1-(2,6-二甲氧基)-2-(3,4-二甲基苯乙氨基)丙烷盐酸盐(DDPH)拮抗α1肾上腺素受体的特性

目的　研究DDPH对α₁-肾上腺素受体(α₁-AR)及其亚型的拮抗作用。方法　放射配体结合实验和离体血管收缩功能实验。结果　DDPH对¹²⁵I-BE2254与大鼠脑皮质和脾脏α₁-AR结合呈竞争性拮抗作用。pK_I值在两者间无显著性差别, Hill系数均接近于1.0。在分别稳定表达α_1A,α_1B或α_1D-AR的克隆HEK293细胞中,其拮抗的pK_I值α_1A和α_1D比α_1B-AR高约2倍,Hill系数均接近于1.0。并拮抗去甲肾上腺素(NE)介导大鼠主动脉,肾动脉和脾脏收缩的pA₂值,在三者间无显著差别,斜率接近1.0。结论　DDPH对α₁-AR有竞争性拮抗作用,但其作用对α₁-AR亚型无选择性。     

1-(2,6-二甲基苯氧基)-2-(3,4-二甲氧基苯乙氨基)丙烷盐酸盐对大鼠及肝硬化模型犬门静脉血液动力学的影响

本文观察了DDPH对正常大鼠及肝硬化模型犬门静脉血液动力学的影响,发现DDPH能阻断α_1受体激功剂脱羟肾上腺素(Phen)对大鼠门静脉血管床的收缩作用,DDPH能明显降低肝硬化犬的门静脉血管阻力及门静脉压力,结果证明肝脏门静脉血管床以α_1受体调节为主,DDPH通过阻断门静脉血管床的α_1,受体,而发挥其降低犬硬化肝脏的门静脉血管阻力及门静脉压力的作用。     

1-(2,6-二甲基苯氧基)-2-(3,4-二甲氧基苯乙氨基)丙烷盐酸盐对大鼠心脏α_1受体的影响

DDPH 3 mg/kg对毁脊髓大鼠有拮抗甲氧胺升高左心室压力及室内压最大变化速率(±dP/dt_(max))、左室舒张末期压、血压和心率的作用;在大鼠离体工作心脏上,有普萘洛尔存在时,DDPH 1～10μmol/L有阻断苯福林升高左心室压力及dP/dt_(max)、主动脉流量和心率的作用;DDPH60μmol/L灌流大鼠在体心肺,有取消甲氧明提高左心室压力和心输出量的作用。DDPH尚可显著减慢大鼠工作心脏和在体心肺装置的心率。上述结果提示DDPH对血管平滑肌及心肌的α_1受体有阻断作用。     

1-(2,6-二甲基苯氧基)-2-(3,4-二甲氧基苯乙氨基)丙烷盐酸盐对大鼠膀胱内压及前列腺增生的作用

在离体兔膀胱颈平滑肌 ,1 (2 ,6 二甲基苯氧基 ) 2 (3,4 二甲氧基苯乙氨基 )丙烷盐酸盐 (DDPH)使去氧肾上腺素所致平滑肌收缩的量效曲线平行右移 ,最大反应不变 ,pA2 值为 7.2 4 ;DDPH 2 5,50mg·kg- 1ig能显著降低麻醉大鼠膀胱容积 ,排尿压 ,排尿阈值压 ;DDPH 12 .5,2 5及 50mg·kg- 1·d- 1ig 4周还可抑制丙酸睾酮所致大鼠前列腺组织的增生 .实验结果提示DDPH有抗前列腺增生及改善尿流率的作用 .     

1-(2,6-二甲基苯氧基)-2-(3,4-二甲氧基苯乙胺基)丙烷盐酸盐对麻醉猫、大鼠心肌缺血再灌注所致心律失常的作用

DDPH是具有α肾上腺素受体阻断作用和较弱抗钙作用的新化合物。本实验研究了DDPH对麻醉猫、大鼠心肌缺血再灌注所致心律失常的作用和对猫血压的影响。结果表明,DDPH iv 0.5～3 mg/kg可降低麻醉猫血压,减少麻醉猫冠状动脉左前降支结扎时心肌缺血产生的VEB,减少麻醉猫和大鼠再灌注所致VEB和VT,VF的持续时间,降低VT,VF的发生率。对动物再灌注时由VF引起的死亡率也有降低的趋势。与哌唑嗪比较,两者具有相似的抗麻醉猫和大鼠心肌缺血再灌注所致心律失常的作用。     

1-(2,6-二甲基苯氧基)-2-(3,4-二甲氧基苯乙氨基)丙烷盐酸盐对肥厚心肌DNA含量和培养心肌细胞DNA合成的影响

为研究1-(2,6-二甲基苯氧基)-2-(3,4-二甲氧基苯乙氨基) 丙烷盐酸盐(DDPH)对心肌肥厚大鼠左室组织 DNA 含量有无逆转作用, 用部分狭窄腹主动脉的方法建 立心肌肥厚的模型. 术后wk4开始给药, 连续8 wk, 左室心肌切片并进行 Feulgen染色, 用 TJTY-300 图像分析系统对DNA进行相对定量, 发现肥厚组平均吸光度为0.089, 是对照组的1.43倍,而二个给药组分别为0.079和0.071, 明显低于肥厚组, 但仍高于对照组(P<0.05), 说明DDPH对肥厚心肌的 DNA 含量有一定的逆转作用. 为进一步研 究 DDPH 能否抑制去甲肾上腺素 (NE) 致培养乳鼠心肌细胞DNA合成的作用, 体外培养乳鼠心肌细胞, 实验分 6 组: (1) 对照组; (2) NE组; (3) DDPH 1.0 μmol·L^-1组; (4) DDPH 10 μmol·L^-1组; (5) 哌唑嗪(Pra) 1.0 μmol·L^-1组; 6) Pra 10 μmol·L^-1组. 每孔加［³H］TdR 37 Bq, 3 h后测 cpm 值, 发现 NE 组为对照组的3.1倍,而 DDPH 及 Pra 组均减少 cpm 值 (P<0.01), 且 Pra 组作用更明显, 二个高剂量组与对照组无显著差异, 结果说明 DDPH 可以抑制 NE 诱导的乳鼠心肌细胞 DNA 合成的增加.     

2,4-二甲氧基苯乙胺类α1-肾上腺素受体拮抗剂的合成、生物活性研究

目的设计合成苯乙胺类α1-肾上腺素受体（α1-AR）拮抗剂,并研究它们对大鼠肛尾肌收缩功能的影响。方法以DDPH为先导化合物设计合成了11个新化合物,以2,6-二甲基苯酚为原料经多步反应得中间体卤代苯氧丙酮,再经还原胺化得目标物。运用大鼠肛尾肌收缩功能实验测定目标物的拮抗活性。结果共合成了11个目的物,其结构经IR、HRMS1、H-NMR确证。结论生物活性测试显示大部分目标化合物均具有一定的α1-AR拮抗活性,化合物Ⅲk拮抗作用和DDPH接近。     

2,4-二甲氧基苯乙胺类α1-肾上腺素受体拮抗剂的合成、生物活性研究

目的设计合成苯乙胺类α1-肾上腺素受体(α1-AR)拮抗剂,并研究它们对大鼠肛尾肌收缩功能的影响。方法以DDPH为先导化合物设计合成了11个新化合物,以2,6-二甲基苯酚为原料经多步反应得中间体卤代苯氧丙酮,再经还原胺化得目标物。运用大鼠肛尾肌收缩功能实验测定目标物的拮抗活性。结果共合成了11个目的物,其结构经IR、HRMS1、H-NMR确证。结论生物活性测试显示大部分目标化合物均具有一定的α1-AR拮抗活性,化合物Ⅲk拮抗作用和DDPH接近。     

1-(2,6-二甲基苯氧基)-2-(3，4-二甲氧基苯乙氨基)丙烷盐酸盐对心肌肥厚大鼠左心室N- ras, P53 mRNA表达的影响

为研究1-(2，6-二甲基苯氧基)-2-(3，4-二甲氧基苯乙氨基)丙烷盐酸盐(DDPH)对心肌肥厚的逆转作用，用部分狭窄腹主动脉方法造成大鼠心肌肥厚模型，从术后wk 4开始，ig DDPH 25和50 mg·kg^-1·d^-1，持续8 wk. 术后12 wk，各组大鼠体重无显著性差异，但模型组心重/体重，左心室重/全心重明显高于对照组. 模型组心肌组织N-ras mRNA表达比对照组高，而抑癌基因P53 mRNA表达明显低于对照组，DDPH可逆转上述变化. 表明DDPH可逆转腹主动脉狭窄所致心肌肥厚.     

α_(1A)-和α_(1B)-肾上腺素受体介导HEK293细胞增殖和Ca~(2 )-钙调蛋白依赖性蛋白激酶激活(英文)

目的:研究α_1-AR三种亚型对细胞增殖和Ca~(2 )-钙调蛋白依赖性蛋白激酶(CCDPK)的作用。方法:采用磷酸钙沉淀法进行转染,用放射配基结合实验测定α_1-AR表达量。用[~3H]胸腺嘧啶参入量测定细胞增殖,用免疫沉淀和髓鞘蛋白底物法测定CCDPK的活性。结果:三株表达α_(1A)-,α_(1B)-和α_(1D)-AR的细胞株表达受体密度约为0.6 nmol·g~(-1)。在普萘洛尔存在下,去甲肾上腺素(NE)作用24 h可浓度依赖地刺激HEK293/α_(1A)-AR和HEK293/α_(1B)-AR细胞DNA合成。NE 10 μmol·L~(-1)可促进HEK293/α_(1A)-AR和HEK293/α_(1B)-AR细胞DNA合成增加,刺激CCDPK活性的升高。NE不引起HEK293/α_(1D)-AR细胞DNA合成和CCDPK活性的显著改变。结论:在转染α_1-AR亚型的HEK293细胞中激动α_(1A)-或α_(1B)-AR可引起细胞增殖,激动α_(1D)-AR则无显著改变。     

1-(2,6-二甲基苯氧基)-2-(3,4-二甲氧基苯乙胺基)丙烷盐酸盐对实验性高血压大鼠的降压作用

DDPH 3～10 mg/kg iv降低DOCA—盐型及自发性高血压(SH)大鼠的MAP及HR;50,100mg/kg ig降低清醒正常血压及SH大鼠MAP及HR·心率减慢较降压作用持续时间短。DDPH(10,100μmol/L)对犬乳头状肌收缩力及静息30 s后第一次收缩(PRC_(30))有抑制作用。小鼠ig DDPH的LD_(50)为640 mg/kg,95％可信限为567～713mg/kg。麻醉大鼠静脉恒速灌注DDPH的致死量为47±SD 4 mg/kg。表明DDPH对实验性高血压大鼠有降压作用,并对心肌收缩力及肌浆网Ca~(2+)的释放有轻度抑制作用。     

酪氨酸蛋白激酶在不同α_1肾上腺素受体亚型Ca~(2+)调控中的作用

目的　了解酪氨酸蛋白激酶信号途径在不同α1肾上腺素受体亚型Ca2 +调控中的作用。方法　用Fura 2荧光探针双波长测定细胞胞浆游Ca2 +浓度 ([Ca2 +]i)的方法 ,在分别转染了α1A、α1B和α1D肾上腺素受体cDNA的HEK2 93细胞 ,观察酪氨酸蛋白激酶抑制剂Genistein和磷脂酶C抑制剂U7312 2 对激动不同α1肾上腺素受体亚型引起的 [Ca2 +]i 变化的影响。结果　预先用U7312 2 (0 1,10 ,5 0 μmol·L-1)与细胞共同孵育 10min ;用Genistein(10 ,10 0 ,2 0 0 μmol·L-1)与细胞共同孵育 1h。在分别转染了α1A、α1B和α1DcDNA的HEK2 93细胞 ,U73 12 2 和Genistein均能浓度依赖性地抑制肾上腺 (10 μmol·L-1)引起的双相 [Ca2 +]i 的升高。在上述细胞 ,U7312 2 (5 0 μmol·L-1)能完全抑制肾上腺素引起的[Ca2 +]i 升高 ;而用最大有效浓度 10 0 μmol·L-1的Genistein只能部分抑制肾上腺素升高 [Ca2 +]i 的作用。结论　在HEK 2 93细胞 ,不同α1肾上腺素受体亚型 (α1A α1B和α1D)激动均能部分通过酪氨酸蛋白激酶信号途径引起Ca2 +释放和Ca2 +内流。α1肾上腺素受体可能通过G蛋白和酪氨酸蛋白激酶两种途径激活磷脂酶C     

1-(2,6-二甲基苯氧基)-2-(3,4-二甲氧基苯乙胺基)丙烷盐酸盐对心脏成纤维细胞胶原I,III型mRNA表达的影响

目的：研究去甲肾上腺素（NE）引起心肌肥厚与胶原I,III型mRNA表达水平之间的关系,及兼具α₁受体阻断作用及钙离子拮抗作用的1-（2,6-二甲基苯氧基）-2-（3,4-二甲氧基苯乙胺基）丙烷盐酸盐（DDPH）的影响。方法：培养的新生鼠心肌成纤维细胞,加NE孵育,胶原I,III型mRNA表达水平用RT-PCR方法测定。结果：心肌成纤维细胞,加1 μmol．L^-1 NE孵育24 h,导致胶原I,III型表达水平分别增加10, 3.1倍,但DDPH可使其表达水平显著降低。 结论：DDPH可抑制心肌成纤维细胞胶原I,III型mRNA的表达。     

一种新的α1A肾上腺素受体选择性拮抗剂—Sertindole

本工作分别在稳定表达α_1A,α_1B和α_1D肾上腺素受体(adrenoceptor,AR)的人胚胎肾脏细胞( human embryonic kidney 293,HEK 293)和大鼠离体血管上,用放射配体结合实验和离体血管收缩功能实验方法以确定sertindole对α₁-AR亚型的选择性拮抗作用。结果显示sertindole与克隆α_1A-AR的亲和性分别是与克隆α_1B-AR和克隆α_1D-AR的69倍和132倍。Sertindole拮抗去甲肾上腺素引起的主动脉和肾动脉收缩反应的pA₂值分别与其对α_1D和α_1A亚型的pKI值相符。分别稳定表达3种亚型受体的HEK293细胞膜标本经与sertindole预温育30min后,受体与¹²⁵IBE2254结合的B_max值显著降低,KD值无显著变化;而在 sertindole 存在条件下,α₁-AR3种亚型与¹²⁵IBE2254 结合的KD值显著增大,但B_max值无显著改变。上述结果表明sertindole为不可逆性竞争性α₁-AR拮抗剂,并有α_1A亚型选择性。     

1-(2,6-二甲基苯氧基)-2-(3,4-二甲氧基苯乙氨基)丙烷盐酸盐对小鼠脑缺血再灌损伤的保护作用

采用断颅 ,iv饱和MgCl2 溶液及结扎双侧颈总动脉和迷走神经等法造成小鼠脑缺血模型 ,观察 1 (2 ,6 二甲基苯氧基 ) 2 (3,4 二甲氧基苯乙氨基 )丙烷盐酸盐 (DDPH)对小鼠脑缺血后存活时间的影响 ;采用小鼠脑缺血 (2 0min)再灌注 (10min)模型 ,观察DDPH对脑组织超氧化物歧化酶 (SOD)活性 ,丙二醛 (MDA)含量及组织病理损伤的影响。结果显示 ,DDPH 3,6 ,12 ,2 4mg·kg- 1缺血前 30minip给药使小鼠存活时间明显延长 ;使小鼠脑缺血再灌注后脑组织内SOD活性增高 ,MDA含量下降 ,并明显改善神经细胞的病理性损伤 .结果提示DDPH对小鼠脑缺血再灌注所致损伤具有一定的保护作用     

苯乙胺类新化合物抗前列腺增生作用研究

目的：探讨具有α1-肾上腺素受体（α1-AR）拮抗作用的XBM系列苯乙胺类新化合物的体外生物活性及体内药效作用。方法：SD大鼠离体肛尾肌等张力试验,观察XBM系列新化合物的拮抗作用;流式细胞术检测XBM-21的α1-AR亚型选择性;采用大鼠前列腺增生模型,观察XBM-21的抗前列腺增生作用。结果：大部分XBM系刳新化合物具有α1-AR拮抗作用,XBM-21的pA2值为8．42。钙流筛选测得XBM-21在α1A-AR、α1B-AR和α1D—AR上的IC50值分别为71．5mmol／L、1．03μmol／L、65nmol／L,且XBM-21能明显改善大鼠前列腺增生模型的干湿重指数。结论：新化合物XBM-21具有明显的α1-AR拮抗作用,且亚型选择性较强,提示该新化合物对良性前列腺增生所引起的症状将有较好的改善作用。     

1-(2,6-二甲基苯氧基)-2-(3,4-二甲氧基苯乙氨基)丙烷盐酸盐对兔心乳头状肌的作用

DDP剂量依赖性地抑制电刺激引起的兔心乳头状肌收缩,阈浓度大于10μM。在有普萘洛尔5μM存在时,DDP 1μM使苯福林增强电刺激引起的乳头状肌收缩的量效曲线平行右移,最大反应不压低,pA_2值为6.8。DDP 30μM降低肾上腺素诱发的乳头状肌自律性,延长功能不应期,对兴奋性无明显影响。结果再次证实DDP具有阻断α_1肾上腺素受体作用,提示在较高浓度时,DDP可能有一定的抗钙作用。     

DDPH对多种介质所致豚鼠离体肠道平滑肌收缩的影响

目的研究1_(2,6_二甲基苯氧基)_2_(3,4_二甲氧基苯乙氨基)丙烷盐酸盐(DDPH)对多种介质引起的豚鼠离体肠道平滑肌收缩的影响。方法肠道平滑肌实验法。结果不同剂量的DDPH可非竞争性抑制磷酸组胺、氯化乙酰胆碱及Ca2 的作用,使量效曲线非平行右移 ,最大反应压低 ,其 pD2’值分别为4 0、3 8、3.9。DDPH还可抑制K 所致肠道平滑肌收缩 ,但作用较维拉帕米弱 ,IC50 值分别为2 7μmol·L-1 和0 7μmol·L-1。结论DDPH通过非竞争性Ca2 拮抗作用使豚鼠回肠平滑肌松弛。     

HEK293细胞中细丝蛋白-C对α_(1A)-肾上腺素受体介导细胞外信号调节激酶磷酸化作用的影响

目的　寻找与α1A 肾上腺素受体 (α1A AR)相互作用的胞浆内非G蛋白 ,研究蛋白对受体信号转导的影响。方法　应用酵母双杂交技术 ,以人α1A AR胞浆内C末端 (α1A AR CT)为诱饵 ,筛选人脑cDNA文库 ,用 5 溴 4 氯 3 吲哚半乳糖苷 (X Gal)定性分析及邻硝基苯基 β D 半乳糖苷 (ONPG)定量分析对筛选出的阳性克隆细丝蛋白 C(FLNC)进行确证。采用脂质体转染及蛋白免疫印迹技术探讨人胚胎肾 2 93(HEK2 93)细胞中FLNC对α1A AR信号转导通路的影响。结果　①缺陷培养基筛选出FLNC的C末端部分片段可以与α1A AR CT在酵母中结合。②X Gal定性分析中 ,FLNC与α1A AR CT的共转子菌落 6h即呈现蓝色 ,而对照菌落颜色无变化 ;经ONPG定量分析发现 ,FLNC与α1A AR CT的共转子中 β 半乳糖苷酶的活性大约是对照的 2～ 3倍(P <0 .0 1)。③编码FLNC的C末端片段的质粒瞬时转染于稳定表达全长α1A AR的HEK2 93细胞中 ,可以明显增强去氧肾上腺素 ( 10 μmol·L- 1,30min)激动α1A AR介导的细胞外信号调节激酶 (ERK1/ 2 )磷酸化作用。结论　FLNC的C末端部分片段可以与α1A AR CT在酵母中结合 ,并且增强HEK2 93细胞中α1A AR介导ERK1/ 2磷酸化的作用     

肾上腺素受体在心脏的作用

肾上腺素受体(AR)广泛分布于心血管系统.AR分为α1,α2,β三型.α1-AR包含α1A,α1B,α1D亚型.α2-AR包含α2A,α2B,α2C亚型.β-AR包含β1,β2,β3亚型.已知α1-AR三种亚型共存于心脏.韩启德等研究发现大鼠心脏中α1A,α1B,α1D亚型约各占25%,45%和30%左右.在介导正性变力及心肌细胞蛋白质合成效应中均表现为α1A-AR效率最高,而α1D-AR几乎不参与.α1A-AR,α1B-AR与β-AR同时激动时,前者抑制而后者增强β-AR介导的正性变力效应.α1D-AR对β-AR介导的正性变力效应则无显著影响.