新鲜冰冻灭活血浆制备冷沉淀的实验研究

目的探讨新鲜冰冻灭活血浆制备冷沉淀的可行性。方法分别用新鲜冰冻血浆和新鲜冰冻灭活血浆制备冷沉淀,应用CA500全自动血液凝固仪检测Ⅷ因子（FⅧ：C）、血管性血友病因子（vWF）和纤维蛋白原（Fb）的含量,比较2种原料制备的冷沉淀成分变化。结果新鲜冰冻灭活血浆制备的冷沉淀中FW：c、vWF及Fb均有不同程度的降低,但损失量均小于25％,仍然符合血液成分质量的国家标准。结论新鲜冰冻灭活血浆制备冷沉淀具有可行性。     

通过检测制备前凝血因子Ⅷ提高冷沉淀凝血因子的质量

目的通过对新鲜冰冻血浆的凝血因子Ⅷ水平进行检测,挑选出适合制备冷沉淀凝血因子的血浆,从而提高冷沉淀凝血因子的合格率。方法随机选取本中心采集6 h内无偿献血者的血液,四种血型的血液各10份,其中男女各半,对制备的新鲜冰冻血浆进行检测,然后提取冷沉淀凝血因子后,对冷沉淀凝血因子的凝血因子Ⅷ含量进行检测。结果制备的冷沉淀凝血因子,合格率为72.5%。进行制备前检验,要求新鲜冰冻血浆Ⅷ因子水平55%以上的血浆制备冷沉淀凝血因子,则冷沉淀凝血因子合格率达到89.7%;要求新鲜冰冻血浆Ⅷ因子水平70%以上的血浆制备冷沉淀凝血因子,则冷沉淀凝血因子合格率达到95.2%。结论通过对新鲜冰冻血浆Ⅷ因子水平的检测,只选取Ⅷ因子水平高的血浆制备冷沉淀凝血因子,可以大大提高冷沉淀凝血因子的合格率,保障冷沉淀凝血因子的质量。     

冷沉淀制备时间对新鲜冰冻血浆凝血因子及纤维蛋白原含量的影响

目的 探讨冷沉淀制备时间对新鲜冰冻血浆凝血因子及纤维蛋白原含量的影响。方法 选择2018年10月—2019年4月期间制备的新鲜冰冻血浆160份,根据采集后制备成新鲜冰冻血浆时间分为4组,分别为6 h组、8 h组、12 h组和18 h组,每组各40份。将4组新鲜冰冻血浆制备成冷沉淀,对比FVIII、Fg含量和冷沉淀中凝血因子质量。结果 随制备时间延长,FVIII含量逐渐降低,差异有统计学意义(P<0.05);不同时间段制备的冷沉淀中Fg含量对比,差异无统计学意义(P>0.05);6 h组合格率为97.50%高于8 h组87.50%、12 h组75.00%和18 h组55.00%,差异有统计学意义(P<0.05),且6 h组、8 h组和12 h组均达到标准,18 h组未达到标准。结论 新鲜冰冻血浆的制备时间对冷沉淀中的凝血因子影响较大,对纤维蛋白原影响无明显影响,并且全血制备新鲜冰冻血浆的最佳时间在6～8 h,最长不能超过12 h。     

采后不同时间分离的血浆所制备的冷沉淀中凝血因子Ⅷ和血浆蛋白原的含量分析

目的探讨全血采集后在不同时间段分离的冰冻血浆所制备的冷沉淀中凝血因子Ⅷ(FⅧ)和血浆纤维蛋白原(FIB)含量差异。方法随机抽取全血采集后不同时间段分离的新鲜冰冻血浆所制备的冷沉淀各50份进行检测,比较其中FⅧ和FIB含量差异。结果全血采集后﹤8h和8~10h制备的冷沉淀,凝血因子Ⅷ(FⅧ)和血浆纤维蛋白原(FIB)含量,符合2012年制定的《全血及成分血质量要求》中规定的相关标准;采集后10~12h、12h~14h、14h~18h分离血浆制备的冷沉淀中,FIB含量虽符合《全血及成分血质量要求》,但随着分离时间的延长,含量明显下降,和﹤8h分离冰冻血浆制备冷沉淀含量比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05);FⅧ含量在分离时间﹥10h分离的冰冻血浆制备的冷沉淀中明显偏低,含量已不符合《全血及成分血质量要求》中的相关标准。结论新鲜血液采集后超过10h分离的血浆,其冷沉淀中FⅧ明显偏低,质量已不符合相关要求规定,为保证血液制品质量,应选择在血液采集后10h内分离的冰冻血浆制备冷沉淀。     

制备冷沉淀方法的比较

冷沉淀是一种特殊的成份血液制品，含有第Ⅷ、XIII因子、纤维蛋白原、纤维结合蛋白、血管性血友病因子，主要用于血友病及凝血因子减少的出血性疾病。冷沉淀是由新鲜冰冻血浆融化、分离，再次提取而制备的。     

制备冷沉淀的两种方法比较

目的通过比较4℃冰箱融化离心法和改良水浴融化虹吸法制备冷沉淀的质量分析,选择合适的制备冷沉淀方法。方法取100袋新鲜冰冻血浆,随机分为两组,每组各50袋分别采用4℃冰箱融化离心法和改良水浴融化虹吸法制备冷沉淀,用血凝分析仪对两种方法制备的Ⅷ因子和纤维蛋白原含量进行检测,电子秤称量血袋重量并计算容量,计算三者的合格率。结果4℃冰箱融化离心法和改良水浴融化虹吸法制备的冷沉淀Ⅷ因子含量（IU/袋）分别为（71.45±29.65）、（102.52±35.84）,差异有统计学意义（P〈0.001）;合格率分别为64.0%、92.0%,差异有统计学意义（P〈0.005）。纤维蛋白原含量（mg/袋）分别为（155.67±36.35）、（168.74±43.62）,差异无统计学意义（P〉0.05）;合格率均为100%。容量（ml/袋）分别为（40.52±5.82）、（25.26±4.66）,差异有统计学意义（P〈0.001）;合格率分别为70.0%、100%,差异有统计学意义（P〈0.005）。结论改良水浴融化虹吸法所需设备简单,操作方便,制备时间短,并且制备的冷沉淀容量少,获得的Ⅷ因子含量和合格率明显优于4℃冰箱融化离心法,值得推广使用。     

多美达速冻机冰冻血浆和冷沉淀凝血因子的体会

目的对2013年4月以来使用多美达速冻机冰冻的2176袋新鲜血浆和320袋冷沉淀凝血因子进行统计分析,找出最佳的冰冻时间,保证新鲜冰冻血浆和冷沉淀凝血因子的质量。减少速冻机不必要的运行,延长使用寿命。方法按照不同的包装,不同容量分别放置或混合放置,到设定45min后,记录冰冻效果,进行统计分析。结果按销售商预先设定的45min,冷沉淀凝血因子全部冻好,冻透率100%;血浆冻好1708袋,冻透率只达78.72%。结论:按预先设定的45min冷沉淀凝血因子可以完全冻好,而血浆仍有21.18%没有冻好。应根据不同的容量和不同的放置方式延长冰冻时间,最大限度减少不稳定凝血因子损失,保证新鲜冰冻血浆质量安全有效。     

恒温摇摆式水浴箱制备冷沉淀的优势

目的研究恒温摇摆式水浴箱制备冷沉淀的优势及影响因素。方法随机取24袋新鲜冰冻血浆（200±20）mL,随机分为第1组和第2组,每组12袋,分别用恒温摇摆式回收率。结果第1组冷沉淀FⅧ的回收率为（47.63±4.06）%,第2组冷沉淀FⅧ的回收率为（64.17±5.96）%,前者平均用时2.5h,而后者平均用时仅为1.0h。结论使用恒温摇摆式水浴箱（CT-4T.6C型）制备冷沉淀其优势在于能够有效控制虹吸法制备冷沉淀的关键控制点,即精确控制水浴温度和融化速度。     

冷沉淀制备的关键控制环节

目的：控制影响冷沉淀质量的关键环节,提高冷沉淀的质量。方法：筛选从采集到制备间隔时间短、FⅧ损失少的全血制备的血浆留做冷沉淀原料浆。保持良好的冷链系统,尽快低温分离成分血,控制好设备和环境温度,把握好制备的最佳时间等环节。结果：2010年2-5月份冷沉淀质量控制结果显示,有25%不合格,不合格原因均为FⅧ因子含量达不到80IU。通过对上述各个环节的不断改进和控制,2010年6-9月份冷沉淀质量控制抽检全部合格。结论：冷沉淀制备的质量控制涉及到全血的采集、储存和运输、分离以及新鲜冰冻血浆的融化、分离、入库等诸多环节,任何一个环节的失控,都会影响到冷沉淀的最终质量。因此,要求心中有关部门加强沟通、紧密协作。质量控制的关键是减少冷沉淀中的不稳定成分FⅧ因子的损失,而FⅧ因子的活性随温度的升高破坏很大,所以控制的核心内容是保持血液的冷链系统,最大限度地减少血液/血制品在常温下的时间。要保证各个环节的的严格受控,制备优质的冷沉淀,除了配备必要的设备外,还要提高员工的质量意识和效率意识,提高专业技能,两个方面缺一不可。     

血液成分制备中冷沉淀制备技术在临床的应用

目的:对冷沉淀制备技术在血液成份制备中的应用效果进行分析。方法:对新鲜血浆进行解冻、融化、分离等一系列措施,另选取15份已经制备好的冷沉淀,利用血凝仪对FⅧ与Fg含量进行检测。结果:新鲜血浆在经过解冻、融化等一系列措施后,冷沉淀容量为27.0±3.1ml,FⅧ为141.5±15.4IU/袋,Fg为210.0±22.3mg/袋,达到了国家有关规定,在临床实际应用中均无不良反应发生。结论:血液成分制备中冷沉淀制备技术在临床中有着重要的意义,冷沉淀制备技术保证了血管性血友病、先天性等疾病患者的治疗需求,具有广阔的应用前景。     

虹吸法与离心法制备冷沉淀的质量分析

目的：通过对虹吸法与离心法制备的冷沉淀的质量分析,选择合适的方法制备冷沉淀。方法：随机取24袋新鲜冰冻血浆,随机分为两组,每组12袋,分别用虹吸法和离心法制备冷沉淀,测定冷沉淀中凝血因子Ⅷ和纤维蛋白原的含量。结果：虹吸法与离心法制备的冷沉淀,其凝血因子Ⅷ的含量分别为（120±11）IU/袋（,90±9）IU/袋,两者比较差异有统计学意义（P〈0.01）;纤维蛋白原的含量分别为（165±12）mg/袋,（168±10）mg/袋,两者比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：虹吸法制备冷沉淀简便、快捷,凝血因子Ⅷ含量高,优于离心法,值得推广应用。     

新鲜冰冻血浆融化后凝血因子的变化

目的:探讨新鲜冰冻血浆融化后24 h内凝血因子的变化,为指导临床治疗提供理论依据.方法:采用ACL 8000自动血凝分析仪对20份血浆样品进行融化后0、6、12、24 h分别测定FIB、FⅦ、FⅧ、FⅨ活性水平.结果:新鲜血浆融化后24 h之内无明显改变的有FIB(P>0.05);其他指标在不同时间段各有明显的改变,同时显示FⅧ半衰期为12～24 h.结论:新鲜冰冻血浆融化后放置会有凝血因子活性的衰减,为保证输血质量,尽可能融化后立即输注.     

新鲜混合血浆替代血凝室内质控品的探讨

目的探讨用新鲜和冰冻正常对照血浆是否能作为日常工作室内质控品。方法分别测得每日新鲜的单人及混合血浆的PT、APTT、FG、TT值,待集满16d标本后一起37℃水浴中5min融化,并分别测其在0、1、2、3、4h时的各项测定值。结果 (1)新鲜血浆与当日质控无明显差异(P>0.05);(2)冷冻后的血浆各项测得值与其新鲜状态下所测得值除FG(P>0.05)外均有显著差异(P<0.05);(3)单人新鲜血浆与质控品测得值除FG(P>0.05)外均有明显差异(P<0.05)。结论新鲜混合血浆可用作为每日的质控血浆,单人新鲜血浆及冻融过的混合血浆则不可以作为正常质控血浆。     

新鲜冰冻血浆二次冻融对凝血因子的影响

目的 探讨新鲜冰冻血浆(FFP)首次融化后放置不同时间再次冰冻,比较二次冻融前后血浆中凝血指标和部分凝血因子的变化.方法 FFP 37 ℃水浴融化后,在4 ℃放置0 h、6 h、12 h、24 h时分别抽取4 ml血浆均等注入2支试管中,一支立即测定,另一支-30 ℃冰箱冰冻保存,10 d时再融化并测定.结果 FFP二次冻融前后比较,凝血指标中APTT平均延长5.7%,PT、TT、FIB未见明显改变(P>0.05);所测的部分凝血因子二次冻融后活性平均衰减4.8%～15.5%.结论 凝血因子随FFP复融后放置时间延长而衰减,反复冻融可降低其活性.但在第一次复融后放置12 h内再次冻融,凝血因子活性值仍在正常范围内, 在血浆供应紧张时,仍可作为新鲜冰冻血浆使用.     

走向理性的新鲜冰冻血浆输血

新鲜冰冻血浆(fresh frozen plasma,FFP)是将采集后6 h以内的新鲜抗凝全血,于4℃离心分离,并迅速在-50℃冰冻成块而制成。FFP含全部凝血因子:含血浆蛋白60 g/L~80 g/L,纤维蛋白原2 g/L~4 g/L,其他凝血因子0.7 IU/ml~1.0 IU/ml。在-20℃可保存一年,一年到期后可作为普通血浆使用。虽然目前国内外已发表多篇FFP临床使用的相关报道,且最早可追溯至上世纪70年代[1],但目前人们对FFP的     

冷沉淀及其在外科手术中的应用

冷沉淀是新鲜冰冻血浆在2—6℃条件下不融解的白色沉淀物，是一种成分血；主要用于治疗先天性缺乏抗血友病球蛋白A（第Ⅷ因子，FⅧ）的血友病A：也可用于因大失血、肝功能障碍等凝血因子减少而导致的出血性疾病的辅助治疗和弥漫性血管内凝血（DIC）重病创伤等患者的替代治疗，以及遗传性假血友病（VWD），先天性或获得性纤维蛋白原缺乏症，手术后出血，近年来特别是在外科手术方面的应用已非常广泛。     

不同制备方式对冷沉淀质量的影响

目的:通过检测不同方式所制备冷沉淀的各项指标,探讨适合的制备方法。方法:抽取Ⅷ因子含量和纤维蛋白原含量符合要求的新鲜冰冻血浆90袋,以三种不同方式进行制备,检测其Ⅷ因子含量和纤维蛋白原含量。结果:虹吸法合格率83.6%,离心法93.3%,制备仪100%。结论:冷沉淀凝血因子制备仪具有温度控制精准、称重温度、虹吸结束后能自动截流等特点,值得推荐。     

用冰冻兔血浆作血浆凝固酶试验的探讨

血浆凝固酥试验阳性的金黄色葡萄球菌一般认为其致病性较强[1] 。血浆凝固酶试验常以兔血浆作为凝固物质 ,一些学者认为 ,做金黄色葡萄球菌凝固酶用的血浆不宜冰冻。但基层实验室由于种种条件限制 ,饲养动物有一定的困难 ,致使新鲜兔血浆的来源受到限制。为此 ,我们以兔血制成血浆后冰冻保存 ,与新鲜兔血浆作比较 ,并进行效期观察 ,现将结果报告如下。材料与方法1　血浆制备1 1　兔血浆制备 :无菌采取兔心脏血 ,以 1份灭菌的3 8%枸橼酸钠液抗凝剂加 4份兔血的比例充分混匀 ,离心 ,吸取上清液即为原兔血浆 ,分装成 1ｍｌ/支或 0 5ｍｌ/支 ;…     

新鲜冰冻血浆与冷藏代浆血胆碱酯酶活性变化的持续观察

[目的 ]探讨新鲜冰冻血浆与冷藏代浆血中胆碱酯酶活性的变化情况 ,为冰冻血浆代替新鲜血液治疗有机磷农药中毒提供依据。 [方法 ]用同一份鲜血分别制备冰冻血浆与冷藏代浆血 ,在 1月内 ,每天 1次 ,用美国BECKMANCX5型生化分析仪检测冰冻血浆和代浆血的胆碱酯活性。 [结果 ] 31d的观察期间 ,冰冻血浆胆碱酯酶活性为 (5 736 89±1 4 6 5)U/L ,变化不明显 (P >0 0 5) ;冷藏代浆血胆碱酯酶活性为 (2 1 35 92± 58 68)U/L ,低于新鲜代浆血 (P <0 0 1 ) ;新鲜冰冻血浆胆碱酯酶活性高于冷藏代浆血 (P <0 0 1 )。 [结论 ]新鲜冰冻血浆存放 31d内可代替新鲜血以满足救治有机磷农药中毒的需要 ,而用冷藏代浆血时应增加用量     

影响新鲜冰冻血浆中凝血因子含量因素的分析研究

目的 探讨不同时间、不同温度下制备的血浆及冷沉淀中纤维蛋白原和FⅧ凝血因子水平变化。方法 通过选取3个时间段(6 h～8 h、10 h～12 h和14 h～18 h)、3个温度段(2℃～6℃、10℃～13℃和20℃～22℃)制备的冰冻血浆、冷沉淀各20份,检测纤维蛋白原和FⅧ凝血因子水平。结果 在2℃～6℃、10℃～13℃、20℃～22℃条件下的不同时间段内FFP和冷沉淀中Fbg水平各时间段差异无统计学意义,而FⅧ随时间延长水平降低。在6 h～8 h、10 h～12 h、14 h～18 h条件下的不同温度段内FFP和冷沉淀中Fbg、FⅧ凝血因子随时间延长而水平降低。结论 温度和时间是影响Fbg、Ⅷ凝血因子活性的主要因素,要保证产品的质量和凝血因子的活性必须从血液采集过程、制备时间、制备温度、运输温度上严格质量控制。