可溶性gp130(sgp130)在IL-6/IL-6R系统中的生物学作用研究

目的：在成功克隆、表达和纯化人可溶性ｇｐ１３０（ｓｇｐ１３０）分子的基础上,研究ｓｇｐ１３０在白介素６（ＩＬ６）／白介素６受体（ＩＬ６Ｒ）系统中的生物学作用。方法：采用转人膜型ｇｐ１３０的ＢＡＦ１３０细胞和人多发性骨髓瘤（ＭＭ）细胞株ＸＧ４ＣＮＴＦ和分离得到新鲜ＭＭ细胞,通过３ＨＴｄＲ的掺入做生物学检测,观察ｓｇｐ１３０在上述细胞上对ＩＬ６生物学活性的影响。结果：ｓｇｐ１３０对ＩＬ６和可溶性ＩＬ６Ｒ引起ＢＡＦ１３０细胞的增殖有抑制作用。此外,ｓｇｐ１３０对ＩＬ６刺激ＸＧ４ＣＮＴＦ细胞和分离得到新鲜ＭＭ细胞的增殖也有抑制作用。结论：ｓｇｐ１３０为ＩＬ６的拮抗剂。     

可溶性gp130对白血病抑制因子和制瘤素的拮抗作用

在研究可溶性ｇｐ１３０（ｓｇｐ１３０）分子对ＩＬ ６／ＩＬ ６Ｒ作用的基础上,继续研究了ｓｇｐ１３０对ＩＬ ６家族细胞因子白血病抑制因子（ＬＩＦ）和制瘤素（ＯＭ）的生物学作用。结果显示,ｓｇｐ１３０对ＬＩＦ和ＯＭ刺激的人多发性骨髓瘤（ＭＭ）细胞株ＸＧ４ ＣＮＴＦ的增殖有抑制作用。此外,ｓｇｐ１３０对ＬＩＦ和ＯＭ刺激表达ＬＩＦ受体的新鲜ＭＭ细胞的增殖也有抑制作用,提示ｓｇｐ１３０也可为ＬＩＦ和ＯＭ的拮抗剂。     

gp130单克隆抗体B-S12的生物学特性研究

研究ｇｐ３０单克隆抗体Ｂ－Ｓ１２的生学特性。方法用细胞计数和＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入的方法观察人多发性骨髓瘤细胞株ＸＧ－１和ＸＧ－２在抗ｇｐ１３０的单抗Ｂ－Ｓ１２与它们的Ｆａｂ片段和Ｆ（ａｂ’）２片段作用下，细胞增殖和生长情况；此外，也观察ｇｐ１３０单抗Ｂ－Ｐ８以及ＩＬ－６和ＩＬ－６Ｒ单抗Ｂ－Ｅ８和Ｂ－Ｒ６对Ｂ－Ｓ１２单抗在这２个细胞株上作用的影响。结果Ｂ－Ｓ１２可刺激ＸＧ－１和ＸＧ－２细胞增殖，并维持     

分泌抗rHuIL—6McAb杂交瘤细胞系的建立及其应用研究

应用常规方法建立了４株稳定分泌抗重组人ＩＬ－６（ｒＨｕＩＬ－６）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）小鼠杂交瘤细胞系１Ｈ３、２Ａ１０、３Ａ３和４Ｂ１。其中，１Ｈ３为ＩｇＧ２ｂ（Ｋ），２Ａ１０为ＩｇＧ１（Ｋ），３Ａ３和４Ｂ１为ＩｇＧ２ａ（Ｋ）。４株ＭｃＡｂ特异性强，与细胞因子ＩＬ－１β、ＩＬ－３、ＩＬ－８、ＴＮＦ－α、ＧＭ－ＳＣＦ、ＩＣＡＭ－１，以及受体菌菌体蛋白成分均无交叉反应。间接ＥＬＩＳＡ测定小鼠腹水ＭｃＡ     

巨细胞病毒感染与可溶性白细胞介素2受体的关系

应用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）对１０４例育龄妇女的血清进行了巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）ＩｇＧ、ＩｇＭ抗体的检测，同时用ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法测定了不同感染状态下血清中可溶性白细胞介素２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）的水平，并将ｓＩＬ－２Ｒ水平与未感染ＨＣＭＶ的正常育龄妇女进行了比较。结果，育龄妇女中抗－ＨＣＭＶＩｇＧ的阳性率为８９．４％，ＩｇＭ的阳性率为９．６％，感染ＨＣＭＶ的妇女血清中ｓＩＬ－２Ｒ水平均大于未感染的对照组（１７８．１±５７．３Ｕ／ｍｌ），Ｐ＜０．０５，其中ＩｇＭ阳性者和ＩｇＭ、ＩｇＧ同时阳性者血清中ｓＩＬ－２Ｒ水平最高，分别为９１０±４６５．６Ｕ／ｍｌ和９０５±３４７．８Ｕ／ｍｌ，两者间的差异无显著性意义（Ｐ＞０．０５），但均大于仅抗－ＨＣＭＶＩｇＧ阳性者（４４６．８±１５８．９Ｕ／ｍｌ），Ｐ均＜０．０５。表明，ＨＣＭＶ感染可致ｓＩＬ－２Ｒ水平升高，并且活动性感染者上升明显。提示：ｓＩＬ－２Ｒ可能参与了ＨＣＭＶ的免疫致病机制。     

分泌抗rHuIL－6McAb杂交瘤细胞系的建立及其应用研究

应用常规方法建立了４株稳定分泌抗重组人ＩＬ－６（ｒＨｕＩＬ－６）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的小鼠杂交瘤细胞系１Ｈ３、２Ａ１０、３Ａ３和４Ｂ１。其中，１Ｈ３为ＩｇＧ２ｂ（ｋ），２Ａ１０为ＩｇＧ１（ｋ），３Ａ３和４Ｂ１为ＩｇＧ２ａ（ｋ）。４株ＭｃＡｂ特异性强，与细胞因子ＩＬ－１β、ＩＬ－３、ＩＬ－８、ＴＮＦ－α、ＧＭ－ＳＣＦ、ＩＣＡＭ－１，以及受体菌菌体蛋白成分均无交叉反应。间接ＥＬＩＳＡ测定小鼠腹水ＭｃＡｂ效价为１０（－６）～１０（－８）。应用识别不同表位的ＭｃＡｂ建立了双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法检测ＩＬ－６，敏感性为１００ｐｇ／ｍｌ。初步应用表明可用于临床标本的检测。     

人巨细胞病毒感染对肾移植受者血清sIL－2R水平的影响

用ＰＣＲ检测ＨＣＭＶ－ＤＮＡ，ＥＬＩＳＡ法检测ＨＣＭＶ－ＩｇＭ及ＩｇＧ，以诊断肾移植受者ＨＣＭＶ感染。用双抗体夹心法ＥＬＩＳＡ检测６５例肾移植受者血清ｓＩＬ－２Ｒ水平，结果表明：ＨＣＭＶ感染后宿主血清ｓＩＬ－２Ｒ水平明显增高（Ｐ＜０．０１），且ＨＣＭＶ疾病组ｓＩＬ－２Ｒ增高程度大于无症状感染组（Ｐ＜０．０１）；６例原发性ＨＣＭＶ感染者ｓＩＬ－２Ｒ水平与ＩｇＭ水平呈正相关（ｒ＝０．９９０８），提示随感染程度增加，血清ｓＩＬ－２Ｒ水平随之增高，还发现血清ｓＩＬ－２Ｒ水平与Ｃ９４／ＣＤ８比值是负相关（ｒ＝－０．９７８９），说明ＨＣＭｖ感染后ｓＩＬ－２Ｒ水平增高与Ｔ细胞亚群改变有关，反之也说明ｓＩＬ－２Ｒ增高程度可表明体内免疫抑制状态。对于ＨＣＭＶ感染后血清ｓＩＬ－２Ｒ水平增高的机理有待进一步探讨。     

体外培养的人胸腺上皮细胞与胸腺细胞的相互作用

人胸腺上皮细胞（ＴＥｃ）的体外培养和传代，使研究人ＴＥｃ的特性和功能成为可能。人ＴＥｃ体外培养成功的关键是抑制成纤维细胞的生长。体外培养的人ＴＥｃ除表达角蛋白外，还表达ＨＬＡ－Ｉ类抗原、ＬＦＡ－３，ＩＣＡＭ－１和ＣＤ４０等表面抗原；可分泌ＩＬ－１，ＩＬ－６，ＩＬ－８，ＧＭ－ＣＳＦ，Ｇ－ＣＳＦ和Ｍ－ＣＳＦ等多种细胞因子和胸腺素；静息的胸腺细胞与ＴＥＳ的结合由ＣＤ２／ＬＦＡ－３介导，激活的胸腺细胞与ＴＥＣ的结合由ＣＤ２／ＬＦＡ－３和ＬＦＡ－１／ＩＣＡＭ－１共同介导；ＴＥＣ对成熟的胸腺细胞有辅助增殖的作用，对不成熟的胸腺细胞有直接激活作用：胸腺细胞可通过直接作用和分泌细胞因子的间接作用来调节ＴＥＣ的细胞因子分泌和表面抗原表达。     

造血生长因子促进RV介导LacZ-NeoR基因在人骨髓造血细胞中转染的机制

目的：本文探索了不同组合的造血生长因子ＳＣＦ、ＩＬ３及ＩＬ６对逆转录病毒（ＲＶ）介导的ＬａｃＺ－ＮｅｏＲ双标志基因转染人骨髓造血细胞转染效率、表达水平的影响及其相关机理。方法：采用ＲＶ转染人骨髓非粘附造血细胞（ＮＡＢＭＣ）及经ＳＣＦ、ＩＬ３及ＩＬ６不同组合预激４８ｈ后的ＮＡＢＭＣ。经荧光素二－β－Ｄ－半乳糖呋喃苷脂（ＦＤＧ）标记的半乳糖苷酶、Ｇ４１８ＲＣＦＵ－ＧＭ及ＰＣＲ／Ｓｏｕｒｔｈｅｒｎ－ｂｌｏｔ检测ＮｅｏＲ和ＬａｃＺ基因的表达。结果：早期造血生长因子（ＨＧＦｓ）的预激明显改善了ＲＶ介导的ＬａｃＺ－ＮｅｏＲ基因在人骨髓造血细胞中的转染效率与表达水平,ＳＣＦ＋ＩＬ３＋ＩＬ６＞ＳＣＦ＋ＩＬ３＞ＩＬ３＋ＩＬ６＞ＳＣＦ＋ＩＬ６。氚标记脱氧胸苷（３Ｈ－ＴｄＲ）自杀及５－溴脱氧尿苷－碘化丙啶（ＢｒｄＵ－ＰＩ）双标流式细胞仪（ＦＣＭ）检测显示,ＨＧＦｓ预激后人骨髓造血细胞及ＣＦＵ－ＧＭ的Ｓ期比例显著提高。结论：ＳＣＦ＋ＩＬ３＋ＩＬ６的联合预激可显著改善ＲＶ介导的外源基因在人骨髓造血细胞中的转染效率与表达水平,这可能与ＨＧＦｓ预激后明显提高人骨髓造血细胞及ＣＦＵ－ＧＭ的Ｓ期比例密切相关     

IL—6在诱导M1白血病细胞分化后凋亡中的应用

目的 探讨ＩＬ－６能否诱导Ｍ１小鼠急性髓样白血病细胞凋亡及其分子机制。方法 透射电镜观察细胞形态判断有无凋亡发生：ＲＴ－ＰＣＲ及狭缝杂交分析ｂｃｌ－２家族成员表达水平的改变。结果：ＩＬ－６诱导Ｍ１细胞向巨噬细胞方向分化后，Ｍ１细胞发生凋亡；ｂｃｌ－２，ｂｃｌ－ＸＬ在ＩＬ－６诱导下表达下调，ｂａｘ表达上调，结论ＩＬ－６诱导Ｂｃｌ－２／Ｂａｘ比例改变，使Ｍ１细胞分化后凋亡。