人乳头瘤病毒E6与宫颈癌

宫颈癌的病因与持续感染人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)相关.最近的研究表明,HPV E6在宫颈癌的发生过程中发挥重要作用.本文就HPV E6宫颈癌的发生机制及HPV E6蛋白的表达与宫颈癌的临床意义进行综述.     

新疆维吾尔族妇女宫颈癌组织HPV16型E6基因变异分析

目的:新疆维吾尔族妇女宫颈癌的发生主要与人乳头状瘤病毒16(HPV16)感染相关,特定的HPV16 E6突变株具有更高的致癌危险性.本研究通过检测维吾尔族妇女宫颈癌组织中HPV16 E6基因突变情况,探讨其与维吾尔族妇女宫颈癌高发的关系.方法:从140例维吾尔族妇女宫颈癌石蜡包埋组织中提取DNA作为模板,PCR 扩增HPV16 E6 全长基因,PCR 产物直接测序,进行突变分析.结果:本组维吾尔族妇女宫颈癌组织中HPV16的阳性率是73.6%(103/140),91例E6基因测序及分析结果表明,维吾尔族妇女宫颈癌组织中存在HPV16 E6变异株,其中49例(53.8%)分离株发生L83V突变,4例(4.39%)发生D25E突变,2例(2.20%)发生D64E/L83V突变,36例(39.6%)与野生型相同.结论:新疆维吾尔族妇女宫颈癌患者HPV16 E6基因发生变异,主要以L83V突变为主,HPV16变异株在维吾尔族妇女宫颈癌患者中的分布可能与维吾尔族妇女宫颈癌高发存在一定关系.     

HLA-DR 抗原及HPV16/18E6蛋白在宫颈癌的表达及其相互关系

目的:通过检测HLA-DR抗原及HPV16/18E6蛋白在宫颈癌组织中的表达情况,探讨由HLA-DR抗原介导的免疫应答在感染高危型HPV至发展为宫颈癌过程中的作用机制.方法:采用免疫组织化学SP法检测宫颈癌、CIN及正常宫颈组织中HLA-DR抗原及HPV16/18E6的表达情况.结果:HLA-DR抗原的阳性表达率在宫颈癌、CIN、正常宫颈组织中分别为 81.8%、73.3%、37.5%,而HPV16/18E6蛋白的阳性表达率则分别为75.8%、60.0%、37.5%,两者在三组中的表达均有显著差异 (P均﹤0.05).HLA-DR抗原及HPV16/18E6蛋白在宫颈癌组织中的阳性表达率随临床分期、分化程度变化及淋巴结是否转移而不同,但其差异无显著意义 (P均﹥0.05).结论:HLA-DR抗原递呈病毒抗原给T细胞引起的免疫应答可能在宫颈癌的发生发展过程中起着重要的作用.     

HPV-16 E6/E7在宫颈癌发生机制及疫苗中的研究进展

宫颈癌(cervical cancer,CC)的病死率位于全球妇女癌症死亡率的第2位,而人乳头瘤病毒(human papillomaviruses,HPV)感染是宫颈癌发生的首要因素.与宫颈癌相关的HPV有16、18、31、33、45、58等10余型,其中以HPV-16与宫颈癌发病的关系密切称为高危型.大量研究认为高危HPV感染是发展为宫颈癌的中心环节.随着分子生物学和分子病毒学技术的不断发展,目前公认病毒DNA整合进入宿主细胞基因组中是细胞发生恶变的重要步骤,其中HPV-16 E6/E7蛋白是2个具有重要转化特性的癌蛋白.     

人乳头瘤病毒E6/E7 mRNA在宫颈病变中的研究进展

近年来,宫颈癌在人群中的发病率显著升高,病死率也逐渐攀升,其好发人群正有从中老年女性转变为年轻女性的趋势.女性发生宫颈癌前病变乃至进展为宫颈癌,与高危型人乳头瘤病毒(HPV)在机体中的持续作用密不可分.其中,HPV E6/E7 mRNA在整个病变过程中起着重要作用,是用于预测宫颈病变恶性转归和监测宫颈癌复发的重要指标....     

新疆维吾尔族妇女宫颈癌组织中HPV16型E6基因突变分析

背景与目的：高危型人乳头状瘤病毒16和18(human papillomavirus type16 and 18,HPV16,HPV18)是宫颈癌主要病因之一,尤其以HPV16最为常见,其中HPV16E6是主要癌基因之一。在一些地区,特定的E6基因突变株是宫颈癌发生的危险因素。新疆南部维吾尔族聚居区足宫颈癌高发区,我们已在前期的研究中发现该地区HPV16E6基因发生突变。本研究旨在检测该突变在新疆南部维吾尔族妇女宫颈癌组织中的分布规律,并探讨其与该地区宫颈癌高发的关系。方法：从35例中国新疆南部维吾尔族妇女宫颈癌活检标本中提取组织DNA作为模板,PCR扩增HPV16E6全长基因,PCR产物直接测序或克隆后测序,分析新疆维吾尔族妇女宫颈癌组织中HPV16E6基因的突变。结果：PCR检测结果表明宫颈癌组织中HPV16E6阳性率为82．86％(29／35);26例中E6分离片段的测序和序列分析表明,15例(57．69％)分离株E6基因与原型相同,另有11例(42．31％)E6基因突变,其中9例(34．62％)分离株发生了L83V突变,2例(7．69％)分离株发生rL83V／D63E突变。结论：中国新疆南部地区HPV16E6基囚发生变异,其原型和变异型在该地区维吾尔族宫颈癌患者巾的分布规律可能与该地区宫颈癌高发存在一定关系。     

HPV E6,p53与宫颈癌的关系及其在基因治疗中的应用

目前宫颈癌的发病率仍居全世界妇女常见恶性肿瘤的第二位.高危型人乳头瘤病毒（high-risk Human Papillomavirus,HR-HPV）感染是宫颈癌及其癌前病变最主要的诱因之一.抑癌基因p53能够有效地抑制细胞增殖和促进细胞凋亡,人类近半数的肿瘤都与p53基因的突变和失活有关,HPV E6蛋白降解p53蛋白,是宫颈癌发生的前提.选择性杀伤p53功能缺失的肿瘤细胞,同时保护正常细胞,发展HPV疫苗及联合用药是临床肿瘤免疫学家进行宫颈癌基因治疗的目标.     

高危型人乳头瘤病毒癌基因E6和E7调节细胞作用靶点的研究进展

高危型人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)的感染与多种人类癌症密切相关,其中最典型的是宫颈癌.高危型HPV最重要的两个病毒癌基因为E6和E7,病毒基因组整合到宿主基因组是病毒癌基因E6和E7实现持续表达的一种方式.HPV癌基因E6和E7能够靶向宿主细胞途径,通过这些相互作用,导致HPV发挥其...     

湖北地区HPV16 E7和E5基因突变与宫颈 病变的相关性

 摘要：目的分析湖北地区宫颈病变组织中HPV16 E7和E5基因序列变异及该变异与宫颈病变的相关关系。方 法对HPV16 E7和E5 DNA阳性的20例正常宫颈、30例CIN Ⅰ~Ⅱ、30例CINⅢ和35例宫颈鳞癌的基因片段进行 纯化测序,检测基因变异。结果除了HPV16 E7和E5原型序列以外,HPV16 E7最常见变异为A647G和T846C的 联合变异株,该联合变异株频率在正常宫颈、CIN Ⅰ~Ⅱ、CINⅢ和鳞癌组中突变率分别为25%、30%、 53.3%、62.9%;HPV16 E5最常见变异为A3979C +A4042G联合变异株,联合变异株在正常宫颈、CIN Ⅰ~Ⅱ 、CINⅢ组和鳞癌组中突变率分别为30%、33.3%、56.7%、71.4%;HPV16 E7和E5联合突变株在宫颈病变各 阶段差异有统计学意义。结论HPV16 E7.A647G／T846C和HPV16 E5.A4042G／A3979C联合变异株为中国湖北 地区宫颈病变中流行的变异株,此变异株与宫颈病变程度呈正相关。     

人乳头瘤病毒癌基因E6和E7对细胞影响的研究进展

高危型人乳头瘤病毒（human papillomavirus，HPV）的持续感染是宫颈癌发生的主要危险因素，HPV感染细胞可通过癌基因E6和E7靶向细胞途径引起多种细胞改变，主要包括调节细胞周期进展、逃避细胞凋亡、诱导DNA损伤、影响细胞代谢等，最终在细胞内发挥其致瘤作用。本文将主要对高危型人乳头瘤病毒癌基因E6和E7引起的细胞改变进行综述。     

山东青岛地区宫颈癌组织中ＨＰＶ１６型Ｅ６和Ｅ２基因突变分析

目的　通过分析山东青岛地区宫颈组织中ＨＰＶ１６型Ｅ６和Ｅ２基因突变情况,探讨其与该地区宫颈癌的关系。方法　从１０４例青岛地区宫颈疾病组织中提取ＤＮＡ作为模板,采用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）技术筛选出高危型ＨＰＶ及ＨＰＶ１６阳性标本,扩增出ＨＰＶ１６型Ｅ６、Ｅ２全长基因,ＰＣＲ产物纯化后测序,与德国ＨＰＶ标准株进行比对分析。结果　宫颈组织中高危型ＨＰＶ阳性率为９３.２７％（９７／１０４）,ＨＰＶ１６阳性率为６９.２３％（７２／１０４）。ＨＰＶ１６阳性标本中扩增出Ｅ６基因３７例,有５例与标准株序列相同,３２例存在突变,其中２５例突变型别为Ｔ１７８Ｇ或Ｔ１７８Ａ（Ｄ２５Ｅ）。在Ｅ２基因全序列测序中,２３例均存在Ｃ３６８４Ａ（Ｔ-Ｋ）,１４例同时存在Ｔ３５２４Ｃ、Ｃ３６８４Ａ（Ｔ-Ｋ）和Ｃ３７８７Ａ（Ｄ-Ｅ）,９例同时存在Ａ２９２６Ｇ、Ｃ３１５９Ａ（Ｔ-Ｋ）、Ｇ３２４９Ａ（Ｒ-Ｑ）、Ｔ３３８４Ｃ（Ｉ-T）、Ｃ３４１０Ｔ（Ｐ-Ｓ）和Ｃ３６８４Ａ（Ｔ-Ｋ）。结论　山东青岛地区宫颈癌患者ＨＰＶ１６型Ｅ６、Ｅ２基因与德国标准株比较存在多处变异,Ｅ６与Ｅ２基因突变可能存在相关性。     

p16~(INK4A)和HPV16 E7/HPV18 E6在ASCUS中的表达及临床意义

目的:探讨p16 INK4A和HPV16 E7/HPV18 E6在宫颈细胞学诊断为非典型性鳞状细胞不明确意义型(ASCUS)中的表达及筛查潜在宫颈病变的价值。方法:对150例ASCUS患者行阴道镜检查并取活检,同时对该150例患者的TCT标本进行免疫细胞化学染色检测p16INK4A的表达和RT-PCR法检测其中HPV16型E7蛋白和18型E6蛋白(HPV16 E7/HPV18 E6)mRNA的表达。结果:p16INK4A和HPV16 E7/HPV18 E6 mRNA在ASCUS中表达的阳性率分别为37.33%和46.67%,随着病理级别的增加,p16INK4A和HPV16E7/HPV18 E6 mRNA表达的阳性率也随之增加;p16INK4A和HPV16 E7/HPV18 E6 mRNA筛查ASCUS中宫颈病变的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为0.88、0.95、0.91、0.93和0.81、0.75、0.67、0.86,在p16INK4A和HPV16 E7/HPV18 E6 mRNA阳性的样本中,宫颈病变发生率分别为91.07%和67.14%,均明显高于阴性样本中的发病率7.45%和13.75%(P<0.001);ASCUS中宫颈病变样本中p16INK4A和HPV16 E7/HPV18 E6 mRNA呈高表达,且具有较高的一致性(κ=0.6475)。结论:p16INK4A和HPV16 E7/HPV18 E6 mRNA在ASCUS中病理诊断为宫颈病变的样本中均呈高表达,对筛查潜在的宫颈病变具有重要意义,其中p16INK4A的筛查效能优于HPV16E7/HPV18E6mRNA;p16INK4A能间接反映HPV的转录活性,在ASCUS的分流中有重要意义,且可视性的p16INK4A免疫染色比HPV检测更直观。     

诺帝对永生化人宫颈上皮细胞HPV16E6基因抑制作用的初步研究

目的:研究诺帝(Nordy)对永生化人宫颈上皮细胞(H8细胞)HPV16E6基因的抑制作用和机制.方法:免疫细胞化学SP法检测诺帝作用前后H8细胞E6蛋白和p53蛋白表达;免疫细胞化学SP法检测增殖细胞核抗原MCM5表达,RT-PCR检测诺帝作用前后HPV16E6 mRNA的表达情况.结果:免疫细胞化学显示,E6和p53蛋白在对照组细胞内呈阳性表达,阳性物分别位于胞浆和胞核,经100μmol/L诺帝处理72h后,H8细胞E6蛋白和p53蛋白表达明显减弱,与对照组相比,差异有显著性.MCM5蛋白在对照组细胞内呈强表达,呈棕黄色分布于胞核内,经100μmol/L诺帝处理96h后,MCM5的表达明显下降.用浓度10μmol/L诺帝处理H8细胞72小时后,H8细胞的HPV16E6 mRNA表达量与对照组表达量无明显差异,而较高浓度的诺帝(50μmol/L,100μmol/L,200μmol/L)处理H8细胞72小时后,H8细胞的HPV16E6 mRNA表达量相比对照组有明显降低,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论:诺帝具有一定抑制HPV16病毒的作用,主要表现在抑制HPV16E6基因的mRNA表达,进而影响E6基因的转录,导致病毒E6蛋白和p53蛋白表达降低,降低永生化细胞MCM5表达,抑制细胞的增殖活性.     

p16INK4A和HPV16 E7/HPV18 E6在ASCUS中的表达及临床意义

目的：探讨p16^INK4A和HPV16 E7／HPV18 E6在宫颈细胞学诊断为非典型性鳞状细胞不明确意义型（ASCUS）中的表达及筛查潜在宫颈病变的价值。方法：对150例ASCUS患者行阴道镜检查并取活检，同时对该150例患者的TCT标本进行免疫细胞化学染色检测p16^INK4A的表达和RT-PCR法检测其中HPV16型口蛋白和18型E6蛋白（HPV16 E7／HPV18 E6）mRNA的表达。结果：p16^INK4A和HPV16 E7／HPV18 E6 mRNA在ASCUS中表达的阳性率分别为37．33％和46．67％，随着病理级别的增加，p16^INK4A和HPV16 E7／HPV18 E6 mRNA表达的阳性率也随之增加；p16^INK4A和HPV16 E7／HPV18 E6 mRNA筛查ASCUS中宫颈病变的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为0．88、0．95、0．91、0．93和0．81、0．75、0．67、0．86，在p16^INK4A和HPV16 E7／HPV18 E6 mRNA阳性的样本中，宫颈病变发生率分别为91．07％和67．14％，均明显高于阴性样本中的发病率7．45％和13．75％（P〈0．001）；ASCUS中宫颈病变样本中p16^INK4A和HPV16 E7／HPV18 E6 mRNA呈高表达，且具有较高的一致性（K=0．6475）。结论：p16^INK4A和HPV16 E7／HPV18 E6 mRNA在ASCUS中病理诊断为宫颈病变的样本中均呈高表达，对筛查潜在的宫颈病变具有重要意义，其中p16^INK4A的筛查效能优于HPV16 E7／HPV18 E6 mRNA；p16^INK4A能间接反映HPV的转录活性，在ASCUS的分流中有重要意义，且可视性的p16^INK4A免疫染色比HPV检测更直观。     

Situation of HPV16 E2 Gene Status During Radiotherapy Treatment of Cervical Carcinoma

Background: Human papillomavirus (HPV) integration within the E2 gene has been proposed as a critical eventin cervical carcinogenesis. This study concerned whether HPV16 status and E2 gene intactness are predictive ofradiation response in patients with cervical cancer. Materials and Methods: Biopsies of 44 patients with cervicalcancer were collected before or after radiotherapy. The presence of HPV16 was assessed by polymerase chainreaction (PCR) using specific primers for the L1 region. E2 disruption was detected by amplifying the entire E2gene. Results: HPV16 DNA was found in 54.5% of the clinical samples. Overall, 62.5% of the HPV16 positivetumors had integrated viral genome and 37.5% had episomal genome. There was a tendency of increase ofHPV16 E2 negative tumors compared with HPV16 L1 ones in advanced stages (75% versus 20% in stage IIIrespectively). Detection of E2 gene appeared influenced by the radiotherapy treatment, as the percentage ofsamples containing an intact HPV16 E2 was more frequent in pretreated patients compared to radiotherapytreated patients (66.6% versus 20%). The radiation therapy caused an eight-fold [OR= 8; CI=1.22-52.25; p=0.03]increase in the risk of HPV16 genome disruption. The integration status is influenced by the irradiation modalities,interestingly E2 disruption being found widely after radiotherapy treatment (75%) with a total fractioned doseof 50Gy. Conclusions: This study reveals that the status of the viral DNA may be used as a marker to optimizethe radiation treatment.     

新疆哈萨克族食管癌组织中HPV16 E6、E7基因的检测与p53的关系

目的探讨人乳头状瘤病毒(HPV)16型感染在新疆哈萨克族(哈族)食管癌发病中的作用,并分析HPV16感染与p53过表达之间的关系.方法采用聚合酶链(PCR)技术,检测41例食管鳞状细胞癌组织中HPV16 E6与E7基因表达差异;用LSAB免疫组织化学方法分析p53蛋白的表达.结果癌组织中HPV16 E6与E7基因阳性检出率分别为34.15%(14/41)和63.41%(26/41);用免疫组化检出p53蛋白阳性率分别在HPV16 E6阳性组(57.1%)与HPV16 E6阴性组(14.8%)间、HPV16 E7阳性组(42.3%)与HPV16 E7阴性组(6.7%)间均存在显著性差异(P＜0.05);用PCR检出HPV16 E6、E7基因在食管癌的高分化组、中低分化组中的检出率分别为7.69%(1/13)、46.43%(13/28)和38.46%(5/13)、75.00%(21/28),差别均有统计学意义(P＜0.05).结论提示p53基因突变与HPV16感染在哈族食管癌的发病过程中存在相互促进作用;另外,HPV16 E6与E7基因和哈萨克族食管癌病理组织学分级的生物学行为密切相关.     

HPV E6/E7 mRNA和HPV DNA检测技术在宫颈上皮内瘤变中的诊断价值分析

目的比较人乳头瘤病毒(HPV)E6/E7 mRNA和HPV DNA检测技术对宫颈上皮内瘤变(CIN)2级及以上(CIN2+)患者的诊断价值,并评价HPV E6/E7 mRNA检测结果在不同实验室间的一致性。方法采用HPV E6/E7 mRNA和HPV DNA检测技术对212例门诊体检的健康者和住院的宫颈病变患者的宫颈脱落细胞学标本进行检测。以病理诊断结果为金标准,评价两种检测技术诊断CIN2+的灵敏度和特异度。北京市迪安中心实验室和北京市怀柔妇幼保健院实验室均采用HPV E6/E7 m RNA检测技术检测同一批标本,评价实验室间检测的一致性。结果HPV E6/E7 m RNA检测的阳性率为38.7%,与HPV DNA的阳性率43.9%比较,差异无统计学意义(P﹥0.05)。HPV E6/E7 mRNA和HPV DNA的检测阳性率均随着病理分级的升高而增加(P<0.01)。HPV E6/E7mRNA检测CIN2+的灵敏度为92.96%,与HPV DNA的90.14%相比,差异无统计学意义(P﹥0.05),而HPV E6/E7mRNA检测CIN2+的特异度为88.65%,高于HPV DNA的79.43%,差异有统计学意义(P<0.05)。两个实验室采用HPV E6/E7 m RNA检测阳性一致的标本例数为78,阴性一致的标本例数为121,总一致率为93.87%,Kappa=0.872,一致性较好。结论与HPV DNA检测技术相比,HPV E6/E7 mRNA检测宫颈病变的特异度更具优势,实验室间重复性检测的一致率较高,有望成为中国宫颈癌HPV筛查的首选方法。     

食管鳞癌中人乳头瘤病毒16型E6、E7和细胞特异性增强子片段的检测

目的:检测食管鳞癌组织中人乳头瘤病毒(HPV)16 E6、E7基因和细胞特异性增强子片段(CTSE).方法:采用聚合酶链反应法(PCR)检测40例食管鳞癌和20例正常食管黏膜中HPV16 E6、E7基因和病毒长控制区内(long control region,LCR)的细胞型特异性增强子(cell type specific enhancer,CTSE).结果:在40例食管鳞癌中,HPV16 的E6、E7基因和CTSE片段的检出率分别是37.5%(15/40)、42.5%(17/40)和40%(16/40),20例正常食管黏膜中E6、E7和CTSE的检出率分别为0%(0/20)、0%(0/20)和5%(1/20),两者均存在显著性差异(P<0.05).CTSE片段分别与E6和E7 基因有明显相关性(P<0.05).食管鳞癌中E6 、E7基因及CTSE的检出率在患者不同性别、年龄、肿瘤浸润程度、淋巴结转移和组织学分级肿瘤中差异均无显著性(P>0.05). 结论:E6和E7基因与CTSE 片段共存于HPV16感染的食管鳞癌组织中,三者可能与食管鳞癌的发生和发展有关.