免疫分子对CD4~+ Treg的调节作用

CD4~+ Treg是机体发挥负向免疫调节作用的一类重要T淋巴细胞亚群,在维持机体免疫耐受和免疫平衡中发挥重要作用,其免疫抑制功能失衡与自身免疫性疾病、肿瘤、炎性免疫应答和移植排斥反应等疾病或病理状态密切相关,明确Treg功能及其相关免疫负调节机制对于临床自身免疫性疾病的预防、治疗和调节抗炎、抗瘤免疫应答均具有重要意义。本文综述重要转录因子、跨膜分子和细胞因子等免疫分子对CD4~+ Treg的免疫调节作用,为深入理解CD4~+ Treg功能及其相关疾病提供理论依据。     

CD4~+ TNFR2~+ 调节性T细胞在免疫相关疾病中作用机制的研究进展

调节性T细胞(Treg)是一种具有免疫抑制功能的效应性T淋巴细胞,在维持机体的免疫自稳中发挥重要作用。肿瘤坏死因子受体2(TNFR2)主要表达于淋巴细胞并参与调节淋巴细胞的分化和存活。TNFR2可以稳定CD4~+CD25~+Treg的数量及其抑制功能。作为人和小鼠体内抑制功能最强的Treg,CD4和肿瘤坏死因子受体双阳性(CD4~+TNFR2~+)Treg参与多种疾病如肿瘤、移植排斥、结肠炎、关节炎、寄生虫感染等的免疫反应过程。CD4~+TNFR2~+Treg在各种免疫相关疾病中的作用及其机制已成为新的研究热点。     

调节性T细胞foxp3基因表达的表观遗传学调控

机体的免疫系统主要通过免疫应答与免疫耐受维持机体的免疫平衡.调节性T细胞(Regulatory T cells,Treg)通过选择性抑制作用在调节免疫耐受中发挥着非常重要的功能.自1995年Sakaguchi等首次发现清除天然CD4~+ CD25~+ Treg细胞可导致自身免疫疾病,而补充这种细胞又可以防止自身免疫疾病的发生以来,CD4~+ CD25~+ Treg细胞已成为免疫学研究的热点领域之一~([1,2]).Foxp3分子做为Treg细胞的关键的转录因子,对其发生、发育以及功能的发挥起着重要作用,但是我们对调控foxp3基因表达的机制尚不十分清楚.最近,从表观遗传学的角度研究Foxp3分子的表达调控取得了很大进展,这将有助于我们进一步阐明Treg细胞的发生、分化以及功能发挥的机制.现对foxp3基因表达的表观遗传学调控机制做一综述.     

转录因子HELIOS在系统性红斑狼疮患者外周血调节性T细胞亚群中表达格局分析

Treg细胞在系统性红斑狼疮(SLE)发生发展中具有重要作用,而转录因子HELIOS在Treg细胞发挥免疫抑制功能方面发挥关键作用。本研究应用流式细胞术分析HELIOS在SLE患者外周血中CD4~+Treg细胞亚群中的表达格局,有助于揭示SLE的发病机制。结果显示,与健康对照相比,SLE患者外周血CD4~+T细胞中CD25~+Foxp3~+Treg细胞比例显著下降;在CD4~+CD25~+T细胞中,表型为CD39-CD45RA~+Treg细胞(幼稚型Treg细胞)比例显著升高,表型为CD39~+CD45RA-Treg细胞(效应型Treg细胞)比例显著下降,而表型为CD39-CD45RA-T细胞(非Treg细胞)比例不变;在Treg细胞中发挥重要免疫调节作用的转录因子HELIOS,在幼稚型Treg和效应型Treg细胞中比例均显著下降,提示CD4~+Treg细胞亚群比例失衡及其HELIOS表达下调可能在SLE发病机制中发挥重要作用。     

CD4~+CD25~+ Treg的免疫调节作用机制以及临床研究进展

CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)是一个具有独特免疫调节功能的T细胞亚群,它不仅能够抑制自身免疫性疾病的发生,而且可能参与诱导移植耐受以及肿瘤免疫的调节,在维持机体内环境的稳定中起重要作用。文章旨在对近两年关于CD4+CD25+Treg的免疫调节作用机制以及临床研究进展作一综述。     

CD4~+CD25~+Treg在类风湿关节炎中的研究进展

CD4~+CD25~+调节性T细胞(Treg)在维持机体自身耐受和预防自身免疫性疾病方面发挥重要作用,其功能失调在类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)发病中同样起重要作用。因此,对CD4~+CD25~+Treg在RA中的深入研究不仅能进一步了解RA的发病机制,也为治疗RA提供了新的途径。     

新型调节性T细胞CD4~+LAP~+ Treg与疾病的研究进展

调节性T细胞(Treg)是体内存在的一类抑制免疫应答的T细胞亚群,分为天然调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)和诱导型调节性T细胞(iTreg),通过细胞-细胞互相接触、分泌细胞因子(IL-10、TGF-β1)等途径抑制B细胞、效应性T细胞的增殖、活化和免疫效应,在抑制自身免疫性疾病发展、移植耐受、肿瘤免疫逃逸等方面发挥重要作用。新的调节性T细胞亚群:CD4+LAP+调节性T细胞(CD4+LAP+Treg),已经被证实在多种动物模型中发挥保护作用,可能是Treg发挥免疫抑制功能关键细胞之一,目前已引起国内外学者的关注。本文对CD4+LAP+Treg的发现及其与疾病关系的研究进展进行综述。     

CD200 与CD4+ CD25+ CD127low Treg 在强直性脊柱炎中的意义

目的:研究强直性脊柱炎(AS)患者外周血淋巴细胞中CD200的表达水平,分析CD200及Treg与IL-6、SAA的相关性,探讨CD200与AS免疫功能的关系以及诊断效能,为辅助AS的诊断、免疫评估提供帮助。方法:从74例AS患者和50例健康志愿者中收集外周血。流式细胞术检测淋巴细胞亚群、Treg的百分率及CD200的表达率,并用ELISA法检测血清中CD200的浓度,上转发光法测定IL-6的浓度,胶乳免疫比浊法测定SAA的浓度。结果:与对照组相比,AS活动组CD4~+T细胞、CD19~+B细胞的百分率均增高(P0.05),CD8~+T细胞、Treg的百分率均减低(P0.05),CD3~+T细胞的百分率无明显差异;稳定组CD4~+T细胞、CD8~+T细胞、CD19~+B细胞、Treg的百分率与对照组均无显著差异。与对照组比较,活动组(CD3~+、CD4~+、CD8~+)T细胞中CD200的表达率和血清中CD200的浓度以及稳定组(CD3~+、CD4~+)T细胞中CD200的表达率和血清中CD200的浓度均减低(P0.05);而稳定组CD8~+T细胞、CD19~+B细胞中CD200的表达率及活动组CD19~+B细胞中CD200的表达率无显著差异。与对照组比较,活动组血清中IL-6、SAA的浓度明显升高(P0.05);而稳定组IL-6的浓度轻度升高(P0.05),SAA的浓度无差异。活动组CD3~+T淋巴细胞中CD200的表达率与Treg呈正相关,与IL-6呈负相关,但与SAA不相关;Treg的百分率与IL-6负相关,与SAA不相关。CD200对AS的诊断优于Treg、SAA,而与IL-6的诊断效能相当。结论:AS活动期患者存在淋巴细胞亚群紊乱,CD200和Treg的表达率降低,两者可能参与了AS的发病,为辅助AS的诊断和免疫功能的判断提供理论依据。     

CD8~+CD28~-调节性T细胞的生物学特性及其与疾病的相关性研究进展

CD8+CD28-调节性T细胞(T regulatory cells,Treg)是具有免疫调节功能的异质性细胞群,在维持机体免疫功能稳态及建立免疫耐受中发挥着重要作用,其功能缺失或数量改变与衰老、肿瘤、感染、移植排斥、自身免疫疾病等的发生发展密切相关。CD8+CD28-Treg经体外诱导而来,通过细胞间直接接触或分泌抑制性细胞因子(IFN-γ、IL-6、IL-10)发挥免疫调节功能,但目前尚未明确其独特表型。对CD8+CD28-Treg进行深入研究将有助于了解机体免疫调节机制,进而对免疫相关疾病进行有效的干预。     

MOG诱导的实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠中枢及外周神经系统CD4~+ T及CD8~+ T调节性细胞变化

目的:观察实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠中枢及外周CD4+ CD25+调节性T细胞(CD4+ CD25+ Treg),CD8+ CD28-调节性T细胞(CD8+ CD28- Treg)表达的变化情况,并探讨相关的细胞免疫学机制。方法:雌性C57BL/6小鼠随机分为未使用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55(MEVGWYR-SPFSRVVHLYRNGK)(MOG35-55)免疫的对照组和使用MOG35-55免疫诱导的EAE小鼠模型组,采用临床症状评分记录小鼠行为学变化、HE染色观察CNS炎症细胞浸润及病理改变,使用流式细胞术(FCM)检测小鼠中枢及外周CD8+ CD28- Treg,CD4+ CD25+ Treg细胞表达水平。结果:MOG35-55诱导的EAE模型组动物出现典型的EAE临床行为学及病理学表现,FCM检测EAE模型组小鼠脾细胞CD4+ CD25+ Treg较对照组升高但无统计学差异,CD8+ CD28- Treg表达水平明显低于对照组(P0.01),EAE模型组中枢有CD4+ CD25+ Treg,CD8+CD28-Treg淋巴细胞的浸润,且CD4+ CD25+ Treg,CD8+ CD28- Treg在中枢的表达均高于外周,对照组中枢神经系统未检测到淋巴细胞浸润。结论:CD4+ CD25+ Treg,CD8+ CD28- Treg均参与调控EAE的病理过程,CD4+ CD25+ Treg,CD8+ CD28- Treg在EAE小鼠中枢及外周分布及变化的不同,提示其进入中枢神经系统(CNS)并参与调节中枢局部炎症。     

TNFR2对CD4~+Foxp3~+Treg的活化、增殖及功能影响的研究进展

CD4~+Foxp3~+Treg是调节免疫稳态所必需的一群免疫细胞。Treg数量和功能的异常与多种疾病的发生有关,包括自身免疫性疾病、过敏性疾病、移植排斥反应和肿瘤免疫逃逸等。TNF-α在炎症和免疫反应中有着双重作用,即促进炎症反应和介导免疫耐受。这很可能与其2个受体——肿瘤坏死因子受体(tumor necrosis factor receptor, TNFR)1和TNFR2独特的信号转导有关。TNFR1几乎在所有类型的细胞中普遍表达,而TNFR2的表达分布则较为局限。现在越来越多的证据表明,Treg较特异性地表达高水平TNFR2。更重要的是,TNFR2在Treg活化、增殖、功能和表型稳定中均起决定性作用。同时,TNFR2参与Treg分化、发育、免疫功能发挥等生理过程。深入研究TNFR2信号活化Treg的分子机制,可为自身免疫性疾病、过敏性疾病、移植物抗宿主病(graft-versus-host disease, GVHD)和恶性肿瘤等疾病的治疗提供进一步的帮助。该文主要介绍TNF-TNFR信号的分子基础和信号转导途径,分析和讨论TNF-TNFR2信号对Treg活化、增殖及功能的影响及其分子机制的最新研究进展。     

2型糖尿病患者外周血CD8+CD25+Foxp3+Treg细胞检测及意义

目的探讨外周血CD8~+CD25~+Foxp3~+Treg(CD8~+Treg)细胞比例在2型糖尿病(T2DM)疾病过程中的作用。方法选取T2DM患者90例。根据尿微量白蛋白(MAL),分为45例T2DM伴正常蛋白尿患者(NMAU,MAL30 mg/24 h),45例T2DM伴微量蛋白尿患者(MAU,MAL 30～300 mg/24 h),同时选择门诊体检健康人员45名作为对照组(HC)。通过特定蛋白仪检测患者mAlb浓度;流式细胞仪检测CD8~+Treg细胞比例;Luminex200检测血浆白细胞介素(IL)-8、1β、6和肿瘤坏死因子(TNF)-α浓度。结果与HC组[4.43(3.26～5.75)%]相比,NMAU组[4.06(3.15～5.43)%]和MAU组[3.52(2.30～4.87)%]患者CD8~+Treg细胞比例降低,且MAU组降低更明显(P0.05);与HC组相比,MAU组和NMAU组患者血浆细胞因子TNF-α、IL-8、IL-6和IL-1β浓度均升高(P0.05);MAU组患者CD8~+Treg比例与血清细胞因子TNF-α(r=-0.444 8,P0.01)、IL-8(r=-0.341 2,P0.05)、IL-6(r=-0.365 3,P0.05)和IL-1β(r=-0.319 2,P0.05)呈负相关;Logistic回归分析显示CD8~+Treg对T2DM患者可能具有保护作用。结论通过调控T2DM患者外周血CD8~+Treg细胞比例,有可能减缓糖尿病的进程。     

红景天乙醇提取物调节Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤浸润T细胞数量并增强抗肿瘤免疫效应

目的探讨藏药红景天(RRL)的抗肿瘤免疫功能。方法将Lewis肺癌荷瘤小鼠随机分为生理盐水组、 500 mg/kg RRL乙醇提取物处理组和10 mg/kg环磷酰胺(CTX)处理组,处理10 d。计算小鼠生存率和肿瘤生长抑制率;流式细胞术检测肿瘤浸润的CD4~+T、 CD8~+ T细胞数量及FOXP3~+调节性T细胞(Treg)占CD4~+CD25~+Treg的比例; ELISA检测荷瘤小鼠血清中白细胞介素2 (IL-2)和γ干扰素(IFN-γ)水平,乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测脾细胞毒性T淋巴细胞(CTL)活性。结果 RRL乙醇提取物处理的Lewis荷瘤小鼠生存率显著提高,肿瘤生长受到抑制,肿瘤浸润的CD4~+T细胞和CD8~+T细胞数量增加, FOXP3~+ Treg占CD4~+CD25~+Treg的比例降低。荷瘤小鼠血清IFN-γ和IL-2水平提高,脾脏CTL的杀伤能力增强。结论 RRL乙醇提取物通过调节免疫细胞数量和功能增强抗肿瘤免疫效果。     

RA患者外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞比例及中性粒细胞表面CD200R1的分析

本研究探讨类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞的百分含量和中性粒细胞表面CD200R1的表达情况,并探讨其临床意义。采用流式细胞术分别检测RA患者和健康对照组外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞的百分含量和中性粒细胞表面CD200R1的阳性表达率。ELISA检测其血清中单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)和CCR2的表达水平。实验结果显示:RA患者外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞占CD4~+T细胞的比例明显低于健康对照组,中性粒细胞表面CD200R1的阳性表达率明显高于健康对照组,RA患者血清中MCP-1与CCR2的表达水平明显高于健康对照组。以上结果提示CD200/CD200R1信号异常,CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞数量减少可能为RA的发病机制之一,调控CD200/CD200R1信号和CCR2~+Treg细胞输注可能成为RA治疗的新靶点。     

重组疫苗E.coli LLO/OVA对小鼠CD4^＋ CD25^＋ Treg细胞调节作用的研究

目的:探讨重组E.coli LLO/OVA对小鼠CD4+CD25+Treg细胞的调节作用.方法:E.coli LLO/OVA和E.coli OVA分别免疫小鼠后,磁珠分离脾脏CD11c、CD4+CD25+Treg和CD4+CD25-T细胞,比较两组CD11c细胞对CD4+CD25+Treg细胞分泌IL-10的影响,以及CD4+CD25+Treg细胞抑制CD4+CD25-T细胞增殖的作用;流式细胞术分析荷瘤小鼠OVA特异性CD8+T细胞比率,观察去除CD4+CD25+Treg细胞前后两组黑色素瘤B16-OVA荷瘤小鼠肺转移情况.结果:E.coli LLO/OVA免疫组小鼠脾脏CD4+CD25+Treg细胞产生IL-10水平明显低于E.coli OVA免疫组小鼠(P＜0.05),CD4+CD25+Treg细胞对CD4+CD25-T 细胞增殖的抑制作用明显减弱(P＜0.05),且OVA特异性CD8+T细胞数量明显增多(P＜0.05).在去除CD4+CD25+Treg细胞前后,E.coli LLO/OVA免疫的荷瘤小鼠肺转移结节数无明显减少(P＞0.05).结论:重组E.coli LLO/OVA可通过下调小鼠CD4+CD25+Treg细胞数量、抑制其功能而促进机体特异性抗肿瘤免疫.     

调节性T细胞在免疫性肾病中的作用及临床应用研究进展

CD4~+CD25~+调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)是一类具有免疫抑制效应的T细胞亚群,与机体免疫稳态维持和自身免疫性疾病的发生发展密切相关。由于其独特的生物学功能,Treg细胞已成为自身免疫性疾病的发生、转归和治疗等研究上的热点和难点。本文关注Treg细胞在人类自身免疫性肾病(如狼疮性肾炎、Goodpasture综合征、抗中性粒细胞胞浆抗体相关性血管炎)及啮齿类动物自身免疫性肾病模型中的作用及致病机制,并对Treg细胞在免疫治疗中的潜在临床价值加以探讨。     

CD161~+调节性T细胞降低风湿性心脏病大鼠瓣膜损伤的作用及机制

目的探讨CD161~+调节性T细胞(Treg)降低风湿性心脏病大鼠瓣膜损伤的作用及机制。方法流式细胞术分选CD161~-和CD161~+ Treg并进行培养, ELISA检测Treg培养上清液白细胞介素10(IL-10)和转化生长因子β(TGF-β)的含量; A组溶血性链球菌悬液与Freund完全佐剂混合后建立风湿性心脏病大鼠模型,分为对照组、 CD161~- Treg组、 CD161~+ Treg组。处理1周后,收集大鼠的心脏血和二尖瓣瓣膜。流式细胞术检测心脏血单个核细胞滤泡辅助性T(Tfh)细胞、 B细胞和浆细胞比例, HE染色检测瓣膜组织病理变化,免疫组织化学染色法检测瓣膜组织中B细胞和浆细胞数目, ELISA检测血清IL-21水平。结果 CD161~+ Treg分泌IL-10和TGF-β的能力显著高于CD161~-Treg。与注射CD161~- Treg的大鼠相比,注射CD161~+Treg能够显著降低瓣膜组织损伤,减少瓣膜组织B细胞和浆细胞的比例;且CD161~+Treg注射能够减少大鼠血液中Tfh细胞、 B细胞和浆细胞的比例,血清中IL-21含量降低。结论 CD161~+Treg通过抑制Tfh细胞和B细胞增殖分化,降低风湿性心脏病的瓣膜损伤。     

IL-17、Foxp3~+Treg和IL-17~+Foxp3~+T细胞在自身免疫性疾病中的作用

白细胞介素17(interleukin-17,IL-17)和Foxp3~+调节性T细胞(Foxp3~+regulatory T cell,Foxp3~+Treg)在机体的免疫调节中起重要作用,分别与其他因子相互协同,在自身免疫性疾病中起到促进或抑制作用。一种新型细胞即IL-17~+Foxp3~+T细胞在维持免疫平衡中起重要作用,但具体机制尚不完全清楚。随着对自身免疫性疾病免疫靶向治疗研究的深入,进一步研究IL-17、Foxp3~+Treg和IL-17~+Foxp3~+T细胞在自身免疫性疾病中的作用,可以为治疗方案提供新思路。本文综述近年来IL-17、Foxp3~+Treg和IL-17~+Foxp3~+T细胞在自身免疫性疾病中作用的研究进展。     

类风湿性关节炎患者外周血Th17/Treg细胞比率失衡的研究

目的:观察类风湿性关节炎(RA)患者外周血Th17细胞与Foxp3+CD4+CD25+调节性T(Treg)细胞的平衡状态与疾病状态的关系,初步阐明Th17/Treg细胞比率失衡在RA发病机制中的作用和意义。方法:流式细胞术(FCM)检测RA患者和健康人外周血中Th17细胞和Foxp3+CD4+CD25+Treg细胞的比率。结果:活动期RA患者外周血CD3+CD4+T细胞和Th17细胞的比率均明显高于健康对照组(P均0.05);而Foxp3+CD4+CD25+Treg细胞的比率明显低于健康对照组(P0.05)。随疾病活动性的增加,Th17细胞表达增高(P0.05);而Foxp3+CD4+CD25+Treg细胞表达降低,但无统计学意义(P0.05)。结论:RA患者外周血T细胞紊乱以CD4+T细胞的增加为主,Th17细胞比率的增加和Foxp3+CD4+CD25+Treg细胞比率的降低所致的Th17/Treg细胞比率失衡,可能在RA的发生发展中起重要作用。     

雷帕霉素对人CD4~+CD25~+调节性T细胞体外扩增的影响

探讨有效的体外扩增人CD4~+CD25~+调节性T细胞(Treg)的方法以及雷帕霉素(rapamycin,RAPA)对人CD4~+CD25~+Treg细胞体外扩增的影响。采用免疫磁珠分离人外周血的CD4~+CD25~+Treg,并将实验分为3组:第1组在CD4~+CD25~+Treg培养体系中加入200 U/ml IL-2和包被CD3/CD28单克隆抗体的磁珠;第2组培养体系中除加入100 nmol/LRAPA以外,其余与第1组相同;第3组是CD4~+CD25~+Treg培养第12天后,将细胞进一步分选获取CD4~+CD25~+CD127~- Treg再继续培养,培养体系与第2组相同。实验结果显示,加RAPA培养的CD4~+CD25~+Treg细胞扩增效率比不加RAPA的低,但细胞的纯度明显提高(92%vs 65%)。而加RAPA培养的第2、3组CD4~+CD25~+Treg细胞在纯度上没有明显的差异。加RAPA培养的CD4~+CD25~+Treg细胞扩增后保持其无能状态。体外抑制实验显示体外扩增的CD4~+CD25~+Treg细胞对CD4~+效应T细胞增殖均有明显的抑制作用,而且加RAPA扩增的Treg细胞表现出更强的抑制功能。另外,与第1组体外扩增的Treg细胞相比,加RAPA扩增的Treg细胞表达低水平的IL-2和IFN-γ。实验证明雷帕霉素抑制了CD4~+ CD25~+Treg细胞中混杂的CD4~+效应T细胞的扩增,使用雷帕霉素可以提高体外扩增CD4~+CD25~+Treg细胞的纯度及其免疫抑制功能。