细胞因子基因在人脑胶质瘤中的表达及意义

目的：探讨细胞因子在脑胶质瘤发生及发展中的作用。方法：采用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法测定５种细胞因子基因在人脑胶质瘤中的表达。结果：介导液免疫的细胞因子（ＩＬ－４、ＩＬ－６、ＩＬ－１０）基因呈优势表达，而介导细胞免疫的细胞因子（ＩＬ－２、ＩＦＮγ）基因呈劣势表达。结论：两类细胞因子在人脑胶质瘤中的漂移可能是造成脑胶质瘤患者细胞免疫功能低下的原因之一。     

自泌性白细胞介素6在人脑胶质瘤发病中的作用

目的：探讨原代培养的人脑胶质瘤细胞是否分泌及表达白细胞介素6(Interleukin-6，IL-6)，以及IL-6在人脑胶质瘤发病中的作用。方法：采用手术中直接获得的人脑胶质瘤组织，进行胶质瘤细胞的原代培养，并分别采用四唑盐比色分析法(MTT)及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定人脑胶质瘤细胞中IL-6的分泌及表达；再分别采用IL-6及IL-6单抗处理脑胶质瘤细胞。结果：①原代培养的人脑胶质瘤细胞可自发分泌IL-6，而正常人脑胶质细胞则无IL-6的分泌；②30例人脑胶质瘤标本中有25例表达IL-6基因，且其表达量与脑胶质瘤的恶性程度呈正相关关系；③IL-6能刺激脑胶质瘤细胞的增殖，而IL-6单抗则能抑制脑胶质瘤细胞的增殖。结论：IL-6在人脑胶质瘤中的异常分泌及表达可能是参与和维持脑胶质瘤恶性增殖的原因之一。     

Th1／Th2类细胞因子在脑胶质瘤中的不均衡表达及其意义

目的研究脑胶质瘤中Th1/Th2类细胞因子的不均衡表达及其意义.方法以IFN-γ、IL-2和IL-4、IL-6、IL-10、IL-13分别代表Th1和Th2类细胞因子,采用半定量逆转录聚合酶链反应技术检测上述细胞因子基因在62例脑胶质瘤组织、4株脑胶质瘤细胞株、15例脑胶质瘤患者外周血单个核细胞以及人正常脑组织、良性脑膜瘤组织中的表达情况.结果脑胶质瘤组织和脑胶质瘤细胞株Th2类细胞因子的表达明显占优势(P＜0.01),胶质瘤患者外周血亦表现出Th2类细胞因子优势表达的趋势,而人正常脑组织和良性脑膜瘤组织中两类细胞因子的表达差异无显著性.结论脑胶质瘤中Th2类细胞因子的优势表达可能与肿瘤的发生发展及免疫逃逸有关.     

Th17细胞相关因子在人脑胶质瘤中的测定

目的了解Th17细胞相关因子在人脑胶质瘤组织中的表达,确定Th17的存在及浸润程度。方法应用免疫组化二步法检测Th17细胞相关因子CD4+和IL-17在34例脑胶质瘤和10例正常脑组织病理切片中的表达,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(QRT-PCR)技术,检测IL-17mRNA、RORγtmRNA在人脑胶质瘤组织中的表达量。结果 IL-17、CD4+在正常脑组织表达不明显,在低级别脑胶质瘤中表达较少,CD4+和IL-17在高级别脑胶质瘤中表达明显,组间比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.05,P<0.01)。IL-17mRNA和RORγt mRNA在正常脑组织、低级别、高级别脑胶质瘤中的表达量随恶性程度升高而增加,组间比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01,P<0.01)。结论脑胶质瘤中存在Th17的浸润,其表达量随脑胶质瘤恶性程度的升高而增加。     

重组腺病毒携带外源p16基因抑制人脑恶性胶质瘤细胞系生长的研究

目的研究5型腺病毒载体(Ad5)携带外源p16基因对人脑恶性胶质瘤细胞系TJ899和TJ905生长状态的影响.方法免疫组化(S-P法)测定P16蛋白表达,甲基噻唑基四唑(MTT)法和克隆形成实验测定恶性脑胶质瘤细胞系生长状态.结果重组体腺病毒能介导p16外源基因在恶性脑胶质瘤细胞系TJ899和TJ905细胞中呈阳性表达,6 d时肿瘤细胞生长抑制率分别可达93.60%和98.28%.并且能显著地抑制肿瘤细胞的克隆形成能力.结论腺病毒介导p16基因能在肿瘤细胞中表达,并能明显抑制不同人脑恶性胶质瘤细胞系的生长状态.     

调节Th1／Th2平衡对脑胶质瘤细胞增殖的影响

目的研究外源性细胞因子调节Th1/Th2平衡对脑胶质瘤细胞增殖的影响.方法分别将IFN-γ+IL-4单抗或IL-4+IFN-γ单抗与脑胶质瘤细胞共同孵育,半定量RT-PCR方法观察Th1/Th2类细胞因子基因表达的变化,并用MTT方法检测其对脑胶质瘤细胞生长情况的影响.结果脑胶质瘤细胞Th2类细胞因子的表达明显强于Th1类(P＜0.01),IFN-γ+IL-4单抗可以增强IFN-γ的表达,抑制脑胶质瘤细胞的增殖并呈剂量依赖性关系(P＜0.01);IL-4+IFN-γ单抗则使Th2类细胞因子的表达有所增强,促进脑胶质瘤细胞的增殖,也呈剂量依赖性关系(P＜0.01).结论 外源性的细胞因子或细胞因子单抗可以调节Th1/Th2平衡,逆转Th2优势,影响脑胶质瘤细胞的生长.     

Western blot法检测人脑胶质瘤中组织型纤溶酶原激活剂及其抑制剂-1的表达

目的:研究人脑胶质瘤组织中组织型纤维蛋白溶解酶原激活剂(tPA)及其抑制剂-1(PAI-1)的表达,旨在了解其与人脑胶质瘤恶性生物学行为间关系,探讨其在人脑胶质瘤中的作用及其临床意义。方法:采用增强化学发光蛋白印迹法,测定人脑胶质瘤手术切除标本41例和颅脑外伤10例正常脑组织标本中的tPA及PAI-1蛋白表达水平。结果:tPA蛋白在高级别脑胶质瘤中呈低表达,在低级别的人脑胶质瘤中呈高表达,而正常脑组织中亦有表达。正常脑组织和低、高级别脑胶质瘤组间表达的差异无统计学意义(P>0.05)。tPA蛋白表达与脑胶质瘤病理级别间无明显相关性(P>0.05)。PAI-1蛋白则随着脑胶质瘤级别升高表达水平逐渐升高,而在正常脑组织中水平极低甚至不表达。正常脑组织组、低级别组脑胶质瘤及高级别组间表达差异有统计学意义(P<0.05);PAI-1蛋白表达水平与脑胶质瘤病理级别间呈正相关(P<0.05)。结论:PAI-1蛋白的高表达反映脑胶质瘤恶性生物学行为;tPA蛋白高表达可能是人胶质瘤组织分化良好的表现。     

人脑胶质瘤骨桥蛋白的表达

目的:探讨骨桥蛋白(OPN)在人脑胶质瘤中的作用、表达及其意义. 方法:采用RT-PCR及免疫组化染色方法检测脑胶质瘤组织和正常组织中骨桥蛋白. 结果:骨桥蛋白在胶质瘤组织细胞中表达,而在正常脑组织细胞中无表达,而且OPN的表达浓度与胶质瘤恶性程度呈正相关. 结论:人脑胶质瘤中OPN的表达与其恶性程度密切相关.     

PTEN、Ki-67在脑胶质瘤中的表达及意义

目的:对抑癌因子PTEN、Ki-67及其在人脑胶质细胞瘤中的表达进行相关研究。方法:免疫组化法检测80例已确诊为脑胶质瘤中PTEN、Ki-67的表达,结合临床随访资料进行分析。结果:PTEN阳性染色定位于细胞核,高分化脑胶质瘤(Ⅰ～Ⅱ级)的阳性表达率明显高于低分化肿瘤(Ⅲ～Ⅳ级)的阳性表达率。Ki-67阳性染色定位于细胞核,高分化脑胶质瘤(Ⅰ～Ⅱ级)阳性表达率明显低于低分化肿瘤(Ⅲ～Ⅳ级)。PTEN和Ki-67的表达与患者的年龄、性别、肿瘤的大小及发病部位均无相关性但二者之间的表达呈负相关。结论:PTEN、Ki-67在脑胶质瘤中的异常表达与肿瘤的分化程度相关,PTEN、Ki-67基因异常在脑胶质瘤的形成及其发展中有着拮抗作用。可以认为PTEN突变或缺失在人脑胶质瘤的发生发展中起重要作用,Ki-67可作为反映胶质瘤细胞增殖潜能的指标。     

cathepsin B和cystatin C在人脑胶质瘤中的表达及意义

目的探讨半胱蛋白酶抑制剂C(cystatin C)和组织蛋白酶B(cathepsin B)在人脑胶质瘤组织中的表达及意义。方法通过免疫组织化学法检测cystatin C及cathepsin B在57例不同分化程度的脑胶质瘤组织中的表达。结果cystatin C在低分化胶质瘤(III-IV级)中的表达低于高分化者(I～II级),而cathepsin B在低分化胶质瘤中的表达高于高分化者(P<0.05)。cystatin C和cathepsin B在脑胶质瘤中的表达呈负相关(P=0.01)。结论 cystatin C和cathepsin B的表达与人脑胶质瘤病理分级及侵袭性相关。联合检测cystatin C和cathepsin B的表达,可为脑胶质瘤的侵袭性及临床恶性程度评估提供重要信息。