多波长HPLC法同时测定青黛药材中靛蓝和靛玉红的含量

目的:利用多波长高效液相色谱法,建立同时测定青黛药材中2种有效成分(靛蓝和靛玉红)含量的方法,并对其质量特征进行分析.方法:采用HPLC法,Phenomenex C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),柱温30 ℃;以甲醇-水溶液(70∶30)为流动相洗脱,流速1.0 ml/min;检测波长286 nm(检测靛蓝)、292 nm(检测靛玉红),同时测定不同产地青黛药材中靛蓝和靛玉红含量.结果:在20 min内青黛中靛蓝和靛玉红2种有效成分被完全分离.靛蓝在5.19～83.04 μg/ml范围内线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率为100.46％,RSD为2.18％;靛玉红在0.364～5.825 μg/ml范围内线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率为101.57％,RSD为2.22％.结论:本方法合理、便捷、快速简便、准确、重复性好,能同时测定青黛中靛蓝和靛玉红含量,符合现行《中国药典》简便、快速、准确的要求.     

HPLC测定青黛中的靛蓝和靛玉红

目的 建立青黛中靛蓝和靛玉红含量的测定方法.方法 采用HPLC法定量分析,色谱柱为DiamonsilTM C18(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为甲醇-水(80:20),流速为1.0 ml·min-1,柱温为30℃;靛蓝的检测波长为287 nm,靛玉红的为292 nm.结果 靛蓝0.07～0.52 μg(r=0.9996)、靛玉红0.02～0.20 p,g(r=0.9999)与峰面积的线性关系良好(r=0.9996),其平均回收率分别为100.9%(RSD=1.42%,n=6)、101.3%(RSD=1.87%,n=6).结论 所建方法可用于青黛中靛蓝和靛玉红的含量测定,为完善青黛的质量标准提供了依据.     

复方苦参汤抗溃疡性结肠炎活性成分的初步研究

目的研究复方苦参汤抗溃疡性结肠炎的活性成分。方法采用系统溶剂法、硅胶柱层析、中压制备液相、制备液相、重结晶等仪器方法,对复方苦参汤水煎液进行分离纯化和结构鉴定。并通过考察各化合物对LPS刺激RAW 264.7细胞产生的NO的抑制作用,对各化合物的抗NO活性进行筛选。结果从复方苦参汤中分离得到7个化合物,化合物1~7经鉴定分别为苦参碱、氧化苦参碱、靛蓝、靛玉红、没食子酸、甘草苷和甘草酸。并筛选出4个活性成分。结论初步确定复方苦参汤抗溃疡性结肠炎的活性成分为苦参碱、氧化苦参碱、靛蓝及靛玉红。     

药用青黛的质量考察

目的对市售青黛药材质量进行考察,为客观、全面控制青黛药材的质量提供科学依据。方法参照现行《中国药典》方法对16批青黛样品性状、总灰分、酸不溶性灰分和靛蓝、靛玉红含量进行测定,并综合分析。结果目前市场上青黛的质量存在较大差异,一些样品检测不到质量标准规定的指标成分靛蓝、靛玉红。结论青黛药材质量问题严重,应完善其质量标准,规范、优化生产工艺,保证质量。     

靛玉红含量测定方法的研究

靛玉红(indirubin)系中药青黛治疗慢性粒细胞白血病的有效成分,目前已用半合成和全合成两种方法进行试制生产,并正在进一步扩大临床实验。为了控制产品质量,我们对靛玉红含量测定方法进行了研究。 文献报道的靛玉红测定方法,我们发现测定结果往往偏高。据推测在靛玉红的合成过程中,可能生成一些靛玉红的同分异构体——靛蓝和靛棕,经硅胶G薄层层析,确证这两种     

板蓝根和大青叶不同部位的靛蓝、靛玉红含量测定及其部分成分的抗内毒素作用比较(摘要)

板蓝根和大青叶主要来源于十字花科植物菘蓝 (IsatisindingticaFort.)的根和叶 ,是我国的常用中药 ,具有清热、解毒、凉血的功效。以板蓝根和大青叶为主要原料的制剂在我国应用广泛 ,近年来发现板蓝根具有抗内毒素的活性 ,临床上可用作抗菌和抗病毒药 ,但其制剂的质量控制却一直未能很好解决。通常人们认为菘蓝的根中含有靛蓝和靛玉红 ,在评价板蓝根制剂的质量时 ,以靛蓝、靛玉红作为板蓝根制剂的质控指标。但也有人认为不应以这两个成分的含量高低作为板蓝根制剂质量的判别标准。还有人认为大青叶叶柄中不含靛蓝和靛玉红。因此 ,弄清板蓝根中是否含有靛蓝和靛玉红以及这两种成分究竟存在于植物的哪一部位是较为重要的问题。为此 ,我们通过薄层层析法对板蓝根和大青叶药材的根、根茎、叶柄、叶片等部位的氯仿提取液进行了靛蓝、靛玉红的含量进测定 ,并通过HPLC法对菘蓝根和根茎的氯仿提取液中靛蓝、靛玉红的含量进行了含量进测定 ,并通过HPLC法对菘蓝根和根茎的氯仿提取液中靛蓝、靛玉红的含量进行了精密测定。此外 ,我们还运用鲎试剂法对靛蓝、靛玉红及板蓝根中所分得的四种有机酸 :苯甲酸、丁香酸、邻氨基苯甲酸、水杨酸的抗内毒素活性进行...     

青黛中靛玉红含量测定方法的研究

目的建立青黛中靛玉红含量的测定方法,为2005年版《中国药典》提供含量测定控制方法。方法采用薄层扫描法对青黛中靛玉红进行含量测定,以苯-氯仿-丙酮(5∶4∶1)为展开剂,λS=540nm,λR=700nm;同时,采用薄层色谱法对青黛中的靛蓝和靛玉红进行定性鉴别。结果靛玉红的回归方程为y=11.915x 1052.4,r=0.9967;平均回收率为99.40%,(n=8),RSD为3.50%。测得7批青黛样品,含量在0.161%~0.225%之间。结论该方法具有简便、迅速、灵敏、重现性好等特点,可用于控制青黛药材的质量。     

Box-Behnken响应面法优化青黛炮制条件

目的 利用Box-Behnken响应面法优化青黛炮制参数。方法 分别以靛蓝、靛玉红产率为响应值,在单因素试验基础上,采用响应面试验设计方法优化青黛炮制条件。用Expert Design 8.0.6软件分析数据。结果 由回归模型预测的定向生成靛玉红的最佳条件为物料比1：10,盐酸浓度3%,通O₃时间73 s,提取温度79℃,提取时间33 min;在此条件下得到的靛玉红产率为0.758 mg·g^-1。由回归模型预测的定向生成靛蓝的最佳条件为物料比1：10,盐酸浓度3.4%,提取温度79℃,提取时间33 min;在此条件下得到的靛蓝产率为2.07 mg·g^-1。结论 本实验系统优化了定向生成靛玉红、靛蓝的青黛炮制条件,提高了青黛品质。     

基于多成分定量结合化学计量学评价青黛的质量

目的 综合评价青黛的质量,为青黛质量控制提供参考。方法 采用超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱（UPLC-MS/MS）法同时测定不同产地青黛中6个吲哚生物碱（靛蓝、靛玉红、靛红、色胺酮、吲哚、吲哚-3-甲醛）的含量,采用聚类分析、主成分分析、偏最小二乘法-判别分析（PLS-DA）对不同产地的青黛质量进行评价。结果 不同产地青黛中靛蓝、靛玉红、靛红、色胺酮、吲哚、吲哚-3-甲醛含量的范围分别为20 320.83～26 585.01、1 327.69～3 102.25、141.69～894.50、2.17～5.27、2.14～5.93、1.69～4.34μg/g。聚类分析将不同产地的青黛聚为2类,S1、S2、S4、S6、S7、S9、S10号样品聚为Ⅰ类,S3、S5、S8、S11、S12号样品聚为Ⅱ类。用3个主成分对不同产地青黛进行评价,结果显示,Ⅰ类样品得分较高,质量较优,Ⅱ类样品得分较低,质量较差。PLS-DA结果显示,靛蓝、靛玉红、色胺酮、靛红是体现青黛质量差异的主要物质。结论 不同产地的青黛质量差异较大,且同一产地不同批次的青黛质量不稳定。本文所建立的青黛质量评价方法稳定可靠,可为青...     

HPLC法同时测定青黛有效成分靛蓝和靛玉红的含量

目的：以HPLC法同时测定青黛中有效成分靛蓝和靛玉红的含量,为《中国药典》2010年版一部中关于青黛饮片质量标准的制定提供依据。方法：采用HPLC法,分别对系统适用性、准确度、重复性、专属性、线性范围、耐用性进行研究;分别考察样品制备的提取方法、提取溶媒、提取时间、溶媒用量;比较本法与《中国药典》2005年版方法。结果：本方法的系统适用性、准确度、重复性、专属性、线性范围、耐用性均符合要求;12批各地样品中靛蓝的含量为（1．70±0．04）％～（3．33±0．15）％,靛玉红的含量分别为（0．09±0．01）％～（0．30±0．01）％;本法测定的靛蓝和靛玉红的含量分别为《中国药典》2005年版方法的1．02倍和1．52倍。结论：本法科学、合理、可行;能同时测定青黛中靛蓝和靛玉红含量,符合现行药典简便、快速、准确的要求。     

马蓝种质资源研究进展

马蓝,广泛分布于我国西南、华南及华东地区,是重要的爵床科药用植物。由其茎、叶加工而成的青黛,以福建产品质最佳,被誉为建青黛,是福建道地药材。马蓝的根入药称南板蓝根,与青黛一起同为《中华人民共和国药典》药材品种。青黛及其原植物马蓝的指标性成分靛玉红（indirubin）是具有抗白血病功效的中成药“黄黛片”及“当归龙荟丸”的主要活性成分。笔者主要综述了马蓝种质资源的分布、生物学特征、栽培技术和分子生物学等国内外研究进展,并提出了马蓝种质资源面临的主要问题,为马蓝及青黛的相关研究与应用提供参考依据。     

Comparative study of aryl hydrocarbon receptor ligand activities of six chemicals in vitro and in vivo

The aryl hydrocarbon receptor (AhR) ligand activities of six known AhR ligands were compared in vivo and in vitro. The in vivo ligand activity was estimated in terms of induction of cytochrome P450 1A1/2 activities, i.e., ethoxyresorufin-O-dealkylase (EROD) and methoxyresorufin-O-dealkylase (MROD) activities, and in vitro ligand activity was evaluated with a recombinant yeast reporter gene assay. The test chemicals were 3-methylcholanthrene (MC), β-naphthoflavone (β-NF), indirubin, indigo, 3,3′-diindolylmethane (DIM) and diphenyl-p-phenylenediamine (DPPD). The first four showed potent AhR ligand activity in vitro, comparable with that of 2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin, while DIM and DPPD showed weaker activity. Administration of MC and β-NF to mice caused significant induction of EROD and MROD activities, while indirubin, indigo and DIM also induced these activities, but less potently. DPPD also induced the activities, but was toxic at higher doses. These enhancing effects were lost or greatly reduced in Ahr-null mice (Ahr ^−/−). Our results suggest that EROD and MROD activity assays are useful for evaluating the AhR ligand activity of chemicals in vivo, where the biodynamics of the chemicals plays an important role.     

双波长分光光度法测定青黛中靛蓝和靛玉红含量的研究

本文采用双波长分光光度法不经分离直接测定中药青黛中靛蓝和靛玉红的含量,并在普通单波长分光光度计上进行双波长法测定。本法操作简便、快速,准确度和精密度较好,为青黛的质量控制提供新的分析方法。     

高效液相色谱法同时测定马蓝根、茎、叶中4种成分的含量及其3种不同干燥方法的评价

目的：建立高效液相色谱法测定马蓝根、茎、叶中靛蓝、靛玉红、色胺酮、异鼠李素4种成分的含量,并对其烘干、阴干、冻干3种不同干燥方法进行评价。方法：采用Agilent 1200高效液相色谱仪,色谱柱为迪马Diamonsil C₁₈柱,流动相为0.2%甲酸甲醇溶液-0.2%甲酸水溶液的梯度溶液,流速为1.0 mL·min^-1,检测波长为289 nm,柱温为25℃,进样量为10 μL。结果：测定了36份分别采用烘干、阴干、冻干进行干燥处理的4个批次的马蓝根茎叶样品。马蓝根中仅能够检测出色胺酮。马蓝茎中能够同时检测出靛蓝、靛玉红、色胺酮。马蓝叶中能够同时检测出靛蓝、靛玉红、色胺酮、异鼠李素。3种不同干燥方法中,冻干法分别处理的马蓝茎、叶中靛蓝含量相对最高。3种不同干燥方法分别处理的马蓝茎、叶中靛玉红含量基本一致。阴干法分别处理的马蓝根、茎、叶中色胺酮含量相对最高。烘干法、冻干法分别处理的马蓝叶中异鼠李素含量基本一致,但阴干法处理的未检测到异鼠李素。结论：本方法操作简便快捷、精密准确、灵敏度高,重现性好,适用于马蓝不同部位药材的质量控制。马蓝根、茎、叶的干燥方法应根据其药用部位以及活性成分进行适当选择。     

青黛超临界提取物中靛蓝和靛玉红的含量测定研究

目的 :本文采用磺化—紫外分光光度法及一阶导数紫外分光光度法 ,对青黛药材及青黛超临界提取物进行含量测定。方法 :样品经磺化反应后 ,用零阶光谱在 6 2 3nm波长处测定靛蓝的含量 ,用一阶导数紫外分光光度法在 4 82nm波长处测定靛玉红的含量。结果 :靛蓝的线性范围为 1 14～ 5 32 μg·ml- 1,r=0 9999,平均回收率为 10 1 0 6 % ,RSD为 1 2 7% ,靛玉红的线性范围为 0 5 2～ 5 2 μg·ml- 1,r =0 9999,平均回收率为 10 1 80 % ,RSD为 0 75 % ,放置 8h对含量测定无影响。结论 :测定数批青黛药材及青黛超临界提取物样品 ,其靛蓝含量测定与药典法测定结果无显著差别。     

抗白血病药物靛玉红以及靛蓝和异靛蓝衍生物的合成

靛玉红是我国用于临床治疗慢性粒细胞白血病的一个药物⁽¹⁾。前报⁽²⁾已报道了N_1′取代靛玉红衍生物的合成。为了研究靛玉红分子内氢键(N₁取代)和两个吲哚环连接位置对于抗肿瘤活性的影响。我们合成了N₁-取代和双取代的靛玉红衍生物(Ⅰ₁,Ⅰ₂,Ⅰ₃)和六个靛蓝、异靛蓝衍生物(Ⅱ_1～3,Ⅲ_1～3)。其中,N-乙基靛蓝和N-甲基或乙基异靛蓝都对Walker癌肉癌256具有抑制作用,而它们的母体化合物则没有抗肿瘤活性。N₁-取代的靛玉红(Ⅰ_1～2)无活性,但N,N′-双甲基靛玉红确又有一定的抗肿瘤活性。