新型肾脏保存液低温保存后犬肾移植效果评价

目的建立犬自体肾移植模型，评价经新型肾脏保存液（HCA-Ⅱ）低温保存后的犬肾移植效果。方法60只杂种犬随机分为A（H-CA液，保存48h）、B（HCA—I液，保存48h）、C（UW液，保存48h）、D（H-CA液，保存72h）、E（HCA-Ⅱ液，保存72h）、F（UW液，保存72h）等六组。切取左肾，灌洗并放入该保存液保存。左肾动脉与右侧髂外动脉端端吻合，静脉与右侧髂外静脉端侧吻合，输尿管与膀胱抗反流吻合，同时切除右侧肾脏。检测移植前后肾功能指标。结果手术成功率95％，HCA-Ⅱ液各组术后血肌酐的峰值均低于H-CA液组，且血肌酐恢复正常的时间也较H—CA液组早（P〈0．05）；以上各指标均与UW液组无明显差别（P〈0．05）。结论HCA-Ⅱ肾脏保存液对供肾的保存效果明显好于H—CA保存液，可安全保存犬肾72h。     

SMO保存液对犬肾低温保存期间氧自由基变化的研究

建立犬离体肾脏单纯低温保存模型，对照组供肾灌注和保存用HTK保存液和UW保存液，实验组用自制SMO保存液，分别在犬肾保存24、48、72h切取肾皮质标本，测定皮质丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性。结果显示，实验组SOD活性48h明显高于对照组，MDA含量各时点均显著低于对照组（P均〈0．05）。实验组各时点SOD活性和MDA含量与UW液组比较均无统计学差异。提示SMO液在减轻氧自由基损伤方面优于HTK液，与UW液相当。     

自制AMU液对低温保存兔肾氧自由基表达的影响

目的观察自制AMU液对低温保存兔肾氧自由基表达的影响。方法分别采用HCA液、AMU液保存兔肾（HCA组和AMU组）。于保存24、48、72 h时切取肾皮质,分别用硫代巴比妥酸法（TBA法）和黄嘌呤氧化酶法检测肾皮质丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活力。结果随保存时间延长,两组SOD活力均下降、MDA含量均上升,但保存48、72 h时AMU组SOD活力明显高于HCA组（P均〈0.05）,保存各时点AMU组MDA含量低于HCA组（P均〈0.05）。结论在阻止低温保存兔肾SOD活力下降及MDA含量上升方面,AMU液优于HCA液。     

零下非结冰UW液、Celsior液和HTK液保存C3A细胞的效果比较

目的 比较UW液、Celsior液和HTK液零下非结冰(-0.8℃)保存生物人工肝用C3A细胞的效果.方法 制备好的C3A细胞悬液分以下3组:UW液保存组(UW液组);Celsior液保存组(CS液组);HTK液保存组(HTK液组).各组细胞于-0.8℃低温保存72 h后,分别测定细胞存活率及死亡率(流式细胞术)、LDH释放、尿素合成功能及白蛋白分泌功能.结果 UW液及Celsior液比HTK液显著提高了零下非结冰保存72 h的C3A细胞的存活率[(84.34±4.25)%,(83.53±3.73)% vs (75.65±3.01)%,P<0.001]和细胞内ATP含量[(5.54±1.44)μg/106 个细胞,(5.51±1.31)μg/106个细胞 vs (2.75±1.03)μg/106 个细胞,P<0.001];抑制了LDH释放(P<0.001);更好地维持了细胞尿素合成功能[(0.63±0.10)mmol/L,(0.62±0.06)mmol/L vs (0.39±0.04)mmol/L,P<0.001]和白蛋白分泌功能[(1.99±0.38)g/L,(1.96±0.24)g/L vs (1.50±0.18)g/L,P<0.05].UW液与Celsior液零下非结冰保存C3A细胞的效果无差异.结论 同HTK液相比,使用UW液或者Celsior液零下非结冰(-0.8℃)保存C3A细胞可以明显地提高复温后细胞存活率和细胞内ATP含量,降低低温损伤引起的LDH释放,有效地保护肝细胞尿素合成功能和白蛋白分泌功能.UW液同Celsior液零下非结冰保存C3A细胞的效果无差异,保存时间不宜超过72 h.     

人工虫草复合液对大鼠离体肾缺血再灌注损伤的保护效应

目的:探讨人工虫草复合液对大鼠离体肾缺血再灌注损伤的保护效应及其作用机制。方法:将72只雄性SD大鼠离体肾脏随机分为生理盐水灌注组、高渗枸橼酸盐腺嘌呤液(HCA液)灌注组和虫草复合液灌注组,分别观察灌注后6h、12h、24h肾损伤程度、肾小管上皮细胞凋亡指数(AI)、肾组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)活力与丙二醛(MDA)含量。结果:(1)在灌注后6h,与生理盐水组和HCA液组比较,虫草复合液组肾损伤程度较轻;灌注后12h,与生理盐水组比较,HCA液和虫草复合液组肾损伤程度较轻,而HCA液和虫草复合液组肾损伤程度无差异;在灌注后24h,各组肾损伤程度无差异;(2)与HCA液和生理盐水组比较,虫草复合液组在灌注后6h、12h后AI较低(P0.05)、肾组织匀浆中SOD活力较高(P0.05)、MDA含量较低(P0.05);灌注后24hAI、肾组织匀浆中SOD活力与MDA含量无统计学差异(P0.05);(3)AI与肾组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)活力负相关(r=-0.724),与丙二醛(MDA)含量正相关(r=0.681)。结论:人工虫草提取液灌注对大鼠离体肾缺血再灌注损伤具有一定的保护性效应,其作用机制可能与抗氧自由基、抗脂质过氧化作用有关。     

Celsior液、HTK液和UW液对心脏保存效果的实验研究

目的应用Langendorff灌注模型低温灌注离体鼠心6h,检验器官保存液Celsior液、HTK液和UW液对心脏保存的效果.方法实验分为3组,每组8只Wistar大白鼠.麻醉并抗凝后,快速取下鼠心并悬挂在Langendorff灌注模型上灌注,测定血流动力学基础值.分别用三种器官保存液灌注离体鼠心,在4℃下低温浸泡保存6h.重新复温、复灌,再次测定血流动力学值和冠状动脉流量,留取标本分别测定心肌水含量、心肌酶漏出量、心肌细胞ATP和CP含量和观察心肌细胞超微结构变化.结果①血流动力学恢复率,Celsior液和HTK液组均优于UW液组.②心肌酶漏出量,Celsior液和HTK液组明显低于UW液组.③ATP和CP含量,Celsior液和HTK液组高于UW液组.④超微结构变化,Celsior液组和HTK液组心肌损害最轻,UW液组心肌损害较重.结论Celsior液、HTK液和UW液对心脏保护的效果均较好,均为较合适的心肌保存液.Celsior液和HTK液对心脏保存的效果无显著差异,但均优于UW液.     

左旋泊尼汀对离体大鼠心脏保存效果的影响

将25只成年雄性Wistar大鼠（体重350～400g）随机分为A组（对照组）及B、C、D、E组，每组5只，经麻醉和抗凝后，快速取下心脏。A组心脏悬挂在Langendorff灌注模型上K-H液恒压灌注，37℃下测定血流动力学指标；B、C、D、E组分别经主动脉灌注4℃ HTK液、UW液、HTK液＋左旋泊尼汀、UW液＋左旋泊尼汀心肌保存液，置于4℃相应的心肌保存液中保存6h；重新复温复灌。再次测定血流动力学指标，留取标本分别测定心肌含水量、心肌酶漏出量、ATP含量变化。结果 D组及E组平均左室发展压（LVDP）与B、C组比较显著升高，磷酸肌酸激酶同工酶（CK—MB）漏出量明显减少，心肌ATP含量明显增多。认为HTK液和UW液中加入左旋泊尼汀能改善离体鼠心脏的低温保存效果。     

原代乳猪肝细胞低温保存的初步探索

目的：探讨4℃低温保存肝细胞的方法。方法：两步法分离新生乳猪肝细胞，将肝细胞分别以3种不同低温保存液（RPM1－1640培养液；加有聚乙二醇（PEG）的RPM1－1640培养液；UW液）4℃保存24h、48h及72h。复苏后接种培养，作存活率、贴壁率及细胞活性等检测，并观察其形态结构变化。结果：不同低温保存液保存不同时间的猪肝细胞的活力、生物学功能及形态学表现均有所不同，其中单用RPM1－1640培养液组效果最差，PEG组和UW组结果相似，均保持70％以上存活率达48h，活力与药物代谢功能无明显差别，镜下见复苏肝细胞浆内含丰富颗粒，可见较多双核细胞，线粒体无减少，粗面内质网数下降，滑面内质网增多。结论：猪肝细胞在4℃可保存48h，加入PEG的RPM1－1640培养液可更好地保持肝细胞活性。     

糖尿病大鼠肾脏组织中氧化应激的实验研究

目的探讨糖尿病大鼠肾脏组织中氧化应激水平在糖尿病肾病中的作用。方法采用STZ诱导糖尿病模型鼠。36只大鼠随机分为正常对照组，糖尿病Ⅰ组(给予鱼精蛋白锌胰岛素2～4U／2d)，糖尿病Ⅱ组(每日给予鱼精蛋白锌胰岛素9～12U／kg体重)。喂养至12w，测定各组血糖，血中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、尿素氮、肌酐、糖化血红蛋白(HbAlc)水平，尿肌酐水平和24h尿蛋白含量。运用比色法测定肾脏皮质中抗氧化酶的活性，包括总超氧化物歧化酶(TSOD)、铜锌超氧化物歧化酶(Cu—Zn SOD)、锰超氧化物歧化酶(MnSOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH—Px)，以及丙二醛(MDA)的含量。结果糖尿病Ⅱ组与正常对照组间各指标无显著性差异。糖尿病Ⅰ组与Ⅱ组或正常对照组比较，血糖、TC、TG、HbAlc明显升高；抗氧化酶中，TSOD、Cu—Zn SOD、CAT活性明显下降，GSH—Px活性则升高，Mn SOD活性在各组中无显著性差异；MDA水平明显升高。尿蛋白含量在糖尿病Ⅰ组较其他两组明显升高，而肌酐清除率则明显下降。结论糖尿病可以引起大鼠肾脏氧化应激水平的升高，在糖尿病肾病发病机制中起重要作用。     

延肾一号冲剂抗大鼠肾缺血再灌注氧化损伤的研究

目的 观察延肾一号冲剂对肾缺血再灌注(I/R)损伤大鼠肾组织活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、Ca2+-Mg2+ ATP酶活性的变化,探讨其抗肾I/R损伤的机制.方法 72只Wistar大鼠随机分为假手术组、对照组、治疗组,各24只.治疗组给予延肾一号冲剂,假手术组及对照组灌以相应量的生理盐水.分别检测缺血1 h、再灌注24、48 h时尿素氮、肌酐,ROS、MDA含量及SOD、Ca2+-Mg2+ ATP酶活性的变化.结果 再灌注24、48 h时治疗组、对照组与假手术组血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)比较均有显著升高 (P＜0.01);再灌注24 h时对照组SOD、Ca2+-Mg2+ ATP酶活性与48 h时相比活性明显降低 (P＜0.05),再灌注24 h时治疗组与对照组相比SOD、Ca2+-Mg2+ ATP酶明显升高 (P＜0.05);再灌注24 h时,治疗组MDA、ROS则显著低于对照组 (P＜0.01) ,再灌注48 h时,治疗组与对照组相比仍有显著差异(P＜0.01).结论 氧化损伤是导致肾I/R损伤的重要原因;氧化损伤主要发生在I/R 24 h;延肾一号冲剂通过升高SOD、Ca2+-Mg2+ ATP酶的活性,减少MDA、ROS产生,减少其对肾脏的损伤作用.