外源性碱性成纤维生长因子对犬急性心肌梗塞后血管生成作用

目的　探讨外源性碱性成纤维生长因子 (basicfibroblastgrowthfactor ,bFGF)对心肌梗塞血管生成的作用。方法　 2 4只犬随机分成对照组 (心梗区注射生理盐水 )和实验组 (心梗区注射bFGF)。每组观察 4个不同的时间点 (1d、3d、10d、17d)。各组分别在术后 3h内及处死前行MR心肌灌注成像。免疫组织化学方法检测各组心肌细胞中血管内皮生长因子 (vascularendothelialgrowthfactor ,VEGF)的表达及微血管数量。结果　微血管的数量除第 1天外各个时间点实验组比对照组明显增多 ;VEGF的表达除第 17天外各时间点实验组比对照组明显增强 ;TTC染色和MR心肌灌注成像 2种方法显示心梗范围对照组和实验组各个时间点之间无显著性差异。结论　局部心肌内注射bFGF有促进心梗区域新生血管形成、减小心梗范围的作用 ;VEGF的表达与组织中微血管的密度密切相关 ;MR心肌灌注成像可有效评价心肌血流灌注和定量评价心肌梗死的范围。     

咪唑安定对脑缺血再灌注沙土鼠血管内皮生长因子表达的调节作用

目的 观察咪唑安定对沙土鼠全脑缺血再灌注损伤过程中血管内皮生长因子(CEGF)表达的影响,为咪唑安定临床合理应用提供实验依据.方法 健康雄性沙土鼠共72只,随机分为对照组、损伤组和治疗组(n=24).采用双血管法建立沙土鼠全脑缺血再灌注模型,对照组仅游离双侧颈总动脉但不夹闭;损伤组夹闭双侧颈总动脉10min,放开动脉夹后即刻腹腔注射生理盐水50ml/kg 1次,随后每天同一时间点在动物清醒状态下腹腔注射生理盐水50ml/kg,共6d;治疗组夹闭双侧颈总动脉10min,放开动脉夹后即刻腹腔注射0.01%咪唑安定注射液5mag/kg随后每天同一时间点在动物清醒状态下腹腔注射0.01%咪唑安定5mg/kg,共6d.以双侧动脉夹放开时间为基准点,分别在放开后6h、1d、3d、7d运用正电子发射断层显像(PET)观察脑梗死体积变化,用免疫组织化学方法观察脑组织VEGF的表达,每次的观察时间点均设在腹腔注射前.结果 对照组脑内再灌注面积无明显异常;与对照组比较,损伤组与治疗组沙土鼠在再灌注后各时间点的脑内灌注面积明显缩小(P<0.01);与损伤组比较,治疗组在再灌注后6h脑内灌注面积无差异,但在1d、3d、7d时明显增加(P<0.01).对照组脑内可见少量的VEGF阳性细胞表达.损伤组沙土鼠在再灌注6h即有VEGF阳性表达,随再灌注时间延长,表达逐渐增强,于再灌注3d时表达最强,以后缓慢下降,至7d时仍有部分表达,与再灌注6h时比较,有显著差异(P<0.01).表达细胞主要为神经胶质细胞和巨噬细胞,其次为神经细胞及血管内皮细胞.治疗组VEGF的表达趋势与损伤组相似,但在再灌注后各时间点的VEGF表达均较损伤组强(P<0.01).结论 咪唑安定5mg/(kg·d)可减少沙土鼠脑缺血再灌注损伤后脑梗死的体积,促进脑缺血再灌注损伤中内源性VEGF的表达,并由此可能对损伤后神经功能中远期的恢复产生影响.     

输注自体骨髓问充质干细胞对小型猪异基因移植肝的保护作用研究

目的 观察经门静脉输注的自体骨髓间充质干细胞(BMSCs)在移植肝脏中的分布情况和对移植肝脏的保护作用. 方法 版纳小型猪(供体)和西藏小型猪(受体)各16只配对行肝移植.受体随机分成对照组和处理组,每组8只.对照组只做原位肝移植,处理组在原位肝移植的基础上于术中经门静脉注射1×10 9个预先经BrdU标记的受体自身BMSCs,术后第3、7、10天静脉采血榆测肝功能,术后检测标记的间充质干细胞在肝脏局部的分布状况,同时检测其在脾、肺组织中的分布状况.结果 BrdU标记的间充质干细胞主要聚集在移植的肝脏中,脾、肺组织中几乎没有分布.术前两组血清谷氨酸氨基转移酶(ALT),天冬氨酸氨基转移酶(AST)比较无明显差异(P＞0.05),术后处理组受体血清中AST和ALT总体水平明显低于对照组(P＜0.01).术后第7天,处理组肝组织轻度淤血,血管周围有少量炎性细胞浸润,肝细胞点状坏死,中性粒细胞浸润.而对照组术后第3天,移植的肝脏中可见汇管区大量炎症细胞聚集、肝细胞浑浊、气球样变性,并出现不同程度的点状、灶状坏死. 结论 肝移植术导致移植肝脏的微环境变化,BrdU标记受体自身BMSCs在肝组织中聚集分布,对移植肝脏有保护作用.     

臭氧化0.9%氯化钠溶液瘤内注射对兔VX2肿瘤低氧诱导因子-1α、血管内皮细胞生长因子表达及微血管密度形成的影响

【摘要】 目的 探讨臭氧化0.9%氯化钠溶液瘤内注射对兔VX2肿瘤组织内低氧诱导因子（HIF）-1α、血管内皮细胞生长因子（VEGF）表达及微血管密度（MVD）形成的影响。方法 制备新西兰大白兔VX2肿瘤模型72只,随机分为4组,各18只。超声导引下分别予以瘤内单次注射0.9%氯化钠溶液（A组）、单次注射臭氧化0.9%氯化钠溶液（B组）、2次注射臭氧化0.9%氯化钠溶液（1次/d,连续2 d,C组）,3次注射臭氧化0.9%氯化钠溶液（1次/d,连续3 d,D组）,剂量均为2倍肿瘤体积。术后第4、8、12天各组分别随机处死6只兔并切取肿瘤,采用免疫组化法检测肿瘤组织内HIF-1α、VEGF表达及MVD形成。采用方差分析进行统计学分析。结果 术后第4、8天B组HIF-1α表达低于A组,第12天略高于A组;术后C、D组HIF-1α表达均高于A组,C组更明显,第12天C组与A、B、D组间差异均有统计学意义（P＜0.05）。术后第4天B、C组VEGF表达稍低于A组,其余时间点及D组VEGF表达均高于A组,且在第8天C、D组与A组间差异均有统计学意义（P＜0.05）。与A组相比,术后第4、8天B组瘤组织内MVD形成减少,术后第12天略增高;C组MVD形成在各时间点均高于A、B、D组,第4天D组MVD形成高于A组,第8、12天低于A组。结论 臭氧化0.9%氯化钠溶液瘤内单次注射对肿瘤组织内HIF-1α、VEGF表达及MVD形成无明显影响,但多次注射可能导致HIF-1α、VEGF高表达,MVD形成呈增加趋势。     

自体脾片移植治疗脾损伤后免疫功能的观察

自体脾片移植治疗脾损伤后免疫功能的观察袁从华自１９９３年１月～１９９６年６月，我院共收治外伤性脾破裂６７例，其中除保守治疗６例，脾修补４例外，单纯性脾切除２７例（脾切组），脾切除后脾片大网膜内移植３０例（移植组），占同期脾破裂４４．７％。两组部分病例...     

放疗对结肠癌细胞种植瘤血管生成的影响

目的:观察荷瘤鼠接受放疗前后,肿瘤组织内微血管密度及血管内皮生长因子表达的变化,探讨放疗对肿瘤血管生成的作用.方法:20只小鼠接种结肠癌细胞SW480,随机分为对照组和放疗组.放疗组接受总量20 Gy的照射.放疗结束后第5 d处死小鼠,免疫组化法测定肿瘤组织内微血管密度和肿瘤细胞VEGF表达阳性率,比较两组间的差异.结果:放疗组和对照组肿瘤组织内MVD值分别为8.40±4.22和14.40±4.65 (P=0.007);VEGF表达阳性率分别为2.07±0.569和1.44±0.608(P=0.028),均有明显差异.结论:放疗可减少荷瘤鼠肿瘤的血管数量,提高血管内皮生成因子的表达.     

自体脾组织移植的研究

目的　探索自体脾组织移植在严重脾外伤及门脉高压等全脾切除术病人中应用的可行性及价值。方法　将切除的脾脏 ,除去被膜 ,切成 1cm× 1cm× 0 .5cm的薄片 5 0块 ,移植在大网膜中间 ,用丝线缝合后固定于脾床。结果　经动物试验及术后B超 ,同位素扫描 (99m锝 )随访观察 ,移植的脾组织成活良好。血常规 ,血小板 ,IgM ,IgG ,补体C3,术后从低水平逐渐上升至正常。结论　全脾切除后自体脾组织移植能够成活并增生变大 ,而且能够维持一定的免疫功能 ,可预防严重的全身性感染发生。     

毛囊真皮鞘细胞在皮肤创伤愈合中作用的实验研究

目的：通过体外培养毛囊真皮鞘细胞移植于大鼠皮肤创面的实验研究,探讨真皮鞘细胞在皮肤创伤愈合中的作用。方法：组织块法原代培养Wistar大鼠触须毛囊真皮鞘细胞,5-溴脱氧尿苷（BrdU）标记。Wistar大鼠22只,采用背部皮肤缺损模型,分细胞移植组和生理盐水对照组。术后3d、7d、14d、1个月和2个月取材,图像分析计算创面收缩率,免疫组化观察植入细胞在体内的转归,光镜和扫描电镜观察创面愈合病理过程。结果：术后各时间点细胞移植组创面收缩率均大于对照组（P〈0．01）;术后7d移植组新生肉芽组织中见不均匀分布的标记细胞,14d标记细胞减少并出现凋亡;移植组愈合过程中肉芽组织形成、表皮再生、胶原增生和组织改建均较对照组有所提前。结论：毛囊真皮鞘细胞在皮肤创伤修复过程中参与肉芽组织形成,具有加速创面收缩和促进愈合进程的作用。     

自体脾移植不同移植量术后血清促吞噬素浓度观察

近年来 ,为保持脾脏的免疫功能 ,避免凶险性感染的发生 ,脾切除术后自体游离组织大网膜内移植术已在国内开展。为深入探讨适宜移植量 ,自 1995～ 1997年收治的因外伤所致脾破裂 5 9例 ,我们分别实施全脾切除以及脾切后不同移植量自体脾移植术 ,采用放免法 (ＲＩＡ)测定能特异性反映脾功能的血清促吞噬素 (Ｔｕｆｔｓｉｎ)浓度 ,以此作为指标 ,对各组病例术后近、远期脾功能状况进行观察和评估。1　临床资料1 1　一般资料　本组患者 5 9例 ,男 37例 ,女 2 2例 ,年龄13～ 6 8岁 ,平均 32 4岁 ,随机分为 5组。Ａ组 :13例 ,为全脾切除组 ;Ｂ、…     

盐酸戊乙奎醚对急性肺损伤血管内皮保护作用的临床研究

目的观察选择性抗胆碱药盐酸戊乙奎醚（PHC）对急性肺损伤（ALI）患者的治疗效果及其对血清中炎性递质血管内皮生长因子（VEGF）、内皮素-1（ET-1）、血管内皮损伤标志物血管性假血友病因子（vWF）变化的影响。方法42例ALI患者随机分为PHC治疗实验组和常规治疗对照组。观察两组48小时内临床疗效;动脉血气;酶联免疫吸附法（ELISA）测定血清VEGF,ET-1,vwF的变化趋势。结果治疗后两组PaO2、PaO2／FiO2均逐渐升高,实验组提前至6小时与0小时组内相比有改善（P〈0．05）,24、48小时PaO2、PaO2／FiO2实验组改善优于对照组（P〈0．05）。PHC显著降低血清VEGF、ET-1、vWF血清浓度,48小时较0小时下降均有统计学差异（P〈0．05）,且48小时实验组较对照组改善显著（P〈0．05）,vwF在48小时存活组与死亡组比较有统计学差异（P〈0．05）。结论PHC能够改善ALI患者早期血气指标,降低VEGF、ET-1和vWF血清浓度;氧合作用的改善可能是由于降低厂血管炎性递质VEGF、ET-1所产生;实验组血管损伤标记物vWF的下降,提示PHC可能起到保护肺血管内皮细胞完整性的作用,对早期急性肺损伤有一定的治疗作用。     

血管内皮生长因子转基因治疗小鼠辐射损伤的实验研究

目的 通过构建血管内皮生长因子(VEGF)基因的真核表达质粒,并将其转入受照小鼠机体,研究VEGF蛋白表达对放射损伤的救治作用及其分子机制。方法 昆明种小鼠通过随机化分组表法随机分为正常对照组、单纯照射组和转基因组。转基因组应用VEGF重组质粒进行肌肉注射,注射后24 h接受8 Gy X射线照射,进行小鼠临床表现和死亡率观察。并于照后不同时间处死动物,进行组织器官病理学和原位胸腺和脾细胞凋亡检测。结果 用PCR方法从pSP73/H_VEGF165质粒扩增得到VEGF₁₆₅基因片段,经双酶切后与酶切的pcDNA3.1载体连接,构建重组质粒pcDNA3.1/ VEGF₁₆₅,经电泳和测序表明序列与GeneBank完全一致。X射线8 Gy照射小鼠,单纯照射组14 d内死亡率为64%,而转基因组为36%,两组比较差异有统计学意义(t=3.92,P＜0.05)。转基因组小鼠胸腺和脾组织的细胞凋亡率显著降低(t=3.11、3.53,P＜0.05),放射病理损伤明显改善。结论 成功构建了重组质粒pcDNA3.1/ VEGF₁₆₅,重组质粒转基因治疗可显著降低严重辐射损伤小鼠的死亡率,显著减低胸腺和脾脏细胞凋亡率,明显改善免疫器官的病理变化。     

Early pancreatic splenosis presented 2 years after splenectomy

Splenosis is defined as the autotransplantation of splenic tissue resulting from the spillage of cells from the pulp of damaged spleen after splenic injury or splenectomy. The splenic tissue implants are generally numerous, and the preferred location is the grater omentum. Pancreatic splenosis is a rare condition with only two previous cases reported in the English literature. We describe a case of pancreatic splenosis with unusual characteristics, in which a definitive diagnosis was obtained with the use of ^99mTechnetium-sulfur-colloid scintigraphy avoiding invasive procedures or surgical removal.     

负载VEGF 、bFGF的聚乳酸-羟基乙酸纳米微囊复合体对放射性损伤创面愈合的作用

 目的 探讨负载VEGF、bFGF的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(poly lactic-co-glycolic acid,PLGA)纳米微囊复合体对放射性损伤创面愈合的影响。方法 以PLGA为支架联合应用bFGF、VEGF构建纳米微囊,作用于小鼠放射性损伤创面作为实验组,单纯应用PLGA为支架,未用bFGF、VEGF的作为对照组,观察两组创面愈合率、创面的病理改变;于伤后不同时间点检测创面新生血管细胞数目、毛细血管截断面积及成纤维细胞数量;RT-PCR检测创面VEGF mRNA 、bFGF mRNA的表达水平;观察其对放射性创面愈合的影响。结果 实验组创面愈合率明显高于对照组;实验组创面组织中VEGF mRNA、bFGF mRNA的表达均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);对创面组织进行HE染色,发现实验组肉芽组织增多增厚,成纤维细胞数量及密度均高于对照组;伤后第8天、第15天,实验组的新生毛细血管数量及毛细血管横截面积均较对照组有所增加,实验组的成纤维细胞计数也明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 采用负载VEGF、bFGF的PLGA纳米微囊复合体可以促进小鼠放射性损伤创面的愈合。     

rIL－2对长期训练小鼠免疫功能的影响

本文就注射ｒＩＬ－２对大强度游泳训练时小鼠免疫功能的影响进行了研究。结果发现：训练可使小鼠脾淋巴细胞对ＣｏｎＡ．ＬＰＳ分裂原的增殖应答，及ＰＦＣ反应明显减弱（Ｐ＜０．０５）；训练配合腹腔注射ｒＩＬ－２则可消除这种减弱，而使其应答反应明显强于安静对照组（Ｐ＜０．０５）；训练配合腹腔注射ｒＩＬ－２还可使Ｔ＿４／Ｔ＿８之比值明显高于单纯训练小鼠的（Ｐ＜０．０５）。这说明用ｒＩＬ－２纠正大强度训练对小鼠免疫系统功能的副作用有一定意义。     

Quantification of angiogenesis by functional computed tomography in a Matrigel model in rats

RATIONALE AND OBJECTIVES: The aim was to evaluate functional computed tomography (fCT) in the quantification of angiogenesis by comparing the tissue perfusion parameters measured by CT perfusion (CTP) software with histologic vascular parameters in a Matrigel model in rats. It was hypothesized that tissue perfusion parameters and histologic vascular parameters are related. MATERIALS AND METHODS: In vivo angiogenesis assays were performed using Matrigel supplemented with escalating doses (0 ng [control group], 250 ng, and 1,000 ng) of recombinant rat vascular endothelial growth factor (VEGF164) subcutaneously injected into the backs of Sprague Dawley rats. On day 7, rats with Matrigel plug underwent fCT following a bolus injection of iodinated contrast medium. Using CTP software, fCT parameters were generated (blood flow [BF], blood volume [BV], mean transit time, and permeability-surface area product) and functional maps on the basis of a distributed parameter tracer kinetic model, the adiabatic approximation to the tissue homogeneity model. The animals were then sacrificed. Matrigel plug was sectioned into slices corresponding to the CT scan plane and stained with CD31 immunohistochemical stain. Histologic vascular parameters, including microvascular density (MVD), vessel number (VN), vascular area, and vascular perimeter, were measured. CTP and histologic parameters were correlated. RESULTS: The Matrigel plugs with the 1,000-ng VEGF group exhibited a higher MVD than the 250-ng VEGF and control groups (P < .05). VN differed significantly between the control versus the 250-ng VEGF groups and 250-ng versus 1,000-ng VEGF groups (P < .05), with the highest VN in the 250-ng VEGF group. BF, mean transit time, and permeability-surface area product each differed significantly to VEGF levels. Changes in BF and BV did not correspond with increases in MVD or VN; however, in the 250-ng VEGF group, there was a strong positive correlation (r = 0.9) between BV and VN, vascular area, and vascular perimeter, which was not seen in the control or 1,000-ng VEGF group. All fCT parameters significantly correlated with each other (P < .05), with strong correlations between BF and mean transit time (r = -0.7) and between BF and permeability-surface area product (r = 0.7) and a weak correlation between BF and BV (r = 0.3). CONCLUSION: These results validate the VEGF-induced endothelial cell in a rat Matrigel model. In addition, histologic vascular parameter MVD does not correlate with fCT parameters measured by CTP software.     

高压喷射载VEGF165、bFGF凝胶促缺血心肌血管新生的实验研究

目的探讨高压喷射心肌内给药的可行性以及载VEGF165、bFGF温敏型壳聚糖水凝胶对缺血心肌的促血管新生和心肌保护作用。方法健康杂种犬32只,随机均分为单纯心肌梗死(SMI)组,高压喷射生理盐水(NS)组,高压喷射温敏型壳聚糖水凝胶(Chitosan)组,高压喷射载VEGF165、bFGF温敏型壳聚糖水凝胶(Chitosan+VEGF165+bFGF)组。结扎左冠状动脉前降支制备急性心肌梗死模型后,SMI组直接关胸,NS组、Chitosan组和Chitosan+VEGF165+bFGF组在结扎线以下左室前壁行高压喷射心肌内给药8～10次,1次/cm2。术后6周取材行组织学、免疫组化检查并计算心肌梗死面积,处死动物前行血流动力学检测。结果术后6周心肌内仅有少量壳聚糖水凝胶样物质残留,其周围无明显的炎性细胞浸润;与SMI组比较,Chitosan组和Chitosan+VEGF165+bF-GF组梗死区新生血管数量增加(P<0.05),梗死面积缩小(P<0.05),左室舒张末压和左室内压最大下降速率明显改善(P<0.05)。结论高压喷射心肌内给药安全、可行;载VEGF165、bFGF温敏型壳聚糖水凝胶心肌内注射能促进...     

猪缺血心肌内膜注射VEGF基因的长期疗效观察

目的探讨经心内膜心肌内直接注射血管内皮生长因子(VEGF)基因治疗猪心肌缺血后的远期心脏电机械活动及心功能改善情况。方法30只实验用小香猪随机均分为对照组(n=15)和治疗组(n=15)。建立心肌缺血模型后,通过NOGA系统经心内膜分别将空载质粒pIRES2-EGFP及质粒pIRES2-EGFP-hVEGF165直接注射至对照组或治疗组缺血部位心肌内。在注射前及注射后1年,分别应用左心室电机械标测(LVEMM)监测局段线性缩短率(LLS)和单极电压(UpV),并用超声监测M型局部室壁运动幅度和背向散射积分的心动周期变异(CVIB)、左心室射血分数(LVEF)。1年后处死动物,组织学切片观察心肌组织中毛细血管生成情况。结果LVEMM监测显示,注射后1年治疗组LLS显著高于注射前及对照组(P<0.05),而UpV与注射前及对照组比较无显著差异(P>0.05);超声监测显示,治疗组注射后1年的局部室壁运动幅度和CVIB、LVEF均显著高于对照组(P<0.05)。组织学检查显示,治疗组心肌内毛细血管数目(38.1±4.8/HP)显著高于对照组(13.2±5.1/HP,P<0.01)。结论经心内膜直接注射pIRES2-...     

Effect of Angiogenesis Induced by Consecutive Intramuscular Injections of Vascular Endothelial Growth Factor in a Hindlimb Ischemic Mouse Model

Purpose

Angiogenesis plays a major role in various physiological and pathological situations. Thus, an angiogenic therapy with vascular endothelial growth factor (VEGF) has been commonly recommended as a representative therapeutic solution to recover the insufficient blood supply of collateral vessels in an ischemic lesion. In this study, the injection method and injection time point of VEGF proteins were focused to discover how to enhance the angiogenic effect with VEGF.

Methods

Mouse models (n = 15) were divided into control, VEGF treatment by intra-venous injection (VEGF-IV) and VEGF treatment by intra-muscular injection (VEGF-IM). Right proximal femoral arteries of mice were firmly sutured to obstruct arterial blood-flow. In the VEGF-IV treatment group, VEGF proteins were injected into the tail vein and, in the VEGF-IM treatment group, VEGF proteins were directly injected into the ischemic site of the right thigh after postoperative day 5, 10, 15, 20 and 25 follow-ups. Blood-flow images were acquired by ^99mTc Gamma Image Acquisition System to compare the ischemic-to-non-ischemic bloodstream ratio at postoperative days 5, 15, and 30.

Results

VEGF-IM treatment significantly induced higher an angiogenic effect rather than both the control group (P = 0.008) and VEGF-IV treatment group (P = 0.039) at the 30th day.

Conclusion

During all experiments, angiogenesis of VEGF-IM treatment represented the most evident effect compared with control and VEGF-IV group in a mouse model of hindlimb ischemia.     

NMDA、甘氨酸、阿片受体与硫喷妥钠催眠作用的关系

目的探讨硫喷妥钠催眠作用与N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体、阿片受体和甘氨酸受体的关系。方法120只昆明种小鼠,雌雄不拘,随机分成NMDA组、纳络酮组和士的宁组。实验小鼠均于腹腔注射50mg/kg硫喷妥钠,待翻正反射消失1min后,NMDA组40只小鼠鞘内分别注射人工脑脊液(aCSF)和25、50、75ngNMDA(n=10);纳络酮组40只小鼠腹腔分别注射生理盐水(NS)和1.0、2.0、4.0mg/kg纳络酮(n=10);士的宁组40只小鼠腹腔分别注射NS和0.5、1.0、2.0mg/kg士的宁(n=10),记录小鼠睡眠时间。结果NMDA对硫喷妥钠催眠小鼠的睡眠时间无明显影响(P>0.05);而纳络酮或士的宁均能明显延长其睡眠时间(P<0.01)。结论NMDA受体与硫喷妥钠的催眠作用无明显关系,而甘氨酸受体和阿片受体均介导了硫喷妥钠的催眠作用。