硒对大鼠肝细胞增殖周期和DNA合成的影响

目的：研究亚硒酸钠对大鼠肝细胞增殖周期和DNA合成的影响。方法：选用雄性SD大鼠，每组5只，用5，10和20μmol/kg的亚硒酸钠腹腔注射染毒。用流式细胞术研究大鼠肝细胞增殖周期和DNA相对含量（DNARC)，用单细胞凝胶电泳检测DNA损伤。结果：10和20μmol/kg的亚硒酸钠均可使大鼠肝细胞G0／G1期细胞显减少，5μmol/kg的亚硒酸钠虽可使G0／G1期细胞减少，但无显性差异。S期和G2／M期细胞以及增殖指数变化不明显。5、10和20μmol/kg的亚硒酸钠可引起大鼠肝细胞DNARC下降，DNA损伤率较对照组显增高，而且DNARC和DNA损伤率之间存在负相关关系，随DNA损伤率的增高，DNARC下降，相关系数为：－0．9887（P＜0．01）。结论：一定剂量的亚硒酸钠不仅改变了大鼠肝细胞的增殖周期，还引起DNA损伤，并影响DNA合成，使DNA相对含量显下降。     

硒和砷对HepG2细胞氧化应激和DNA氧化损伤及修复的作用

目的研究硒和砷单独及联合作用对HepG2细胞氧化应激和DNA氧化损伤及修复的影响。方法采用不同浓度的硒(2.5、5.0和10.0μmol/L亚硒酸钠)和砷(1.56、3.13、6.25、12.5和25.0μmol/L亚砷酸)为受试物单独或联合处理HepG2细胞。荧光法测定丙二醛(MDA)作为氧化应激的指标,高效液相色谱-电化学检测法(HPLC-EC)测定8-羟基鸟苷(8-OHdG)作为DNA氧化损伤的指标,Western Blot检测hOGG1表达作为DNA氧化损伤修复的指标。结果在硒和砷单独作用的条件下,可观察到:(1)5.0、10.0μmol/L的亚硒酸钠和6.25、12.5、25.0μmol/L的亚砷酸均引起HepG2细胞MDA含量增加、8-OHdG生成增多、hOGG1表达明显下降(P<0.05,P<0.01);(2)较低浓度的亚硒酸钠(2.5μmol/L)具有有限的抑制8-OHdG生成的作用(P>0.05)。在硒和砷联合作用的条件下,可观察到:(1)2.5μmol/L的亚硒酸钠和6.25μmol/L的亚砷酸同时染毒使MDA含量和8-OHdG的生成均较相应砷剂量组下降(P<0.05);(2)2.5μmol/L的亚硒酸钠与6.25、12.5和25.0μmol/L的亚砷酸同时染毒,hOGG1表达与相应砷剂量组比较没有明显差异(P>0.05)。结论5.0、10.0μmol/L的亚硒酸钠和6.25、12.5、25.0μmol/L的亚砷酸均可引起HepG2细胞氧化应激增强、8-OHdG生成增多、hOGG1表达明显下降;一定剂量的硒(2.5μmol/L的亚硒酸钠)对砷诱导的HepG2细胞氧化应激和DNA氧化损伤具有抑制作用,但对砷所致的DNA氧化损伤修复不产生明显影响。     

硒对镉诱导的大鼠肝脏端粒酶逆转录酶和c-Myc及p53表达的影响

目的研究亚硒酸钠时氯化镉诱导的大鼠肝脏端粒酶逆转录酶（TERT）mRNA、c-Myc蛋白、p53蛋白表达的影响。方法健康雄性SD大鼠随机分为6组，对照组、硒组（5μmol／kg亚硒酸钠）、5μmol／kg氯化镉组、10μmol／kg氯化镉组、研（5μ／kg亚硒酸钠）＋5μmol／kg氯化镉组、硒（5μmol／kg亚硒酸钠）＋10μmol／kg氯化镉组。每组动物5只，染毒48h后取出肝脏，用RT-PCR方法检测TERP基因的表达，用免疫组织化学方法检测c-Myc蛋白和p53蛋白的表达。结果与对照组比较，5μmol／Lkg氯化镉组和10μmol／kg氯化镉组TERP表达增多，10μmol／L kg氯化镉组c-Myc蛋白表达增多，5μmol／L kg氯化镉组和10μmol／L kg氯化镉组p53蛋白表达增多。TERT的表达，硒＋10μmol／Lkg氯化镉组与10μmol／L kg氯化镉组比较降低；硒＋10μmol／L kg氯化镉组比10μmol／L kg氯化镉组c-Myc蛋白表达降低；硒＋5μmol／L kg氯化镉组、硒＋10μmol／L kg氯化镉组与相对应的镉组比较p53蛋白表达降低。结论镉在5～10μmol／L kg的剂量条件下可以诱导大鼠肝脏高表达TERT、c-Myc蛋白和p53蛋白，而硒对镉引起的TERT、c-Myc蛋白和p53蛋白的表达增高具有一定的拮抗作用。     

硒对镉诱导的大鼠肝细胞原癌基因表达的影响

目的 研究亚硒酸钠对氧化镉诱导的在体大鼠肝细胞原癌基因c-myc、c-fos、c-jun表达增强的影响。方法 选用雄性SD大鼠,每组5只,腹腔注射染毒,用Northern斑点杂交方法观察。用5μmol/kg Na2SeO3分别与5μmol/kg、10μmol/kg、20μmol/kg CdCl2联合作用。结果 观察Na2SeO3对CdCl2所致大鼠肝细胞c-myc、c-fos、c-jun表达增强的拮抗效应。结论 一定剂量的亚硒酸钠能抑制一定剂量的氧化镉引起的大鼠肝细胞原癌基因c-myc、c-fos、c-jun表达增强。     

亚硒酸钠对大鼠胚胎肢芽细胞增殖和分化的影响

目的 探讨亚硒酸钠对大鼠胚胎的致畸性。方法 采用胚胎肢芽细胞培养方法，观察亚硒酸钠对大白鼠胚胎肢芽细胞增殖和分化的影响。结果 试验显示亚硒酸钠对大鼠肢芽细胞半数抑制分化浓度（ID50）为10．92μmol/L，半数抑制细胞增殖浓度（IP50）为7．95μmol/L。结论 亚硒酸钠的IP50／ID50值为0．728（＜6）,表明亚硒酸钠只是一种细胞毒性物质，而非致畸物。     

硒对镉诱导大鼠肝细胞端粒酶活力作用研究

目的 研究硒对镉诱导的大鼠肝细胞端粒酶活力、癌基因c-myc和p53表达的影响.方法 80只雄性SD大鼠随机分为16组,包括对照组,2.5、5.0和10.0 μmol/kg亚硒酸钠组,5.0、10.0和20.0μmol/kg氯化镉组,9个硒镉联合作用组.氯化镉采用腹腔注射染毒、亚硒酸钠采用灌胃染毒.用端粒重复序列扩增法(TRAP)检测端粒酶活力,用逆转录聚合酶链反应法检测c-myc和p53表达.结果 3个镉单独作用组的大鼠肝细胞端粒酶活力、c-myc和p53表达较对照组明显增高,差异有统计学意义(P＜0.05).硒镉联合作用组中,当2.5和5.0μmol/kg亚硒酸钠分别与5.0、10.0和20.0μmol/kg氯化镉联合作用时,大鼠肝细胞端粒酶活力、c-myc和p53 mRNA水平较相应剂量的镉单独作用组下降;当10.0 μmol/kg亚硒酸钠分别与5.0、10.0和20.0 μmol/kg氯化镉联合作用时,大鼠肝细胞端粒酶活力、c-myc和53 mRNA水平与相应剂量的镉单独作用组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 相对较低剂量的硒对镉引起的大鼠肝细胞端粒酶活力增高具有抑制作用,其抑制作用可能是通过降低c-myc和p53表达.     

抗氧化剂与自由基清除剂预防硒性白内障实验研究

目的　通过观察抗氧化剂与自由基清除剂对大鼠亚硒酸钠性白内障的口服预防作用 ,探讨白内障的防治新途径。方法　实验分为正常对照组、亚硒酸钠诱导发病组及口服预防组。亚硒酸钠诱导发病组系给 11～ 13日龄的大鼠皮下注射亚硒酸钠 ,首次剂量为 6umol/Kg体重 ,间日 1次 ,逐次递增 1umol/Kg体重 ,连续 6次。口服预防组则为注射亚硒酸钠诱导发病组的同时口服抗氧化剂与自由基清除剂。通过晶状检验 ,观察是否发生白内障比较各组间差异。结果　口服预防组白内障的发生率为 19.2 %～ 2 8%。与诱导发病组的 94 .9%的白内障发生率相比 ,差异有极显著意义。结论　抗氧化剂与自由基清除剂通过口服能有效地防止大鼠亚硒酸钠性白内障的发生     

镉对硒引起的离体大鼠肝细胞DNA损伤作用的影响

应用单细胞凝胶电泳研究氯化镉对亚硒酸钠引起的大鼠肝细胞ＤＮＡ损伤作用的影响。结果表明，在８７５μｍｏｌ／Ｌ、１７５０μｍｏｌ／Ｌ、３５００μｍｏｌ／Ｌ的剂量下，亚硒酸钠单独作用时，可引起肝细胞ＤＮＡ损伤。当氯化镉与亚硒酸钠联合作用时，８７５μｍｏｌ／Ｌ的氯化镉对８７５μｍｏｌ／Ｌ、１７５０μｍｏｌ／Ｌ、３５００μｍｏｌ／Ｌ的亚硒酸钠引起的ＤＮＡ损伤存在明显的拮抗作用，而３５００μｍｏｌ／Ｌ的氯化镉对８７５μｍｏｌ／Ｌ、１７５０μｍｏｌ／Ｌ、３５００μｍｏｌ／Ｌ亚硒酸钠引起的ＤＮＡ损伤不但未显示出拮抗作用，反而使得ＤＮＡ损伤程度加重。１７５０μｍｏｌ／Ｌ的氯化镉与１７５０μｍｏｌ／Ｌ的亚硒酸钠联合作用，拮抗作用最为明显。本研究结果提示，在一定剂量条件下，氯化镉对亚硒酸钠引起的大鼠肝细胞ＤＮＡ损伤存在拮抗作用，并与镉和硒的相对剂量有关     

N-乙酰半胱氨酸和硒对镉急性毒性的影响

目的对急性染镉大鼠预先投予N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl cysteine，NAC)和亚硒酸钠(Na2SeO3)。探讨其对急性染镉大鼠肝、肾毒性的影响。方法将Wistar大鼠32只随机分成4组。第1组为对照组。皮下注射0．9％氯化钠，第2组为单纯染镉组，皮下注射35μmol／kg的氯化镉溶液；第3、4组大鼠分别腹腔注射1mmol／kg NAC和10μmol／kg Na2SeO3预处理后2h，再皮下注射35μmool／kg的氯化镉溶液。染毒24h后测定血清乳酸脱氢酶(LDH)、谷丙转氨酶(GPT)活性以及肝、肾皮质中镉(Cd)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结果与对照组比较，单纯染镉组大鼠的血清LDH、GPT活性及肝肾镉含量显著升高，肝GSH、MDA含量显著升高，GSH-Px活性显著下降。与单纯染镉组比较，NAC预处理组的血清GPT和LDH活性及肝GSH、MDA含量显著降低，肝、肾皮质镉含量显著降低；Na2SeO3预处理组血清GPT和LDH活性及肝、肾皮质GSH、镉含量显著降低，肝GSH-Px活性及肾MDA含量显著升高。结论NAC和亚硒酸钠对急性染镉所致肝损伤具有一定的保护作用，其机制可能与NAC或亚硒酸钠预处理后改变体内GSH含量或GSH-Px活性有关。     

大剂量硒降低硒酶基因表达并致大鼠肝组织损伤

目的 :　探讨补充大剂量硒对谷胱甘肽过氧化物酶和硫氧还蛋白还原酶基因表达和酶活性的影响、以及对大鼠肝组织的作用。方法 :　给大鼠腹腔分别注射 0 ,2 0 ,40和 80 μg/ (kg·d)亚硒酸钠 -生理盐水 1 5d,取肝脏做组织切片 ,再将肝组织匀浆后通过反转录聚合酶链式反应半定量检测不同剂量亚硒酸钠对硒酶基因表达的影响 ,同时测定硒酶活性、肝组织硒含量及丙二醛含量。结果 :　补充亚硒酸钠 2 0 μg/ (kg· d)的鼠肝中 ,两类硒酶的 m RNA丰度及酶活性均增高 ,而补充 40和 80 μg/ (kg· d)亚硒酸钠的大鼠 ,两类硒酶的 m RNA丰度及酶活性均显著下降 (P<0 .0 5) ,且随补硒剂量升高下降幅度增大。而鼠肝硒含量则随补硒剂量升高而显著性增大 (P<0 .0 5)。与对照组相比 ,补充 40μg / (kg· d)亚硒酸钠的鼠肝脂质过氧化水平增高 (P<0 .0 1 ) ,肝组织在形态学上发生病变。结论 :　大剂量补硒降低鼠肝谷胱甘肽过氧化物酶和硫氧还蛋白还原酶基因表达和酶活性 ,并造成肝组织损伤。该作用与过量硒致组织脂质过氧化水平升高相关联     

竹叶提取物清除和·OH自由基的研究

竹子属于禾木科 (Poaceae)竹亚属 (Babu-soideae)多年生常绿植物。竹叶性淡、微涩、寒 ,味甘、苦 ,具有清热利尿 ,明目解毒和止血的功能[1] 。其活性成分是竹叶中的某种化学物质。但目前对竹叶化学成分及其作用尚不清楚 ,本研究采用氮蓝四唑(NBT)光化还原法 ,对竹叶中提取的黄酮类化合物清除 O·2 和· OH的效果进行测定 ,并与维生素 C(VC)进行比较 ,以探讨其抗氧化作用的机制。为进一步开发利用竹叶资源提供依据。1　材　料　与　方　法1 .1　主要仪器　　岛津 UV- 1 60 1型紫外分光光度计及其配套设备 ,日本岛津公司。　　岛津 AEL…     

高原地区不同海拔正常人血中自由基含量测定及分析

对青藏高原不同海拔高度２４８名正常成人血中氧自由基含量进行测定。结果表明：随着海拔升高，人体血中ＳＯＤ含量降低，ＭＤＡ含量升高，有非常显著差别（Ｐ＜０．０１），提示氧自由基可能参于高原病的发生发展过程，对久居高原人群应该采用自由基清除剂，清除体内过多的自由基，减少对人体损害而预防高原疾病的发生。     

自由基在亚急性酒精中毒中的损伤作用实验研究

自由基在亚急性酒精中毒中的损伤作用实验研究阎月，葛蒙梁，王清娟，李向红，冯方波，段绍瑾（北京中国人民解放军第２６１医院，北京，１０００９４）ＡｎＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌＳｔｕｄｙｏｎｔｈｅＲｏｌｅｏｆＦｒｅｅＲａｄｉｃａｌｉｎｓｕｂａｃｕｔｅＡｌｃｏ...     

牛磺酸对应激大鼠心肌损伤的保护机制

以异丙肾上腺素诱导的大鼠应激为模型，研究牛磺酸对心肌及血清中自由基系统与游离脂肪酸含量组成的影响。与对照组比较，结果Ｉｓｏ组心肌中ＦＲ、ＬＰＯ、ＣＫ、ＬＤＨ、Ｃ１６：０、Ｃ１８：０、Ｃ１８：１、ＦＦＡ与Ｃ１８：０／ＦＦＡ值显著升高，ＳＯＤ、Ｃ１８：３、Ｃ２０：４ＰＵＦＡ／ＦＦＡ值显著降低；血清中ＬＰＯ、ＣＫ、Ｃ１６：０、Ｃ１８：１、ＦＦＡ值显著升高，Ｃ１８：３、Ｃ２０：４、ＰＵＦＡ／ＦＦＡ及ＳＯＤ值呈下降趋势，牛磺酸对纠正应激引起的上述变化有显著作用，结果提示牛磺酸可通过减少自由基产生，增加抗氧化酶活性来减少脂质过氧化反应，维持细胞膜完整，影响心肌中ＦＦＡ含量及组成，保护心肌免受应激损伤。     

长寿命自由基在辐射损伤中作用的实验研究

目的研究长寿命自由基在辐射损伤中的作用。方法将细胞分为对照组、抗坏血酸、氨基胍和人参皂甙处理组,照射剂量分别为2、4、6、8 Gy,实验组照射30 min后加入药品,用MTT方法检测细胞增殖性的变化,用微核率检测细胞DNA的损伤程度。结果12 h和24 h检测各剂量点处,实验组OD值均比对照组显著增加,而微核率却显著减少。结论长寿命自由基在电离辐射诱导细胞的损伤中起着重要作用,而抗坏血酸、氨基胍和人参皂甙可以有效的清除长寿命自由基,减轻辐射损伤。     

大麦麦叶中黄酮类化合物清除自由基动态研究

目的 :　研究 4种大麦麦叶中提取的黄酮类化合物对超氧阴离子自由基 (O2· )、羟自由基 (· OH)的清除作用。方法 :　用氮蓝四唑 (NBT)光还原法测定 O2·的清除率 ,氧化还原法测定· OH的清除率。结果 :　随着黄酮在反应液中浓度的增加 ,清除率呈上升趋势 ,当黄酮浓度达到 1 2μg/ ml左右时 ,对 O2·和· OH的清除率可分别高达 95.56%和 94.1 2 %。结论 :体外实验证实 ,大麦麦叶提取物具有较强的抗氧化作用     

对海参糖胺聚糖抗氧化性的研究

目的研究海参糖胺聚糖的抗氧化性。方法以K3[Fe（CN）6]为模型,测定海参糖胺聚糖的还原能力。利用邻苯三酚自氧化产生超氧阴离子自由基（·O^2-）且在320nm处有最大吸收,测定海参糖胺聚糖对羟自由基（·OH^-）和超氧阴离子自由基（·O^2-）的清除能力。结果海参糖胺聚糖有较强的还原力,对羟自由基和超氧阴离子自由基的清除能力与浓度成量效关系,有良好的清除羟自由基和超氧阴离子自由基的作用。结论海参糖胺聚糖具有良好的抗氧化作用。     

生脉散对自由基致大鼠离体心脏损伤保护作用

目的观察对家兔灌胃给予生脉散后,其含药血清对大鼠离体灌流心脏内外源性自由基所致心肌损伤的保护作用。方法家兔每日2次灌胃给予生脉散5 ml/kg,连续3 d,末次给药后60 min取血,分离血清。将含药血清加到Langendorff法灌流的大鼠离体心脏,记录左室内压（LVP）、左室内压最大上升速率（＋dp/dtmax）、左室舒张末压（LVEDP）、心率（HR）,定时收集冠脉流出液测定冠脉流量（CF）和肌酸激酶（CK）活性,再灌结束时测定心肌组织中丙二醛（MDA）含量。结果以含0.25μmol/L 1.1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）或0.06μmol/L次黄嘌呤（HX）和2.0μ/L黄嘌呤氧化酶（X0）的K-H液灌流心脏10 min,可显著降低LVP、＋dp/dtmax升高LVEDP,增加CK和MDA释放;预先用含药血清灌流心脏10 min,可显著改善DPPH或HX＋XO所致心功能损伤,减少CK和MDA释放。结论含生脉散血清对DPPH或HX＋XO诱导内外源性自由基所致心肌损伤具有明显保护作用。     

营养、衰老与自由基理论

1965年Harman D提出衰老的自由基理论(free radical theory of aging)，它的提出是基于这样的前提，即所有生物的衰老和死亡是由一个受遗传因素和环境因素影响的共同过程负责。该理论认为衰老是细胞成分积累性氧化损伤的结果，是由自由基反应引起的，自由基反应参与环境、疾病和遗传控制的衰老过程有关的衰老性改变。     

硒对培养大鼠心肌细胞抗氧化损伤作用的研究

目的　探讨硒对培养心肌细胞的抗氧化损伤作用。方法　应用不同浓度的过氧化氢 (H2 O2 ) ,分别作用不同时间 ,动态观察其对心肌细胞的损伤作用。同时观察硒对培养心肌细胞的保护作用。结果　H2 O2 作用于培养心肌细胞可造成乳酸脱氢酶 (LDH)从心肌细胞泄漏、细胞周期发生改变、心肌细胞和培养液中脂质过氧化物 (丙二醛 ,MDA)含量增加 ,同时发生 HE-染色可见的形态学改变。培养液中加入一定浓度的硒后 ,培养细胞和介质中 LDH和 MDA水平显著下降 (P<0 .0 1 ) ,噻唑蓝 (MTT)测定培养心肌细胞的存活率显著升高 ,细胞周期和形态学表现与正常细胞基本相同。结论　 H2 O2 作为一种自由基 ,依其浓度和作用时间可造成不同程度的心肌细胞的损伤。硒作为具有抗氧化作用的微量元素 ,能明显抑制自由基对心肌细胞的损伤作用。