应用聚合酶链反应（PCR）检测乙型肝炎患者的HBV—DNA

应用聚合酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｃｈａｉｎ Ｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）检测１０３例乙型肝炎患者血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ，在不同类型的ＨＢＶ感染标志物（ＨＢＶＭ）的血清中结果有所不同：（１）在ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ和抗ＨＢｃ阳性血清中，ＰＣＲ阳性率８６．１１％（３１／３６）；（２）在ＨＢｓＡｇ、抗ＨＢｅ和抗ＨＢｃ阳性血清中，ＰＣＲ阳性率５５．８８％（１９／３４）；（３）在抗ＨＢｅ和ＨＢｃ阳性血清     

应用聚合酶链反应（PCR）检测乙型肝炎患者的HBV一DNA

应用聚合酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）检测１０８例乙型肝炎患者血清中ＨＢＶ一ＤＮＡ，在不同类型的ＨＢＶ感染标志物（ＨＢＶＭ）的血清中结果有所不同：（１）在ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ和抗ＨＢｃ阳性血清中，ＰＣＲ阳性率８６．１１％（３１／３６）；（２）在ＨＢｓＡｇ、抗ＨＢｅ和抗ＨＢｃ阳性血清中，ＰＣＲ阳性率５５．８８％（１９／３４）；（３）在抗ＨＢｓ、抗ＨＢｅ和ＨＢｃ阳性血清中，ＰＣＲ阳性率为２０％（２／１０）；（４）在抗ＨＢｅ和抗ＨＢｃ阳性血清中，ＰＣＲ阳性率为２５％（２／８）；文中就ＰＣＲ检测的结果及临床意义作了扼要的讨论。     

乙型肝炎表面抗原并非饮食从业人员筛查HBV传染源的理想指标

笔者使用分子生物学方法对乙型肝炎表面抗原(ＨＢｓＡｇ)携带者的传染性进行定量研究,以探讨ＨＢｓＡｇ作为饮食从业人员中ＨＢＶ传染源监控指标的可行性。一、材料和方法1.对象:从992例受试者中检出ＨＢｓＡｇ携带者156例。男102例、女54例,年龄6～82岁。2.方法:以ＥＬＩＳＡ法检测血清ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ和抗ＨＢｅ;以套式ＰＣＲ检测血清ＨＢＶＤＮＡ;将套式ＰＣＲ检测ＨＢＶＤＮＡ的低限作为一个ＨＢＶ感染剂量,将血液10倍系列稀释,其终末阳性ＨＢＶＤＮＡ的稀释倍数作为ＨＢＶ感染剂量的数值。二、结果1.ＨＢｅＡｇ阳性率为19.9%(31…     

HBV感染孕妇血清HBVM与TORCH抗体检测

目的了解ＨＢＶ感染孕妇血清ＨＢＶＭ与ＴＯＲＣＨ抗体阳性率。方法应用ＥＬＩＳＡ法筛查出９３例ＨＢＶ感染孕妇,并用ＰＣＲ检测ＨＢＶ－ＤＮＡ。分娩时取脐血测弓形体（Ｔｏｘ）、风疹病毒（ＲＶ）、巨细胞病毒（ＣＭＶ）、单纯疱疹病毒Ⅱ型（ＨＳＶ－Ⅱ）四种病原血清特异性ＩｇＭ和风疹病毒ＩｇＧ抗体。结果９３例ＨＢＶ感染孕妇中ＴＯＲＣＨ总感染率４７．３１％。单项抗体阳性率２５．８１％,７例为２项抗体阳性,２例３项抗体阳性。原发宫内感染以Ｔｏｘ最高（１２．９０％）,ＣＭＶ次之（６．４５％）,随后ＨＳＶ－Ⅱ（５．３８％）,ＲＶ最低（３．２３％）。孕妇ＨＢｓＡｇ阳性组,ＰＣＲＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率７６．９２％,ＴＯＲＣＨ感染率６１．５４％。ＨＢｓＡｇ阴性组,ＰＣＲＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率３８．８９％,ＴＯＲＣＨ感染率３７．０４％。结论脐血ＴＯＲＣＨ感染率与母血ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、ＨＢＶ－ＤＮＡ相关（相关系数分别为０．１４、０．２９、０．１５）。乙肝感染孕妇ＴＯＲＣＨ的抗体筛查对优生优育是非常有用的指标。     

广西肝癌患者乙型肝炎病毒前C区基因的突变

目的 了解乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）前Ｃ区基因突变与ＨＢｅＡｇ阴性的原发性肝癌患ＨＢＶ感染的关系。方法 应用套式ＰＣＲ方法对广西１６例原发性肝癌患血清ＨＢＶ ＮＡ前Ｃ区进行扩增,对阳性用Ｓａｎｇｅｒ ＤＮＡ测序法分析。结果 １６例肝癌患中有１４例ＨＢＶ ＤＮＡ阳性,阳性率为８７．５％（１４／１６）。其中１例ＨＢｅＡｇ阳隆,１例虽然ＨＢｅＡｇ为阴性,但其前Ｃ区序列正常;２例为ＨＢＶ野毒株和突变株     

HBeAg阴性的慢性乙型肝炎血清HBV—DNA的定量检测及意义

目的 探讨ＨＢｅＡｇ阴性慢性乙型肝炎（ＣＨ－Ｂ）血清ＨＢＶ－ＤＮＡ定量检测的意义．方法 应用定量ＰＣＲ法对经肝穿活检确诊的５２例ＨＢｅＡｇ阴性、３３例ＨＢｅＡｇ阳性ＣＨ－Ｂ血清进行ＨＢＶ－ＤＮＡ含量检测，并将ＨＢｅＡｇ阳性与阴性患者ＨＢＶ－ＤＮＡ含量、ＨＢｅＡｇ阴性ＨＢＶ－ＤＮＡ高水平与低水平患者肝脏病理损害分别进行了比较。结果：ＨＢＶ－ＤＮＡ含量ＨＢｅＡｇ阳性患者显著高于阴性患者，ＨＢｅＡｇ阴性     

用聚合酶链反应技术检测血清中HBV－DNA

本文报道了以聚合酶链反应技术检测血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ的方法。将血清在０．１ＭＮａＯＨ中３７℃孵育６０分钟使ＨＢＶ－ＤＮＡ从病毒中释放出来。再经琼脂糖检测２７ＤｂＰ的ＨＢＶ－ＤＮＡ片段。本方法检测ＨＢＶ的最低检测限为１０￣（－２）ｐｇ。用建立的方法检测５０例已被证实或怀疑为慢性乙型肝炎感染的病人血清。在１６例ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ为阳性的病人中，斑点杂交和ＰＣＲ分析均为阳性；１９例ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｂ为阳性的病人中，斑点杂交法检出５例，ＰＣＲ法检出１４例；在１５例抗－ＨＢｃ病人中，杂交法检出４例，ＰＣＲ法检出１０例阳性。结果表明ＰＣＲ法比杂交法敏感。     

聚合酶链反应结合斑点杂交测定乙型肝炎病毒DNA的评价

分别以Ｄｏｔｂｌｏｔ，ＰＣＲ－ＥＢ，ＰＣＲ－Ｄｏｔｂｌｏｔ法测定了１４６例慢性乙型肝炎患者血清ＨＢＶＤＮＡ。结果显示在ＨＢｅＡｇ组，ＰＣＲ－Ｄｏｔｂｌｏｔ阳性率（１００％）显著高于ＰＣＲ－ＥＢ（９４．８％），在ＨＢｅＡｂ组，ＰＣＲ－Ｄｏｔｂｌｏｔ的检出率为５４％，ＰＣＲ－ＥＢ为３８％。两者总检出率分别为８４．２％和７５．３％，统计学处理差异显著。有３例ＰＣＲ－ＥＢ再现生信号，但ＰＣＲ－Ｄｏｔｂｌｏ     

不同患者群体HBsAg阳性者HBV感染特点的对比研究

目的为评价ＨＢｓＡｇ作为ＨＢＶ医院感染监测指标的价值。方法以ＰＣＲ技术检测了ＨＢｓＡｇ阳性的８０例普通住院患者和１２３例肝炎患者的ＨＢＶＤＮＡ。结果普通患者的ＨＢｅＡｇ和ＨＢＶＤＮＡ阳性率显著低于肝炎患者，抗－ＨＢｅ阳性率则升高，ＨＢＶＤＮＡ阳性率的差异仅存在于抗－ＨＢｅ阳性模式之中。提示两组患者的ＨＢＶ携带率、传染性、感染阶段和感染的分子生物学机理等方面均存在差异。ＨＢｓＡｇ可作为肝炎患者预示ＨＢＶ传染性的良好指标，但对普通患者的预示作用则大为降低。结论ＨＢｓＡｇ作为ＨＢＶ医院感染监测指标的实用性仍需作进一步的研究。     

加热与洗涤法对HBV,HCV血清标志的影响

采用ＥＬＩＳＡ和聚合酶链反应（ＰＣＲ），对经６０℃１０ｈ加热的ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、抗－ＨＢＣ及抗－ＨＣＶ阳性血清和洗涤４次的ＲＢＣ洗涤及放散液的血清标志及ＨＢＶＤＮＡ、ＨＣＶＲＮＡ进行了检测。结果，６０℃加热１０ｈ用ＥＬＩＳＡ检测血清标志均由强阳性转为阳性，ＰＣＲ检测ＨＢＶＤＮＡ及ＨＣＶＲＮＡ均为阴性；洗涤液用ＥＬＩＳＡ和ＰＣＲ检测血清标志及ＨＢＶＤＮＡ、ＨＣＶＲＮＡ均呈阴性反应，放散液用ＥＬＩＳＡ检测阴性，用ＰＣＲ检测ＨＣＶＲＮＡ１０份标本９份阴性，１份阳性。提示６０℃加热１０ｈ和洗涤ＲＢＣ可灭活或去除血清中大部分ＨＢＶ、ＨＣＶ及其血清标志。     

HBeAg作为HBV经手术传播监控指标的实用性研究

目的探讨HBeAg阴性变异株对HBeAg作为手术中HBV传染源监控指标实用性的影响。方法在确定HBeAg阴性变异株与手术中HBV传染源关系的基础上，探讨病毒变异对HBeAg作为监控指标的影响。结果HBeAg阴性手术组的HBV传染性强度〈HBeAg阴性肝病组〈HBeAg阳性手术组；传染性聚集范围依次为（0～10^2）、（10^2～10^5）、（10^5～10^9）ID／ml；有53．60％的HBeAg阴性手术患者病毒复制静止，60．00％的HBeAg阴性肝病患者病毒活跃复制，45．16％的HBeAg阳性手术患者存在高水平病毒血症；HBeAg阴性手术组和肝病组的手术中HBV传染源分别为3．20％和22．50％，其最大传染性依次为10^1和10^2 ID，均为变异毒株携带者。结论HBeAg阴性变异株对HBeAg作为手术中HBV传染源监控指标的实用性无影响。     

手术患者中乙型肝炎病毒感染的特点和传染性

目的探讨手术患者中乙型肝炎病毒（HBV）感染的特点和传染性。方法在确定手术患者中HBV感染剂量（ID）的基础上，探讨病毒感染的特点和传染性。结果HBsAg阴性组、HBeAg阴性和阳性组患者中的HBVDNA阳性率分别为9．00％、67．20％和100．00％；HBV传染性范围分别为0～10^4ID／ml、0～10^4ID／ml、10^2～10^9ID／ml；HBV复制者的ID均值分别为10^1.80±1.30、10^2.16±1.35和10^5.10±1.62ID／ml。HBV浓度≥10^5ID／ml者分别为0、3．20％和83．87％。53．60％的HBeAg阴性患者血清病毒水平≤10^0ID／ml，45．16％的HBeAg阳性患者≥10^7ID／ml。结论手术患者中存在三种类型的HBV携带状态，他们的病毒携带率、经手术感染的传染性和手术中手套的防护效果都不相同。     

乙型肝炎病毒经手术传播感染阈值的实验研究

目的探讨围术期乙型肝炎病毒（HBV）感染阈值。为建立其监控方法以及评价该方法的防护效果提供依据。方法使用ELISA法检测992例手术患者的HBsAg和HBeAg．套式PCR法检测156例HBsAg阳性和100例阴性者的HBVDNA。套式PCR极量稀释法检测HBVDNA阳性者的感染剂量,缝针刺伤接种模拟试验法检测HBV经手术传播的感染阈值。结果HBsAg阳性和阴性、HBeAg阳性和阴性者的HBVDNA阳性率分别为73．7％和9．0％、100．0％和67．2％：其传染性范围分别在0—109ID/ml和0～104ID/ml、102-109ID!ml和0～106ID／ml。缝针刺伤单层手套传播HBV的感染阈值为手术传播的基本阈值,其值是105ID／Ⅱd,HBsAg阴性HBV携带者都不能成为传染源;保护手术患者的感染闽值是103ID／ml,68．6％HBsAg阳性者不能成为传染源．15．2％HBeAg阴性者可成为传染源：保护外科医生的感染阂值是108.5ID!ml,所有HBeAg阴性者和99．4％HBsAg阳性者不能成为传染源。结论围术期保护医生或患者的HBV感染阈值不同．使用的防护措施也应该不同。     

以HBsAg为传染源替代指标的实验及其优缺点分析

目的分析以乙型肝炎表面抗原(HBsAg)为传染源替代指标的优缺点。方法在测定HBsAg携带者病毒浓度和经手术传染感染阈值的基础上,分析以HBsAg为传染源替代指标的优缺点。结果 9.0%HBsAg阴性者HBVDNA阳性,传染性在0～104ID/ml;73.7%HBsAg阳性者HBVDNA阳性,传染性在0～109ID/ml;HBV经单层手套传播的感染阈值为105ID/ml,经双层手套传播的感染阈值为106ID/ml;HBsAg阴性者病毒浓度都在感染阈值之下,单层手套可使80.8%HB-sAg阳性者的传染性消失,双层手套可使另外4.5%传染性消失,剩余14.7%仍具有传染性,其病毒浓度高出感染低限1000倍。结论 HBsAg监控法对手术中HBV传染源的筛查效果很好,但控制HBV经手术传染的效果较差。而且不是最经济的防护方法 。     

剖析住院患者中的乙肝病毒携带状态

目的 剖析住院患者中的乙型肝炎病毒（HBV）携带状态,为制定护理人员HBV职业感染的防护方法提供依据.方法对992例连续入院的住院患者入院时取空腹静脉血3 ml,分离血清于-40℃保存备用.使用ELISA法检测每份血清的乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）和乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）.使用套式聚合酶链反应（n-PCR）检测所有HBsAg阳性患者和100例连续入院的HBsAg阴性患者血液的HBV DNA.将n-PCR检测HBV DNA低限作为一个HBV感染剂量,使用n-PCR极量稀释法检出每份HBV DNA阳性血清所含的HBV感染剂量/ml,以此作为HBV传染性或病毒浓度的指标.结果 992例住院患者中156例HBsAg阳性（HBsAg阳性者）,依据HBeAg是否阳性将HBsAg阳性者分为HBeAg阳性和阴性2种类型,HBeAg阳性者31例（19.87%）,阴性者125例（80.13%）.73.7% 的HBsAg阳性者HBV DNA阳性,病毒浓度范围为0～109感染剂量/ml,26.3%的 HBsAg阳性者HBV DNA阴性,病毒浓度在n-PCR的检测阈值之下.9%的HBsAg阴性者HBV DNA阳性,病毒浓度范围在0～104感染剂量/ml,最大传染性较HBsAg阳性者小105感染剂量/ml.HBeAg阳性者的病毒浓度范围在102～109 感染剂量/ml,阴性者在0～106 感染剂量/ml;HBeAg阳性者的病毒浓度较阴性者高103倍.结论住院患者中存在隐匿性和HBsAg阳性2种HBV携带状态,两者的最大HBV浓度相差105感染剂量/ml;HBeAg阳性者是HBV携带者中传染性较强部分,病毒浓度较阴性者高103倍.这些特点可为制定护理人员HBV职业感染的防护方法提供依据.     

乙型肝炎标志物与HBV—DNA的血清学检测结果分析

目的进-步了解乙型肝炎血清标志物(HBVM)与HBV—DNA的关联，有效控制乙型肝炎病毒(HBV)的传播。方法320份血清样品采集于沈阳市传染病院。用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测HBsAg、抗-HBs、抗-HBc、HBeAg、抗-HBe，用PCR方法检测HBV—DNA。结果HBeAg阳性，HBV—DNA的检出率为96．23％(51／53)；HBsAg阳性，其他HBVM阴性，HBV—DNA的检出率为37．93％(11／29)；HBsAg、抗-HBc和抗-HBe3项均阳性，HBV—DNA的检出率为52．38％(11／21)；抗-HBc和抗-HBe两项均阳性，HBV—DNA的检出率为23．53％(4／17)；HBVM全阴性，HBV—DNA的检出率为10．22％(14／137)；抗-HBs阳性，其他HBVM阴性，HBV—DNA未检出。结论HBeAg阳性，是HBV复制的佐证，具传染性；“小三阳”，乙型肝炎恢复期，仍有52．38％(11／21)的传染性；血清中除仅抗-HBs阳性，作为保护性抗体，无传染性外，其他HBVM阳性，均有-定量的HBV复制，仍须防范传播感染。     

某农场HBV感染的血清流行病学研究

对777份血清标本分别用敏感的SPRIA、ELTSA和斑点杂交法检测HBsAg、抗-HBs、抗-HBc、HBeAg、抗-HBe和HBV DNA。检测结果表明:HBeAg阴性者中仍有9.33% HBV DNA阳性,因此仅检测HBeAg并不能准确评价HBsAg携带者的传染性;在HBV总感染者中,男件HBsAg携带率明显高于女性,这种差异可能说明男女对HBV的反应性不同;在单项抗-HBs阳性者中,78.72%曾有过HBsAg和/或抗-HBc阳性史,因而提示这种单项抗_HBs阳性是HBV感染的特异表现。     

检测HBV DNA评价在岗饮服人员HBV感染者的传染性

目的　检测感染HBV饮服人群的HBVDNA ,研究HBVDNA阳性者的家庭聚集性 ,探讨其传染性 ,为修订有关法规提供依据。　方法　用反向间接血凝法检测HBsAg ,用赖氏法检测ALT ,酶联免疫吸附试验检测HBVM ,聚合酶联反应 -微孔杂交法和荧光定量PCR法检测HBVDNA。对HBVDNA阳性者的家庭聚集性进行对照研究。　结果　在 4110 5名饮食服务人员中检出HBsAg阳性 14 82人 ,阳性率 3 .61%。在HBsAg <1:5 12、ALT <40、且HBeAg阴性的90 0人中检出HBVDNA阳性者 3 12人 ,阳性率 3 4.67%。HBVDNA阳性者的家庭聚集率为 86.49% ,家庭成员HBV感染率为 64 .3 8% ,相对危险性 6.5 8。HBVDNA阳性者的家庭成员HBV感染呈家庭聚集性。　结论　血清学检验结果同时表现为HBsAg <1:5 12、ALT <40、HBeAg阴性、但HBVDNA阳性的在岗饮食服务人员是HBV的危险传染源。     

孕妇乙型肝炎血清学模式与新生儿宫内感染的相关性分析

目的探讨孕妇乙型肝炎血清学感染模式与新生儿宫内感染的相关性。方法 ELISA法检测孕妇血清乙型肝炎病毒血清学标志物（HBV-M）,HBsAg、HBeAg、HBeAb、HBcAb任一项阳性者,荧光定量PCR法检测脐血HBV-DNA。根据HBV-M不同模式将结果分为HBeAg（＋）组、HBsAg（＋）HBeAg（-）组、HBsAg（-）HBeAg（-）三组,比较各组脐血HBV-DNA阳性检出率及HBV-DNA定量结果。结果 722例受检孕妇中,93例脐血HBV-DNA检出阳性,阳性检出率为12.9%,HBeAg（＋）组阳性检出率显著高于其它二组（P〈0.001）;三组脐血HBV-DNA对数均值分别为（4.85±1.29）、（4.35±0.98）和（3.75±0.40）,HBeAg（＋）组脐血DNA含量显著高于其它二组（P〈0.001）。结论孕妇血清HBeAg（＋）者新生儿宫内感染率较高,孕妇血清HBsAg（-）HBeAg（-）者新生儿亦存在宫内感染的可能性。     

乙型肝炎病毒DNA复制水平与HBeAg、HBsAg的相关性研究

目的分析乙肝病毒(HBV)DNA复制水平与HBeAg、HBsAg的相关性。方法选取2015年1月至2016年12月我院收治的150例乙肝患者,以化学发光免疫法测定HBeAg与HBsAg,以荧光定量PCR测定HBV DNA水平。统计HBeAg、HBsAg阳性率,比较HBeAg、HBsAg阴性与阳性患者的HBV DNA阳性率与平均拷贝数。结果HBeAg阳性患者的HBV DNA阳性率与平均拷贝数均高于HBeAg阴性患者(P<0.05)。HBsAg阳性患者的平均拷贝数高于HBsAg阴性患者(P<0.05)。HBeAg和HBsAg均阳性患者的HBV DNA阳性率与平均拷贝数均高于HBeAg、HBsAg单一阳性患者(P<0.05)。HBeAg阳性与HBsAg阳性均与HBV DNA水平呈正相关(P<0.05)。结论HBeAg与HBsAg能在一定程度上反映HBV DNA复制水平,特别是高水平HBeAg,与HBV DNA密切相关。