系统性红斑狼疮患者B淋巴细胞EBV-LMP1和ZEBRA的表达研究

目的：探讨ＥＢＶ－ＬＭＰ１和ＺＥＢＲＡ在系统性红斑狼疮患者（ＳＬＥ）的表达情况。方法：间接荧光免疫标记，流式细胞仪检测。结果：ＳＬＥ患者Ｂ淋巴细胞中ＥＢＶ－ＬＭＰ１和ＺＥＢＲＡ的表达显著高于正常对照组（Ｐ＜０．０１）。活动期患者ＣＤ２３＋细胞ＥＢＶ－ＬＭＰ１和ＺＥＢＲＡ的表达率均高于ＣＤ１９＋细胞（Ｐ＜０．０１）。非活动期患者ＣＤ２３＋细胞ＥＢＶ－ＬＭＰ１表达也高于ＣＤ１９＋细胞（Ｐ＜０．０１）。但ＥＢＶ－ＺＥＢＲＡ表达在两亚群间差异没有统计学意义（Ｐ＞０．０５）。结论：朋病毒参与了ＳＬＥ的发病机制，病毒主要以潜伏期状态存在于患者中，病毒复制促进病情发展，检测Ｂ淋巴细胞ＥＢＶ－ＬＭＰ１和ＺＥＢＲＡ的表达率，有助于病情活动指标的判断。     

急性和慢性病毒肝炎患者外周血单核细胞免疫反应IL－1产生降低

急性和慢性病毒肝炎患者外周血单核细胞免疫反应ＩＬ－１产生降低英Ｍｕｌｌ－ｅｒＣｈ…／／ＤｉｇＤｉｓＳｃｉ．─１９９３，３８（８）．─４７７～４８１ＩＬ－１产生的变化可能与已知发生于慢性和急性病毒性肝炎患者的细胞免疫调节的改变有关。因此，研究了这些疾病...     

表达2型单纯疱疹病毒糖蛋白D的重组痘苗病毒对动物的免疫效果

用表达２型单纯疱疹病毒（ＨＳＶ－２）糖蛋白Ｄ的重组痘苗病毒（Ｒ－ｇＤ－Ｖ）免疫ＣＢＡ小鼠，通过间接免疫荧光（ＩＦ）（观察小鼠抗体滴度变化）和四甲基偶氮唑蓝法（ＭＴＴ）动态观察细胞毒性Ｔ细胞活性（ＣＴＬ），均见增高并检测了其产生的抗体对动物的保护作用。同时对Ｒ－ｇＤ－Ｖ和２型单纯疱疹病毒（ＨＳＶ－２）产生的二次ＣＴＬ活性进行了比较，结果表明，Ｒ－ｇＤ－Ｖ产生抗体３周达高峰（１：６４０），７周下降为１：３２０，抗体对病毒攻击动物有保护作用，其中和指数（Ｎ）为６３。Ｒ－ｇＤ－Ｖ在鼠体内产生初次ＣＴＬ８ｄ达高峰，１２ｄ后消失；二次ＣＴＬ持续８周之久，且ＣＴＬ活性明显高于初次。Ｒ－ｇＤ－Ｖ和ＨＳＶ－２相比较产生ＣＴＬ在统计学上有差异（Ｐ＜０．０５）。说明Ｒ－ｇＤ－Ｖ能引起体液免疫和细胞免疫，对动物有保护作用。     

逆转录病毒mRNA核输出通道的研究进展

ＨＩＶ－１Ｒｅｖ是一个ＲＮＡ核输因子。它通过Ｒｅｖ、ＡＲＭ与ＲＮＡ相结合，并且通过ＲｅｖＮＥＳ与连有ＲａｎＧＴＰ的Ｃｒｍｌ分子结合然后通过Ｃｒｍｌ与特异核孔蛋白的依次作用，进而导致未拼接或未完全拼接的病毒ＲＮＡ转运到核外。在许多病毒和细胞的蛋白中都已鉴定出含有ＮＥＳ，这些ＮＥＳ具有共同的列特征：Ｌ－Ｘ（２－３）－Ｌ（Ｉ、Ｍ、Ｖ、Ｆ）－Ｘ（２－３）－Ｌ－Ｘ－Ｌ（Ｉ），但也不仅凭借序列的同源性就确定Ｎ     

鼻咽癌细胞株SUNE1中EB病毒LMP1全基因克隆及部分？…

目的 研究广东地区鼻咽癌（ＮＰＣ）细胞株ＳＵＮＥ１中ＥＢ病毒ＬＭＰ１基因的结构特征。方法 利用聚合酶链反应从ＳＵＮＥ１细胞基因组中扩增ＬＭＰ１全长ＤＮＡ,并克隆到ｐｃＤＮＡ３载体中,采用Ｓａｎｇｅｒ双脱氧末端终止法测定ＳＵＮＥ－ＬＭＰ１ ３个外显子及２个内含子覆盖的序列,并与病毒原型Ｂ９５－８－ＬＭＰ１进行比较分析。结果 克隆到ｐｃＤＮＡ３中的ＳＵＮＥ１－ＬＭＰ１全基因长度为２．６ｋｂ,测序长度为     

hGM—CSF基因转导的人胃癌,肝癌细胞研究

ｈＧＭ－ＣＳＦ是一种细胞因子，能通过多种机制激活机体免疫功能。为了研究ｈＧＭ－ＣＳＦ修饰的人肝癌、胃癌细胞的免疫功能的变化，将含该基因的逆转录病毒载体ＬＸＳＮ转染ＰＡ３１７包装细胞，经Ｇ４１８筛选较高滴度病毒分泌株（滴度为１．５×１０４ＣＦＵ／ｍｌ），用病毒上清感染肝癌（ＨＨＣＬ）和胃癌（ＭＫＮ４５），筛选后测ｈＧＭ－ＣＳＦ活性，最高分别为２７１Ｕ／１０６细胞·２４小时和２４３．８０Ｕ／１０６细胞·２４小时。ｈＧＭ－ＣＳＦ基因在肝、胃癌细胞中整合，未发生重排。ＭＨＣ分子测定结果显示经修饰的肝癌ＨＨＣＬ细胞ＭＨＣ分子的表达无改变，而修饰后胃癌细胞ＭＫＮ４５的ＭＨＣⅠ类分子表达明显增加。本实验为今后瘤苗研制提供了资料。     

抗核心脂域McAb对LPS体外诱导细胞释放IL-1及其mRNA表达的影响

采用细胞因子活性检测，Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ及ＲＴ－ＰＣＲ等方法，在体外研究了抗细菌核心糖脂域ＭｃＡｂ（ＥＬ１、ＥＬ３和３Ｈ４）对ＬＰＳ诱导人外周血单核细胞（ｈＰＢＭＣ）释放ＩＬ－１及其ｍＲ－ＮＡ表达水平的影响。结果表明，ＥＬ１、ＥＬ３和３Ｈ４在体外有抑制ＬＰＳ诱导细胞释放ＩＬ－１的作用；Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ及ＲＴ－ＰＣＲ结果证实，这３株ＭｃＡｂ能降低ＩＬ－１ｍＲＮＡ表达的水平；提示抗细菌核心糖脂域ＭｃＡｂ可通过与ＬＰＳ的结合而中和ＬＰＳ作用于效应细胞，从而降低或阻碍了效应细胞中ＩＬ－１ｍＲＮＡ的表达，达到抑制细胞释放ＩＬ－１的作用。     

特异性细胞毒性T细胞检测方法的建立及其在重组痘苗病毒活疫苗细胞免疫研究中的应用

报道了用ＣＢＡ／Ｊ小鼠、Ｌ９２９细胞及ＭＴＴ比色法建立的特异性细胞毒性Ｔ细胞（ＣＴＬ）的检测方法及其在重组痘苗病毒活疫苗细胞免疫研究中的应用。通过检测痘菌病毒特异性初发ＣＴＬ的动态变化及其二次反应ＣＴＬ，表明，本法能较好地检测初发及二次反应ＣＴＬ水平的变化。用本法检测了不同启动子控制下的表达Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒｓ（ＥＢ）病毒膜抗原（ＥＢＶ－ＭＡ）的重组痘菌病毒ＥＢＶ－ＭＡ特异性ＣＴＬ、以及与表达人白细胞介素－２的重组痘苗病毒联合免疫时的ＥＢＶ－ＭＡ特异性ＣＴＬ。结果表明，Ｐ７５００启动子表达的ＥＢＶ－ＭＡ比Ｐ１１０００启动子表达的ＥＢＶ－ＭＡ诱导的ＥＢＶ－ＭＡ特异性ＣＴＬ高，但无显著性差异。当上述重组痘苗病毒与表达人白细胞介素－２的重组痘苗病毒联合免疫时，均能使二者的ＥＢＶ－ＭＡ特异性ＣＴＬ增高，但增高幅度本身及其二者之间均无显著性差异。     

生殖器单纯疱疹病毒感染的快速诊断与病毒分型

采用细胞培养，短时细胞培养（２４ｈ）免疫酶染色及单纯疱疹病毒单克隆抗体（ＨＳＶ－ＭｃＡｂ）酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）方法检测了８１份不同性病患者的生殖器标本，结果常规细胞培养，短时细胞养免疫酶染色及ＥＬＩＳＡ的ＨＳＶ阳性检出率分别为３９．５％，３８．２％和３２．１％（Ｘ＾２＝１．０９６，Ｐ〉０．０５）。与常规细胞培养分离病毒相比，免疫酶染色体技术的灵敏性为９３．７％，特异性为９７．９％，而ＥＬ     

应用YAC探针进行荧光原位杂交检测慢性粒细胞白血病BCR基因重排

为检测慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）中ＢＣＲ基因重排，采用酵母人工染色体（ＹＡＣ）ＤＮＡ的Ｉｎ－ｔｅｒ－Ａｌｕ－ＰＣＲ产物为探针进行荧光原位杂交（ＦＩＳＨ）研究了１０例ＣＭＬ，其中包括初诊患者２例，ＣＭＬ急变并接受化疗２例，α干扰素治疗２例，自体骨髓移植术（ＡＢＭＴ）后３例和Ｐｈ染色体阴性ＣＭＬ１例。同时进行细胞遗传学和ＲＴ－ＰＣＲ检测。结果：９例ＣＭＬ的４６％～１００％的可分析核型显示ｔ（９；２２）易位，其中携带ｔ（９；２２）细胞最少者为１例自体骨髓移植术后８个月的患者，其６４％的分裂相存在ｔ（９；２２），３６％为正常核型；１例Ｐｈ（－）ＣＭＬ未见ＢＣＲ基因易位，而ＲＴ－ＰＣＲ（＋），提示ＡＢＬ基因片段插入２２ｑ１１，造成隐匿性Ｐｈ染色体。结果表明：应用ＹＡＣ探针进行原位杂交的定位明确。ＦＩＳＨ检测微小残留病（ＭＲＤ）比常规细胞遗传学方法更敏感，而且可以完成ＰＣＲ方法不易进行的定量分析。     

SL益生素的免疫促进作用

ＳＬ益生素的免疫促进作用马桂荣，郑宝灿，陈忠科，王涓，王鑫ＳＬ益生素（ＳＬ－ｐｒｏｂｉｏｔｉｃｓ，ＳＬ－ＰＢ）系多株乳酸菌在ＭＲＳ培养基上３７℃厌氧混合培养所得的微生物活菌制剂。我们以１．２５、２．５０和５．００×１０７ＣＦＵ／只的ＳＬ－ＰＢ连续对体...     

IL－10mRNA在SLE患者外周血单个核细胞上的表达

采用随机引物标记法将ＩＬ－１０ｃＤＮＡ标记地高辛甙元（Ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ，ＤＩＧ）作为探针，用点杂交检测正常人和ＳＬＥ患者ＰＢＭＣ表达ＩＬ－１０ｍＲＮＡ量，经图象分析和计算机处理发现ＳＬＥ患者ＩＬ－１０ｍＲＮＡ表达量明显高于正常对照组（０．３３５５±０．０９２／０．１３６２±０．０５３５；Ｐ＜０．００１）。同时我们用ＰＨＡ和ＬＰＳ体外激活正常人ＰＢＭＣ，发现激活的ＰＢＭＣ表达ＩＬ－１０ｍＲＮＡ的量显著高于未经激活的对照组（０．４３８２±０．０７０７／０．１３６２±０．０５３５；Ｐ＜０．００１）。由此推论ＳＬＥ患者体内单个核细胞在体内已被激活，且通过产生ＩＬ－１０来调节患者免疫应答，这一作用可能与ＳＬＥ患者病情的发展有一定的关系。     

用肾综合征出血热病毒结构蛋白体外免疫正常人外周血淋巴细胞制备单克隆抗体

用亲和层析提取的肾综合征出血热病毒（ＨＦＲＳＶ）结构蛋白（５０ｋＤ和６７ｋＤ）为抗原，在体外免疫正常人外周血淋巴细胞（ＰＢＬ）。ＰＢＬ经亮氨酸甲基酯处理后，在含有ｓＰＷＭ－Ｔ、ＩＬ－２及不同浓度抗原的培养基中培养６ｄ，计数存活ＰＢＬ数量。结果表明，在上述体外免疫条件下存活ＰＢＬ的数量与抗原剂量呈正相关。将此体外免疫的ＰＢＬ与人－鼠杂交瘤细胞（Ｋ６Ｈ６／Ｂ５）融合，获得了３株分泌抗ＨＦＲＳＶ人单抗的杂交瘤细胞，表明在体外免疫条件下，正常人ＰＢＬ能够对ＨＦＲＳＶ结构蛋白发生特异性免疫应答。     

EBV-LMP及二甲基亚砜对人鼻咽癌细胞生长分化的影响

目的：研究ＥＢＶ－ＬＭＰ及二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）对人鼻咽癌（ＮＰＣ）细胞体外生长分化的影响。方法：以人高分化鼻咽癌细胞株（ＣＮＥ１）为对象，采用电穿孔基因转染技术，将重组ＥＢＶ－ＬＭＰ表达质粒转染ＣＮＥ１细胞，以载体质粒转染及ＣＮＥ１细胞为对照，用细胞体外增殖实验、流式细胞仪和免疫组化等方法，观察细胞生长分化的变化情况。结果：ＥＢＶ－ＬＭＰ在体外可明显促进ＣＮＥ１细胞的增殖，实验组与空白组及阴性对照组比较Ｐ＜０．０１，实验组Ｓ期细胞明显增多，细胞角蛋白表达显著下降（Ｐ＜０．０５），有向低分化鳞癌发展倾向；ＤＭＳＯ诱导后ＣＮＥ１细胞增殖力明显下降（Ｐ＜０．０１），细胞角蛋白表达显著增高（Ｐ＜０．０１）；ＬＭＰ可明显抑制ＤＭＳＯ对ＣＮＥ１细胞的诱导分化作用，转染细胞诱导后增殖力和角蛋白表达无显著改变（Ｐ＞０．０５）。结论：ＤＭＳＯ可在一定程度上诱导ＣＮＥ１细胞分化；ＥＢＶ－ＬＭＰ对ＣＮＥ１细胞生长有明显的促进作用，可抑制细胞分化及降低细胞对终末分化信号的反应，有助于深入研究ＮＰＣ的发生机理及防治     

48例软组织平滑肌肉瘤的病理及免疫组化研究

目的：研究软组织平滑肌肉瘤（ＬＭＳ）组织学亚型的病理形态特点及其对各种肌源性标记的表达。方法：对４８例软组织ＬＭＳ作为形态学观察、组织学分型和免疫组化研究。结果：其组织学亚型依次分为普通型（Ｃ－ＬＭＳ）（７７．１％）,多形性（Ｐ－ＬＭＳ）（１２．５％）,上皮样（Ｅ－ＬＭＳ）（６．３％）和伴有破骨细胞样巨细胞（ＯＧＣ－ＬＭＳ）（４．２％）;后三种亚型和某些低分子化Ｃ－ＬＭＳ易误诊为恶性纤维组织细胞瘤     

淋巴组织增生性疾病组织中c-myc基因表达及其与EB病毒LMP基因的关系

目的：探讨ｃ－ｍｙｃ基因的表达与淋巴瘤发生及其与ＥＢ病毒ＬＭＰ基因的关系。方法：用免疫组织化学方法，对２１２例以前作过ＥＢ病毒ＬＭＰ（潜伏感染膜蛋白）基因原位杂交检测的淋巴组织增生性疾病组织中ｃ－ｍｙｃ基因的表达进行检测。结果：显示ｃ－ｍｙｃ阳性率霍奇金淋巴瘤（ＨＤ）为８３．６７％、非霍奇金淋巴瘤（ＮＨＬ）为８４．３４％，均显著高于淋巴组织良性增生病例ｃ－ｍｙｃ阳性率（５４．２８％）（Ｐ＜０．０１）；淋巴瘤中ＥＢ病毒ＬＭＰ阳性病例ｃ－ｍｙｃ阳性率（１００％）显著高于ＥＢ病毒ＬＭＰ阴性病例（８０．５６％）（Ｐ＜０．０１）。结论：（１）ｃ－ｍｙｃ的高度表达与淋巴瘤的发生有关。（２）ＥＢ病毒可能通过激活ｃ－ｍｙｃ基因而参与淋巴瘤的发生。     

抗肾综合征出血热病毒人单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及初步鉴定

以亲和层析技术纯化的肾综合征出血热病毒（ＨＦＲＳＶ）结构蛋白（５５０００，６７０００）为特异性抗原，体外免疫正常人外周血淋巴细胞（ＰＢＬ），然后将体外免疫的淋巴细胞与人－鼠种间杂交瘤细胞（Ｋ６Ｈ６／Ｂ５）融合，经ＥＬＩＳＡ间接法筛选出２株（２Ｄ５，１Ｂ７）分泌抗－ＨＦＲＳＶ人单克隆抗体（Ｈ－ＭｃＡｂ）杂交瘤细胞株，４次克隆化后，１００％阳性。对２Ｄ５株初步鉴定表明，其抗体类型为ＩｇＧ１；培养上清中抗体浓度为２０～３０μｇ／ｍｌ；特异性免疫荧光反应证明２Ｄ５株Ｈ－ＭｃＡｂ是ＨＦＲＳＶ特异性；中和效价为１∶１６０；体外连续传代６个月仍稳定分泌抗体。     

育龄妇女人巨细胞病毒初次感染诱导的免疫对再次感染的保护作用

育龄妇女人巨细胞病毒初次感染诱导的免疫对再次感染的保护作用［英］／ＡｄｌｅｒＳＰ．．．ＪＩｎｆｅｃｔＤｉｓ．－１９９５，１７１（１）．－２６～３２研究表明，母体免疫对新生儿人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）感染有保护作用。为研究野型病毒或疫苗诱导的免疫对ＨＣＭ...     

EB病毒编码的RNA及EB病毒潜在膜蛋白在中线T淋巴瘤中的表达

应用免疫组化和原位杂交技术及抗ＥＢ病毒潜在膜蛋白（ＬＭＰ－１）单克隆抗体和ＥＢ病毒编码的ＲＮＡ（ＥＢＥＲ－１）探针对９例中线Ｔ淋巴瘤（ＭＴＬ）进行了ＥＢ病毒（ＥＢＶ）检测。结果显示：８例肿瘤细胞核ＥＢＥＲ－１阳性；７例肿瘤细胞膜和胞浆ＬＭＰ－１阳性。结果表明：（１）ＥＢＶ与我国的ＭＴＬ存在密切关系，很可能在其发病中起着重要作用；（２）ＥＢＶ在ＭＴＬ的检出率高于全身其它部位和其它类型的周围型Ｔ淋巴瘤；（３）ＥＢＥＲ－１原位杂交和ＬＭＰ－１免疫组化在检测ＭＴＬ中ＥＢＶ方面都很敏感、可靠，而后者更经济简便。     

PA—MSHA菌毛株疫苗对三种癌症患者免疫疗效的？…

目的 主宰绿脓杆菌－甘露糖敏感血凝（ＰＡ－ＭＳＨＡ）菌毛株疫苗是一种能有效提高和调节多种疾病患者的免疫功能,改善免疫调节机制,增强免疫力的新型细菌性免疫调节剂（或称ＰＡＭＳＨＡ免疫调节剂）。方法 用该疫苗对３０１例癌症（急性白血病、恶性淋巴瘤及肺癌）患者的治疗过程中的１２项免疫指标变化的临床疗效加以比较。结果 免疫综合疗效的总有效率,急性白血病为８７．１％;恶性淋巴瘤为７７．７８％;肺癌为８４．０