59例急性白血病形态学分型与免疫分型结果对比分析

目的 探讨急性白血病(AL)形态学分型与免疫分型结果的关系,以提高细胞形态学诊断水平.方法 采用骨髓细胞形态学、骨髓细胞化学染色及免疫分型检测方法.结果 59例AL中,24例急性淋巴细胞白血病(ALL)经免疫分型诊断为7例T-ALL、17例B-ALL;32例急性髓细胞白血病(AML)CD13、CD33、CD14、CD15、CD34、HLA-DR阳性率分别为43.3%、93.8%、22.7%、50.0%、52.6%、22.2%;FAB不能分型的3例AL,经免疫分型证实为AML、T-ALL、B-ALL各1例.FAB分型的1例M2b、3例ALL经免疫分型证实为双表型AL.结论 白血病免疫分型是诊断AL的必要手段,是对形态学分型的补充和修正.     

初诊成人急性淋巴细胞白血病免疫学亚型和临床特征的关系

报道了荷兰多中心协作组用免疫荧光法对91例初诊成人急性淋巴细胞白血病(ALL)免疫亚型的前瞻性研究结果,阐述了与临床特征的关系。全部病例均根据FAB标准诊断为ALL。在可比较的91例中,B-ALL 67例(73％),T-ALL 18例(21％),急性未分化细胞白血病(AUL)4例,双系ALL 2例(B-ALL/M_4,B/T-ALL)。与文献相似的是,CD_(10)~+ALL最多见,其次是T系ALL或AUL,而B-ALL     

45例儿童急性淋巴细胞性白血病流式细胞术免疫分型的研究

目的研究儿童急性淋巴细胞性白血病(ALL)免疫表型的特点。方法采用流式细胞仪对45例初治儿童急性淋巴细胞性白血病进行免疫表型分析。结果①45例ALL中T淋巴细胞性ALL(T-ALL)5例(11.1%),B淋巴细胞性ALL(B-ALL)36例(79.9%);ALL1型(L1)9例(20%),ALL2型(L2)27例(60%),ALL3型(L3)5例(11.1%);②45例ALL中4例符合急性混合性白血病(HAL)的诊断标准(8.9%),25例(55.6%)为髓系抗原阳性的ALL(My+ALL),其中CD13阳性率最多,为44.4%(20例),CD33为22.2%(10例),CD15为22.2%(10例)。B-ALL中My阳性率为55.6%,T-ALL中My阳性率为20%,有明显差异;L1中My阳性率为22.2%(2/9),L2中My阳性率为70.4%(19/27),L3中My阳性率为40%(2/5),L2中My阳性率明显高于L1和L3(P<0.05)。结论结合免疫表型分析与细胞形态学检验能为儿童急性淋巴细胞性白血病的诊断提供更可靠和更有价值的分型依据。     

PCR测定B-细胞系急、慢性淋巴细胞白血病患者的免疫球蛋白基因重排

作者用多聚酶链反应(PCR)技术测定了19例急性淋巴细胞白血病(ALL)和15例慢性淋巴细胞白血病(CLL)患者在确诊时的外周血和骨髓的DNA 标本,还检测了5例正常人外周血的DNA 标本。白血病患者标本中均含有10%以上的白血病细胞。用V670/OL-4,VH26/OL-4两对引物来扩增免疫球蛋白重链基因的CDR■(Complementarity determining re-gion 3)区。依FAB 分型19例ALL 中L_1型3例,L_2型15例,L_3型1例。其免疫学表型为普通型-ALL(C-ALL)15例,T-ALL2例,B-ALL 和无标记ALL(N-ALL)各1例,15例CLL 均为B-免疫表型。C-ALL、B-ALL、N-ALL 共     

急性淋巴细胞白血病的免疫分型和基因的研究

目的:回顾性分析30例急性淋巴细胞白血病(ALL)患者的免疫分型,融合基因及基因突变的分子生物学检测结果,并探讨其与临床治疗效果及预后的关系。方法:选取哈尔滨市第一医院血液肿瘤研究中心2015年8月到2016年6月经过骨髓细胞形态学、免疫表型、细胞遗传学、分子生物学等检查确诊的ALL患者30例,按照FAB标准分类,27例为B系ALL,3例为T系ALL。分析ALL患者白血病细胞膜表面及胞浆内分化抗原,并且对所有患者都进行43种融合基因定性筛查(BCR-ABL,AML1-ETO,PML-RARα等)和ALL基因突变(IKZF1,TP53,PAX5,JAK1,JAK2,CRLF2,PHF6,NOTCH1,FBXW7,PTEN)的二代测序(NGS)检测。结果:30例ALL患者中男性14例,女性16例,年龄2-74岁,中位年龄11.5岁。30例ALL中B-ALL发病率(90.00%)明显高于T-ALL(10.00%)。27例B-ALL患者主要表达CD19、CD22、CD10和CD34等。CD19和CD22是B-ALL最具有诊断价值的抗原;3例T-ALL主要表达cCD3、CD7、CD10和cTDT等,CD7和cCD3是T-ALL最具有诊断价值的抗原。30例ALL患者的43种融合基因定性筛查发现,BCR-ABL、TEL-AML1、E2A-PBX1、MLL-AF6、MLL-AF4和SIL-TAL融合基因阳性各1例,ALL相关基因突变的NGS检测结果表明,3例B-ALL患者发生TP53突变,1例B-ALL患者发生TET2 I1762V突变;3例患者(2例T-ALL,1例B-ALL)发现NOTCH1基因突变。1个疗程后成人B-ALL的治疗效果(28.57%)明显差于儿童B-ALL(95.00%),截止至2017年7月10日儿童B-ALL的生存率明显优于成人B-ALL,其差异都具有显著性意义。结论:白血病免疫分型技术及分子生物学检测技术在白血病的诊断、治疗方案的选择及疗效评价方面具有重要指导作用,是骨髓细胞形态学诊断的补充。     

462例白血病分型回顾性分析

目的探讨白血病FAB分型与免疫分型的关系,以指导临床分析与治疗。方法回顾性分析2011~2013年该院收治462例初诊为各种类型白血病患者的临床资料,统计FAB分型及组化染色结果,部分患者进行流式细胞术(FCM)免疫分型,并对两种检查结果进行分析比较。结果 462例白血病患者中FAB初诊急性髓细胞白血病(AML)171例,急性淋巴细胞白血病(ALL)50例,慢性白血病76例,少见类型3例,分型不明确56例,分型不符27例。FAB分型与临床诊断符合率82.03%;34例白血病行免疫分型,单表型29例,双表型4例,未表型1例,免疫分型与临床诊断符合率达到97.06%。髓系抗原CD13,CD33阳性表达率高;CD34及HLA-DR在M3中未表达;CD7为髓系常伴随的淋巴系统表面抗原。结论免疫分型诊断准确率高于FAB分型,二者结合可提高诊断准确率,免疫分型在鉴别AML各亚型具有重要作用。     

急性淋巴细胞白血病(ALL)免疫表型与临床及化验资料的相互联系

对350例未经治疗的ALL用一组单克隆抗体(Nomenclature of the International Workshop on Leukocyte Typing)确定其恶性细胞的免疫表型,并对其与就诊时患者临床及化验检查特点之间的相互关系进行了研究.全部ALL病例经骨髓涂片形态学及细胞化学确诊.根据免疫表型所见,ALL分为五组:前B-ALL,B-ALL,T-ALL,MO-ALL和未分化ALL,前B-ALL又分为前B1-B4-ALL,T-ALL分为T1-T4-ALL共11个确定的免疫学亚型,其中B细胞系ALL占63.5%,T细胞系ALL24%,未分化ALL4%,MO-ALL2%,多细胞系ALL6.5%.     

63例T细胞急性淋巴细胞白血病患者MIC分型与临床预后分析

T细胞急性淋巴细胞白血病(T-ALL)约占ALL的20%,其生物学及临床特征不同于B细胞急性淋巴细胞白血病(B-ALL).我们回顾性分析了我院2000年1月至2007年6月63例住院初诊T-ALL患者的临床、免疫学分型和细胞遗传学资料,并就其与预后的关系进行讨论.     

111例儿童急性淋巴细胞白血病免疫表型的特点分析

目的 探讨儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)免疫表型特征和诊断价值.方法 应用直接免疫荧光标记以CD45/SSC双参数散点图设门法对111例初治儿童ALL行流式细胞术分析,并探讨形态学分型与免疫分型的关系.结果 本组ALL免疫表型特点:①B系ALL 81例(73.0%),T系ALL 16例(14.4%),B/T-ALL 14例(12.6%);②伴髓系抗原表达者(My+-ALL)25例(22.5%);③FAB分型L1型59例(53.2%),L2型47例(42.3%),L3型2例(1.8%,Ⅰ型旱前B型和成熟B型各1例).急性粒细胞白血病(M2a)1例(0.9%,为Ⅰ型早期前B型ALL),形态学无法分类2例(均为Ⅱ型早前B型ALL).结论 免疫分型有助于明确白血病性质,是儿童ALL诊断的必要手段.     

骨髓涂片免疫组化在血液系统疾病中的应用价值

目的 分析骨髓涂片免疫组化在血液系统疾病诊断中的应用价值.方法 采用骨髓涂片,进行细胞形态学和骨髓细胞免疫化学染色检查方法.结果 形态学诊断AML 16例,ALL26例,嗜血细胞综合症8例,可疑淋巴瘤侵犯骨髓5例,涂片查见分类不明细胞2例.免疫组化提示42例急性白血病中8例形态学分型与免疫学分型诊断不符合(19%),其中26例ALL不符合的6例,16例AML不符合的2例;6例嗜血细胞综合症组织细胞含T细胞标志,2例组织细胞单核细胞标志阳性;确诊淋巴瘤侵犯骨髓4例,转移癌1例,神经母细胞瘤1例.结论 骨髓涂片免疫组化对急性白血病免疫分型有较大价值,是对急性白血病形态学分型的补充及修正;对于一些疑难骨髓涂片的正确诊断有较好指导作用.     

PI3K/AKT信号通路在急性白血病中调控机制的初步研究

本研究探讨PI3K/AKT通路中的PTEN、CCND1、mTOR、RICTOR、FOXO1基因在急性髓系白血病(AML)、急性淋巴细胞白血病(ALL)患者中与正常人中表达的差异,以期查明PI3K/AKT通路在白血病中是否存在通路失调。随机收集16例骨髓标本,其中白血病12例(AML 6例,ALL 6例),正常骨髓标本4例。用实时定量RT-PCR方法检测PI3K/AKT通路中的PTEN、CCND1、mTOR、RICTOR、FOXO1基因的表达变化;以管家基因GAPDH为内参,按2-△△Ct法计算目的基因相对表达量。结果表明:PTEN、mTOR、RICTOR在AML、ALL中总体呈低表达趋势,PTEN在12例标本中有10例低表达,mTOR在12例标本中9例低表达,RICTOR在12例标本中7例低表达;FOXO1,CCND1在AML、ALL中则呈高表达趋势,FOXO1在12例标本中有9例高表达,CCND1在12例标本中7例高表达。结论:PI3K/AKT信号通路基因在白血病细胞中被激活。     

儿童急性白血病T细胞受体δ、γ基因重排连接区序列的动态分析

目的 探讨儿童急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）患在初诊、完全缓解（ＣＲ）及复发不同时期的Ｔ细胞３受体（ＴＣＲ）δＶ－Ｄ,γＶ－Ｊ基因重排连接区序列的差异及其意义。方法 采用Ｔ－载体分子克隆测离１限制性酶团及聚合酶链反应等技术,对３４丛ＡＬＬ患标本进行ＴＣＴδ、γ连接区序列动态分析。结果 ３４丛ＡＬＬ患标本进行ＴＣＲ－５γ连接区序列动态分析。结果 ３４份ＡＬＬ患标本的ＴＣＲ５、γ基因重排序列在初     

PD98059对急性淋巴细胞白血病细胞MAPK信号通路的抑制作用

本研究检测阻断Ras／Erk信号通路对原代人类急性淋巴细胞白血病（ALL）细胞重要转录因子c-fos、c-jun、弼削基因表达的影响。筛选PD98059作用的最佳有效浓度和时间,采用SYBRGreenI实时定量PCR检测PD98059作用于原代ALL细胞前后和正常人原代细胞的目的基因的表达水平。结果表明：与正常人原代细胞相比,处理前原代ALL细胞c-fos、TAK1 mRNA的相对表达升高（P值分别为0．014和0．017）。经PD98059处理后原代ALL细胞中c-fos、c-jun、TAK1 mRNA的相对表达情况为：c-los、c-jun mRNA7个样本均低表达,TAK1 mRNA5个样本低表达,2个样本高表达;较处理前c-los、c-jun、TAK1 mRNA表达明显下降（P值均为0．018）。处理后原代ALL细胞与正常人原代细胞相比,c-fos、c-jun、TAK1mRNA表达无统计学差异。结论：原代ALL细胞的c-fos和弼脚基因的活性增高,阻断ALL细胞的Ras／Erk信号通路可导致重要转录因子c-fos、c-jun、TAK1基因表达明显下降。     

直接RT-PCR扩增法研究miR-223在儿童急性淋巴细胞白血病血浆中的异常表达

本研究旨在探索miR-223在急性淋巴细胞白血病（ALL）患儿血浆中的表达情况及其在不同疾病状态下的表达特点。选取北京儿童医院2005年5月至2012年1月住院ALL患儿64例,包括初诊患儿30例,缓解患儿30例,复发患儿4例。直接使用血浆进行逆转录和实时荧光定量PCR的方法检测样本中miR-223的表达情况。结果发现,miR-223在初诊患儿血浆中表达较低,在缓解患儿中表达升高。由于复发例数太少,暂未发现差异性;在初诊或缓解患儿中,miR-223在TEL-AMLI阳性组和无融合基因B系ALL组表达均无明显差异。结论：miR-223在初诊患儿血浆中表达较低,在缓解患儿中表达明显升高,可能起着抑癌基因的作用,并可作为白血病的分子标志物以及监测疗效的指标。     

脾高雪病的临床病理及免疫组化分析

阐明高雪病的临床病理形态特征,为临床诊断提供确切依据。方法对５例脾高雪病手术切除标术和会诊病例采用光镜组织形态学观察,辅以ＰＡＳ,免疫组化染色,结合文献对本病临床病理特点进行探讨。结果高雪病患者具有无痛性脾肿大,伴有轻－中度贫血,光镜下见高雪细胞甩浆呈淡红色皱纹样、ＰＡＳ强阳性反应染色,ＣＤ６８强阳性,Ｌｙｓｏｚｙｍｅ阳性。结论本病术前容易误诊,慢性巨脾症患者应本病的可能;免疫组化标准染色,ＣＤ６     

Comparison of poly(acryl starch) and poly(lactide-co-glycolide) microspheres as drug delivery system for a rotavirus vaccine.

Drug delivery systems allowing controlled release of antigen are of particular interest in the development of vaccines. We have compared poly(acrylic starch) microspheres (PAS) and poly(lactide-co-glycolide) microspheres (PLG) as drug delivery systems for a rotavirus vaccine. The polymers are both biodegradable but have different degradation mechanisms and antigen release profiles. PAS are enzymatically degraded and have a continuous fast antigen release rate compared to the hydrolytically degraded PLG which release the incorporated antigen in a pulsatile manner. In this study mice were immunised intramuscularly and orally on three occasions with formalin-inactivated rotavirus (FRRV) incorporated in PAS and PLG and with FFRV alone. Serum and faeces samples were collected and analysed by ELISA for rotavirus specific IgG and IgA antibodies. A neutralising assay was also conducted on both serum and faeces antibodies. The two different polymer drug delivery systems induced different immune responses depending on administration route. PAS elicited significant antibody levels and neutralising effect after oral administration while PLG showed high antibody levels after intramuscular administration. The immune response appears to be dependent on the differences in antigen release and degradation mechanism for the two polymer systems.     

HLA-DRB1＊15与162例儿童急性淋巴细胞白血病发病的关系

为了研究HLA—DRB1＊15与儿童急性淋巴细胞白血病（ALL）的关系,用特异性引物,对162例15岁以下儿童ALL患者进行HLA—DRB1＊15检测,对HLA—DRB5＊进行PCR扩增,并与1000份健康脐血做显著性比较,计算相对危险度。结果表明：儿童ALL患者DRB1＊15的抗原频率为40．12％,等位基因频率为22．62％;对照组抗原频率为30．8％,等位基因频率为16．81％。两组比较,差别有显著的统计学意义（χ^2=5．560,P=0．018,RR=1．506）。结论：儿童ALL患者HLA—DRB1＊15的抗原频率和等位基因频率均显著高于正常对照,此结果对儿童ALL的发病机制研究有重要意义。     

bcl-2基因和Fas基因与小儿急性淋巴细胞白血病细胞凋亡的关系及其临床意义

研究小儿急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞Bcl-2蛋白表达以及特异硫代反义脱氧寡核苷酸(ASON)和抗Fas单克隆抗体(anti-Fas McAb)在诱导白血病细胞凋亡中的作用,采用免疫组织化学法和Western blot法。结果显示,小儿ALL细胞Bcl-2蛋白表达量明显高于正常,ASON和anti-Fas McAb诱使白血病细胞凋亡,且Bcl-2蛋白高表达的白血病患者比bcl-2低表达者对FasMcAb更敏感。结论提示,ASON和anti-Fas McAb可诱导ALL细胞凋亡,这为ALL临床治疗展示了新方向,也为白血病患者自体骨髓移植,体外纯净骨髓或周边血液提供理论依据和实验技术。     

应用MALDI-TOF-MS法筛选儿童急性淋巴细胞白血病潜在标记物

本研究旨在分析儿童急性淋巴细胞白血病（c-ALL）的肿瘤特异性蛋白,寻找新的肿瘤蛋白分子标志物。应用双向凝胶电泳（2-DE）及基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析（MALDI-TOF-MS）及联网检索数据库,鉴定表达上调的差异蛋白,并应用细胞免疫组织化学法验证相关蛋白。结果表明,获得了4个表达上调的蛋白点,经质谱分析初步鉴定出其中2个表达上调的差异蛋白为谷胱甘肽S转移酶P和阻殖蛋白;细胞免疫组织化学法检测发现,二者在儿童ALL细胞内的表达阳性率明显高于对照组,差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论：谷胱甘肽S转移酶P和阻殖蛋白有望成为儿童ALL新的诊断标志物和药物靶点。