不同方法检测B群链球菌效果评价

目的分析显色肉汤法、金标免疫层析法(简称金标法)、乳胶凝集法在孕妇B群链球菌(GBS)定植筛查中的应用效果。方法同时采用细菌培养法、显色肉汤法、金标法、乳胶凝集法对1 300例孕35~37周孕妇阴道下端或肛周拭子进行GBS筛查。以细菌培养法作为金标准方法,评价显色肉汤法、金标法、乳胶凝集法的诊断性实验性能。结果显色肉汤法检出率为12.8%、金标法为11.5%、乳胶凝集法为12.1%、细菌培养法为12.0%,不同方法检出率比较差异无统计学意义(P0.05)。显色肉汤法准确度、灵敏度最高,分别为98.4%和98.6%;金标法特异度最高,为98.9%,但漏诊率达到14.7%;乳胶凝集法特异度为97.2%,阴性预期值为97.3%。结论与细菌培养法相比,3种方法筛查GBS的检出率相近。显色肉汤法准确、特异,检测系统独立,可作为孕妇GBS定植筛查和辅助诊断的常规方法。金标法检测速度快,可用于门诊大规模常规筛查。乳胶凝集法特异度较好,成本低,适合基层医院开展。     

3种方法检测围产期孕妇阴道分泌物B群链球菌的效果分析

目的分析一般细菌培养法、B群链球菌(GBS)显色培养法和实时荧光聚合酶链反应(PCR)在围产期孕妇GBS检测中的应用效果。方法收集2019年1—8月自愿就诊于曲靖市第二人民医院妇产科的围产期孕妇送检的1 088份阴道分泌物标本,同时采用一般细菌培养法、GBS显色培养法和实时荧光PCR检测GBS,比较3种方法的阳性率和检测时长;以一般细菌培养法为参考标准,计算其余两种方法的敏感度、特异度和准确度。结果 1 088份围产期孕妇阴道分泌物标本中,一般细菌培养法检出阳性55份,阳性率为5.06%;GBS显色法检出阳性62份,阳性率为5.70%;实时荧光PCR检出阳性78份,阳性率为7.17%。实时荧光PCR阳性率明显高于一般细菌培养法〔7.17%(78/1 088)比5.06%(55/1088)〕,差异有统计学意义(P0.05),其余方法比较差异均无统计学意义(均P0.05)。以一般细菌培养法为参考标准,GBS显色培养法的敏感度、特异度、准确度分别为100%、99.3%、99.4%,实时荧光PCR分别为96.4%、97.6%、97.5%,差异无统计学意义(P0.05)。一般细菌培养法和GBS显色培养法所需时长为24～36 h,实时荧光PCR耗时4～6 h。结论实时荧光PCR筛查GBS阳性率最高且耗时短,适合于为临床提供准确、快速的诊断依据,GBS显色培养法适合于基层医院进行GBS的常规筛查和防治。     

结核杆菌三种实验方法的应用评估

目的比较痰涂片法、实时荧光定量PCR法和免疫结核抗体(金标法)检测对结核病的诊断意义。方法选取2015年7月至2015年10月在我院诊疗疑似或确诊患者172例,进行涂片抗酸染色、实时荧光定量PCR法检测和采集血样进行免疫结核抗体检测。结果 172例检测样本中,抗酸染色痰液标本阳性例数只有20例,阳性率为11.6%。实时荧光定量PCR法阳性例数55例,阳性率31.2%。免疫结核抗体(金标法)阳性例数为87例,阳性率为50.6%。结论三种方法中,以结核抗体阳性率最高,实时荧光定量PCR法次之,抗酸染色法阳性率最低。如果三种方法联合运用,相互佐证,可提高准确性。     

应用实时荧光定量PCR技术探讨B群链球菌与胎膜早破的关系

目的探讨应用荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术检测B群链球菌与胎膜早破之间的关系。方法将300例发生胎膜早破的孕妇设为研究组,300例未发生胎膜早破的孕妇设为对照组,采集孕妇宫颈分泌物,用实时荧光定量PCR法和细菌培养法检测B群链球菌。结果对照组宫颈分泌物检测B群链球菌阳性率为7.00%(21/300);研究组宫颈分泌物检测B群链球菌阳性率为20.00%(60/300)。实时荧光定量PCR法检测B群链球菌阳性率为13.50%(81/600);显色细菌培养法检测B群链球菌阳性率为10.00%(60/600);传统细菌培养法检测B群链球菌阳性率6.67%(40/600)。结论围生期孕妇生殖道B群链球菌感染与胎膜早破的关系密切,应加强孕晚期B群链球菌的筛查,降低发生胎膜早破的风险。实时荧光定量PCR技术检测B群链球菌的阳性率明显高于细菌培养法,且用时短,准确度高。尽早检出B群链球菌感染有可能降低或预防胎膜早破的发生。     

生殖道衣原体感染的临床疗效观察指标的探讨

目的通过实验探讨生殖道沙眼衣原体感染临床疗效观察的指标。方法用McCoy细胞分离培养、实时荧光定量PCR和一步免疫层析法对首诊单纯衣原体阳性的患者同时进行临床疗效的监测。结果治疗一周后，细胞培养法和荧光定量PCR检测法转阴率分别为53．6％、51．8％，而一步免疫层析法仅为5．4％。三周后细胞培养法达96．4％；四周后荧光定量PCR达94．6％；五周后一步免疫层析法达96．4％。结论荧光定量PCR和一步免疫层析法均不能成为短期疗效观察的指标。     

实时荧光PCR技术和细菌培养法检测妊娠晚期孕妇定植B群链球菌临床分析

目的 探讨应用实时荧光PCR技术和细菌培养法检测妊娠晚期孕妇定植B群链球菌(GBS)的敏感性。方法 采集孕妇生殖道-直肠分泌物拭子2份,一份标本用普通细菌培养法、另一份用实时荧光PCR技术检测生殖道GBS。比较两种方法的准确性、快速性。308例孕妇根据实时荧光PCR检测分为GBS阳性组与GBS阴性组,通过对比较分析GBS与发生胎膜早破的关系。结果 将308例孕妇进行生殖道GBS检测,用普通细菌培养法进行培养有18例阳性,阳性率5.8%(18/308),实时荧光PCR检测有29例阳性,阳性率9.4%(29/308)。在PCR检测GBS阳性组中,发生胎膜早破9例,发生率为31%。在PCR检测GBS阴性组中,发生胎膜早破33例,发生率为11.83%。结论 该次调查结果显示实时荧光PCR技术的阳性检出率明显高于细菌培养法,应用该法检测技术为GBS的快速诊断以及更加准确有效地进行抗菌药物预防提供了依据。     

三种沙眼衣原体的检测方法评价

目的：探讨聚合酶链反应（PCR）、免疫层析法（C－C快速法）和糖原试验检测泌尿生殖道沙眼衣原体感染的诊断价值。方法：用三种方法分别对102例送检标本进行平行检测。结果：以PCR法作参比，免疫层析法敏感性为86．7％，特异性为97％；糖原试验敏感性为80．0％，特异性为96．6％。结论：PCR法有较高灵敏度，免疫层析法有一定灵敏度和专一性，基层医院可以采用。     

实时荧光 PCR 技术和细菌培养法检测妊娠晚期孕妇定植B 群链球菌临床分析

目的：探讨应用实时荧光 PCR 技术和细菌培养法检测妊娠晚期孕妇定植 B 群链球菌（GBS）的敏感性。方法采集孕妇生殖道-直肠分泌物拭子2份,一份标本用普通细菌培养法、另一份用实时荧光 PCR 技术检测生殖道 GBS。比较两种方法的准确性、快速性。308例孕妇根据实时荧光 PCR 检测分为 GBS 阳性组与 GBS 阴性组,通过对比较分析 GBS 与发生胎膜早破的关系。结果将308例孕妇进行生殖道 GBS 检测,用普通细菌培养法进行培养有18例阳性,阳性率5．8％（18/308）,实时荧光 PCR检测有29例阳性,阳性率9．4％（29/308）。在 PCR 检测 GBS 阳性组中,发生胎膜早破9例,发生率为31％。在 PCR 检测 GBS阴性组中,发生胎膜早破33例,发生率为11．83％。结论该次调查结果显示实时荧光 PCR 技术的阳性检出率明显高于细菌培养法,应用该法检测技术为 GBS 的快速诊断以及更加准确有效地进行抗菌药物预防提供了依据。     

实时荧光定量PCR快速检测脑膜炎奈瑟菌的临床价值

目的探讨实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)快速检测流行性脑脊髓膜炎(简称流脑)病原菌脑膜炎奈瑟菌(Nm)的临床价值。方法收集70例疑似流脑病例的双份脑脊液标本,1份采用细菌培养法进行检测,另1份采用实时荧光定量PCR进行检测,比较2种方法的检出阳性率以及敏感性和特异性。结果采用细菌培养法检出Nm阳性49例,阳性率为70.00%;实时荧光定量PCR检出Nm阳性67例,阳性率为95.71%,二者阳性率比较差异有统计学意义(P0.05)。实时荧光定量PCR检测结果与细菌培养法阳性符合率为70.00%,其中有18例细菌培养法为阴性而实时荧光定量PCR为阳性。实时荧光定量PCR检测Nm的特异性为100%,无假阴性结果,阳性预测值为73.13%,阴性预测值为0.00%,检测下限为103拷贝/m L,线性范围为2×103~2×107拷贝/m L。结论实时荧光定量PCR检测Nm敏感性高、特异性强,且快速简便,为流脑流行病学调查提供了一种快速、简便的病原学诊断手段。     

实时荧光定量PCR法与常规PCR法及细菌培养法检测副溶血弧菌的比较

目的:比较实时荧光定量PCR法、常规PCR法及细菌培养法检测副溶血弧菌的灵敏度与特异性。方法:采用建立的实时荧光定量PCR、常规PCR及传统细菌培养法3种方法,同时对副溶血弧菌等细菌进行检测。结果:实时荧光定量PCR检测的灵敏度可达19cfu/mL,且有很高的特异性,对金黄色葡萄球菌等10种相关细菌均无交叉反应,从细菌核酸提取至完成检测仅需3h左右。结论:实时荧光定量PCR检测由于在密封环境中进行,避免了产物与环境间的交叉污染,是3种方法中最为快速敏感的方法,适用于公共卫生应急疫情的实验室快速诊断。     

五种方法检测产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌的卫生经济学评价

目的分析PCR(A方法)、Carba NP试验(B方法)、紫外分光光度法(C方法)、改良碳青霉烯灭活法(mCIM,D方法)和环介导等温扩增(LAMP,E方法)5种检测产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌(CPE)方法的成本和检验性能。方法计算机检索PubMed、EMbase、The Cochrane Library、CNKI、WanFang Data和CBM数据库,搜集具有相同或相似设计、相同目的和独立结果的关于CPE检测的文献,检索时限均为2009年5月~2019年5月。对各方法的成本和检验性能数据进行提取,将效用中的"灵敏性、特异性、简便性、快速性"等4个医学检验专业性指标量化为具体数值,利用药物经济学分析方法中的成本-效果分析(cost-effective analysis,CEA)、成本-效用分析(cost-utility analysis,CUA)和多属性效用理论(multi-attribute utility theory,MAUT)对5种检测CPE的方法进行卫生经济学评价。结果 A、B、C、D、E方法的成本分别为210.00元、22.00元、10.50元、6.00元和60.00元,A、B、C、D、E方法的CEA的C/E分别为210.00、22.96、10.66、6.14和60.00。A、B、C、D、E方法的CUA的C/U分别为302.16、32.13、19.30、11.13和80.00。A、B、C、D、E方法的MAUT值分别为42.56、5.00、2.54、1.63和12.56。结论从CEA、CUA及MAUT的角度看,改良碳青霉烯灭活法的经济学价值最好,一般情况下可作为常规检测CPE方法;但其操作时间长,在临床严重感染需要快速检测时可采用环介导等温扩增法,更兼具经济性和快速性。     

Detection of Klebsiella pneumonia in respiratory tract samples by the loop-mediated isothermal amplification method

目的:建立环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测呼吸道感染患者痰液中肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae,Kpn)的方法并进行初步应用。方法:基于Kpn phoE基因设计4条特异性引物,对反应条件中的Mg^2+和甜菜碱浓度进行优化,建立检测Kpn LAMP方法并进行特异性和灵敏度试验;收集308例呼吸道感染患者痰液样本,进行细菌培养法、LAMP法、DNA测序技术检测,评估LAMP检测体系。结果:8 mmol/L、0.4 mmol/L确定为Mg^2+和甜菜碱的最佳扩增浓度;该体系特异性强,与其他菌株无交叉反应,灵敏度为104 CFU/mL;临床样本中Kpn的LAMP检出率(53.89%)高于培养法(42.20%),差异有统计学意义(χ^2=161.65,P<0.05);LAMP法与细菌培养法在Kpn阳性样本、无细菌生长样本、非Kpn其他细菌阳性样本中的一致率分别为96.15%、100%、65.25%,46例不一致样本经DNA测序验证,LAMP法与测序符合率为86.95%(40/46);LAMP法和DNA测序法对131例样本同时进行检测,经Kappa检验两者具有极好的一致性(Kappa系数=0.817)。结论:与细菌培养法相比,LAMP法具有准确性高、灵敏度高、特异性强、反应省时等优势,可以作为肺炎克雷伯菌的快速检测方法。     

Cost-Effectiveness Comparison Between Monofocal and Multifocal Intraocular Lens Implantation for Cataract Patients in Taiwan

Purpose

Our aim was to conduct a cost-effectiveness analysis (CEA) of monofocal and multifocal intraocular lenses (IOLs) for cataract patients in Taiwan.

Methods

This prospective nonrandomized study was designed to evaluate the effectiveness of monofocal and multifocal IOLs by means of visual performance, visual quality, vision-related quality of life, and spectacle-independence rates. The direct costs were calculated using the payment points of the fee schedule for medical services multiplied by the treatment items. The concept of incremental cost effectiveness ratios was used to evaluate the costs of different types of IOLs in cataract surgery and postoperative outcomes in patients.

Findings

A total of 61 patients from the monofocal IOL group (n = 21), multifocal IOL group 1 (n = 22), and multifocal IOL group 2 (n = 18) who completed the study were included in the analysis. No significant differences were observed in mean ages or patient to eye ratio. Significant differences in effectiveness after the implantations of monofocal and multifocal IOLs were observed for spectacle-free rate and monocular contrast sensitivity under glare conditions only. The incremental cost-effectiveness ratios of monofocal versus multifocal IOLs indicated that it cost an additional $57 to $58 (US dollars) to increase each 1% of the spectacle-independence rate.

Implications

This study’s results indicated that multifocal IOLs provided better effectiveness on vision-related indicators like the incremental cost effectiveness ratios of postoperative spectacle-independence rate and binocular best-corrected visual acuity measurements at near vision. Our findings suggest that multifocal IOLs can be highly cost effective for patients who prefer to be spectacle free, so it is important to ensure that patients have realistic expectations when making choices between monofocal and multifocal IOLs.     

三种治疗胃溃疡用药方案的药物经济学评价

目的:对治疗胃溃疡的3种药物治疗方案进行药物经济学评价。方法:A组方案为雷钡拉唑 克拉霉素 甲硝唑 法莫替丁;B组方案为奥美拉唑 阿莫西林 甲硝唑 法莫替丁;C组方案为果胶铋 克拉霉素 甲硝唑,采用成本-效果分析法对3种药物治疗方案进行回顾性分析。结果:B方案成本-效果比较低,总有效率高。结论:B方案为最佳方案。     

环介导等温扩增法快速检测痰液标本中的结核分枝杆菌

目的由于结核病检测技术目前存在灵敏度低,检测周期长的问题,给结核病防治工作带来了诸多不便。多种基因检测技术的出现为结核病的诊断,提供了有利工具。本文通关过使用新型基因扩增法,LAMP法对痰标本中的结核分枝杆菌进行检测。方法采集54份肺结核疑似患者的临床痰标本,对每份样本使用LAMP法进行检测,并使用痰培养结果作为金标准。结果在直接检测痰标本的试验中LAMP的灵敏度为96%,特异性为100%。结论通过这项研究发现,使用LAMP技术用于痰标本中结核分枝杆菌的检测,可大大缩短检测周期,简化操作步骤,具有成本低、灵敏度高、特异性强的优点,有利于进行结合病的筛查和诊断。     

B族链球菌四种筛查方法的比较

目的评估B族链球菌肉汤增菌培养法(Todd-Hewitt型,T-H)、直接培养法、液体显色培养法及核酸环介导恒温扩增法(LAMP)在孕晚期妇女筛查中的临床应用。方法回顾性研究。采集2016年10月至2018年4月在广州医科大学附属广州市妇女儿童医疗中心产科门诊产检妊娠35~37周孕妇直肠阴道分泌物标本969份,采用双盲法,以T-H肉汤增菌培养法为参考方法,分3个研究阶段先后比较直接培养法、液体显色培养法及LAMP法的检验性能。以敏感度、特异度、符合率、阳性预测值、阴性预测值及尤登指数为评价指标,一致性用Kappa检验。结果增菌培养法共检测标本969份,阳性90份(9.3%)。以增菌培养法为参考,敏感度从高到低依次为LAMP法[100%(25/25)]、直接培养法[81.5%(22/27),95%CI:65.8%~97.1%]、液体显色培养法[71.1%(27/38),95%CI:55.9%~86.2%];特异度则依次为直接培养法[100%(282/282)]、液体显色培养法[98.1%(455/464),95%CI:96.8%~99.3%]、LAMP法[94.0%(125/133),95%CI:89.9%~98.1%];符合率依次为直接培养法[98.4%(22+282)/309]、液体显色培养法[96.0%(27+455)/502]、LAMP法[94.9%(25+125)/158]。而直接培养法(0.889)、LAMP法(0.832)与增菌培养法的一致性Kappa值均≥0.75,液体显色培养法则为0.708。直接培养法有18.5%(5/27)的漏检率,LAMP法漏检率为零、假阳性率为6.0%(8/133),液体显色培养法的漏检率、假阳性率分别为28.9%(11/38)、1.9%(9/464)。结论本研究所比较的几种GBS筛查方法中,仅LAMP法与增菌培养法在敏感度、特异度及符合率上均具较好的一致性,而其他两种方法存在一定的漏检。临床实验室可根据实际条件、技术力量选择使用,或参照欧美指南推荐的孕晚期增菌培养筛查与产时核酸检测相结合,以最大程度满足临床需求。     

Cost-Effectiveness Analysis in the Nursing Literature, 1992–1996

Purpose: To review the recommendations by the U.S. Panel on Cost-Effectiveness in Health and Medicine (panel) for use in future nursing research. The review (a) provides a critique of the nursing cost-effectiveness and cost utility literature from the perspective of the recommendations set forth by the panel and other recognized authorities in cost-effectiveness analysis (CEA), (b) constructs an interdisciplinary framework to show the steps in the conduct of CEA, (c) makes the fechniques and major findings of nursing CEA studies available and understandable, and (d) offers guidelines for the incorporation of CEA into the evaluation of future nursing intervention and research.
Data Sources: Seven nursing studies published between 1992 and 1996 that compared two or more interventions for costs and outcomes.
Organizing Framework: For each study, the (a) perspective, fb) net costs, (c) net effect, (d) analysis of costs and effects, and (e) decision outcomes were analyzed.
Findings: If the panel's recommendations reflect the problems in the health care CEA literature in general, then on balance, the nursing CEA 1992–1996 studies are no more or less flawed than CEA studies in the health or medical care fields.
Conclusions: Methodologic guidelines and interdisciplinary strategies are needed to advance the progress of nursing cost-effectiveness research.     

Modified real-time PCR for detecting, differentiating, and quantifying Ureaplasma urealyticum and Ureaplasma parvum

We evaluated a previously described quantitative real-time PCR (qPCR) for quantifying and differentiating Ureaplasma parvum and U. urealyticum. Because of nonspecific reactions with Staphylococcus aureus DNA in the U. parvum PCR, we developed a modified qPCR and designed new primers. These oligonucleotides eradicated cross-reactions, indicating higher specificity. The detection limits of the qPCR were determined at 1 and 3 colony-forming units/ml for U. parvum and U. urealyticum, respectively. The quantification limits of the assay for both Ureaplasma species ranged from 2.10(6) to 2.10(1) copy numbers per PCR. A total of 300 patient samples obtained from the lower genital tract were tested with this newly designed qPCR assay and compared with culture results. Of the samples, 132 (44.0%) were culture positive, whereas 151 (50.3%) tested positive using qPCR. The U. parvum and U. urealyticum species were present in 79.5% and 12.6% of the qPCR-positive samples, respectively. Both species were found in 7.9% of those samples. Quantification of U. parvum and U. urealyticum in the samples ranged from less than 2.5 × 10(3) to 7.4 × 10(7) copies per specimen. In conclusion, the modified qPCR is a suitable method for rapid detection, differentiation, and quantification of U. parvum and U. urealyticum.     

E.coli O157：H7 LAMP检测方法的建立

目的建立检测E.coli O157：H7环介导的等温扩增方法（LAMP）。方法选取E.coli O157：H7的rfbE基因设计LAMP引物,优化建立LAMP检测体系。并用该体系和国标法对76份人工污染样品进行了检测。结果所建立的E.coli O157：H7 LAMP体系具有良好的特异性,用该体系对9属13种41株菌进行检测,结果只有E.coli O157：H7的扩增产物电泳结果为阶梯状条带,非E.coli O157：H7均未产生扩增产物,灵敏性为2.7×101CFU/mL。样品及培养基对反应体系没有影响或影响很小。对76份样品进行了检测,E.coli O157：H7 LAMP检测方法与国标法的总符合率为96.1%,2h内即可完成检测。结论本研究建立的E.coli O157：H7的LAMP法不但解决了分子生物学检测对实验室仪器设备的高要求问题,而且检测方法简便、快捷,非常便于基层实验室和现场检测使用。