儿童急性淋巴细胞白血病免疫表型186例分析

目的:探讨儿童急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)免疫表型特征,为临床诊断、微小残留病(minimal residual disease,MRD)的监测提供依据。方法:采用多参数流式细胞仪(multiparameter flow cytome-try,MFC),对186例儿童ALL病例进行免疫表型分析。结果:186例ALL中,B-ALL78.5%(146/186),T-ALL19.3%(36/186),T/M混合型ALL1.1%(2/186),B/M混合型ALL1.1%(2/186)。结论:儿童B-ALL比率约为T-ALL的4倍,混合细胞白血病在儿童很少见。儿童ALL均具有独特的白血病相关免疫表型(characterization of leukemia-associated immunotyping,LAIP)。     

小儿急性白血病MTS1基因缺失及点突变的研究

为探讨MTS1基因突变与恶性血液病的关系,应用PCR-SSCP和DNA印迹方法检测35例急性白血病(AL)患儿MTS1基因改变。结果显示:急性淋巴细胞白血病(ALL)缺失(包括点突变)为25.8％(8/31)。B-ALL纯合缺失为16％(4/25),T-ALL为33％(2/6)。点突变则两型各1例。结果证明:我国儿童ALL有MTS1基因失活的存在,T-ALL高于B-ALL,点突变仅见于少数病例。该基因失活与AL的发生发展及临床预后有密切关系。     

45例儿童急性淋巴细胞性白血病流式细胞术免疫分型的研究

目的研究儿童急性淋巴细胞性白血病(ALL)免疫表型的特点。方法采用流式细胞仪对45例初治儿童急性淋巴细胞性白血病进行免疫表型分析。结果①45例ALL中T淋巴细胞性ALL(T-ALL)5例(11.1%),B淋巴细胞性ALL(B-ALL)36例(79.9%);ALL1型(L1)9例(20%),ALL2型(L2)27例(60%),ALL3型(L3)5例(11.1%);②45例ALL中4例符合急性混合性白血病(HAL)的诊断标准(8.9%),25例(55.6%)为髓系抗原阳性的ALL(My+ALL),其中CD13阳性率最多,为44.4%(20例),CD33为22.2%(10例),CD15为22.2%(10例)。B-ALL中My阳性率为55.6%,T-ALL中My阳性率为20%,有明显差异;L1中My阳性率为22.2%(2/9),L2中My阳性率为70.4%(19/27),L3中My阳性率为40%(2/5),L2中My阳性率明显高于L1和L3(P<0.05)。结论结合免疫表型分析与细胞形态学检验能为儿童急性淋巴细胞性白血病的诊断提供更可靠和更有价值的分型依据。     

小儿急性淋巴细胞白血病p16基因缺失与临床特征相关性的研究

p16基因异常与人类多种肿瘤的发生与发展有关。作者用PCR方法检测了42例小儿急性淋巴细胞白血病(ALL)p16基因3个外显子缺失状况,初步探讨了pl6基因缺失与小儿ALL的发病、临床表现及预后的相关性。结果表明,p16基因缺失在小儿ALL的发生率为40％,其中1例为exon1单一缺失。T-ALL中p16基因缺失为12/13(92％),远高于B-ALL,后者为5/22(23％),临床高危型ALL pl6基因缺失为17/19(89％),20例标危型ALL均未检测到p16基因缺失。实验证明,pl6基因缺失在小儿ALL(尤其是T-ALL)的发病过程中起重要作用。与临床的相关性研究表明,pl6基因缺失提示预后不良。     

63例T细胞急性淋巴细胞白血病患者MIC分型与临床预后分析

T细胞急性淋巴细胞白血病(T-ALL)约占ALL的20%,其生物学及临床特征不同于B细胞急性淋巴细胞白血病(B-ALL).我们回顾性分析了我院2000年1月至2007年6月63例住院初诊T-ALL患者的临床、免疫学分型和细胞遗传学资料,并就其与预后的关系进行讨论.     

186例儿童急性淋巴细胞白血病免疫表型特征

目的回顾分析186例儿童急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)免疫表型结果,以期了解儿童ALL免疫表型的特征,为临床诊断、微小残留病(minimal residual disease,MRD)的监测提供依据。方法采用多参数流式细胞术(multiparameter flow cytometry,MFC),利用CD45PE-cy5/SS设门,完成186例儿童ALL病人的免疫分型。结果在186例ALL中,B系ALL78．5％(146/186),T系ALLl9．3％(36/186),T/M混合型ALL1．1％(2/186),B/M混合型ALL1．1％(2/186)。白血病相关免疫表型(characterization of leukemia-associated immunotyping,LAIP)的出现频率为:B-ALL CD19 /CD10 /CD117 1．4％; CD19 /CD10 /CD13 25．3％;CD19 /CD10 /CD33 21．3％;CD19 /CD10 /CD2 5．5％;CD10 /CD34 /CD45±86．9％;CD19 / CD34 /CD20 24．7％;CD19 /CD10 /CD45±67．1％;CD19 /CD10-/CD20-4．1％。T-ALL CD7 /CD13 /CD45±5．6％;CD7 / CD33 /CD45±2．8％;TdT /CD3 /CD45±100％;CDT /CD2±/CD45±77．8％;CD7 /CD4 /CD3-16．7％;CD7 /CD8 /CD3- 16．7％。结论儿童B-ALL比率高于T-ALL,约为T-ALL的4倍,混合细胞白血病在儿童很少见。而且儿童ALL均具有独特的LAIP特征,因此免疫表型分析对于白血病的诊断和MR监测可提供非常客观的依据。     

PCR测定B-细胞系急、慢性淋巴细胞白血病患者的免疫球蛋白基因重排

作者用多聚酶链反应(PCR)技术测定了19例急性淋巴细胞白血病(ALL)和15例慢性淋巴细胞白血病(CLL)患者在确诊时的外周血和骨髓的DNA 标本,还检测了5例正常人外周血的DNA 标本。白血病患者标本中均含有10%以上的白血病细胞。用V670/OL-4,VH26/OL-4两对引物来扩增免疫球蛋白重链基因的CDR■(Complementarity determining re-gion 3)区。依FAB 分型19例ALL 中L_1型3例,L_2型15例,L_3型1例。其免疫学表型为普通型-ALL(C-ALL)15例,T-ALL2例,B-ALL 和无标记ALL(N-ALL)各1例,15例CLL 均为B-免疫表型。C-ALL、B-ALL、N-ALL 共     

复发的成人B细胞系列急性淋巴细胞白血病过表达周期素E

为研究细胞周期调节蛋白——周期素E(cyclin E)和周期素A在成人急性淋巴细胞白血病(ALL)复发中的作用,作者用Western印迹法对19例成人ALL患者的周期素E和周期素A蛋白水平进行研究。19例ALL患者(B-ALL15例,T-ALL4例)年龄16～74岁(平均     

急性淋巴细胞白血病的免疫分型和基因的研究

目的:回顾性分析30例急性淋巴细胞白血病(ALL)患者的免疫分型,融合基因及基因突变的分子生物学检测结果,并探讨其与临床治疗效果及预后的关系。方法:选取哈尔滨市第一医院血液肿瘤研究中心2015年8月到2016年6月经过骨髓细胞形态学、免疫表型、细胞遗传学、分子生物学等检查确诊的ALL患者30例,按照FAB标准分类,27例为B系ALL,3例为T系ALL。分析ALL患者白血病细胞膜表面及胞浆内分化抗原,并且对所有患者都进行43种融合基因定性筛查(BCR-ABL,AML1-ETO,PML-RARα等)和ALL基因突变(IKZF1,TP53,PAX5,JAK1,JAK2,CRLF2,PHF6,NOTCH1,FBXW7,PTEN)的二代测序(NGS)检测。结果:30例ALL患者中男性14例,女性16例,年龄2-74岁,中位年龄11.5岁。30例ALL中B-ALL发病率(90.00%)明显高于T-ALL(10.00%)。27例B-ALL患者主要表达CD19、CD22、CD10和CD34等。CD19和CD22是B-ALL最具有诊断价值的抗原;3例T-ALL主要表达cCD3、CD7、CD10和cTDT等,CD7和cCD3是T-ALL最具有诊断价值的抗原。30例ALL患者的43种融合基因定性筛查发现,BCR-ABL、TEL-AML1、E2A-PBX1、MLL-AF6、MLL-AF4和SIL-TAL融合基因阳性各1例,ALL相关基因突变的NGS检测结果表明,3例B-ALL患者发生TP53突变,1例B-ALL患者发生TET2 I1762V突变;3例患者(2例T-ALL,1例B-ALL)发现NOTCH1基因突变。1个疗程后成人B-ALL的治疗效果(28.57%)明显差于儿童B-ALL(95.00%),截止至2017年7月10日儿童B-ALL的生存率明显优于成人B-ALL,其差异都具有显著性意义。结论:白血病免疫分型技术及分子生物学检测技术在白血病的诊断、治疗方案的选择及疗效评价方面具有重要指导作用,是骨髓细胞形态学诊断的补充。     

282例急性白血病流式细胞术免疫分型的特点分析

目的探讨急性白血病免疫表型特征及诊断价值。方法采用流式细胞术三色荧光直接标记技术检测282例AL患者,根据抗体积分系统进行分型。结果①按免疫表型的特征可将急性白血病分为4类:单表型急性白血病(82.27％),表达某一系列抗原为主的急性白血病(9.22％),急性杂合性白血病(HAL)(7.09％),未分化型急性白血病(AUL)(1.42％);②80％以上急性非淋巴细胞白血病(ANLL)患者主要表达MPO(96.38％)、CD13(89.86％)、CD33(69.57％),90％以上急性淋巴细胞白血病(ALL)主要表达cCD79a(100％)、CD19(93.67％)或cCD3(100％)、CD2(100％),表达某一系列抗原为主的AL以急性B淋巴细胞白血病伴随系表达(My B-ALL)为主(62.50％),HAL以B-ALL及MAL为主。结论流式细胞仪三色免疫荧光直接标记法进行AL免疫分型,cCD3、cCD79a、MPO为系列特异性标志,CD117为早期髓细胞的标志,对AL的诊断及一些特殊类型的白血病的确诊、治疗和预后均有重要意义。     

59例急性白血病形态学分型与免疫分型结果对比分析

目的 探讨急性白血病(AL)形态学分型与免疫分型结果的关系,以提高细胞形态学诊断水平.方法 采用骨髓细胞形态学、骨髓细胞化学染色及免疫分型检测方法.结果 59例AL中,24例急性淋巴细胞白血病(ALL)经免疫分型诊断为7例T-ALL、17例B-ALL;32例急性髓细胞白血病(AML)CD13、CD33、CD14、CD15、CD34、HLA-DR阳性率分别为43.3%、93.8%、22.7%、50.0%、52.6%、22.2%;FAB不能分型的3例AL,经免疫分型证实为AML、T-ALL、B-ALL各1例.FAB分型的1例M2b、3例ALL经免疫分型证实为双表型AL.结论 白血病免疫分型是诊断AL的必要手段,是对形态学分型的补充和修正.     

糖原染色在急性淋巴细胞白血病亚型诊断中的应用

目的分析急性淋巴细胞白血病(ALL)中糖原染色(PAS)的不同阳性率及分布形态及与ALL亚型(B型及T型)的关系,探索PAS在ALL亚型区分中的应用价值。方法 (1)对2009年以来每例急性白血病患者送检的骨髓涂片均加做过氧化物酶(POX)染色,将根据法国、美国、英国(FAB)协作组提出的急性白血病分型诊断标准诊断的ALL患者骨髓涂片与流式细胞术(FCM,流式)分型结果作回顾性比较,计算吻合率;(2)对上述ALL患者骨髓涂片加做PAS,计算PAS阳性率并描述其分布形态,比较PAS不同阳性率及分布形态与ALL亚型(B型及T型)的关系。结果 (1)根据FAB分型标准诊断ALL 57例,其中FCM证实ALL 56例(1例微分化型急性髓细胞白血病),与FCM吻合率为98.2%。(2)44例B-ALL中,PAS阳性38例(占86.4%),其中PAS阳性率大于或等于51.0%的32例(占72.7%)。12例T-ALL中,PAS阳性5例(占41.7%),其中PAS阳性率大于或等于51.0%的1例(占8.3%)。(3)38例PAS阳性B-ALL中,34例PAS颗粒(++～++++);5例PAS阳性T-ALL中,PAS颗粒均为(+)。结论 PAS阳性率大于或等于51%并且PAS呈粗颗粒状时,多数为B-ALL,PAS可作为ALL免疫亚型诊断的辅助手段。     

207例儿童急性淋巴细胞白血病免疫表型与细胞遗传学及临床特征的相关性

本研究检测207例儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)患者的免疫表型,探讨其与细胞遗传学改变和临床特征的关系。应用流式细胞术及一组系列相关单克隆抗体对207例儿童ALL患者骨髓进行4色免疫表型分析,用染色体R显带技术对其中的146例进行核型分析。结果显示,207例儿童ALL患者中,11.6%为T-ALL,88.4%为B-ALL。42.5%ALL患者表达髓系抗原(MyAg),CD13是ALL中最常见的MyAg(31.4%)。髓系抗原阳性率在T-ALL(41.7%)与B-ALL(42.6%)两组间未见统计学差异。可供核型分析的146例中核型异常者84例(57.5%)。MyAg+ALL与MyAg-ALL患者临床和生物学特征分析表明,MyAg+ALL组白细胞计数高(>50×109/L)的患者比例及CD34+患者比例均高于MyAg-ALL组。结论 :免疫表型对ALL的诊断与分型至关重要,免疫表型与患者的异常核型改变及临床特征关系密切。     

T细胞受体γ基因和免疫球蛋白重链基因在急性淋巴细胞白血病细胞的重排及其在分型中的意义

用PCR扩增检测27例急性淋巴细胞白血病(acute lymphocytic leukemia,ALL)和1例T细胞淋巴瘤(T lymphocytic lymphoma,T-LL)的T细胞受体(Tcell receptor,TCR)γ基因和免疫球蛋白重链(immunoglobulin heavy chain,IgH)基因重排。TCRγ基因在9例T-ALL及2例未分型白血病病例中全部重排;在6例B-ALL中有1例重排;在10例C-ALL中有1例重排,而IgH基因在24例ALL病例中重排,其中7例为T-ALL,1例为未分型白血病。TCRγ和IgH基因在1例T-LL中均无重排,在T-ALL、B-ALL和C-ALL中均有交叉重排现象。我们探讨了这些结果在分型中的意义,同时还注意到,在28例中的10例病人存在IgH和TCRγ基因双重重排,如作为特异的双标记检测其微小残留白血病细胞,无疑会提高准确率。     

急性淋巴细胞白血病免疫表型与细胞遗传学及临床特征的关系

目的 探讨急性淋巴细胞白血病(ALL)患者免疫表型与细胞遗传学改变和临床特征的关系.方法 应用流式细胞术及相关单克隆抗体,Cell Quest软件获取并分析50 000个细胞,通过CD_(45)/侧向角散射光强度(SSC)设门识别幼稚细胞,对113例ALL患者骨髓进行免疫表型分析;采用骨髓细胞72 h培养法常规制备染色体,R显带技术对其中的74例进行核型分析.结果 113例ALL患者中,14.2%(16/113)为T淋巴细胞急性淋巴细胞白血病(T-ALL),85.8%(97/113)为B淋巴细胞急性淋巴细胞白血病(B-ALL).113例ALL患者中有106例进行髓系抗原检测,34.9%(37/106)ALL患者表达髓系抗原(MyAg),CD_(13)是ALL中最常见的MyAg(23.6%,25/106).T-ALL髓系相关抗原表达总的阳性率为46.2%(6/13),B-ALL为33.3%(31/93),差异无统计学意义(X~2=0.825,P＞0.05).成人ALL各髓系相关抗原表达总的阳性率为47.6%(20/42),高于儿童的26.6%(17/64),差异有统计学意义(X~2=4.948,P＜0.05).可供核型分析的74例ALL中,核型异常者39例(52.7%).MyAg~+ALL与MyAg~-ALL患者临床和生物学特征分析表明,MyAg~+组高白细胞(＞50×10~9/L)患者比例为48.6%(18/37),高于MyAg-ALL组的20.3%(14/69),差异有统计学意义(X~2=9.191,P＜0.01);MyAg~+ALL组CD_(34)阳性患者比例为83.8%(31/37),高于MyAg~-ALL组的53.6%(37169),差异有统计学意义(X~2=9.527,P＜0.05);而且MyAg~+ALL组成人患者比例(54.1%,20/37)高于MyAg~-ALL组(31.9%,22/69),差异有统计学意义(X~2=4.948,P＜0.05).结论 ALL免疫表型与细胞遗传学改变和临床特征具有一定相关性,将免疫表型与细胞遗传学检测相结合,有助于ALL诊断.     

急性淋巴细胞白血病(ALL)免疫表型与临床及化验资料的相互联系

对350例未经治疗的ALL用一组单克隆抗体(Nomenclature of the International Workshop on Leukocyte Typing)确定其恶性细胞的免疫表型,并对其与就诊时患者临床及化验检查特点之间的相互关系进行了研究.全部ALL病例经骨髓涂片形态学及细胞化学确诊.根据免疫表型所见,ALL分为五组:前B-ALL,B-ALL,T-ALL,MO-ALL和未分化ALL,前B-ALL又分为前B1-B4-ALL,T-ALL分为T1-T4-ALL共11个确定的免疫学亚型,其中B细胞系ALL占63.5%,T细胞系ALL24%,未分化ALL4%,MO-ALL2%,多细胞系ALL6.5%.     

CD34、CD38和HLA-DR表达及其对急性白血病诊治的意义

目的观察CD34、CD38和人类白细胞抗原DR(HLA-DR)在急性白血病(AL)的表达及其与临床疗效的关系。方法采用流式细胞术对81例初诊为急性混合细胞白血病(HAL)、急性髓细胞白血病(AML)、急性淋巴细胞白血病(B-ALL或T-ALL)患者的骨髓标本进行细胞免疫学表型分析,统计患者4个疗程结束时的治疗效果,观察其与血红蛋白(Hb)、白细胞(WBC)、血小板(PLT)、初诊时骨髓白血病细胞平均水平以及CD34、CD38和HLA-DR单个核细胞平均表达水平的关系。结果该组病例CD34、CD38、HLA-DR的阳性率分别为62.96%、82.72%和69.14%,各亚型阳性病例单个核细胞表达水平不一,HAL高表达CD34和HAL-DR,M0较其他AML患者CD34和HAL-DR表达水平高,6例M3患者低表达CD34、CD38,不表达HLA-DR;ALL患者,CD34在T-ALL和B-ALL表达水平一致,T-ALL高表达CD38,B-ALL HLA-DR表达水平较高;AML患者死亡组初诊时骨髓白血病细胞平均水平高,HLA-DR表达水平低,与缓解组相比,差异有统计学意义(P<0.05),ALL患者死亡组CD34和CD38平均表达水平高于缓解组(P<0.05)。结论急性白血病单个核细胞CD34、CD38和HLA-DR表达水平与白血病细胞类型和分化程度相关,CD34和HLA-DR在M0和HAL单个核细胞表达水平高于其他分化明确的AML。观察初诊患者CD34、CD38和HLA-DR表达以及骨髓白血病细胞平均水平,对于指导治疗、判断预后有一定价值。     

急性淋巴细胞白血病的分子遗传学研究进展

细胞遗传学的改变已成为急性淋巴细胞白血病(ALL)最重要的预后判断指标。近年来分子遗传学研究显示,部分早前B-ALL和早前T-ALL患者存在一些小信号分子的突变。细胞和分子遗传学的发展为ALL患者的遗传学分组和个体化靶向治疗提供了可能。     

儿童急性淋巴细胞白血病患者基因突变谱与预后相关性的临床研究

目的:分析儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)患者的基因突变谱，并探讨其对患儿预后的影响。方法:回顾性分析2018年1月至2021年12月于武汉儿童医院血液肿瘤科249例初诊ALL患儿的临床资料，采用靶向特异性二代测序(Next-generation sequencing, NGS)技术获得基因突变谱数据，并分析其与ALL患儿预后的相关性。结果:249例患儿中B-ALL 227例(91.2%),T-ALL 22例(8.8%);178例(71.5%)患儿检测发现基因突变，其中85例(34.1%)患儿存在≥3种基因突变。突变率较高的基因依次为NRAS(23.7%)、KRAS(22.9%)、FLT3(11.2%)、PTPN11(8.8%)、CREBBP(7.2%)、NOTCH1(6.4%),其中KRAS、FLT3、PTPN11、CREBBP突变主要在B-ALL中检出，而NOTCH1、FBXW7突变主要在T-ALL中检出。与B-ALL比较，T-ALL患儿基因突变发生率更高(χ²=5.573,P<0.05),且更容易发生基因共突变(P<0.05)。伴TP53突变的患...     

急性白血病流式细胞术免疫分型的特点及临床意义

目的探讨急性白血病流式细胞术免疫分型的特点及临床意义。方法 100例急性白血病,采用流式细胞术进行急性白血病免疫表型检测。结果①用特异性抗体将急性淋巴系白血病分为T细胞系列急性淋巴细胞白血病(T-ALL)和B细胞系急性淋巴细胞白血病(B-ALL)。②用特异性抗体使急性髓细胞白血病(AML)的分型更明确。③发现急性淋巴细胞白血病(ALL)中伴髓系抗原表达(My-ALL)、AML中伴淋系抗原表达(Ly AML)和混合型白血病。结论免疫学分型能反映白血病细胞的特征,提高了诊断的准确性。