定量检测WT-1基因在急性髓细胞白血病的表达水平及其临床意义

目的 通过采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测急性髓细胞白血病(AML)患者WT-1基因的表达情况,分析其表达水平与AML患者亚型关系,及其在AML临床疗效的作用.方法 采用实时荧光定量PCR方法分别检测10例正常人及48例初诊急性髓细胞白血病患者骨髓细胞WT-1基因mRNA的表达水平(拷贝数),将ABL基因作为内参照基因,比较AML组与对照组WT-1基因表达水平的差异性,以WT-1基因表达水平的中位数作为界值,将48例初诊AML分为WT-1基因高表达组和低表达组,并通过高表达组和低表达组间CR1率(初次诱导化疗缓解率)的差异,从而分析WT-1基因表达水平与急性髓细胞白血病预后的关系.结果 对照组WT-1基因表达水平中位数为0.008(0～0.019),AML组WT-1基因表达水平中位数为0.679(0～1.680),WT-1基因在AML骨髓细胞表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.001).WT-1表达对AML患者治疗效果的影响:AML各亚型高表达组与低表达组初次诱导后完全缓解率(CR1率)差异有统计学意义(P＜0.05),WT-1高表达组缓解率低于低表达组,AML患者WT-1基因高表达组疗效比低表达组疗效差.结论 WT-1基因可作为AML微小残留病(MRD)的分子标志,也可作为AML预后分层的分子学指标.     

SHP-1和JAK3基因在成人急性髓系白血病患者中的表达

目的:分析SHP-1基因和JAK家族基因在成人急性髓系白血病(AML)患者中的表达及相关性,以探讨两者在AML发病机制中的作用。方法:选取初发急性髓系白血病患者93例及健康志愿者或完全缓解(CR)患者20例为研究对象,分别应用荧光定量聚合酶链(FQ-PCR)和反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测骨髓单个核细胞中SHP-1和JAK3基因的mRNA表达情况,并分析两者的相关性及其与预后的关系。结果:SHP-1在AML患者中的表达水平明显低于完全缓解组和健康对照组(P<0.01),而JAK3表达水平明显高于完全缓解组和健康对照组(P<0.05);SHP-1和JAK3在mRNA水平方面呈现负相关(P<0.05)。结论:SHP-1可能是白血病的抑癌基因,AML细胞中SHP-1与JAK3的mRNA表达呈负相关,这种负调控作用的机制有待进一步研究。     

急性白血病P16基因mRNA表达水平的研究

目的研究P16基因mRNA的表达水平与急性白血病发生发展及预后的相关性。方法采用荧光实时定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测50例急性白血病患者P16基因mRNA表达水平。结果急性白血病患者P16基因mRNA表达水平明显低于正常人mRNA表达水平（P〈0.001）。其中急性淋巴细胞白血病mRNA表达水平又低于急性髓细胞性白血病（P〈0.05）。初诊组、难治复发组、初诊组、完全缓解组与正常对照组mRNA表达水平依次升高（P〈0.05）。初诊组中完全缓解组mRNA表达水平高于未完全缓解组（P〈0.001）。结论P16基因表达缺陷在急性白血病的发生、发展中起重要作用,且与白血病患者的治疗和预后有一定关系。     

DJ-1基因在急性髓系白血病中的表达及其临床意义

目的 探讨DJ-1基因在非急性早幼粒细胞白血病(APL)的急性髓系白血病(AML)患者骨髓单个核细胞中的表达、临床特征和其对预后的影响.方法 收集135例患者骨髓标本,采用实时荧光定量PCR检测DJ-1表达水平,分析其与临床特征及预后的相关性.结果 在mRNA水平上,初治组与复发难治组的DJ-1表达水平明显高于正常对照组及缓解组(P<0.01);初治组与复发难治组的DJ-1表达水平无明显差异(P>0.05);缓解组DJ-1表达水平与对照组差异不明显(P>0.05);初治组中DJ-1的水平与白细胞计数高低有关(P<0.01),而与患者的年龄、性别、贫血程度、血小板计数高低、幼稚细胞高低、FAB分型、WHO分型无统计学差异(P>0.05).结论 DJ-1基因在初治及复发难治非APL的AML患者中存在高表达,缓解组表达下降,且初诊患者中DJ-1的表达与患者白细胞高低有相关性.     

急性髓系白血病患者hDMP1表达特点及临床意义

目的探讨人类细胞周期调节蛋白依赖性Myb样蛋白1(hDMP1)在急性髓系白血病(AML)中的表达及其临床意义。方法 93例初诊AML患者及19例健康志愿者(对照组)骨髓标本,以β胆色原脱氢酶(GAPDH)表达水平为内参,应用实时定量RT-PCR方法检测hDMP1及肾母细胞瘤基因(WT1)的表达水平。分析hDMP1表达水平与患者临床资料、染色体核型的关系。结果AML患者骨髓细胞中hDMP1在表达水平较对照组显著降低(476.6vs.2103.0)(P<0.01),WT1基因表达水平较对照组显著升高(202.6vs.1.2)(P<0.01)。hDMP1和WT1基因表达水平与患者性别、年龄、有无肝脾淋巴结肿大、起病时外周血WBC计数、骨髓中原始细胞比例、AML亚型、染色体核型分组无关。结论 AML患者hDMP1的低表达伴随WT1基因高表达,两者均参与AML发病。     

急性髓细胞白血病组蛋白乙酰化修饰及其对过氧化还原酶基因表达的调控作用

目的探讨急性髓细胞白血病(AML)患者组蛋白乙酰化修饰规律,并研究组蛋白乙酰化对过氧化还原酶(PRDX2)基因差异表达的调控作用。方法应用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术检测55例AML患者和20例非白血病患者单个核细胞(MNC)的PRDX2mRNA的表达,应用蛋白印迹法检测乙酰化H3表达情况。结果 AML组mRNA表达量较对照组明显下降,差异有统计学意义(t=-4.89,P<0.05);2组乙酰化H3相对表达量为2.2±1.0,3.2±0.9,差异有统计学意义(t=-3.94,P<0.05);AML组患者组蛋白H3乙酰化水平与PRDX2基因mRNA呈正相关(r=0.358,P=0.007)。结论 AML患者的组蛋白乙酰化呈低表达现象,组蛋白乙酰化在AML患者中对PRDX2基因差异表达具有调控作用。     

白血病抑制因子基因在急性白血病患者中的表达及意义

目的 研究急性白血病(acute leukemia,AL)患者外周血白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)mRNA的表达水平及其与AL病情、疗效和预后的关系.方法 采用逆转录聚合酶链反应(RT PCR)检测37例不同类型以及同一类型不同阶段AL患者[初治患者16例(初治亚组)、完全缓解患者12例(完全缓解亚组)、复发患者9例(复发亚组)]LIF的mRNA的表达水平,并与20例健康者(对照组)比较.结果 初治亚组LIF基因mRNA阳性表达率低于对照组和完全缓解亚组(P<0.05);复发亚组LIF基因mRNA阳性表达率低于完全缓解组(P<0.05);复发亚组与初治亚组比较及完全缓解亚组与对照组比较,LIF基因mRNA阳性表达率差异无统计学意义(P>0.05);LIF基因表达率在急性髓系白血病(AML)和急性淋巴细胞白血病(ALL)患者间无显著性差异(P>0.05).结论 LIF基因表达水平与AL患者病情变化密切相关.检测AL患者LIF基因表达情况,为AL患者检测病情、疗效评价、指导临床用药和预后判断,提供了一定的理论依据.     

急性白血病患者血清IFN-γ、TGF-β、IL-6和IL-17水平及临床意义

目的 研究急性白血病患者血清干扰素-γ(IFN-γ)、转化生长因子-β(TGF-β)、白介素-6(IL-6)和IL-17表达情况以及临床意义.方法 选取2014年4月-2016年3月收治的96例急性白血病患者为观察对象,按FAB分型标准分为急性淋巴细胞白血病(ALL)组35例,急性髓细胞白血病(AML)组61例.另选同期健康体检者96例为对照组.采用酶联免疫吸附法检测急性白血病患者治疗前后及对照组血清IFN-γ、TGF-β、IL-6和IL-17的表达情况.结果 治疗前,ALL组与AML组血清IFN-γ水平明显低于对照组(P＜0.05),TGF-β、IL-6、IL-17水平明显高于对照组(P＜0.05).ALL组血清IFN-γ与IL-6水平高于AML组(P＜0.05).ALL组和AML组治疗后,完全缓解患者血清IFN-γ水平高于未缓解患者(P＜0.05),TGF-β、IL-6和IL-17水平低于未缓解患者(P＜0.05).ALL组和AML组中,IFN-γ与TGF-β、IL-6和IL-17呈负相关(P＜0.05),TGF-β与IL-6和IL-17呈正相关(P＜0.05),IL-6与IL-17呈正相关(P＜0.05).结论血清IFN-γ 、TGF-β、IL-6和IL-17与急性白血病的发生、发展有关,可作为临床诊断急性白血病与评价其预后的重要指标.     

抗凋亡蛋白Livin在急性白血病中的表达

目的 研究Livin在急性白血病中的表达,探讨其临床意义.方法 采用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT PCR)检测40例急性白血病(AL)患者(AL组)Livin mRNA的表达水平,其中初治患者16例(初治亚组)、复发患者11例(复发亚组)、完全缓解患者13例(缓解亚组).另选10例健康人(对照组)的标本作正常对照.结果 初治亚组中Livin mRNA的表达较对照组明显升高(P＜0.05),治疗缓解后的表达水平下降(P＜0.05),复发时又再次升高;初治亚组Livin阳性的患者缓解率(14.3%)低于表达阴性的患者(77.8%)(P＜0.05).Livin mRNA的表达与AL患者性别、年龄无关(P＞0.05).结论 Livin基因的过度表达参与了AL的发病,并且是AL复发的高危因素.Livin基因的高表达是判断AL预后不良的指标之一.     

老年急性髓细胞白血病患者FLT3表达的意义

目的研究老年急性髓细胞白血病（AML）患者Fms样的酪氨酸激酶3（FLT3）的表达水平,探讨其在老年AML中的作用机制及临床意义。方法采用半定量RT-PCR方法检测36例老年AML和11例良性血液病为对照组FLT3表达水平。结果36例老年AML组表达水平明显高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．001）;复发难治组最高,初治组居中,完全缓解组最低,三者表达水平具有显著性差异（P〈0．05）。结论FLT3在老年AML中存在过度表达,提示FLT3在老年AML的发病机制中有一定作用。FLT3表达水平与疾病进展及预后相关。在检测微小残留病,估计残留白血病细胞负荷量,也可能有一定价值。