APAAP技术检测大鼠淋巴细胞亚群

<正> 碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶复合物(简称APAAP)桥联酶标技术是最近几年发展起来的一种新兴组织化学染色技术;用于大鼠淋巴细胞亚群的检测,在国内尚未见报道。本文应用英国牛津大学创建的MRC W/OX McAbs初步建立了用AP AAP技术检测大鼠淋巴细胞亚群的方法,并与常规的间接免疫荧光法进行比较。     

检测抗体分泌细胞数的酶斑法

<正> 检测抗体分泌细胞数(ASC)的常用方法为溶血空斑试验(PFC试验)。近年来,在酶免疫测定基础上成功地发展了新一代检测ASC方法,即ELISA酶斑技术(ELISPOT Assay或称Filter ImmunoPlaque Assay)简称酶斑法,其灵敏度与PFC试验相当,但在国内用纤维薄膜进行ASC检测尚未见报道。     

检测外周血T淋巴细胞亚群四种方法的比较

用单克隆抗体检测外周血T淋巴细胞亚群的方法报道较多,各有特点。为了选择一种适于常规应用的简便、特异性及重复性较好的检测方法,本文以抗人T细胞单克隆抗体OKT_3(抗人全T)、OKT_4(抗人T辅助亚群)和OKT_8(抗人T抑制杀伤亚群)采用抗生物素-生物素-辣根过氧化酶(ABC)法、间接SPA菌(SACI-Ig) 花环法、间接免疫荧光法(IFA)和红细胞花环试验(RT)同时检测人T细胞总数和亚群,并进行比较。现将结果报道如下。     

用微量APAAP技术检测淋巴细胞亚群

检测淋巴细胞表面抗原常用间接免疫荧光法(IFA),但它对细胞的数量和活性要求较高,因检测前后标本难以长期保存,所以,很难大规模收检标本;此外,该法需用昂贵的荧光显微镜。免疫组化技术能弥补以上不足,其中硷性磷酸酶-抗硷性磷酸酶复合物(简称APAAP)技术因具有众多的优点而日益受到重视。但常规抽静脉血制备单个核细胞涂片进行染色,采集标本较困难,     

IgM抗体捕获法在诊断乙型脑炎中的应用

<正> 流行性乙型脑炎(简称乙脑)的早期诊断是降低病死率,减少后遗症的关键。为此,我们比较了IgM抗体捕获ELISA法(Mac·ELISA)、血凝抑制试验(HI)和ELISA法测IgG抗体(ELISA·IgG)在乙脑早期诊断上的敏感性和特异性,本文报道我们的研究结果。     

IMMULITE型化学发光酶免疫分析仪检测CRP及其临床应用

C反应蛋白(CRP)是急性期反应蛋白之一,具有激活补体,促进细胞吞噬及其免疫调控的生理功能,临床上对各种炎症或感染性(全身或局部性)疾病的辅助诊断有较高价值.本文选用化学发光酶免疫分析法(CLEIA)高灵敏检测CRP浓度,并与常规胶乳凝集法(LAT)同步比较.结果显示CLEIA法不仅提高了检测灵敏度,且又拓宽了定量检测线性范围.现报道如下.     

检测血清甲胎蛋白的双位点一步法ELISA及其临床应用

<正> 应用两种针对不同抗原位点的单克隆抗体(MeAb)建立的双位点一步法ELISA,简称两点一步法,检测抗原物质,不仅操作简便、快速,而且还可以达到改善检测系统灵敏度、精确性及重复性的目的。 1981年Votila首先报道用二点一步法检测人血清甲胎蛋白(AFP)含量,证明了这一方法的优越性。1986年刘杲等报道了抗人AFP McAb的制备、双位点夹心ELISA的建立及在检测血清AFP中的初步应用。1987年周鸣、刘杲报道了检测血清AFP的两点一步法。我们应用两种抗AFP不同抗原位点的McAb,通过选择合适的抗体提纯方法,应用马来酰亚胺法制备辣根过氧化物酶(HRP)-Fab’结合物以及选用灵敏的四甲基联苯胺(TMB)底物等方面的工作,建立了适合于临床检测用的血清AFP两点一步ELISA测定法。     

系统性念珠菌病患者抗原血症的研究——用两种方法提取的白色念珠菌甘露聚糖制备的抗多糖血清的比较

为了迅速、正确地诊断系统性念珠菌感染,以利早期治疗,近年来许多学者用高效抗血清,结合高度敏感方法检测体液中的可溶性菌体表面特异性多糖抗原——甘露聚糖(Mannan,Mn)。我们在前文中报道了白色念珠菌(简称白念菌)Mn抗原的提取法并与BSA偶联,制成了M-B偶联抗原(简称偶联抗原)。此抗原的纯度很高,对家     

尖吻蝮蛇毒PCA对血管内皮细胞的影响

<正>目的:观察皖南尖吻蝮蛇毒蛋白C激活剂(PCA)对人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)活性及表达组织因子(TF)、血管性血友病因子(v WF)的影响,探讨PCA对血栓性疾病的防治机制。方法:常规培养HUVEC,MTT法检测细胞活性,ELISA检测细胞上清液中TF和v WF的含量,Western blot法检测细胞内TF蛋白表达,RT-PCR法检测细胞内TF和v WF mRNA的表达。     

蜡块表面脱钙法在骨肉瘤标本制片中的应用

目的探讨蜡块表面脱钙法(SD)对骨肉瘤组织形态学及分子生物学方面的影响,建立新的骨组织脱钙方法。方法收集17例骨肉瘤标本,每例切取含肿瘤骨组织2块,分为表面脱钙组(SD)和常规脱钙组(RD),石蜡切片分别行HE染色;免疫组织化学检测ki-67、stab2、caspase9、survivin、和BAX表达; MDM2探针荧光原位杂交染色检测MDM2基因的扩增。结果表面脱钙法与常规脱钙法HE染色2者无差异;抗原和MDM2基因检测SD组高于RD组(P0. 05)。结论蜡块表面脱钙法在组织形态学、抗原及核酸保存方面优于常规脱钙法。     

小儿外科病人术后庆大霉素用药方案的探讨

本文报道了14例小儿外科病人手术前、后庆大霉素(GM)按常规用药方法(4mg·kg~(-1))血,尿浓度和主要药动学参数的变化情况。以微量微生物法检测血、尿中GM浓度,检测菌为短小芽胞杆菌,药—时数据用MCPKP软件经IBM计算机处理。实验证明:(1)小儿静滴GM药—时曲线符合二房室模型;(2)按Moore创伤分级方法、手术创伤在4级或4级以上者,GM峰浓度由术前     

以生物素化酶免疫试验检测乙型肝炎e系统

本文以生物素化酶免疫试验(BA-ELISA)与常规ELISA对比检测乙型肝炎e系统。本法HBeAg检出相对敏感度为常规ELISA法的2倍;其HBeAg检出阳性率亦非常显著高于常规ELISA(P<0.01);两法检测HBV·DNA的一致性以及与Abbott试剂的符合率本法均优于常规ELISA。     

甲基纤维素半固体培养法检测TNF

<正> 检测肿瘤坏死因子(TNF)活性方法以染料摄入法易被人们接受,因该法一次可做多组分检测,无主观因素、简便快速。但其弊端是只能用贴壁生长较牢固的肿瘤细胞为靶细胞。对悬浮生长和贴壁不牢的肿瘤细胞不适用。本文采用甲基纤维素半固体培养法以悬浮生长和贴壁不牢的肿瘤细胞为靶细胞,检测大鼠血清TNF(以下简称RTNS)活性。     

免疫磁性活化细胞分选方法优化及纯化后细胞的生物学特性检测

目的:改良常规免疫磁性活化细胞分选(MACS)的分离纯化方法,提高分选后细胞的纯度并确保细胞仍具有良好活性及功能。方法:以干细胞抗原-1(Sca-1)标记的Sca-1+造血干/祖细胞(Sca-1+HSC/HPC)为例,分别用改良后和常规MACS法分选出小鼠骨髓细胞Sca-1+细胞,流式细胞术检测两种分选方法获得Sca-1+细胞纯度;计算阳性细胞回收率;台酚蓝染色检测分选细胞存活百分率;CCK-8检测细胞增殖,混合造血祖细胞(CFU-Mix)体外培养评价分选Sca-1+细胞分化能力。结果:改良MACS法分选获得的Sca-1+细胞纯度达93%以上(常规MACS法仅为87%),阳性细胞的回收率可达73%(常规法仅为62.3%);细胞存活率、细胞增殖和CFU-Mix集落形成能力两种分选方法无明显差别。结论:改良法能明显提高细胞分选纯度及回收率,细胞活性和功能保持良好,值得各种细胞免疫磁性分选参考采用。     

儿童细菌性和非细菌性脑膜炎患者脑脊液中铁蛋白的RIA及临床应用

脑脊液铁蛋白(简称CSF-Fer)的测定对中枢N系统白血病、恶性肿瘤、脑损伤及出血的诊断价值已有报道，但CSF-Fer在颅内感染患儿中报道较少，或即有报道例数也不够。我们用RIA法检测161例正常时期儿童及脑膜炎患儿CSF-Fer，以探讨其含量的变化并对临床诊断，治疗及预后观察的应用价值。     

固定杂交瘤细胞间接免疫荧光法检测抗独特型抗体

<正> 在制备多克隆抗独特型抗体(简称抗Id抗体)过程中,检测抗Id抗体通用方法是用纯化独特型抗体(简称 Id 抗体)的 ELISA或RIA。由于分泌Id抗体的杂交瘤细胞表面表达有均一的Id抗体分子,Kennedy等人曾采用分泌Id抗体的新鲜杂交瘤细胞间接免疫荧光试管法检测抗Id抗体的活性及特异性,以节省纯化Id抗体的用量和提高初步检测的速度。我们在检测自制的多克隆抗Id抗体的过程中,对该法进行了改进,即用固定杂交瘤细胞间接免疫荧光玻片法检     

在淋巴细胞转化试验中~3H-TdR掺入法与~3H-UR掺入法的比较

<正> 用3~H-TdR 掺入法淋巴细胞转化测定(简称淋转)肿瘤病人的细胞免疫功能已有不少报道,本文在3~H-TdR 掺入法淋转的基础上,对37例癌症病人作了3~H-UR(氚尿嘧啶核苷)掺入法淋转,以便了解癌病人淋转的 RNA 合成水平,以及与 DNA 合成间的差异。现将方法和结果简述如下。     

3种不同检验方法对尿液WBC、RBC检测的对比分析

目的为了提高本院检验科尿液分析的准确性,有效性,比较分析GEB-600尿干化学分析仪(简称GEB-600),及IQ200尿沉渣仪(简称IQ200)及手工法显微镜镜检(简称手工法)检测尿液红细胞、白细胞结果。方法随机抽取本院住院患者304份新鲜的尿液标本,分别用GEB-600,IQ200及手工法进行检测,比较分析检测结果。结果GEB-600,IQ200及手工法检测RBC的阳性率分别为21.4%、19.4%、18.8%;WBC的阳性率分别为21.7%、22.7%、22.0%。经检验RBC、WBC的检出率差异无统计学意义(>0.05)。结论有效的结合尿液干化学分析仪,尿沉渣分析仪及手工显微镜镜检对尿液进行检测,可以快速,准确的为临床提供有效可靠地检验结果。     

全自动酶放大化学发光免疫分析法与RIA法定量AFP的对比

近年来非放射标记免疫分析技术已逐渐推广应用.本文选用美国德普公司IMMULITE Ⅰ型酶放大化学发光分析法(以下简称发光法)与RIA进行了对比分析,并对患者血清样品若干批次的AFP进行了检测,结果报道如下.     

应用酶联SPA结合法测定麻疹IgG抗体

<正> 检测麻疹抗体一般常规采用中和试验或血凝抑制试验。由于前者必须有细胞培养;后者又需用猴红细胞,因此给广泛开展麻疹血清流行病学调查或疫苗免疫后的效果考核带来困难。Shani(1981)报告快速免疫过氧化物酶试验测定麻疹的IgG抗体,具有快速诊断的优越性。我们则以感染麻疹病毒的Vero细胞为抗原,应用酶联葡萄球菌A蛋白(SPA)结合法(简称酶联法)测定人血清中的麻疹IgG抗体,取得满意的结果,为测定麻疹抗体提供敏感而快速的新途径,现报告如下。