曲美他嗪影响巴马小型猪冠状动脉微栓塞后心肌细胞凋亡的机制

目的　探讨曲美他嗪对巴马系小型猪急性冠状动脉微栓塞（CME）后心肌细胞凋亡的影响及意义。方法　健康巴马系小型猪随机分为假手术组、CME组和CME+曲美他嗪组,每组5只。采用经皮冠状动脉介入法,于左前降支中远端经微导管注入微栓塞球建立CME模型;假手术组注入等量生理盐水;CME+曲美他嗪组术前30　min经耳缘静脉注入曲美他嗪。术后9　h采用心脏超声检测心功能,TUNEL染色检测心肌细胞凋亡,Western　blot检测活化Caspase-8和Caspase-3表达水平。结果　与假手术组相比,CME组左心室射血分数（LVEF）、左心室短轴缩短率（FS）及心排血量（CO）下降,左心室舒张期末内径（LVEDd）增加（P<0.05）;与CME组相比,CME+曲美他嗪组心功能明显改善（P<0.05）。与假手术组相比,CME组心肌细胞凋亡率、活化Caspase-8及Caspase-3含量显著增加（P<0.05）;与CME组相比,CME+曲美他嗪组心肌细胞凋亡率、活化Caspae-8及Caspase-3含量明显减少（P<0.05）。结论　曲美他嗪预处理可明显减少CME后心肌细胞凋亡并改善心功能,其机制可能是阻断心肌细胞Caspase-8介导的死亡受体凋亡途径的激活。     

程序性细胞死亡因子4与猪冠状动脉微栓塞致心功能损伤的关系及机制研究

目的:探讨巴马系小型猪冠状动脉(冠脉)微栓塞(CME)致心功能损伤与程序性细胞死亡因子4(PDCD4)表达的动态变化及关系。方法:60头巴马系小型猪经微导管左前降支注入微栓塞球构建冠脉微栓塞组;注射生理盐水构建假手术组,每组小型猪均为30只。每组小型猪随机分为0 h、3 h、6 h、9 h、12 h、24 h六个不同时间点观察(每个时间点小型猪均为5头)。应用心脏超声心动图检测心功能指标;组织病理切片苏木素-伊红(HE)染色和苏木素碱性复红苦味酸(HBFP)染色进行梗死区域测量;荧光定量多聚酶链反应(PCR)检测心肌组织PDCD4与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mR NA表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测心肌组织PDCD4与TNF-α蛋白表达。结果:超声心动图参数显示,冠脉微栓塞组除0 h、24 h外其余时间点左心室射血分数(LVEF)均较假手术组明显降低(P0.05),伴随着LVEF显著下降,心脏超声心动图表现为左心室短轴缩短率(LVFS)和心排血量(CO)下降及左心室舒张末期内径(LVEDd)增加。病理学显示,冠脉微栓塞组3 h、6 h、9 h、12 h、24 h五个时间点均可见微梗死灶,但各时间点之间的微梗死面积比较差异无统计学意义(P0.05)。荧光定量PCR结果显示,冠脉微栓塞组心肌组织PDCD4与TNF-αmR NA表达都是在3 h开始升高,9 h达高峰,12 h和24 h下降(P0.05);与假手术组比较,冠脉微栓塞组除0 h外其他时间点心肌组织PDCD4与TNF-αmR NA的表达量均显著增加(均P0.05)。蛋白免疫印迹结果显示,冠脉微栓塞组心肌组织PDCD4与TNF-α的蛋白表达都是在3 h开始升高,9 h达高峰,12 h和24 h下降(P0.05);与假手术组比较,冠脉微栓塞组除0 h外其他时间点心肌组织PDCD4与TNF-α蛋白表达水平均显著增加(P均0.05),差异均有统计学意义。结论:PDCD4参与了冠脉微栓塞致心功能的损伤,并呈现出明显的时间变化规律,可能是通过调控心肌TNF-α的表达实现。     

Ras同源基因家族蛋白A/Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶抑制剂对冠状动脉微栓塞引起心肌损伤的预防作用

目的:探讨Ras同源基因家族蛋白A(Rho A)/Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶(ROCK)信号通路在冠状动脉微栓塞(CME)大鼠心肌凋亡的作用机制。方法:将60只SD大鼠随机分为3组:假手术组、模型组、抑制剂组;模型组、抑制剂组经左心室注入微栓塞球构建CME模型;构建CME模型前1 h抑制剂组尾静脉注射Rho A/Rho信号通路抑制剂(Y-27632)(5 mg/kg)。术后12 h依次采用:苏木素碱性品红苦味酸(HBFP)染色、脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)染色、免疫印迹法(Western blot)检测心肌缺血微梗死面积、心肌细胞的凋亡率以及p-Rho A、ROCK1、ROCK2的表达水平。结果:与假手术组相比,模型组大鼠心脏的微梗死面积、心肌细胞凋亡率、p-Rho A、ROCK1、ROCK2的表达明显升高,与模型组相比,抑制剂组大鼠的心脏的微梗死面积、心肌细胞凋亡率、p-Rho A、ROCK1、ROCK2的表达明显降低,差异均有统计学意义(均P0.05)。结论:CME激活Rho A/ROCK通路,抑制Rho A/ROCK通路能明显降低心肌的凋亡率,改善CME大鼠心功能。     

冠状动脉微栓塞后大鼠心肌组织炎症细胞因子表达和心功能的动态变化及关系

目的:探讨大鼠冠状动脉微栓寒(CME)后心肌组织中炎症细胞因子肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β及IL-10的表达和心功能动态变化及其关系.方法:经左心室心尖部注射42μm的微球,建立大鼠CME模型.将大鼠随机分为CME组和假手术组,以注射生理盐水为假手术组(每组n=50).按CME后3 h、6 h、12 h、24 h、4周共5个时间点(各时间点n=10)分为不同时间观察.采用逆转录--聚合酶链反应和免疫组织化学方法检测各组大鼠微栓塞后不同时间点心肌组织内TNF-α、IL-1β、IL-10的动态表达规律及其与心功能变化的关系.结果:CME组与假手术组比较,在CME后3 h、6 h、12 h、24 h心肌组织中TNF-α、IL-1β和IL-10信使核糖核酸、蛋白表达均升高,差异均有统计学意义(P均<0.05).心脏超声显示与假手术组比较,CME组在微栓塞后3 h、6 h、12 h、24 h和4周的左心室射血分数均下降,差异均有统计学意义(P均<0.05).CME组中3 h、6 h、12 h、24 hTNF-α信使核糖核酸(mRNA)和IL-1β mRNA表达量分别与左心室射血分数呈显著负相关(P均<0.05).CME组内各时间点微梗死面积和炎症细胞浸润比较差异无统计学意义(P均>0.05).结论:CME后TNF-α、IL-1β和IL-10在心肌组织中表达均显著增高,并在微栓塞后12 h达到高峰,24 h后明显下降.同时心功能也随着炎症细胞因子的变化而改变,提示CME后心肌组织TNF-α、IL-1β等炎症细胞因子表达的显著增加在心肌损伤中发挥重要作用.     

阿托伐他汀对冠状动脉微栓塞后心肌炎症的影响

目的 探讨阿托伐他汀干预治疗对冠状动脉微栓塞（CME）后心肌炎症的影响.方法 48只清洁级雄性SD大鼠经左心室内注射自体微血栓,同时短暂夹闭主动脉,建立大鼠CME模型后,随机分为未治疗组及阿托伐他汀（Atrovastatin）干预组,于术后7 d处死.HE染色观察梗死心肌,免疫组织化学染色及Western blot检测肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白介素6（IL-6）及细胞间黏附因子1（ICAM-1）等炎症因子在心肌中表达的变化.结果 阿托伐他汀可轻度减少梗死面积,显著抑制CME后心肌中白细胞浸润及TNF-α、IL-6、ICAM-1 蛋白表达（P均〈0.05）.结论 阿托伐他汀能显著抑制CME后心肌炎症反应.     

大鼠冠状动脉微栓塞后细胞间黏附分子1在心肌中的表达及意义

目的建立大鼠冠状动脉微栓塞（CME）模型，探讨细胞间黏附分子1（ICAM-1）在心肌中的表达。方法60只SD大鼠分为CME组（36只）、假手术组（24只）。经左心室内注射自体微血栓，同时短暂主动脉夹闭，构建大鼠实验性CME模型；行免疫组化及Western blot检测ICAM-1在心肌中的表达情况。结果病理学显示，CME组心肌内局灶性分布微梗死灶，总面积为（16．70±2．07）％；左室血流动力学、超声心动图参数提示CME组较假手术组左心室收缩功能显著性降低（P〈0．01）。CME组术后1d，在血管内皮及微梗死灶心肌ICAM-1表达均增强，术后3d达到高峰，7d表达减弱，但持续至术后14d心肌微梗死灶仍有强表达；假手术组心肌仅有少量ICAM-1表达。两组平均吸光度值分别是1．51±0．09和0．25±0．04，1．71±0．09和0．24±0．04，1．34±0．08和0．26±0．04，1．06±0．12和0．25±0．06，差异均有统计学意义（均为P〈0．01）。Western blot显示，CME组在不同观察时段心肌ICAM-1较假手术组均明显增强，与内参灰度比值分别是0．38±0．01和0．09±0．02，0．48±0．03和0．07±0．02，0．35±0．01和0．04±0．01，0．19±0．03和0．03±0．01，差异均有统计学意义（均为P〈0．05）；急性期心肌组织ICAM-1含量与左室内压最大上升速率显著负相关（r=-0．90，P〈0．01）。结论经左心室内注射自体微血栓，同时短暂主动脉夹闭可成功建立大鼠CME模型；CME后，大鼠心肌ICAM-1表达明显增强，这可能是白细胞黏附、浸润造成心肌损害、心功能下降的重要因素。     

丁苯酞和TLR4抑制剂预处理对冠状动脉微栓塞大鼠心肌损伤的改善作用及其机制

目的 探讨丁苯酞(NBP)联合Toll样受体4(TLR4)抑制剂预处理对冠状动脉微栓塞大鼠心肌损伤的改善作用及机制.方法 将32只SD大鼠按随机数字表法分为NBP+TAK-242组、NBP组、CME组、Sham组,每组8只.NBP+TAK-242组CME术前予NBP 80 mg/kg连续灌胃7 d,CME术前30 min按2 mg/kg尾静脉注射0.5 mg/mL的TLR4抑制剂TAK-242;NBP组CME术前予NBP 80 mg/kg连续灌胃7 d;其余各组同法注射4 mL/kg的生理盐水.然后,NBP+TAK-242组、NBP组、CME组左心室注入直径42μm微栓塞球混悬液0.1 mL,Sham组注射0.1 mL生理盐水.CME术后6 h,检测各组大鼠心功能指标,苏木精—伊红染色(HE)及苏木精—碱性品红苦味酸染色(HBFP)观察心肌组织病理改变;RT-PCR检测心肌组织TLR4 mRNA,Western blotting法检测心肌组织TLR4通路相关蛋白(TLR4、myD88、NF-κB)及炎性因子(IL-1β、TNF-α蛋白).结果 与Sham组相比,CME组大鼠心功能射血分数(LVEF)和短轴缩短率(FS)降低(P均<0.01),左心室收缩末期内径(LVEDs)增加(P<0.01);HE染色可见明显白细胞浸润,心肌微梗死面积增加(P<0.01);心肌TLR4 mRNA相对表达量升高(P<0.01);心肌TLR4通路相关蛋白及炎性因子相对表达量升高(P均<0.05).与CME组相比,NBP组及NBP+TAK-242组LVEF、FS升高(P均<0.01),左心室舒张末期内径(LVEDd)、LVEDs降低(P均<0.01);心肌炎性细胞浸润减少,心肌微梗死面积减少(P均<0.01);TLR4 mRNA相对表达量降低(P<0.01);心肌TLR4通路相关蛋白及炎性因子相对表达量均降低(P均<0.05).与NBP组相比,NBP+TAK-242组LVEF、FS升高(P<0.05);心肌炎性细胞浸润较少,心肌微梗死面积减少(P<0.01);心肌TLR4、MyD88、IL-1β、TNF-α蛋白相对表达量进一步降低(P均<0.05).结论 NBP和TLR4抑制剂预处理可改善冠状动脉微栓塞大鼠的心肌损伤,预处理效果优于单用NBP,其作用机制可能与抑制LR4/myD88/NF-κB信号通路及炎性因子有关.     

阿托伐他汀对冠状动脉微栓塞后非梗死区心肌炎症的影响

目的:探讨阿托伐他汀干预治疗对冠状动脉微栓塞（CME）后非梗死区心肌炎症的影响。方法: 给清洁级雄性新西兰兔选择性经左前降支(LAD)注入微栓子颗粒悬液建立CME模型，将36只新西兰兔随机分为CME组（模型组）、阿托伐他汀（atrovastatin）干预组及对照组，每组12只(n=12)。于术后7 d处死，取左心室乳头段心肌经HE染色后，观察梗死心肌并检测梗死面积。用ELISA法及RT-PCR检测肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白介素6（IL-6）及其基因在非梗死区（右室）心肌中的表达。结果: 前降支动脉微栓塞后，非梗死区右室心肌中白细胞浸润明显增多，TNF-α、IL-6蛋白及其基因的表达显著增强。与未处理组相比，阿托伐他汀可显著抑制CME后右室心肌中白细胞浸润及TNF-α、IL-6蛋白及其基因的表达(均P<0.01)。结论: 冠脉微栓塞后，炎症反应的激活不仅局限于梗死灶，且累及非梗死区心肌。阿托伐他汀可显著抑制CME后非梗死区心肌炎症反应。     

阿托伐他汀对冠状动脉微栓塞后非梗死区心肌炎症的影响

目的：探讨阿托伐他汀干预治疗对冠状动脉微栓塞（CME）后非梗死区心肌炎症的影响。方法：给清洁级雄性新西兰兔选择性经左前降支（LAD）注入微栓子颗粒悬液建立CME模型,将36只新西兰兔随机分为CME组（模型组）、阿托伐他汀（atrovastatin）干预组及对照组,每组12只（n=12）。于术后7d处死,取左心室乳头段心肌经HE染色后,观察梗死心肌并检测梗死面积。用ELISA法及RT-PCR检测肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白介素6（IL一6）及其基因在非梗死区（右室）心肌中的表达。结果：前降支动脉微栓塞后,非梗死区右室心肌中白细胞浸润明显增多,TNF-α、IL-6蛋白及其基因的表达显著增强。与未处理组相比,阿托伐他汀可显著抑制CME后右室心肌中白细胞浸润及TNF-α、IL-6蛋白及其基因的表达（均P〈0．01）。结论：冠脉微栓塞后,炎症反应的激活不仅局限于梗死灶,且累及非梗死区心肌。阿托伐他汀可显著抑制CME后非梗死区心肌炎症反应。     

经冠状动脉内注射月桂酸钠构建大鼠冠状动脉微栓塞模型

目的建立新的在体大鼠冠状动脉微栓塞模型。方法成年SD大鼠随机分为正常对照组(n=6)、月桂酸钠组(n=54)及微球组(n=27),微球组依所注射微球的数量进一步分为500、1000和3000个次3个亚组(n=9);大鼠麻醉后开胸,夹闭主动脉后经左心室内注射200μg月桂酸钠或42μm的微球达冠状动脉,以注射生理盐水为对照;分别采用病理切片、超声心动图和彩色微粒子测量技术,观察各组大鼠心肌内微血栓和微梗死形成,以及心功能和心肌局部血流量的变化。结果经左心室内注射200μg月桂酸钠后1h,大鼠心肌微小动脉内即有微血栓形成,3h以后达高峰,血栓形成率高达66.4%±18.8%,在此后的12～72h逐渐降低。与微球组相比,所形成的微血栓中不但有血小板及纤维蛋白的聚集,而且还伴有内皮损伤及较严重的炎细胞浸润;二者所形成的微梗死灶皆为锲形呈局灶性分布,但月桂酸钠组梗死部位炎症反应较重。月桂酸钠组所形成的微梗死面积、心功能和心肌局部血流量的下降程度与单次注射1000个微球相似。结论经冠状动脉内注射月桂酸钠可成功构建大鼠冠状动脉微栓塞模型,其最佳剂量和时间点分别为200μg和3h,与机械性的塑料微球栓塞相比,在病理发病机制上比较贴近于临床,可作为冠状动脉微栓塞微循环研究的理想的动物模型。     

State of knowledge of helminth fauna of freshwater fishes of Poland

A total 89 fish and lamprey species has been recorded from Polish freshwater habitats. Twenty-seven of them (30.3%) have not been surveyed for parasitic helminthes. Some of the latter fishes are either rare or not easily accessible. Other live only in specific habitats in scattered localities. An important obstacle for studying parasite faunas of some fishes may be their status on an endangered species. Among the non-surveyed fishes, are those which have been relatively recently introduced to Poland or migrated there on their own. The present paper attempts to review all hitherto not studied helminthologically fish species, their habitats, localities and current protection status.     

高血压降压治疗目标的再认识

根据传统的高血压水平的定义,1993年WHO高血压治疗指南提出血压控制目标为<140/90mm Hg(1mm Hg=0.133kPa),但是并非所有患者都必须将血压降至同一水平,而应根据患者情况进行个体化治疗。Framingham进行的一项长达10～12年的心血管事件研究发现,第5年后,正常上限血压[收缩压(SBP