血吸虫钙结合蛋白研究进展

摘要 钙结合蛋白在生物机体中广泛存在,种类繁多,在生物体的生理活动及功能调节方面具有重要的作用,是血吸虫寄生于宿主不可或缺的蛋白。已报道的血吸虫钙结合蛋白有EF手家族及非EF手家族蛋白,它们都具有钙结合位点。在所报道的血吸虫钙结合蛋白中,很多都具有较好的免疫反应性,免疫动物后也具有较好保护性,例如Sm8、钙激活中性蛋白酶(calcium-activatedneutral proteinase,calpain)、Sm-p80、Sj22.6、Sm22.6、Sm20.8、SmIrV1、SjIrV1。血吸虫钙结合蛋白有可能是筛选疫苗候选分子的重要领域。     

肾上腺髓质素对大鼠血管钙化的影响

目的　观察肾上腺髓质素 (ADM)对血管钙化的影响。方法　维生素D3 (VitD3 )和尼古丁制备大鼠血管钙化模型 ,分别测定血管、心肌钙含量和血管碱性磷酸酶 (ALP)活性 ,血浆和血管ADM含量 ,12 5I ADM与ADM受体的结合力及血管环磷酸腺苷 (cAMP)含量。结果　与对照组相比 ,钙化组 (VDN组 )的血管钙含量和ALP活性明显升高 ;血管及血浆ADM的含量亦升高 ,但12 5I ADM与血管质膜ADM受体结合的位点减少 ,Kd值升高 ,提示亲合力降低 ,同时伴钙化血管的cAMP合成减少。提示钙化血管对ADM的反应减弱。空载脂质体对血管钙化无影响。用脂质体包裹ADM组 (VDN ADM组 )与钙化组相比 ,其血管的钙含量、ALP的活性均明显降低 ;12 5　I ADM与血管质膜ADM受体结合的位点增加 ,Kd值减少 ,cAMP的合成也增加 ,提示该组血管对ADM的反应增强。结论　血管钙化时ADM ADM受体 cAMP途径发生变化 ,外源性ADM通过改善ADM ADM受体 cAMP途径 ,发挥抑制血管钙化的作用     

新型磷结合剂在慢性肾脏病中的应用

慢性肾脏病(CKD)患者肾功能恶化,引起继发性甲状旁腺功能亢进以及钙磷代谢紊乱,进一步导致血管钙化等心血管疾病,增加CKD患者发病率及死亡率.传统磷结合剂常含钙、铝成分,降低血磷但不良反应较多.司维拉姆、碳酸镧、SBR759、PA21-1、考来替兰和碱式碳酸镁铁等新型磷结合剂不含钙、铝,具有与传统磷结合剂类似的降低血磷作用,却不升高血钙,为控制高磷血症且减少血管钙化风险提供了治疗前景.     

血吸虫钙结合蛋白研究进展

钙结合蛋白在生物机体中广泛存在，种类繁多，在生物体的生理活动及功能调节方面具有重要的作用，是血吸虫寄生于宿主不可或缺的蛋白。已报道的血吸虫钙结合蛋白有EF手家族及非EF手家族蛋白，它们都具有钙结合位点。在所报道的血吸虫钙结合蛋白中，很多都具有较好的免疫反应性，免疫动物后也具有较好保护性，例如Sm8，钙激活中性蛋白酶（calcium-activated neutral proteinase,calpain) ,Sm-p80,Sj22.6,Sm22.6,Sm20.8,SmIrV1,SjIrV1.血吸虫钙结合蛋白有可能是筛选疫苗候选分子的重要领域。     

克隆的日本血吸虫谷胱甘肽S-转移酶的化学修饰:主要组氨酸残基的证据

谷胱甘肽S-转移酶(GST)是二聚蛋白,有证据表明位于每个亚单位上的每个活性位均由两个彼此分离但相邻且与底物结合的位点组成,一个是还原型谷胱甘肽结合位点(G位点),一个是能与亲电子的第二底物结合的疏水位点(H位点)。但对与底物识别和催化有关的特异性氨基酸残基的参与情况却知之甚少。本文研究了在日本血吸虫26kDa谷胱甘肽S-转移酶(Sj26 GST)中以二乙基焦碳酸盐(DEP)修饰组氨酸残基作为位点诱变的前提。     

多囊卵巢综合征相关基因研究进展

多囊卵巢综合征是生育期女性最常见的内分泌紊乱,以无排卵性不孕、高雄激素血症、胰岛素抵抗为特征,与2型糖尿病、血脂异常、心血管疾病、子宫内膜癌相关.国外报道发病率约6.6%,但病因和具体机制还不清楚.目前的观点倾向于多个微效基因与环境因素共同作用引起.其中最为密切的是D19S884,已在3项独立研究中得到证实.其他如钙蛋白酶(CAPN)-10、17α-羟化酶(CYP17)、雄激素受体(AR)、性激素结合球蛋白基因也是潜在的位点.     

大肠癌组织HLA-Ⅰ类抗原及相关分子的表达意义

目的探讨大肠癌组织HLA-Ⅰ类分子及相关分子表达及其意义. 方法用免疫组化的方法,以切端黏膜作为正常对照,检测大肠癌组织、癌旁组织和正常黏膜组织中HLA-Ⅰ类分子及相关分子的表达,并结合肿瘤的临床病理资料综合分析. 结果受检的大肠癌组织中重链HLA-A位点、B/C位点及轻链beta2微球蛋白(β2M)较其相应正常黏膜表达明显下调(P=0.0 001);肠癌中低分子量多肽(LMP2)(P=0.0 001),钙联蛋白(calnexin)(P=0.004)较正常黏膜表达明显下调;肠癌中HLA-Ⅰ类分子表达与肿瘤分化无关;随着肿瘤的Dukes分期,癌组织中HLA-Ⅰ类分子表达渐次降低,但各位点表达情况并不相同,HLA-B/C表达水平与肿瘤分期相关,其在Dukes A期表达水平高于D期(P=0.0262). 结论肠癌组织及癌旁黏膜中HLA-Ⅰ类分子、低分子量多肽及钙联蛋白较正常黏膜表达明显下调;肠癌组织中HLA-B/C位点随着肿瘤Dukes分期演进其表达下调.     

高血压病患者红细胞膜结合钙测定的临床意义

高血压病(EH)患者有多种细胞膜钙运转异常。本研究用原子吸收法测定红细胞膜结合钙含量发现:(1)EH组(48例)值明显低于对照组(35例);分别为2.16±0.87和4.65±1.39μg/mg膜蛋白(P<0.01)。(2)不同期的高血压即Ⅰ期(12例)、Ⅱ期(26例)和Ⅲ期(10例),也显示膜结合量不同,分别力3.21±0.37、2.20±0.3和0.82±0.25μg/mg膜蛋白(P<0.01)。膜钙与收缩压、舒张压和平均压呈负相关,r分别为-0.795、-0.797和-0.883(P均<0.01)。(3)本研究所用膜钙测定方法简便、实用。因而。我们认为,膜钙降低不但对高血压发病膜缺陷机理探讨有益,而且对了解高血压病的程度有一定价值。     

日本血吸虫一个新钙结合蛋白全长编码区的克隆与功能预测

目的　对用表达序列标签 (ExpressionSequenceTag ,EST)策略从日本血吸虫尾蚴cDNA文库中筛选出的新基因进行功能预测。方法　用NCBI站点的BLASTx及BLASTn程序对所获得的新基因序列进行同源性搜索 ;用NCBIBLAST站点的blasttwosequence程序对同源性高的基因进行核苷酸及氨基酸水平的同源性比较 ;利用motifscaninaProteinsequence对cDNA序列所编码的蛋白质进行结构域搜索。结果　发现一个与曼氏血吸虫尾蚴期特异性 8kDa钙结合蛋白 (Sm8)基因高度同源的日本血吸虫新基因 ,cDNA序列与氨基酸水平的同一性均为 82 % ;蛋白结构域搜索结果显示 ,该cDAN序列所编码的蛋白质具有 2个EF手钙结合位点。结论　用EST策略筛选新基因是一个可行的方法 ,所筛到的日本血吸虫新基因编码一种钙结合蛋白 ,全长编码序列与Sm8基因高度同源 ,对该基因的期特异性及免疫保护性的探讨具有重要的意义。     

间隙连接蛋白40基因多态性与原发性高血压病的相关性研究

目的：探讨间隙连接蛋白40基因（44和＋71位点）多态性与原发性高血压（EH）的相关性。方法运用聚合酶链反应PCR技术对210例原发性高血压病住院患者,对照组158例体检正常人的 Cx40基因的44和＋71位点基因多态性、基因型、等位基因分布频率等进行统计学分析。结果病例组三酰甘油、钙、高密度脂蛋白（HDL）与对照组有统计学意义（P〈0.05）,CX40基因44位点基因型病例组和对照组构成比总体及男性均存在统计学意义（P〈0.05）,＋71位点无统计学意义（P〉0.05）。Logistic回归提示44位点 AA基因型、三酰甘油、钙的OR值分别是4.458、4.1330、0.195,P分别是0.039、0.001、0.014。结论 Cx40基因启动子区域44位点 AA基因型可能是男性高血压人群的危险因素,高三酰甘油为危险因素,高钙为保护因素。     

COLIA1基因Sp1结合位点多态性与原发性骨质疏松症

Ⅰ型胶原α1链(COLIA1)基因spl结合位点多态性与骨密度、骨折风险有显著的相关性,它可能通过引起α1(Ⅰ)链和α2(Ⅰ)链蛋白的比例失常而影响骨质量和骨强度,增加骨折风险。但spl结合位点多态性的分布存在着明显的种族差别。其在亚洲地区包括我国人群中的确切分布和作用还需进一步研究。     

氯化镧对人牙周膜成纤维细胞增殖的影响

目的探讨不同浓度的氯化镧对人牙周膜成纤维细胞(PDLFs)增殖的影响。方法原代细胞培养PDLFs,MTT法检测5种不同浓度氯化镧(1×10-3、1×10-4、1×10-5、1×10-6及1×10-7mol/L)对PDLFs增殖的影响。结果 1×10-3mol/L氯化镧的OD值明显低于阴性对照(P<0.01),其余4种浓度与阴性对照比较差异无统计学意义。结论高浓度(1×10-3mol/L)的氯化镧对PDLFs细胞增殖有抑制作用。     

大鼠心肌缺血再灌注时心肌细胞核1,3,4,5-四磷酸肌醇受体的结合特性改变

目的　观察大鼠心肌缺血再灌注时心肌细胞核 1, 3, 4, 5 四磷酸肌醇受体 (IP4R)的结合特性改变,进一步探索心肌缺血再灌注损伤时细胞凋亡的病理机制。方法　TUNEL技术检测心肌细胞核凋亡率。蔗糖密度梯度离心法提纯心肌细胞核,放射配体分析法检测心肌细胞核膜上IP4R的结合特性变化。结果　心肌缺血再灌注组大鼠心肌细胞凋亡率显著高于对照组 (P<0 01)。大鼠心肌细胞核膜上存在两个与IP4 配体结合容量不同、亲和力不同的单位点结合受体。心肌缺血再灌注组心肌细胞核膜上IP4R两结合位点解离常数值较对照组分别降低 63%及 55% (P<0 05),且高亲和位点IP4R受体密度(Bmax)显著高于对照组 (P<0 05 ),而低亲和位点IP4R的Bmax无显著改变。两组心肌细胞核经蛋白激酶C磷酸化后,IP4R的结合特性显著增高 (P<0 05),以心肌缺血再灌注组效应更明显。对照组大鼠心肌细胞核IP4R的结合特性对核外钙离子是浓度依赖性的,心肌缺血再灌注组大鼠在钙超载情况下,结合力也显著性增强。结论　大鼠心肌缺血再灌注病理情况下心肌细胞核IP4R结合特性显著增强,致核内钙浓度增高,这可能是心肌缺血再灌注损伤中心肌细胞凋亡的主要病理机制之一。     

大鼠肝脏、卵巢及肾上腺胰岛素受体结合性质的比较

目的比较大鼠肝脏、卵巢和肾上腺胰岛素受体(insulinreceptor,IR)的结合性质。方法采用放射配体结合分析法对IR的数目(用结合容量表示)与亲和力(用饱和常数表示)进行检测。结果大鼠肝脏、卵巢和肾上腺IR高亲和位点的结合容量分别为7.359×10     

安多霖胶囊对高频电磁辐射损伤大鼠海马组织的保护作用

目的观察高频辐射后大鼠海马区血脑屏障(BBB)的变化和caspase-3蛋白的表达及安多霖胶囊的防护效果。方法鼠龄8周的健康SD大鼠,随机分为正常组(A组),模型组(B组)、安多霖低浓度组(C组)、安多霖高浓度组(D组)。先饲养7 d使其适应环境后,A组和B组用生理盐水灌胃,C组和D组给予不同浓度安多霖灌胃。于给药第10天,对B、C、D组大鼠进行高频辐射后24 h,断头,取材。采用透射电镜技术检测海马组织中血脑屏障结构变化。免疫组化S-P法检测海马组织中锥体细胞和齿状回颗粒细胞caspase-3蛋白表达情况。结果透射电子显微镜下可见C组硝酸镧颗粒主要沉积在毛细血管内皮细胞紧密连接(TJ)处,少量镧颗粒穿过TJ处。星形胶质细胞周围亦见少量镧颗粒沉积。D组硝酸镧颗粒主要沉积在基膜外侧,未穿过TJ处。星形胶质细胞周围亦未见有镧颗粒沉积。caspase-3表达量C组低于B组(P0.05),D组低于B组(P0.05),D组较C组低(P0.05)。结论安多霖胶囊可有效防护高频辐射损伤大鼠的学习记忆功能。     

膳食钙营养的研究进展

钙是人体的重要组成部分,在一般情况下,钙占人体重量的1.5％～2.0％,其中99％集中于骨骼和牙齿中,以羟磷灰石结晶[(Ca_2(PO_4)Ca(HO)_2]形式存在,其余1％的钙以游离的或结合的离子态存在于软组织、细胞外液和血液中。这些钙和骨骼钙维持着动态平衡,对人体生长发育和生理机能起着重要作用。尤其是生命初期的钙摄入对成年人骨质是一个     

细粒棘球绦虫表面抗原EpC1的生物信息学分析北大核心CSCD

目的采用生物信息学方法分析细粒棘球绦虫表面抗原EpC1的结构和功能等。方法从NCBI数据库中下载EpC1氨基酸序列,采用ProtParam预测蛋白的理化性质,SignalP-5预测信号肽,Euk-mPLoc 2.0进行亚细胞定位,ProtScale、SOSUI、DNASTAR预测其亲疏水性,SOMPA预测二级结构,NetPhos预测磷酸化位点,MotifScan预测修饰位点,Swissmodel预测三级结构,TMHMM分析跨膜区域;运用ABCpred、IEDB预测B细胞抗原表位,SYFPEITHI预测T细胞抗原表位。结果预测EpC1由174氨基酸序列组成,分子式为C_(884)H_(1403)N_(245)O_(268)S_(9),不稳定指数为46.27,为亲水蛋白,无信号肽和无跨膜区,且定位于细胞膜及细胞质中。二级结构中α螺旋占44.25%,β折叠占14.94%,β转角占5.75%,无规则卷曲占35.06%,EgEpC1具有能与HLA-A*02-01的结合能力,且能被HLA-DRB*0401(DR4Dw4)分子呈递。结论生物信息技术分析EpC1蛋白存在多个B、T细胞表位,含有钙结合结构域,可为该蛋白的基因克隆表达及细粒棘球绦虫感染的防治研究提供理论基础。     

COLIA1基因Sp1结合位点多态性与原发性骨质疏松症

Ⅰ型胶原α1链(COLIA1)基因Sp1结合位点多态性与骨密度、骨折风险有显著的相关性，它可能通过引起α1(Ⅰ)链和α1(Ⅰ)链蛋白的比例失常而影响骨质量和骨强度，增加骨折风险。但Sp1结合位点多态性的分布存在着明显的种族差别。其在亚洲地区包括我国人群中的确切分布和作用还需进一步研究。     

衰老过程对心血管的影响

心肌老化有关心肌收缩和松弛等的亚细胞水平机理,现已完全清楚。在动作电位0相,钠经快通道流入细胞;在动作电位2相,钙经慢通道流入细胞,使其浓度梯度减小。细胞溶质内钙增加,促使细胞内贮存的钙从肌浆网释出。这种源自肌浆网的“钙触发性钙释放”(Calcium-triggered calcium release),使肌丝的调节蛋白(Troponin-tropomyosin)得以有更多的钙可供利用。结合于肌钙蛋白(Troponin)的钙,可使收缩蛋白肌纤蛋白和肌球蛋白(Actin和Myosin)的活性结合部位脱离空间抑制作用。收缩蛋白在肌球蛋白ATP酶(Myosin ATPase)的作用下,形成能量依赖     

低钙透析联合磷结合剂对血液透析患者钙磷代谢紊乱和冠状动脉钙化的影响

目的探讨低钙透析联合磷结合剂对血液透析患者钙磷代谢紊乱和冠状动脉钙化的影响。方法 80例伴冠状动脉血管钙化并行维持性血液透析(MHD)患者按照随机数字表法分为对照组和研究组各40例;对照组采取标准钙透析液及醋酸钙口服治疗,研究组采取低钙透析联合醋酸钙治疗,两组均进行12个月治疗;治疗前、治疗3、6、12个月后对血清钙、磷、甲状旁腺素进行检测,并采用螺旋CT对冠状动脉钙化积分进行检查。结果两组治疗前血清钙、磷及甲状旁腺素水平比较无明显差异(P>0.05)。研究组治疗3、6、12个月后血清钙及磷水平均明显低于对照组,而甲状旁腺素水平明显高于对照组(P<0.05);两组治疗前冠状动脉钙化积分比较无明显差异(P>0.05);研究组治疗3、6、12个月后冠状动脉钙化积分均明显低于对照组(P<0.05)。结论低钙透析联合含钙的磷结合剂可有效纠正钙磷代谢紊乱,延缓冠状动脉钙化进展,有效降低甲状旁腺功能亢进的发生率,适用于伴冠状动脉血管钙化的血液透析患者。