鼻咽癌高癌家系癌患者外周血淋巴细胞S100A9表达分析

目的探索鼻咽癌高癌家系癌患者外周血淋巴细胞S100A9差异性表达情况及其临床意义。方法收集高癌家系鼻咽癌患者、散发鼻咽癌患者及正常对照组外周血各22例,分别抽取患者及对照组病人外周静脉血10ml,提取外周血淋巴细胞进行S100A9蛋白分析,采用Western blot、RT-PCR分别检测三组研究对象S100A9蛋白、S100A9mRNA表达情况。结果鼻咽癌高癌家系癌患者及鼻咽癌散发癌患者及正常对照组S100A9 mRNA表达分别为-3.886±1.663、-3.421±1.110、-4.031±1.586,三组比较P0.05,差异无统计学意义。S100A9蛋白表达分别为0.518±0.353、0.481±0.344、0.245±0.202,三组比较P0.05,差异具有统计学意义。结论鼻咽癌高癌家系癌患者及散发鼻咽癌患者外周血淋巴细胞S100A9蛋白表达与正常人比存在差异性,有望成为鼻咽癌早期筛查指标。     

Twist和HIF-1α在鼻咽癌中的表达及其相关性研究

目的 探讨Twist和HIF-1α在鼻咽癌组织中表达及其相关性.方法 应用RT-PCR及SABC免疫组化法检测50例鼻咽癌组织Twist、HIF-1α的mRNA及蛋白表达情况.结果 鼻咽癌组织中不同患者年龄、肿瘤大小分组间Twist及HIF-1α的mRNA和蛋白表达差异无统计学意义;不同淋巴结转移、临床分期和病理分级分组间Twist及HlF-1α的mRNA和蛋白表达差异具有统计学意义.鼻咽癌组织中Twist的mRNA及蛋白表达间、HIF-1α的mRNA及蛋白表达间、Twist和HIF-1α的蛋白表达间、Twist和HIF-1α的mRNA表达间均存在正相关关系.结论 鼻咽癌组织中Twist、HIF-1α均高表达,且两者间具有相关性.HIF-1α蛋白可能通过上调Twist 表达成为其促进鼻咽癌浸润、转移的途径之一.     

不同家族史鼻咽癌患者癌组织Prohibitin的表达

目的对比Prohibitin(PMB)在不同家族史的鼻咽癌患者癌组织中的表达,以探究鼻咽组织中Prohibitin是否可以作为鼻咽癌潜在标记物。方法收集高癌家系气虚质鼻咽癌患者、鼻咽黏膜慢性炎症患者的鼻咽组织各9例,散发气虚质鼻咽癌患者的鼻咽组织12例,应用实时定量PCR方法检测Prohibitin在各组鼻咽组织中的表达。利用Western-blotting蛋白免疫印迹方法检测Prohibitin在各组患者鼻咽组织中的表达。结果 PHB m RNA在鼻咽黏膜慢性炎症鼻咽组织、散发气虚质鼻咽癌组织、高癌家系气虚质鼻咽癌组织中的2-△△Ct值分别为1.00±0.72、1.08±0.49、0.97±0.41(P0.05)。PHB蛋白相对表达依次为0.33±0.21、0.59±0.25、1.72±0.96(P0.05)。分析各组间对比PHB基因表达量无明显变化,但蛋白表达量鼻咽癌患者明显高于正常人,高癌家系鼻咽癌患者蛋白表达量高于散发患者,考虑与级联放大反应有关,有望成为高癌家系气虚质鼻咽癌患者早期诊断及筛查的标志物。     

鼻咽癌高癌家系不同体质证型鼻咽癌患者鼻咽病灶组织蛋白双向凝胶电泳分析

目的 建立鼻咽癌高癌家系鼻咽癌患者气虚体质证犁及湿热体质证型高分辨率双向凝胶电泳特征图谱,探讨其证本质相关性蛋白质组学特征.方法 设鼻咽癌高癌家系鼻咽癌患者气虚体质组、湿热体质组、其他体质证型组,散发性鼻咽癌患者组,鼻明癌高癌家系健康成员对照组,共计5组.分别获取鼻咽组织标本,提取总蛋白质,固相pH梯度双向凝胶电冰分离,经考马斯亮蓝显色后,Image Master 2D Elite4.01图像分析软件进行电泳结果分析.结果 各组标本均获得分辨率高、重复性好的双向凝胶电泳图谱,平均蛋白质点数分别为860±20,854±25,842±30,867±20及857±15.比较分析,发现鼻咽癌高癌家系鼻咽癌患者气虚体质组与湿热体质组,差异蛋白质点10个.结论 鼻咽癌高癌家系鼻咽癌患者不同体质证型蛋白质谱发生了明显变化,提示同病异证存在不同的本质内涵,为进一步研究鼻咽癌高癌家系鼻咽癌患者中医体质证型的本质内涵提供了实验依据.     

NF-КBp65在鼻咽癌组织的表达及临床病理意义

目的 探讨NF-КBp65蛋白和mRNA在鼻咽癌组织中的表达及其临床病理意义.方法 运用免疫组化和RT-PCR的方法检测NF-КBp65蛋白和mRNA在60例鼻咽癌和30例鼻咽炎组织中的表达,分析鼻咽癌组织NF-ΚBp65表达活性差异与鼻咽癌患者临床病理指标的相关性.结果 鼻咽癌组织中NF-КBp65蛋白和mRNA的表...     

POT1蛋白在人鼻咽癌细胞系及鼻咽癌组织中的表达及临床意义

目的探讨端粒保护蛋白1(protection of telomeres 1,POT1)在人鼻咽癌细胞系及鼻咽癌组织中的表达、细胞定位及临床意义。方法应用Western blot法检测POT1蛋白在人鼻咽癌系、人鼻咽上皮细胞系、鼻咽癌组织、癌旁组织中的表达;应用细胞免疫荧光检测POT1蛋白在鼻咽癌细胞中的定位。结果 POT1蛋白在人鼻咽癌细胞系CNE-1、5-8 F、CNE-2、6-10 B中的表达强度高于在人鼻咽上皮细胞系NP69中的表达强度,分别为2.8、2.3、1.9、1.5倍;POT1蛋白主要定位于细胞质;鼻咽癌组织中POT1蛋白表达量(0.6414±0.0979)明显高于癌旁组织中的表达量(0.4386±0.0912),两组比较有统计学意义(P<0.05);鼻咽癌组织中POT1蛋白表达强度与鼻咽癌的临床分期、T分期有关(P<0.05),但与患者年龄、性别、颈部淋巴结转移无关(P>0.05)。结论 POT1蛋白表达可能与鼻咽癌的发生与发展有关。     

中晚期鼻咽癌中核苷酸切除修复交叉互补基因1表达与铂类药物疗效的相关性研究

目的:探讨中晚期鼻咽癌组织中核苷酸切除修复交叉互补基因1(ERCC1)的表达,并分析其表达与铂类药物化疗疗效的关系。方法:采用免疫组织化学方法检测107例中晚期鼻咽癌组织及48例癌旁组织中的ERCC1的表达情况。结果:ERCC1在鼻咽癌组织中低表达55例,高表达52例,而癌旁组织中低表达30例,高表达18例,2组差异无统计学意义。ERCC1表达与鼻咽癌患者临床综合分期有关,与年龄、性别、组织学类型、T分期、N分期均无关。ERCC1低表达病例近期治疗有效率(81.8%)比高表达病例近期有效率(63.5%)高,二者差异有统计学意义。97例随访,2例发生死亡,5例发生肝或肺转移,ERCC1不同组间的差异无统计学意义。结论:ERCC1蛋白可作为预测鼻咽癌患者对铂类药物化疗敏感性的指标之一,也有助于肿瘤患者个体化治疗方案制定,而免疫组织化学检测亦是简便而有效的检测手段,值得广泛推广。     

下调内质网相关降解蛋白-1对鼻咽癌CNE-2Z细胞化疗敏感性的作用及机制

目的 探讨下调内质网相关降解蛋白(Derlin-1)对鼻咽癌CNE-2Z细胞株化疗敏感性的作用及机制。方法 收集10例鼻咽癌患者鼻咽癌组织及癌旁正常组织并通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测组织中Derlin-1 mRNA含量;本实验分组：空白对照组(control组)、阴性对照组(NC组)、敲低组(si-Derlin-1组)。RT-qPCR法检测鼻咽癌Derlin-1 mRNA的表达;采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同顺铂浓度时3组细胞的增殖;Annexin V-FITC/PI双染法检测顺铂浓度为5μmol/L时3组细胞的凋亡率;Transwell检测顺铂浓度为5μmol/L时3组细胞的侵袭迁移能力;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法、Western blot法检测Bcl-2、Bax、基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9 mRNA及蛋白相对表达量。结果 RT-qPCR结果显示,鼻咽癌癌组织中Derlin-1 mRNA相对表达量较癌旁正常组织显著减少,差异具有统计学意义(P<0.05);si-Derlin-1组Derlin-1 mRNA较control组、NC组...     

高迁移率族蛋白1在喉鳞状细胞癌组织及血清中的表达及意义

目的 研究高迁移率族蛋白1( high mobility group box-1,HMGB1) mRNA及蛋白在喉鳞状细胞癌(简称喉鳞癌)组织及患者血清中的表达及其临床意义.方法 反转录聚合酶链反应( RTPCR)及Western blot分别检测HMGB1 mRNA及蛋白在30例喉鳞癌患者肿瘤组织及癌旁黏膜组织中的表达;酶联免疫吸附试验( ELISA)检测HMGB1蛋白在喉鳞癌患者及正常志愿者血清中的表达.结果RT-PCR结果示HMGB1 mRNA(HMGB1/GAPDH)在喉鳞癌组织、癌旁黏膜组织中的相对表达量((x)±s)分别为1.25±0.12、0.32±0.04,差异有统计学意义(t=40.27,P＜0.05);Western blot结果示HMGB1蛋白(HMGB1/β-actin)在喉鳞癌和癌旁黏膜组织中的相对表达量分别为1.29 ±0.10、0.34±0.03,两组间差异有统计学意义(t=49.84,P＜0.05).结果显示HMGB1 mRNA和蛋白的表达水平与患者的T分级、临床分期、有无淋巴转移及是否吸烟有关(P值均＜0.05);而与年龄、性别、是否饮酒及肿瘤病理分级无关(P＞0.05).ELISA结果显示,喉鳞癌患者及正常志愿者血清中HMGB1质量浓度分别为(24.80±14.08) ng/ml、(23.58±14.69)ng/ml,差异无统计学意义(t=0.37,P＞0.05).结论 HMGB1 mRNA及蛋白在喉鳞癌组织中的表达显著高于癌旁黏膜组织,且表达水平与T分级、临床分期及有无淋巴转移有关.     

固肾培元方对肾阳虚大鼠耳蜗组织HSP70mRNA表达的影响

目的 观察固肾培元方对肾阳虚大鼠耳蜗组织HSP70mRNA蛋白表达的影响.方法 采用肌注氢化可的松注射液的方法造成SD大鼠肾阳虚模型,用RT-PCR的方法检测耳蜗组织HSP70mRNA表达.结果 固肾培元方可使肾阳虚大鼠耳蜗HSP70mRNA表达增强,与空白组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 固肾培元方可能通过调节HSP70mRNA的表达而达到改善听力、保护耳蜗结构与功能的目的.     

HSP70、Ki-67、nm23-H1蛋白在鼻咽癌组织中表达

目的探讨鼻咽癌组织中HSP70、Ki-67和nm23-H1蛋白表达的临床价值。方法采用免疫组织化学二步法，检测50例鼻咽癌患者鼻咽部或颈淋巴结组织中HSP70、Ki-67和nm23-H1蛋白表达水平。结果50例鼻咽癌组织中HSP70、Ki-67和nm23-H1阳性表达率分别为36．0％（18／50）、98．0％（49／50）和50．0％（25／50）；HSP70和nm23-H1蛋自在Ⅱ—Ⅲ期和Ⅳa期中阳性表达率均有显著性差异（P=0．016，P=0．037）：Binarylogistic回归模型分析HSP70、nm23-H1表达是鼻咽癌局部复发或远处转移的相关因素（P=0．022，P=0．038）：Cox多因素回归模型分析HSP70表达是影响患者生存期的独立因素（P=-0．001）：nm23-H1与HSP70表达呈负相关（P=0．003）；Ki-67表达与鼻咽癌局部复发或远处转移及生存期均无相关性。结论检测鼻咽癌组织中HSP70和nm23-H1表达对指导治疗及评价预后有重要的临床意义。     

中晚期鼻咽癌患者Thl7细胞功能活性及调节性细胞因子水平的免疫病理意义*

目的探讨Th17细胞功能活性及其相关调节性细胞因子在中晚期鼻咽癌患者免疫病理中的意义。方法28例中晚期鼻咽癌患者,应用流式细胞术检测外周血Thl7细胞数量比例,RT-PCR法检测ROR-γt mRNA转录水平,ELISA法检测血清白介素l0（IL-l0）和17（IL-17）及γ干扰素（IFN-γ）含量水平,并以l5例健康人作为对照,分析其组间差异及其意义。结果中晚期鼻咽癌患者外周血单个核细胞中Thl7细胞占CD4+T细胞的数量比例和ROR-γt mRNA的相对表达量均低于正常对照组（P＜0.05）,血清IL-10水平高于健康对照组(P＜0.05),IL-17和IFN-γ水平低于正常对照组(P＜0.05),提示Th17细胞功能活性显示了一种与患者病情进展程度呈现负相关关系的趋势。结论 Thl7细胞数量及其功能活性降低,可能是中晚期鼻咽癌患者肿瘤微环境中免疫耐受现象突出、产生免疫逃逸的重要因素之一。一旦该结论得到确认,则有望成为新的干预治疗靶标。     

谷胱甘肽S 转移酶A1在鼻咽癌中的异常表达

 目的比较谷胱甘肽S 转移酶A1（glutathione S transferase A1,GSTA1）在鼻咽癌组织与正常鼻咽上皮组织中转录和表达的差异，并探究其与鼻咽癌患者临床特征的相关性。方法通过GCBI（gene cloud of biotechnology information）在线分析平台分析鼻咽癌表达谱芯片数据（GSE12452，GSE64634），探索GSTA1基因在鼻咽癌组织与正常对照组织中的转录水平差异；分别通过实时荧光定量PCR和免疫组织化学染色验证和检测GSTA1在鼻咽癌组织和正常鼻咽上皮中转录和表达差异；通过人类肿瘤基因组（the cancer genome atlas, TCGA）数据库，分析GSTA1的转录水平与头颈肿瘤临床分期的相关性。 结果GSTA1基因在鼻咽癌中转录和表达均显著下调，且GSTA1的mRNA水平在头颈肿瘤不同分期有显著差异。 结论GSTA1转录和表达下调是鼻咽癌的分子特征，提示其可能通过影响细胞代谢参与鼻咽癌的发生和演进。     

HSP70,Bcl-2和PCNA在鼻咽癌中的表达及其意义

目的　探讨HSP70 ,Bcl 2和PCNA在鼻咽癌中的表达及临床意义。方法　用免疫组化S P法分别检测HSP70 ,Bcl 2和PCNA在 6 0例鼻咽癌组织中的表达。结果　①HSP70 ,Bcl 2和PCNA在鼻咽癌组织中的阳性表达率分别为 70 % (4 2 / 6 0 )、6 5 % (39/ 6 0 )和 86 .7% (5 2 / 6 0 )。②HSP70表达阳性和阴性病人的预后组间无统计学意义 (P >0 .0 5 ) ;Bcl 2、PCNA表达阳性和阴性病人以及不同临床时期 (Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ )病人的生存状态比较有统计学意义 (P <0 .0 5 )。③鼻咽癌组织中HSP70和Bcl 2的表达一致率为 75 % (4 5 / 6 0 ) ,存在统计学意义 (P <0 .0 5 ) ,PCNA与Bcl 2、HSP70间无显著相关。④HSP70、PCNA阳性表达在鼻咽癌不同临床时期 (Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ )比较有统计学意义 (P <0 .0 5 )。结论　HSP70表达与鼻咽癌临床分期相关 ,但可能并不直接反映预后 ;Bcl 2、PCNA表达在鼻咽癌预后评估中有一定意义。     

PD-L1蛋白在鼻咽癌中的表达及其临床意义

目的探讨PD L1在鼻咽癌中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学技术对收集的162例鼻咽癌组织进行PD L1蛋白的表达检测,并结合患者临床病理参数及预后信息,探讨其临床价值。结果PD L1蛋白表达水平与性别、年龄、PS评分、临床分期、吸烟情况等临床病理参数之间无显著差异(P>0.05)。PD L1阳性组与阴性组3年总生存率分别为92.3%与80.0%,差异具有统计学意义(P=0.026)。结论PD L1蛋白阳性鼻咽癌患者预后较好,有望成为鼻咽癌患者预后评估的生物标志物。     

nm23-H1蛋白表达与鼻咽癌颅内转移发生及预后的关系

目的探讨nm23-H1基因蛋白表达与鼻咽癌颅内转移的关系.方法用nm23-H1单克隆抗体对68例鼻咽癌患者的102份标本进行免疫组织化学染色(SP)法,检测nm23-H1蛋白的表达.结果在鼻咽癌中,nm23-H1蛋白表达与颅内转移的发生及预后均有明显相关性(P＜0.05).结论原发肿瘤中nm23-H1表达下降对脑转移癌的发生及预后具有重要意义,检测鼻咽癌组织中nm23-H1蛋白表达水平可能是预测鼻咽癌颅内转移及预后的重要指标.     

α-烯醇化酶在鼻咽癌中的表达

目的:观察α-烯醇化酶(ENO1)在鼻咽癌中的表达状态,探讨其与鼻咽癌的发生发展及转移的关系.方法:采用SP免疫组织化学方法检测120 例鼻咽癌初治患者癌组织中ENO1表达.结果:鼻咽癌组织中ENO1蛋白高表达率为60.0%(72/120),鼻咽黏膜炎性组织为27.5%(11/40),两组差异有统计学意义(P<0.05).T1 、T2、T3期患者ENO1蛋白表达阳性率均高于T4患者,其差异有统计学意义(χ2=11.424,P<0.05).但ENO1蛋白表达与颈淋巴结转移及放疗后复发和转移无关(P>0.05).结论:ENO1蛋白的高表达可能涉及鼻咽癌的发生和发展过程.     

Dicer1低表达与鼻咽癌患者预后的关联性研究

目的:Dicer1在RNA干扰的起始阶段起着重要作用,本研究旨在评估Dicer1在鼻咽癌组织中的表达及预后价值。方法:采用免疫组织化学染色法检测276例鼻咽癌活检标本的Dicer1蛋白表达,利用定量RTPCR法分析56例鼻咽癌活检标本和11例鼻咽炎组织中Dicer1mRNA水平,采用Cox回归分析确定独立预后因素,建立预后评分模型进行生存预测。结果:Dicer1的mRNA和蛋白在鼻咽癌组织中表达水平均明显偏低,Dicer1的mRNA表达水平与蛋白表达水平呈正相关。Dicer1的低表达与鼻咽癌患者远处转移的发生(P<0.01)以及患者死亡率(P<0.05)显著相关。Dicer1低表达与鼻咽癌患者的总体生存期(HR=2.32,95%CI:1.30~4.14,P<0.01)和无远处转移生存率(HR=2.56,95%CI:1.39~4.74,P<0.01)亦显著相关。此外,多变量分析显示Dicer1低表达和TNM分期是鼻咽癌患者总体生存期和无远处转移生存率的独立预后因素。Dicer1表达和TNM分期相结合的预后评分模型比Dicer1表达单独模型或TNM分期单独模型拥有更好的预后价值(P<0.05)。结论:Dicer1mRNA和蛋白表达水平在鼻咽癌组织中均明显偏低,Dicer1的低表达可能是鼻咽癌患者新的预后标志物。     

豚鼠外周血单个核细胞与耳蜗组织中糖皮质激素体含量的相关性分析

目的通过分析豚鼠外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)与耳蜗组织中糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)mRNA和蛋白含量变化,探讨PBMC与耳蜗组织中GR含量的相关性。方法将32只健康白色豚鼠随机分为地塞米松组和对照组,地塞米松组予地塞米松(5mg/ml,10mg/kg/day)腹腔连续注射7天,对照组予等体积的生理盐水腹腔连续注射7天。给药结束后次日取豚鼠PBMC及双侧耳蜗组织,通过实时荧光定量PCR检测豚鼠PBMC和左耳耳蜗组织中GR mRNA表达水平,通过Western blot结果半定量分析豚鼠PBMC和右侧耳蜗组织中GR蛋白的含量,并运用统计学软件SPSS16.0进一步分析豚鼠PBMC与耳蜗组织中GR mRNA及GR蛋白表达量的相关性及短期全身使用地塞米松对其表达量的影响。结果 GR mRNA与GR蛋白在豚鼠PBMC与耳蜗组织中均有表达,地塞米松组PBMC及耳蜗组织中GR mRNA与GR蛋白含量较对照组有明显提高,统计学相关性分析结果提示地塞米松组及对照组的PBMC与耳蜗组织的GR mRNA、GR蛋白表达量存在正相关,结果有统计学意义。结论豚鼠短期全身使用地塞米松可以使PBMC与耳蜗组织中的GR mRNA、GR蛋白含量均同步上调,豚鼠PBMC与耳蜗组织中GR mRNA、GR蛋白的含量变化具有正相关性。PBMC中GR含量可间接反映耳蜗组织的GR表达水平。