CD40L、IL－10和IL－17的辐射防护作用

CD40L(CD40配体)作为重要的共刺激分子，与CD40(白细胞分化抗原40)相互作用参与机体细胞和体液免疫调节，并在免疫应答中起着极其重要的作用。IL-17(白细胞介素17)可诱导IL-6(白细胞介素6)和G—CSF(粒细胞集落刺激因子)等细胞因子的产生，从而刺激造血祖细胞(CD34^ )增殖、分化。IL-10(白细胞介素10)可干扰共刺激分子的上调，抑制免疫刺激因子(如IL-12)的产生，用抗IL-10单抗可阻断紫外线诱导的免疫抑制。简要介绍了CD40L、IL-17和IL-10在辐射防护中的作用。     

CD40L、IL-10和IL-17的辐射防护作用

CD40L(CD40配体)作为重要的共刺激分子,与CD40(白细胞分化抗原40)相互作用参与机体细胞和体液免疫调节,并在免疫应答中起着极其重要的作用。IL-17(白细胞介素17)可诱导IL-6(白细胞介素6)和G-CSF(粒细胞集落刺激因子)等细胞因子的产生,从而刺激造血祖细胞(CD34+)增殖、分化。IL-10(白细胞介素10)可干扰共刺激分子的上调,抑制免疫刺激因子(如IL-12)的产生,用抗IL-10单抗可阻断紫外线诱导的免疫抑制。简要介绍了CD40L、IL-17和IL-10在辐射防护中的作用。     

CD40与CD138在骨髓瘤细胞表面的表达

 目的探讨CD40与CD138在多发性骨髓瘤(Multiple Myeloma,MM)患者骨髓瘤细胞表面的表达程度.方法应用间接免疫荧光化学方法,分别用一抗和二抗羊抗鼠IgG-FITC标记30例MM患者骨髓涂片中骨髓瘤细胞中CD40与CD138,计数阳性细胞.结果CD40与CD138在骨髓瘤细胞都有较高的表达,根据多发性骨髓瘤的分期不同,CD403b1和CD 138在MMⅢ期患者与Ⅱ期患者的表达率分别为(68±0.22)%,(77±0.60)%,(75±0.46)%,(90±0.35)%,差异有显著性意义(P＜0.05),CD40和CD138在IgA型MM患者和IgG型中的表达差异没有显著性意义(P＞0.05).结论CD40和CD138在多发性骨髓瘤细胞都有较高的表达,并且与疾病的分期有一定的关系.     

人CD40L胞外区和人CTLA4Ig双基因共表达腺病毒载体的克隆和鉴定

目的：构建人CD40L胞外区和CTLA4Ig双基因共表达重组腺病毒载体并鉴定。方法：RT-PCR扩增人CD40L胞外区片段，与致瘤素信号肽连接后构建穿梭质粒，经酶切、插入、同源重组，获质粒pAdshCD40L-IRES2-CTLA4Ig，经293细胞包装，获共表达双基因的腺病毒pAdvshCD40L-IRES2-CTLAg，并行凝胶电泳、PCR、共聚焦显微镜检测。结果：电泳、PCR扩增出了600bp和400bp的特异性片段、共聚焦显微镜观察到CD40L绿色荧光和CTLA4Ig红色荧光的共表达。结论：成功构建了人CD40L．胞外区和CTLA4Ig共表达双基因重组腺病毒载体。     

CD40L高表达在急性冠脉综合征病人中的临床意义

为探讨急性冠脉综合征（ACS）病人外周血单核细胞表达CD40L及血清可溶性CD40L（sCD40L)变化的临床意义,应用间接免疫荧光流式细胞术和ELISA分别对正常对照组16例、稳定型心绞痛（SA）24例（包括8例PTCA）、不稳定型心绞痛（UA）20例、急性心肌梗死（AMI）12例的外周血单核细胞表达CD40L及sCD40L水平进行检测。结果显示：（1）UA组及AMI组血单核细胞表达CD40L明显较SA和对照组高（P＜0.01）,SA与对照组相比无差异（P＞0.05）;（2）UA组及AMI组血清sCD40L水平明显较SA和对照组高（P＜0.01）,而SA与对照组相比亦有明显差异（P＜0.05）;（3）AMI患者血清sCD40L水平与UA组比较无显著性差异（P＞0.05）,但AMI发病后24h sCD40L有一峰值;（4）PTCA后血清sCD40L明显高于PTCA前（P＜0.01）,但血单核细胞表达CD40L无显著性差异（P＞0.05）;（5）血清sCD40L水平与冠脉病变的复杂狭窄数相关（γ＝0.54,P＜0.01）。提示血清可溶性CD40L同在ACS的发生和发展中具有重要作用,且可能是冠脉病变的活动性标志物。     

CD40／CD40L在慢性淋巴细胞白血病治疗中的生物学意义

慢性淋巴细胞白血病（chronic lymphocytic leukemia．CLL）是一种主要源于B淋巴细胞的低度恶性小淋巴细胞疾病，其特征是成熟的小淋巴细胞在外周血、骨髓、淋巴结和脾脏中累积。大量研究表明．CLL细胞和其他B细胞恶性肿瘤一样．不能表达或弱表达共刺激分子，以致不能有效地递呈抗原及激发T细胞抗肿瘤的免疫反应，使得肿瘤细胞逃避免疫监视并不断增殖。     

miR-503对辐射诱导U937细胞CD40表达的调控作用

目的 探讨miR-503在U937细胞中与CD40的靶向关系,并观察其对辐射诱导U937细胞CD40表达的调控作用。方法 将miR-503序列插入载体pcDNA-DEST-47中构建真核表达质粒;同时构建CD40基因3’-UTR-荧光素酶报告质粒,与pcDNA-DEST-miR-503质粒共转染至U937细胞,分析miR-503对其调控作用;同时用miR-203和miR-29b作为对照,观察miR-503对CD40的靶向作用。采用Western blot方法,证实miR-503对CD40蛋白表达的抑制作用及照射后U937细胞CD40蛋白表达变化;采用Real-Time PCR方法检测 5 Gy电离辐射照射后U937细胞miR-503表达量。结果 psiCHECK2-CD40和pcDNA-DEST-miR-503两种质粒共转染组的荧光素酶表达明显低于单独转染的空载体和靶基因CD40组(t=3.16,P<0.05),miR-203和miR-29b不能抑制CD40荧光素酶活性,而miR-503明显抑制CD40荧光素酶活性(t=5.25,P<0.01);转染pcDNA-DEST-miR-503质粒后在U937细胞中,靶基因CD40蛋白的表达受抑制。5 Gy电离辐射照射后,U937细胞中miR-503表达量上调(t=3.63~17.00,P<0.01),而CD40蛋白表达下降。结论 miR-503与CD40可能是靶向关系,并参与其调控作用。辐射上调人急性白血病细胞株U937细胞的miR-503的表达量,而且抑制CD40蛋白表达,说明miR-503可能参与辐射对肿瘤细胞CD40蛋白表达的调控作用。     

CD40L和基质金属蛋白酶在冠脉斑块形成中的作用机制临床研究

 目的 探讨CD40L和基质金属蛋白酶在冠心病患者冠脉斑块形成中的作用机制.方法 根据冠状动脉造影证实有冠状动脉狭窄 ,根据冠状动脉狭窄评分(CSA)标准对86例冠心病患者按照冠脉病变支数分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ3 个组,男51例,女35例,平均年龄59.4岁.采用酶联法测定 CD40L、CRP、MMP-2、MMP-9 .结果 CD40L、CRP,MMP-2、MMP-9随病情加重而升高,多支病变高于单支病变,Ⅱ型病变高于Ⅰ、Ⅲ型病变.MMP-2、MMP-9与CD40L呈正相关性(r=0.69)( r=0.75).结论 CD40L和MMPs在冠脉斑块形成中有一定联系,CD 40 L可能通过MMPs对冠脉损伤,从而导致斑块形成.而CD40L和MMPs增高有助于研究易损性冠脉斑块.     

CD40,CD40L与动脉粥样硬化及磁共振成像的相关研究进展

1CD40及CD40L概述CD40分子是一种Ⅰ型跨膜糖蛋白,分子量约48kd,是许多细胞的表面分子[1],如B淋巴细胞,血管内皮细胞,胸腺上皮细胞及单核细胞,树突状细胞,内皮细胞和某些肿瘤细胞。隶属于肿瘤坏死因子受体超家族[2～4]。人CD40基因位于20q11～13,其cDNA为一条831bp的开放阅读框架,所编码蛋白产物含有277个氨基酸(aa)。其中,胞外区由193个aa组成,跨膜区含22个aa,胞内区有62个aa[1]。CD40配体(CD40L或CD154)是以三聚体形式存在,是一种Ⅱ型跨膜糖蛋白,分子量约为39kd[1]。主要存在于活化的CD4 T细胞表面,少量表达于CD8 T细胞、外周血…     

早期梅毒皮损组织CD3、CD20和CD68的表达

为探讨一，二期梅毒皮损组织细胞免疫应答过程及机制，采用免疫组织化学及计算机图像分析的探讨，对一，二期梅毒病损组织中的CD3，CD20，CD68表达进行定性定量分析研究。结果显示，43例一，二期梅毒标本中CD3，CD20，CD68表达均阳性，表达水平病期发展，皮肤损害加重而逐渐升高。CD68表达水平高于CD3，CD20，尤其在血管周围表达明显增高，CD20表达较低。研究表明，T细胞，B细胞，特别是巨噬细胞在清除早期梅毒组织内感染的梅毒螺旋体过程中起着重要的细胞免疫调节作用，但作用不完全。     

抗人CD40功能性嵌合抗体的制备及其高效表达

目的构建抗CD40嵌合抗体的真核表达载体,实现在真核细胞中的高效表达。方法采用RT-PCR法,从分泌鼠源抗人CD40抗体的杂交瘤细胞系5C11中钓取其轻、重链基因,进行序列测定。将5C11轻重链可变区基因分别克隆入表达载体pCMV-VH和pCMV-VL,构建成嵌合抗体（c5C11）的轻链真核表达载体5C11L-pCMV及重链真核表达载体5C11H-pCMV。将嵌合抗体的轻重链真核表达载体共转染入293T细胞,利用夹心ELISA法测定上清中c5C11的浓度,通过流式细胞术检测c5C11与膜抗原的特异性结合。通过生物信息学相关方法对c5C11的氨基酸序列进行合理改造,尝试在保持生物学功能的基础上提高c5C11的表达量。结果成功钓取鼠源单抗5C11的轻重链可变区基因并构建了真核表达载体,实现了c5C11的分泌表达;嵌合抗体较好地保留了鼠源母本抗体的抗原识别能力。利用计算机辅助设计,一定程度上提高了c5C11的表达量。结论为后续研究嵌合抗CD40抗体对B淋巴瘤等肿瘤的治疗提供了一定的依据。     

人CD40分子基因的克隆及其在COS—7细胞中的表达

目的：克隆编码人ＣＤ４０分子基因的全长ｃＤＮＡ,在ＣＯＳ－７细胞中获得高表达。方法：提取人Ｂ淋巴细胞看Ｄａｕｄｉ总ＲＮＡ,以ＲＴ－ＰＣＲ技术克隆了编码人ＣＤ４０基因全长ｃＤＮＡ,序列测定证实其正确性。将测序正确的ＣＤ４０基因克隆入真核表达载体ｐｃＤＮＡ３．１构建重组表达载体。采用脂质体转染试剂脂染胺（Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ）杂ＣＯＳ－７细胞,用流式细胞仪,免疫细胞化学和免疫荧光法检测ＣＤ４０基     

CD3+CD28+T细胞与晚期非小细胞肺癌化疗疗效的相关性研究

目的探讨CD3+CD28+T细胞与晚期非小细胞肺癌化疗疗效的相关性。方法 40例有可测量病灶的晚期非小细胞肺癌患者接受NP方案化疗,化疗前采用流式细胞术检测外周血CD3+CD28+T细胞的数值,进行有效组(CR+PR)、稳定组(SD)、进展组(PD)和正常对照组四组间比较,并进行疗效与CD3+CD28+T细胞值的相关性分析。结果化疗前有效组的CD3+CD28+T细胞值与对照组相比差异无统计学意义(P=0.158),稳定组和进展组均低于对照组(P=0.003,P=0.000);有效组明显高于稳定组和进展组(P=0.036,P=0.000),稳定组高于进展组(P=0.000)。疗效与CD3+CD28+T细胞数值的相关系数r=0.672(P=0.000)。结论化疗前CD3+CD28+T细胞检测值与化疗疗效有一定的相关性,化疗前CD3+CD28+T细胞数值高,则化疗效果好。     

Arthrofibrosis is the result of a T cell mediated immune response

It is thought that an excessive fibrotic healing response with diffuse intra-articular scarring leads to arthrofibrosis after trauma and surgery around joints. To clarify the specific cellular mechanism of arthrofibrosis during arthrolysis we took fibrotic tissue samples from 18 patients at varying periods after knee trauma or surgery. Sections were stained with hematoxylin and eosin to study the overall histopathological changes. Major histocompatibility complex (MHC) class II expressing cells as well as CD3, CD4, CD25, CD28, CD68, CD80, and CD83 positive cells were localized immunohistologically. The results demonstrated synovial hyperplasia with fibrotic enlargement of the subintima and infiltration of inflammatory cells. The number of MHC class II expressing cells was increased. Mainly, intimal macrophages and dendritic cells showed positive immunostaining for MHC class II antigens. In the subintima moderate infiltration of T cells including activated T cells (CD25), CD4+ T helper (Th) cells and Th1 and Th2 subsets was detected. There was a slight polarization of the Th1/Th2 balance towards Th1 differentiation. Positive immunostaining for CD80/CD28 indicated the costimulatory signal for T cell activation and clonal expansion. These findings strongly support an immune response as the cause of capsulitis leading to formation of diffuse scar tissue within the knee joint. Based on our immunohistological study we conclude that a T cell mediated immune response plays a crucial role in the mechanism of arthrofibrosis.     

艾滋病合并念珠菌食管炎的影像学表现与CD~4+ T淋巴细胞计数的关系

目的:探讨艾滋病合并念珠菌食管炎的影像学表现及其与CD4+T淋巴细胞水平的关系。方法:回顾性分析经胃镜活检证实的36例艾滋病合并念珠菌食管炎的影像学资料及其外周血CD4+T淋巴细胞计数水平。结果:本组食管受累以中下段(22/36)和全段(11/36)为主,受累食管张力降低和蠕动减弱,29例边缘不规则呈"毛刷征",26例黏膜表面多发充盈缺损呈"鹅卵石征"。所有患者CD4+T淋巴细胞计数为(6～145)×106/L,12例<50×106/L,18例为(50～100)×106/L,其余6例>100×106/L,平均(53.61±47.32)×106/L。随着CD4+T淋巴细胞计数水平的降低,受累食管由下向上进展,程度也进一步加重。结论:艾滋病合并念珠菌食管炎的影像学表现具有"毛刷征"和"鹅卵石征"等特点,食管受累范围及程度与患者外周血CD4+T淋巴细胞计数水平具有相关性。