ELISA法检测高尔基蛋白73诊断原发性肝癌的方法学评价

目的评价ELISA法检测新的肿瘤标志物高尔基蛋白73（GP73）诊断原发性肝癌试剂的性能。方法对GP73ELIAS检测方法绘制工作曲线,进行偏倚测定、不精密度测定、回收试验以及对120例临床标本进行测定,并与＂金标准＂病理结果比较,分析灵敏度、特异性、符合率、阳性预测值和阴性预测值。结果 GP73检测方法的工作曲线为：Y=427.2 X-5.05（r2=0.998）,有较大的斜率（427.2）、有良好的准确度（偏倚均〈5ng/ml）和精密度[变异系数（CV）〈11.0%],120例临床标本的GP73水平与＂金标准＂病理结果比较,敏感度为90.0%、特异性为70.0%、符合率为76.7%、阳性预测值为60.0%和阴性预测值为93.3%。结论 GP73ELISA试剂的测定性能良好,具有较好的临床应用价值。     

三种国产抗-HCV酶联免疫诊断试剂检测结果与电化学发光法比较

目的探讨A、B和C三种不同国产酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂检测丙型肝炎病毒抗体（抗-HCV）结果的差异性,并将检测结果与电化学发光法检测结果进行比较。方法随机挑选临床检测样本94例。所有样本再使用B、C和Roche电化学发光法试剂盒进行检测。ELISA试剂都使用各自的试剂盒S/CO值进行阴阳性判断,电化学发光检测结果判断以仪器的COI作为判断标准,结果〉1为检测有反应性。结果 A、B、C和电化学发光检测的阳性率分别为84.04%（79/94）、35.11%（33/94）、25.53%（24/94）和39.36%（37/94）,A试剂显著高于电化学发光法,而C试剂显著低于电化学发光法。A、B、C和电化学发光检测的结果一致性分别为55.32%（52/94）、95.74%（90/94）和86.17%（81/94）。将A试剂盒检测的结果分为阴性组（〈1）、弱阳性组（1~8）、阳性组（〉8）三个组,阴性和阳性组四种试剂检测结果符合率较好,而弱阳性组符合率较低。结论 3种国产试剂对阴性和阳性标本与Roche电化学发光法检测符合率很高,弱阳性标本符合率则存在差异,对于弱阳性标本建议使用确诊试验。     

血液检测实验室ELISA试剂的选择评价

目的　综合评价抗 HCV、抗 HIV国产ELISA试剂在血液筛查实验室的应用效果。方法　将参考品试验与常规中试试验相结合 ,参考品试验 :将抗 HCV试剂、双抗原夹心法抗 HIV试剂在 37℃恒温箱中放置 72h后 ,检测参考品的符合率 ,计算每种试剂的阳性符合率、阴性符合率、总符合率、约登指数、阳性预测值、阴性预测值 ,比较差别 ;常规中试试验 :用抗 HIV试剂、抗 HCV试剂分别检测常规标本 ,绘制每种试剂阴性结果S/CO分布图 ,观察每种试剂反应模式的均一性。结果　在参考品试验中 ,5种符合国家标准的抗 HCV国产试剂存在差异 ;常规中试试验中 ,抗 HCV、抗 HIV阴性结果S/CO分布图显示了不同试剂本底均一性的差别。结论　血液筛查实验室ELISA试剂的选择 ,在依照参考品的考核结果的同时 ,还应结合常规应用情况 ,就试剂盒本底均一性、功能性、适应性、成分稳定性综合判定。     

进口ELISA试剂在检测献血者HBsAg中的应用及评价

目的 对进口酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂检测乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)的应用效果进行评价,探究减少1次ELISA检测的可行性.方法 将2019年9月至2020年7月105737份无偿献血标本用国产和进口ELISA试剂进行HBsAg平行检测,对结果为单试剂有反应性的标本做核酸检测,以国产试剂作为比较试剂,核酸检测作为确认方法,利用统计学方法分析进口ELISA试剂的复检符合率、阳性率和单试剂阳性标本的阳性预测值.结果 国产试剂和进口试剂的复检符合率分别为27.42％和51.79％,阳性率分别为0.30％和0.46％,差异均有统计学意义(χ2=12.597,P<0.05;χ2=36.921,P<0.05);国产试剂和进口试剂的阳性预测值分别为5.88％和4.26％,差异无统计学意义(χ2=0.098,P>0.05).结论 进口试剂的假阳性率和国产试剂相当,但其稳定性和灵敏度明显优于国产试剂;国产试剂和进口试剂仍具有一定程度的互补性,如血清学检测只用进口试剂做1次ELISA检测,存在漏检的可能.     

四种酶联免疫吸附试验试剂检测梅毒抗体的比较

目的评价国内常用的4种梅毒酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂的有效性,为临床选择梅毒诊断试剂提供依据。方法对180例临床血清分别进行快速血浆反应素环状卡片试验（RPR）、梅毒螺旋体颗粒凝集试验（TPPA）和4种试剂的ELISA（试剂分别为A、B、C、D）。以TPPA结果为参考对照,分别统计各ELISA试剂的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值。结果 180例血清标本中,RPR阳性58例,TPPA阳性84例,两者均阴性95例。TPPA检测阳性率为46.67%（84/180）,A试剂为44.44%（80/180）,B试剂为45.00%（81/180）,C试剂为45.00%（81/180）,D试剂为28.33%（51/180）。D试剂与TPPA及其他3种试剂的检测阳性率差异有统计学意义（P均〈0.01）。D试剂的敏感性最差（57.14%）,而其他几种ELISA试剂的敏感性较好（94.05%~95.24%）。4种ELISA试剂的特异性均较理想（96.88%~100.00%）。结论个别国产ELISA试剂的敏感性差,提示在选择这类试剂时,应以质控血清进行预试验,使用符合要求的试剂。     

咸阳地区无偿献血人群HIV感染情况分析

目的比较采用酶联免疫吸附试验(ELISA)及核酸检测(NAT)技术检测咸阳地区无偿献血人群HIV感染情况的差异,为探讨科学合理的血液检测模式提供依据。方法收集该中心血站2010-2018年432 357例无偿献血者血液标本,采用国产和进口ELISA两种试剂及一种进口NAT试剂进行HIV检测,对ELISA国产与进口试剂初筛结果、NAT结果及确证结果进行统计分析。结果 ELISA HIV初筛阳性率为11.75/10 000,确证阳性率为2.08/10 000;其中国产、进口ELISA试剂及进口NAT试剂初筛阳性率分别为9.71/10 000、4.76/10 000、2.08/10 000,三者之间差异有统计学意义(P0.05);3种试剂确证阳性率均为2.08/10 000;阳性符合率分别为21.43%、43.69%、100.00%,三者之间差异有统计学意义(P0.05);阳性检出率均为100.00%,假阳性率分别为78.57%、56.31%、0.00%,三者之间差异有统计学意义(P0.05);ELISA检测结果为阴性的标本其NAT检测结果均为阴性;国产ELISA试剂检测值S/CO≤1的标本、进口ELISA试剂检测值S/CO≤5.0的标本其NAT试剂及确证结果同时为阴性。结论该中心血站无偿献血者ELISA HIV初筛阳性率大于NAT初筛阳性率及确证阳性率,国产试剂的假阳性率大于进口试剂,ELISA检出的确证阳性标本NAT试剂检测结果均为阳性,NAT试剂检出的阳性结果与其确证结果100%相符;进口ELISA试剂和进口NAT试剂联合应用可有效减少血液报废,提高血液检测质量。     

口岸出入境人群梅毒感染检测方法比较

目的探讨适合口岸出入境人群检测梅毒的方法。方法采用国产酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂与甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）和梅毒螺旋体颗粒凝集试验（TPPA）进行血清学方法比较,采用聚合酶链反应（PCR）对梅毒患者生殖道皮损渗出液进行检测,分析其传染性。结果国产ELISA试剂与TPPA检测结果阳性符合率为96%（263/273）,2种方法对273例标本的检测结果差异无统计学意义。而TRUST和TPPA检测结果差异有统计学意义,与ELISA检测结果差异亦有统计学意义。PCR检测29例梅毒患者生殖道皮损渗出液和100例初筛阳性血清标本,生殖道皮损渗出液与临床诊断符合率为100%,血清检测结果均为阴性。结论ELISA可替代TRUST和TPPA作为梅毒感染的筛查方法。PCR不能作为出入境人员梅毒传染性判断的方法。     

抗风疹病毒IgM类抗体生物素-亲合素时间分辨荧光免疫分析捕获法的建立与性能评价

摘要：目的：建立抗风疹病毒IgM类抗体（RV IgM）生物素-亲合素时间分辨荧光免疫分析捕获法（BA Mac TrFIA）并评价其分析性能。 方法：用鼠抗人μ链单克隆抗体（抗-μ McAb）作为包被抗体,生物素化RV重组抗原为桥接抗原,链霉亲合素标记铕作为示踪物,配制以β-萘甲酰三氟丙酮为主要成分的增强液,测定抗RV IgM抗体,并对其检测限、重复性、阴性参考品符合率、阳性参考品符合率、试剂热稳定性进行评价,与同类方法学比对检测1 020例样本,比对实验的一致性分析采用Kappa检验。 结果：本方法检测国家检测限参考品L1、L2和L3的结果均为阳性反应（S/CO≥1.00）,批内变异系数（CV）＜15.00%,国家阴性参考品符合率为10/10,国家阳性参考品符合率为5/5;本方法的试剂盒于37 ℃恒温放置6 d后,检测性能无明显改变;与珠海海泰公司试剂结果符合率为98.82%,Kappa=0.96。 结论：本方法灵敏度高,特异性强,精密度好;与同类方法学检测结果相关性好,能满足临床应用需要。     

溶血标本使用国产HBsAg酶免试剂可用于常规分析

目的 观察标本不同程度溶血对国产两步法乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）酶联免疫吸附测定（ELISA）试剂检测结果的影响.方法 收集HBsAg阴性和阳性已确定的血液标本各3例,并将其分别作为HBsAg阴性组和阳性组.标本人为处理为无、轻、中、重度溶血,用3种国产HBsAg ELISA试剂对其进行重新检测,分析溶血后标本吸光度值与临界值的比值（S/CO值）的变化.结果 在HBsAg阴性标本中,不同浓度的溶血标本未检出阳性,S/CO值无明显改变（P〉0.05）;在HBsAg阳性标本中,不同浓度的溶血标本和无溶血的标本比较,S/CO值也无明显变化（P〉0.05）.结论 国产两步法HBsAg ELISA试剂可用于溶血标本的常规检测.     

两种ELISA试剂与TRFIA法HBsAg检测结果比较

目的比较不同ELISA试剂与时间分辨荧光免疫分析法（TRFIA）对HBsAg的检测能力。方法对TRFIA法HBsAg阳性样本112份和阴性样本174份,采用两种ELISA试剂作HBsAg平行检测,比较两种ELISA试剂和TRFIA法检测结果。结果 TRFIA阳性组112份样本,两种ELISA试剂检测均为阳性,TRFIA阴性组174份样本ELISA法共检出29份确认阳性,国产试剂1和进口试剂2阳性检出率分别为6.32%（11/174）和16.7%（29/174）,两种试剂检出率的差异有统计学意义（P〈0.05）,ELISA试剂2、试剂1和TRFIA法检测敏感性分别为100.0%、87.2%和79.4%。结论 ELISA仍然为HBsAg检测的可靠方法,其定性检测能力可优于TRFIA,但不同试剂存在明显差异。     

乙型肝炎病毒前S1抗原化学发光免疫检测方法的建立及初步临床应用

目的建立乙肝病毒前S1抗原（PreSl-Ag）化学发光免疫检测方法，并分析其临床应用价值。方法采用PreSlAg单抗包被微孔板，以辣根过氧化物酶标记的抗乙肝病毒表面抗原的抗体为二抗，结合鲁米诺化学发光底物系统，建立PreSlAg的化学发光免疫检测方法。研制PreSl-Ag诊断试剂企业参考品，并用于分析所建立方法的特异性、灵敏度、稳定性和精密性等试剂性能。所建立方法与市售的PreSl-Ag诊断试剂盒同时比对检测临床血清样本126份，比较检测结果。结果检测结果表明试剂性能符合企业参考品质量标准。批内变异系数6．5％-8．1％、批间变异系数13．2％；试剂盒置37℃考核3d，其稳定性良好。临床样本比对检测结果表明，两种方法相关性良好（阴性符合率96．0％、阳性符合率100％，总符合率为97．6％，Kappa值为0．951，一致性强度为最强）。结论成功建讧了快速、特异、敏感和稳定的PreSlAg化学发光免疫检测方法，适合临床检验推广应用。     

用于国产一步法HBsAg ELISA试剂及确认试验试剂的改进方法

目的延长酶反应时间以提高国产一步法酶联免疫吸附试验（ELISA）乙型肝炎表面抗原（HBsAg）试剂的敏感性和精密度。方法将酶反应时间自30 min延长至120 min,观察检测结果的敏感性和特异性的变化,及其对相关确认试剂确认试验的影响,并与Murex确认试剂检测结果进行比对。结果酶反应时间延长至120 min,HBsAg ELISA试验检测的Cut-off值不变,在检测Murex HBsAg检测结果呈阴性反应的样本时,其结果均为阴性。延长酶反应时间至120 min可以提高检测结果的吸光度（A）值,位于灰区的弱阳性样本的A值可提高1倍左右。常规ELISA结果S/CO值在0.5-1.0区段的22例阴性灰区样本中,在酶反应时间延长至120 min的国产确认试剂检测中有4例样本确认为阳性,该4例样本在Murex确认试验中亦为阳性;S/CO值在1.0-2.0区段的79例阳性灰区样本中,120 min的国产确认试验与Murex确认试验均为50例阳性,2种确认试验结果一致（χ^2=0.078,P〉0.05）。结论延长国产一步法HBsAg ELISA试剂的酶反应时间可以提高检测的敏感性并适用于相关的确认试验。     

游离三碘甲状腺原氨酸（FT3）时间分辨荧光免疫分析试剂盒的研制

目的研制一种游离三碘甲状腺原氨酸（free triiodothyronine,FT3）时间分辨荧光免疫分析（time-resolved fuoroimmunoassay,TRFIA）试剂盒。方法采用直接竞争法建立游离三碘甲状腺原氨酸（FT3）检测TRFIA试剂盒（固相包被T3-复合物,与样本中的FT3竞争结合DTTA-Eu3＋标记的T3单克隆抗体）,并对试剂盒各项指标进行评价。结果该试剂盒的有效检测浓度范围为1.5~70 pmol/L,分析灵敏度为不高于0.7 pmol/L,批内、批间的不精密度分别不高于8.2%与10.5%。与T4、FT4、反T3、反T4交叉反应率分别为：〈0.01%、0.11%、〈0.01%、〈0.01%。稳定性试验表明试剂可以在2~8℃稳定一年,37℃稳定7d。用该试剂盒对500份正常人血清标本进行测试,统计该试剂盒的正常参考值范围是3.2~6.5 pmol/L。156份血清标本用本试剂盒与国外某知名品牌化学发光法试剂盒同时检测,其相关系数为0.992。结论试剂盒各项指标均达到临床检测要求,可考虑作为国外化学发光法同类产品试剂盒的替代产品。     

时间分辨免疫荧光法检测乙型肝炎病毒血清标志物的研究

目的：探讨时间分辨免疫荧光法（TRFIA）检测乙型肝炎病毒（HBV）血清标志物的准确性及意义。方法选取2011年1月至2013年1月在该院就诊的乙型肝炎（乙肝）或疑似乙肝患者180例,分别采用TRFIA定量和酶联免疫吸附试验（ELISA）定性两种方法检测患者的临床血清标本的乙型肝炎病毒表面抗体（HBsAb）、乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）、乙型肝炎病毒核心抗体（HBcAb）、乙型肝炎病毒e抗体（HBeAb）5个指标,将TRFIA设为治疗组,ELISA设为对照组,通过κ检验对两种方法间的一致程度进行评价。结果采用TRFIA检测HBV血清标志物HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb的阳性率分别为47．1％、41．1％、44．4％、58．9％、48．9％,采用ELISA检测的阳性率分别为48．3％、42．2％、42．2％、57．8％、52．2％,两组阳性率差异无统计学意义（P＞0．05）;两种方法检测5个指标的效率均表现高度的一致,其中HBsAb指标表现为极强的一致性,其他指标表现为高度一致。结论在检测HBV血清标志物方面,传统的ELISA可靠性也较高,与TRFIA一致性较高,都具有很高的应用价值。     

三种方法检测低浓度乙肝表面抗原的比较与分析

目的：初步探讨三种方法对低浓度乙肝表面抗原（HBsAg）定性与定量检测的结果并进行对比分析。方法分别用酶联免疫吸附法（ELISA）、化学发光微粒子免疫分析法（CMIA）与时间分辨荧光免疫法（TRFIA）测定2013年10月～2014年4月间于湖南旺旺医院就诊及体检的85例低浓度 HBsAg（ELISA法0.6＜S／CO≤3.0）标本,三种方法测定低浓度 HBsAg定性结果分为0.6＜S／CO≤1.0,0.6＜S／CO≤3.0两组采用检出阳性率进行χ2检验;HBsAg定量结果分为0.6＜S／CO≤1.0,1.0＜S／CO≤2.0,2.0＜S／CO≤3.0,0.6＜S／CO≤3.0四组采用配对样本t检验进行两两比较;HBsAg含量相关性采用相关系数t检验进行两两分析。结果①HBsAg检出阳性率0.6＜S／CO≤1.0组 CMIA法（64.0％）和TRFIA法（54.0％）两者之间差异无统计学意义（χ2值为0.333,P＞0.05）,0.6＜S／CO≤3.0组 ELISA 法（70.6％）与CMIA法（89.4％）及TRFIA法（87.1％）之间差异有统计学意义（χ2值分别为9.412,6.907,P均＜0.05）,CMIA法和TR-FIA法两者之间差异无统计学意义（χ2值为0.227,P＞0.05）。HBsAg检出阳性率 CMIA＞TRFIA＞ELISA。②HBsAg含量测定0.6＜S／CO≤1.0,1.0＜S／CO≤2.0,2.0＜S／CO≤3.0三组除在2.0＜S／CO≤3.0组 ELISA法与 CMIA法之间,ELISA法与TRFIA法之间差异均有统计学意义（t值1.743～3.671,P均＜0.05）,0.6＜S／CO≤3.0组三种方法之间差异均有统计学意义（t值分别为2.053,2.766,4.459,P均＜0.05）,总体含量CMIA＞TRFIA＞ELISA。③三种方法测定HBsAg含量之间均呈正相关关系（t值分别为2.928,2.939,60.915,P均＜0.05）,其中 CMIA法与 TRFIA法之间相关性最好（r＝0.989）。结论低浓度 HBsAg检测应首选 CMIA法,TRFIA法次之。对于 ELISA法检测低浓度 HBsAg标本应向临床建议用CMIA法或TRFIA法复查,避免漏检;并且不建议临床对不同方法测定定量或半定量结果间进行横     

Development of an economic and efficient strategy to detect HBsAg: application of "gray-zones" in ELISA and combined use of several detection assays

BackgroundELISA and CMIA are commonly used for detection of HBsAg. However, few investigations have been performed to evaluate their value in clinical practice, especially when jointly used. A reasonable and economic HBsAg testing algorithm is in great need.MethodsA total of 161,426 specimens in China were tested for 5 serum HBV markers with commonly used ELISA kits. 498 of these specimens were further tested for HBsAg by another ELISA kit, a CMIA kit and an HBsAg confirmatory assay.ResultsThe sensitivities of the 2 ELISA kits were 76.21% and 88.42%, respectively. However, when using “gray-zones”, the sensitivities were significantly improved to 97.43% and 96.43%. Furthermore, the combined use of the 2 ELISA kits and their “gray-zones” improved the sensitivity to 99.04%. Nevertheless, 2.91% of the samples with S/CO values below the lower “gray-zone” limits were reactive by the CMIA kit and then confirmed as HBsAg positive. However, 71.43% of the samples with HBsAg values within 0.05 and 0.10 IU/ml detected by the CMIA kit could not be confirmed.ConclusionsAs a rational and economic strategy, combined use of “gray-zones” in ELISA and several different detection assays can significantly increase the efficiency of HBsAg detection.     

应用CLSI EP12-A2文件评价HBsAg酶联免疫吸附试验试剂盒的分析性能

目的：应用CLSI EP12-A2文件评价乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）的酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒的性能,并比较2个不同厂家试剂盒之间的性能差异。方法按照CLSI发布的EP12-A2文件,对实验室使用的2个不同厂家的 HBsAg ELISA试剂盒的性能进行评价。结果2个厂家的试剂盒对分析物浓度为120％临界值的标本的检测阳性率均大于或等于95％,对分析物浓度为80％临界值浓度的标本的检测阴性率大于或等于95％,批内变异系数小于或等于15％,批间变异系数小于或等于20％。2个厂家试剂盒的灵敏度分别为94．2％（95％CI：84．3％∽98．0％）和92．3％（95％CI：81．8％∽97．0％）;特异性分别为98．0％（95％CI：89．5％∽99．6％）和100．0％（95％CI：92．8％∽100．0％）。2个厂家试剂盒灵敏度差值95％区间为-5．46％∽10．19％,特异性差值95％区间为-2．00％∽5．32％。结论2个厂家试剂盒检测 HBsAg 临界值＆#177;20％的浓度范围之外标本,能够得到稳定、可靠的检测结果,并具有较高的灵敏度和特异性,两者的检测灵敏度和特异性相近。     

阴道炎五联检测试剂盒临床诊断价值探讨

[目的]探讨LTS-V400阴道炎检测仪五联试剂在细菌性阴道病(BV)诊断中的临床价值.[方法]248例妇科门诊患者阴道分泌物同时用手工Amsel法、革兰染色和瑞氏染色及阴道炎五联试剂进行检测,并对其结果一致性进行对比分析.[结果]248例样本中,手工Amsel阳性率为21.0%,五联检测法阳性率为21.4%,两者比较...     

新型ELISA检测戊型肝炎病毒IgM抗体的敏感度与特异度评价

目的 评估基于戊型肝炎病毒（HEV）主要免疫表位多肽及其截短多肽的新型ELISA检测抗HEV IgM的敏感度与特异度.方法 根据抗HEV抗体与主要免疫表位多肽的高反应性以及与截短多肽的不反应性,分别以两种多肽为包被抗原,建立新型ELISA法,检测2007-2012年收集的612例可疑HEV感染者血清抗HEV IgM,并与万泰HEV IgM抗体诊断试剂盒检测结果比较,结果不一致血清用免疫印迹法（Western blotting）确认,χ^2检验比较两种试剂灵敏度和特异度.结果 抗HEV IgM检测中,新型ELISA阳性326例,阴性286例;万泰试剂阳性370例,阴性242例;两种试剂同时阳性320例,同时阴性236例.在万泰试剂阳性而新型ELISA阴性的50例中,Western blotting证实阳性21例,阴性29例;在万泰试剂阴性而新型ELISA阳性的6例中,Western blotting显示阳性与阴性各3例.以两种试剂同时阳性或Western blotting阳性为标准,万泰试剂与新型ELISA灵敏度分别为99.1％（95％ CI：0.972-0.998）和93.8％（95％ CI：0.907-0.961）,差异有统计学意义（χ^2=13.988,P＜0.001）;特异度分别为89.2％（95％ CI：0.847-0.925）和98.9％（95％ CI：0.965-0.997）,差异有统计学意义（χ^2=22.466,P＜0.001）.结论 与万泰试剂相比,新型ELISA检测抗HEV IgM敏感度略低,但特异度较好,可减少抗HEV IgM检测中的假阳性.