，均显著高于对照组（Ｐ＜０．０１）。结论：ｒｈＩＬ－６具有促进受辐射小鼠早期造血细胞恢复的生物学效应，可减轻辐射所致骨髓损伤和促进造血干／祖细胞（ＨＳＣ／ＨＰＣ）的增殖、分化，有利于骨髓造血功能的恢复。     

重组人TGF-β1在NIH/3T3细胞系中的表达及鉴定

选择腊质休法将人转化生长因子（ＴＧＦ-β１）基因转移至ＮＩＨ／３Ｔ３中，经Ｇ４１８（４５０ｕｇ／ｍｌ）筛选，随机挑选出１３个表达克隆；其培养上清经体外斌活（加热或酸化）处理，用水貂肺上皮细胞株ＣＣＬ－６４生长抑制法测定ＴＧＦ。用活性，证明绝大多数表达克隆的ＴＣＦ－β１表达量均超过了１００ｎｇ／ｍｌ．４８ｈ，最高克隆表达量为１５６ｎｇ／ｍｌ·４８ｈ。选择高表达克隆经Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ、Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ鉴定，证实外源人ＴＧＦ－β１基因稳定重组人ＮＩＨ／３Ｔ３细胞中，有ｍＲＮＡ表达。ＰＣ…     

ABC－ELISA检测人天然及重组γ－干扰素

采用生物素－亲和素双抗体夹心酶联免疫吸附分析技术（ＡＢＣ－ＥＬＩＳＡ）检测人天然及重组γ－干扰素。以固相化兔多抗ＩｇＧ捕获待检样品中γ－干扰素，以具有中和γ－干扰素抗病毒活性的生物素化单抗作为检测抗体，再加ＡＢＣ复合物，用邻苯二胺显色。据已知不同浓度标准γ－干扰素显色后的ＯＤ值的标准曲线，判定待检品中γ－干扰素蛋白含量。所检γ－干扰素与抗病毒活性一致，与肿瘤坏死因子、白细胞介素－２（ＩＬ－２），α、β－干扰素等无交叉显色反应；最低检测值为１００ｐｇ／ｍｌ（相当于抗病毒效价１～２Ｕ／ｍｌ）；可用于重组人γ－干扰素生产、纯化过程中的定性、定量分析以及血清γ－干扰素水平、人淋巴细胞γ－干扰素分泌量及ＬＡＫ和ＴＩＬ细胞等产生γ－干扰素水平的测定。