检测日本血吸虫感染者血清中特异性IgG4的诊断价值

为评价日本血吸虫感染者血清中特异性IgG4的诊断和疗效价值，本研究以SEA为抗原，胶体金．抗人IgG4单抗结合物为检测标记物，以金标免疫渗滤法（DIGFA）检测急性和慢性血吸虫病患者治疗前后血清中特异性IgG4抗体。结果显示，急性和慢性血吸虫病病人血清中IgG4阳性率分别为90．9％（30／33）和98．0％（98／100）；检测非疫区健康者血清及其他寄生虫（包括肺吸虫、华支睾吸虫、囊虫等）感染者血清共235人份，未有阳性出现（特异性为100％）；检测急性血吸虫病病人治疗后6个月和12个月血清，IgG4抗体的阴转率分别为52．0％（13／25）和87．5％（21／24），均明显高于IgG阴转率；检测血吸虫病病人治后6个月血清，慢性病人与急性病人IgG4抗体阴转率无差异。结果表明DIGFA法检测病人血清特异性IgG4诊断血吸虫病敏感性高，与IgG相比有更高的特异性，具有一定的疗效考核价值。     

rSj26-Sj32-IgG4-ELISA法用于慢性日本血吸虫病疗效考核价值的研究

目的 探讨rSj26-Sj32-IgG4-ELISA法用于慢性日本血吸虫病疗效考核价值的研究。方法 采用rSj26-Sj32融合蛋白和日本血吸虫成虫粗抗原（SjAWA）作为包被抗原建立ELISA方法检测慢性日本血吸虫病患者体内治疗前后血清中特异性IgG4抗体水平的变化。结果 rSj26-Sj32融合蛋白组中,化疗前、化疗后3个月、化疗后6个月和化疗后12个月血清中IgG4抗体阳性率分别为95.00%、77.27%、60.00%和30.43%;而SjAWA组中血清特异性IgG4抗体阳性率分别为97.50%、81.82%、55.00%和34.78%。结论 rSj26-Sj32-IgG4-ELISA法可用于慢性日本血吸虫病的疗效考核。     

日本血吸虫循环抗原与抗独特型抗体的检测及其比较

以日本血吸虫肠相关ＭｃＡｂ－Ｇ３及单克隆抗独特型抗体ＮＰ３０致敏红细胞，建立ＲＩＨＡ诊断血吸虫病。结果是正常人、急、慢性及晚期血吸虫病人Ｇ３－ＲＩＨＡ阳性率分别为２．１７％、９８．７９％、８４．０％、３２．１４％；ＮＰ３０－ＲＩＨＡ阳性率各为１．４５％、９７．５８％、８１．３％、２８．５７％。７５例慢性感染人群中，两者与Ｋａｔｏ阳性符合率分别为８４．０％、８１．３％；而阴性符合率各是３１．５％、３７．０％轻、中、重感染度人群循环抗原／抗独特型抗体阳性率：Ｇ３－ＲＩＨＡ分别为８０．３３％、１００．０％、１００．０％；ＮＰ３０－ＲＩＨＡ为８０．３３％、８８．８９％、８０．０％，显示慢血病人血清中循环抗原及／或抗独特型抗体与ＥＰＧ无相关性。本文提示循环抗原、抗独特型抗体在免疫调变及／或免疫网络系统中呈竞争与抑制状态。     

结核、血吸虫抗体快速联检方法的建立与应用

目的创建一种新的结核、血吸虫抗体快速联合检测方法,并评价其在疾病预防中的潜在应用价值。方法以血吸虫虫卵可溶性抗原（SEA）和结核分枝杆菌脂阿拉伯甘露糖（LAM）作为检测用抗原,分别点样在硝酸纤维素膜上,以胶体金-蛋白A结合物为检测标记物,采用自行设计的垂直流检测装置为抗原抗体反应体系．建立结核抗体、血吸虫抗体快速联合检测的金标免疫渗滤法（TB／Sj—DIGFA）;用TB／Sj—DIGFA检测肺结核病人、血吸虫病人、健康人及流动人口血清样本,以敏感性、特异性等指标考核其诊断价值及应用价值。结果TB／Sj—DIGFA检测36份肺结核病人血清和40份血吸虫病人血清的敏感性分别为94．4％（34／36）和100％（40／40）;检测50人份健康人血清,对结核病和血吸虫病的特异性分别为80．0％（40／50）和100％（50／50）。应用新创建的TB／Sj-DIGFA方法调查3120流动人口,查出结核抗体阳性675份,阳性率为21．6％（675／3120）,血吸虫抗体阳性38人份．阳性率为1．22％（38／3120）。结论TB／Sj—DIGFA检测结核和血吸虫抗体具有较高的敏感性和特异性。该方法一次操作可同时完成结核和血吸虫2项特异性抗体测定,检测效率高,可节省大量人力和物力。     

ELISA法与RFFIT法检测狂犬病疫苗免疫后血清抗体的比较

目的比较狂犬病疫苗免疫后血清抗体酶联免疫吸附试验（ELISA）与快速免疫荧光灶抑制试验（RFFIT）两种检测方法。方法对93名研究对象采用0、3、7、14和28d程序进行暴露后免疫，分别采用ELISA法与WHO认可的金标法RFFIT法检测免疫DO、D3、D7、D14、D45d的血清抗体。结果免疫DO、D3、D7、D14、D45dELISA法检测抗体阳性率分别为8．6％、11．8％、22．6％、49．6％、86％，RFFIT法检测抗体阳性率分别为0％、0％、22．58％、100％、100％，ELISA法与RFFIT法阳性符合率分别为0％、0％、34.8％、100％、100％；阴性符合率分别为100％、100％、81．4％、0％、0％。结论ELISA法检测狂犬病疫苗免疫后血清抗体，免疫早期DO、D3、D7假阳性率较高，免疫D14、D45则假阴性率较高。建议采用WHO认可的方法做检测。     

三峡库区生态环境变化对血吸虫病流行的影响及防治对策研究

目的研究三峡成库后生态环境变化对血吸虫病流行的影响，为制定防治方案提供科学依据。方法在三峡库区中段和尾端江岸海拔160m和180m高度，模拟成库后灌溉区和淤积区类似条件，投放湖北肋壳钉螺和四川光壳钉螺，观察其生长繁殖1年的情况；用IHA抽样筛查来往于疫区流动人群中潜在的传染源．粪便检查血吸虫虫卵；了解耕牛等生畜引进情况；调查重庆市历史疫情报告和三峡医院、重庆医科大学附属第一医院诊断的血吸虫病病例；调查影响钉螺输入的因素。结果肋壳钉螺和光壳钉螺成活率仅少数月份在50％以下，多数月份在80％左右，各试验区发现钉螺交配数量较少，相对以3-6月为多，同时发现活幼螺；来往疫区流动人员血清抗体检查1075人，血吸虫抗体阳性率为1．77％，疫区返乡人员1030人，血清阳性率为1．07％；1989—2006年，发现有记载的输人性血吸虫病病例14例；血吸虫病区有大量造纸原料和花草树木进入库区。结论三峡成库后，生态环境发生变化，存在血吸虫病流行的潜在危险。     

日本血吸虫铁蛋白基因的克隆、表达及其免疫诊断的研究

目的：构建、表达、纯化日本血吸虫铁蛋白基因的原核表达重组蛋白，并初步观察其免疫诊断价值。方法：将日本血吸虫铁蛋白基因亚克隆于pGMC载体，转化重组体到大肠杆菌E．coli 2566进行表达；采用电泳层析法分离纯化日本血吸虫铁蛋白；用SDS-PAGE和Western blot鉴定表达纯化产物；用Dot-ELISA分别检测了血吸虫病人及正常人的血清。结果：重组的日本血吸虫铁蛋白以GMC(粒细胞巨噬细胞集落刺激因子)．日本血吸虫铁蛋白融合蛋白的形式在细菌中得到高效表达，分子量为40kD，能被日本血吸虫感染兔血清识别。用重组铁蛋白检测30例日本血吸虫病人血清和30例正常人血清，阳性率和假阳性率分别为93．3％和3．3％。结论：成功地表达纯化日本血吸虫重组铁蛋白．且该蛋白具有一定的免疫诊断价值．     

国产甲型肝炎灭活疫苗的安全性和免疫原性研究

目的 评价一种国产甲型肝炎（甲肝）灭活疫苗对人体的安全性和免疫原性。方法 为Ⅰ期临床试验。31名对甲肝易感的成年人被随机分为两组，实验组16个，接种国产甲肝灭活疫苗，对照组15人，接种史克必成公司生产的甲肝灭活疫苗。按0、3程序进行接种。国产疫苗剂量为每针1000U／0．5ml，史克疫苗剂量为每针720ELISAU／1ml。观察并比较两种接种后的局部和全身反应以及接种后1、3、4个月血清抗体阳转率和滴率。结果 两组初免和加强接种后个别接种对象表现轻微局部或全身反应，未发现肝功能损害。初次免疫后1个月、3个月和加强后1个月，国产疫苗的抗体阳转率分别为94％，100％和100％；史克疫苗为73％，80％和100％。国产疫苗抗体几何平均滴度分别为139．2mIU/ml、137．7mIU/ml和1066．7mIU/ml；史克必成疫苗分别为104．3mIU/ml、111．3mIU／ml和760．7mIU／ml。结论 国产甲肝灭活疫苗具有良好的安全性和免疫原性。     

斑点金免疫渗滤试验同步检测抗梅毒螺旋体IgM和IgG抗体的研究

目的探求一种可用于梅毒诊断及疗效考核的简便、快速、可靠的方法。方法建立检测抗梅毒螺旋体抗体的斑点金免疫渗滤试验（DIGFA），平行检测梅毒患者血清中IgM和IgG抗体，对患者在治疗前和治疗后血清中特异抗体水平的动态变化进行研究；以梅毒螺旋体血凝试验（TPHA）法为金标准，对临床上疑为梅毒患者的360份血清进行TPHA法和DIGFA法检测对比。结果用DIGFA法对已确诊为Ⅰ期、Ⅱ期和Ⅲ期梅毒患者治疗前血清中特异IgM抗体的检出率分别为82．61％（38／46）、100．00％（24／24）和77．78％（t4／t8）；IgG抗体的检出率分别为60．87％（28／46）、91．67％（22／24）和88．89％（16／18）；在Ⅰ期梅毒患者血清中特异IgM抗体的阳性率高于I{$抗体（P〈0．05），在Ⅱ期和Ⅲ期梅毒患者血清中，两类抗体的阳性率均较高，且差异无统计学意义（P均〉0．05）。58例两类抗体均阳性的梅毒患者经有效药物治疗后3个月、6个月、1年、1．5年、2年连续采血，经DIGFA检测连续观察的结果表明，IgM抗体出现较早，阴转较为明显和迅速，治疗后3个月的阴转率就达31．03％（18／58），1年的阴转率可达93．10％（54／58）；而IgG抗体出现较晚，阴转缓慢，治疗后1年的阴转率仅为34．48％（20／54）。结论DIGFA是检测抗梅毒螺旋体抗体的有效方法，早期梅毒的诊断和疗效考核可检测IgM抗体，而IgG抗体的检测则主要用于回忆性诊断，不适用于判断是否治愈或再感染。     

甲状腺激素自身抗体的检测及其临床意义

为探讨患者血清甲状腺激素水平假性升高的原因及检测甲状腺激素自身抗体的方法，为临床正确判断甲状腺激素水平提供帮助，本研究进行了甲状腺激素自身抗体结合实验、自身抗体稀释度实验、自身抗体抑制曲线实验及自身抗体检定实验。结果显示：患者血清与^125I-T2或^125I-T4呈特异性结合，结合率分别为58．77％和49．05％，是正常人或三蒸水对照的8－13倍；得到满意的T3和T4自身抗体稀释度曲线和抑制曲线，并确定甲状腺自身抗体为IgG，与兔抗人T3和T4抗体出现在电泳同一位置。甲状腺激素水平假或高的主要原因是患者体内存在着内源性抗甲状腺激素抗体，检测甲状腺激素自身抗体有利于正确判断甲状腺激素水平，为临床诊断和治疗甲状腺疾病提供帮助。     

原代沙鼠肾细胞流行性出血热双价疫苗临床观察与免疫学效果研究

目的对新近研制成功的沙鼠肾原代细胞培养的流行性出血热双价疫苗（汉滩型＋汉城型）进行Ⅱ期临床扩大观察，考核其对人体的安全性和中和抗体反应。方法将观察人群设在不同地区，分别选择中国南方和北方两个点，每个点接种５００人的双价疫苗，同时接种２５０人的商品化单价疫苗（汉滩型）作对照，观察接种对象的副反应程度和采集其血清样品测定荧光抗体和以蚀斑减少中和法测定中和抗体，考核疫苗效果。结果观察结果显示，在观察的２８０人中分别有７人呈现轻度局部副反应和３７．５℃以下低热的全身反应，总反应率分别为２．５％。ＩＦＡ抗体阳转率１００％，ＧＭＴ１∶６７。中和抗体阳转率汉滩型为８７．６％，汉城型为９６．３％（ｎ＝８１）。如果以同一份血清中任何单一血清型阳转来计算，阳转率为１００％。以同一份血清两个血清型均需阳转来计算，则阳转率为７５．３％（６１／８１）。结论经过Ⅱ期临床人体观察结果显示，该双价疫苗仅有轻度局部反应和良好的中和抗体应答。证明该疫苗对人体安全，具有较好的免疫原性     

rSj26-Sj32融合蛋白用于急性日本血吸虫病患者的诊断价值

目的探讨rSj26-Sj32融合蛋白用于急性日本血吸虫病患者的诊断价值。方法以纯化获得的rSj26-Sj32融合蛋白和SjAWA为包被抗原建立酶联免疫吸附试验(ELISA)、斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)和Dipstick三种方法分别检测急性日本血吸虫病患者血清中IgG抗体,并以华支睾吸虫病、卫氏并殖吸虫病、泡型棘球蚴病、囊型棘球蚴病、乙型肝炎和肺结核患者以及健康人血清作对照。结果 rSj26-Sj32三种方法检测急性日本血吸虫病患者血清的敏感性分别为90.00%、100.00%和96.00%;特异性分别为97.67%、95.35%和97.67%。结论 rSj26-Sj32融合蛋白作为诊断抗原用于急性日本血吸虫病患者血清的诊断具有较好的敏感性和特异性,对急性日本血吸虫病的诊断有较大的应用价值。     

斑点金免疫渗滤试验检测结核血清抗体方法的建立及初步临 …

从结核分枝杆菌（Ｈ３７ＲＶ菌株）中提纯了可拉伯糖甘露糖脂（ＬＡＭ）抗原，将其用于斑点金免疫渗滤试验以检测结核血清抗体。对痰菌阳性组和痰菌阴性组的活动性肺结核病人血清标本，本法的阳性率分别为９１．９％（６８／７４）和５３．３％（８／１５）。对正常人、肺癌病人和肺炎病人血清标本，本法的阴性率分别为９６．４％（８０／８３）、９４．４％（１７／１８）和１００．０％（１２／１２）。     

韶关市1998—2007年流感流行与监测分析

目的 了解韶关地区1998-2007年流感流行情况，探讨流行特征，提供防治建议。方法 根据韶关地区流感监测和疫情资料进行流感流行分析。结果 1998-2007年共采集流感样患者标本5062人份，经分离鉴定流感病毒阳性303株，分离率为5．99％。在303株流感病毒株中，H3亚型流感病毒245株（80．86％），B型流感病毒34株（11、22％），H1亚型流感病毒20株（6、60％），首次发现禽H9流感病毒感染人，并检出禽H9亚型流感病毒4株（1．32％）。10年内共报告疫情128起，以3～7月份为爆发高峰，以中、小学校居多，以H3亚型流感病毒引起的疫情见多，其次为B型流感。监测中采集一般人群血清596份，流感病毒川、H3、B1、B2型抗体阳性率分别为57、72％、69、30％、40、77％、27、68％；采集职业暴露人群血清366份，流感病毒H5和H9抗体阳性率分别是0．27％和33、08％。结论 韶关市近10年的流感流行优势株为H3亚型，流感流行高峰在3～7月，进入2000年后流感活动有所加强，一般人群血清流感抗体均有下降趋势，对此应做好加强监测及措施，防范流感在本市的大规模流行。首次在本市发现禽H9亚型流感病毒感染人事件，建议继续加强禽流感的监测。     

丙型肝炎病毒E1抗体检测及临床应用

目的：研究丙型肝炎患者血清中HCV E1抗体，确定HCV E1抗原在抗体检测中的应用价值。方法：应用酶联免疫吸附测定（ELISA）方法检测80份卫生部第3代HCV血清参比品，821例职业献血员血清和720例临床肝炎患者血清中E1抗体。结果：用E1抗原单包板检查80份卫生部血清参比品的阳性符合率为70％、阴性符合率为100％；从821例职业献血员血清样品中检出E1抗体阳性率为1．9％；从720例临床肝炎患者血清中检出E1抗体阳性率为68％。大部分E1抗体阳性血清，同时也能和HCV的Core、NS3抗原及NS5A抗原呈阳性反应，但有个别血清只对E1抗原呈阳性反应。用市购HCV抗ELISA检测试剂盒检测为阴性的218例肝炎科门诊患者、813例献血员和848例一般人群血清，用E1抗原单包板复检，检出的阴性率分别为1．4％、1．1％和0．9％。在3例患者血清学转变的追踪研究中，HCV E1抗体都同现最早。结论：用E1工程蛋白检测E1抗体具有较高的灵敏度和特异性。E1抗体在HCV感染患者中普遍存在而且早出现，在临床诊断上是有意义的。     

rSj26-Sj32-Immunogold-Dipstick试剂对慢性日本血吸虫病的诊断价值研究

目的研究rSj26-Sj32-Immunogold-Dipstick试剂对慢性日本血吸虫病的诊断价值。方法用rSj26-Sj32融合蛋白和日本血吸虫成虫抗原（SjAWA）Immunogold-Dipstick法检测慢性日本血吸虫病患者血清,同时以华支睾吸虫病、卫氏并殖吸虫病、泡型棘球蚴病、囊性棘球蚴病、乙型肝炎、肺结核患者和健康人血清作为对照,比较两种抗原检测抗体效果的差异。结果该法检测慢性日本血吸虫病的敏感性和特异性分别为92.50%和97.67%,诊断该病的阳性预告值、阴性预告值及诊断效率分别为97.37%、93.33%和95.18%,并且与其他疾病患者血清均无交叉反应。结论 rSj26-Sj32-Immunogold-Dipstick试剂可用于慢性日本血吸虫病的免疫诊断。     

三峡库区肺吸虫病与血吸虫感染ELISA检测的交叉反应研究

目的探索三峡库区肺吸虫病与血吸虫病免疫反应的交叉反应率。方法在酶联免疫吸附试验（ELISA）标准条件下进行严格质量控制后,采用ELISA方法分别用肺吸虫成虫抗原检测血吸虫病人阳性血清,用血吸虫虫卵抗原检测肺吸虫病人阳性血清．观察二者间的交叉反应率。结果在质控条件下ELISA的检测结果显示,80例三峡库区肺吸虫患者血清经血吸虫虫卵ELISA检测阳性19例,交叉反应率为23．75％。30例血吸虫患者血清经肺吸虫成虫抗原检测阳性11例,交叉反应率为36．67％。二者间差异无统计学意义（χ^2=1．835,P〉0．05）。结论三峡库区肺吸虫病与血吸虫病ELISA检测有较高的交叉反应率,需建立肺吸虫和血吸虫病的特异性免疫学检测方法,减少交叉反应。对三峡库区上下游的血吸虫病流行区传入库区的血吸虫病作出特异诊断、早期预防,以达到控制血吸虫病在库区流行、扩散的目的。     

肝抗原自身抗体在自身免疫性肝病诊断中的意义

目的 探讨肝抗原自身抗体在自身免疫性肝病患者血清中的阳性率。方法 将患者分为3组：①自身免疫性肝病组，包括自身免疫性肝炎(AIH)、原发性胆汁性肝硬化(PBC)，原发性硬化性胆管炎(PSC)。②各类病毒性肝炎组；③不明原因肝损伤组。分别用间接免疫荧光法、免疫印迹法检测肝抗原(SAL/LP、LKM-1、LC-1、AMA-M2)自身抗体。结果 抗SLP／LP抗体在AIH患者血清中阳性率为46．4％，明显高于LKM-1(13．3％)、LC-1(0．O％)及AMA-M2(13．3％)抗体，并且在病毒性肝炎患者血清中呈阴性反应。抗AMA-M2抗体在PBC患者血清中阳性率达95．0％。不明原因肝损伤组患者中有10．0％的AMA-M2抗体阳性。结论 抗SLA/LP抗体对AIH具有特异性，肝抗原自身抗体的检测将有助于自身免疫性肝病患者的诊断及治疗。     

猪、羊、鸡抗-HEV抗体流行率调查

目的 探讨猪、羊、鸡群中抗-HEV抗体流行率。方法从新疆、广西、广东、北京和河北收集猪、羊、鸡的血清标本498份，应用双抗原夹心酶联免疫法(ELISA)检测抗-HEV抗体。结果 猪抗-HEV阳性率为67．53％(104／154)，其中新疆4～5个月龄猪血清抗-HEV阳性率为100．00％，广西3个月龄以下仔猪抗-HEV阳性率为36．00％(9／25)，6月龄以上猪阳性率为71．67％(86／120)；新疆108份绵羊血清抗-HEV抗体全部阴性；236份鸡血清标本的抗-HEV阳性率仅为1．27％(3／236)。广东罗定、深圳和广西柳州郊区鸡血清标本中各检测出一份抗-HEV阳性，阳性率分别为4．00％(1／25)、1．49％(1／67)、1．49％(1／67)。北京郊区25份和河北52份鸡血清抗-HEV检测全部阴性。结论 猪、鸡群中存在HEV感染，猪抗-HEV抗体流行率最高。猪和鸡在传播人HEV中的作用值得进一步研究。     

液相人血清TSH免疫放射分析的建立

本文利用兔抗人ＴＳＨ（ｈＴＳＨ）多克隆抗体、（１２５）~Ｉ－鼠抗ｈＴＳＨ单克隆抗体、固相驴抗兔二抗建立了液相高灵敏度人血清ＴＳＨ免疫放射分析。方法学考核显示，灵敏度为０．００８ｍＩＵ／Ｌ，批内和批间变异系数分别为１．６％～４．１％和２．７％～８．６％，回收率为９５．２％～１０１．４％，与ｈＦＳＨ和ｈＨＣＧ的交叉反应率分别为４．４１×１０~（－５）和５．０８×１０~（－７）．用本法测定了３４名正常人、２７例甲亢和９例甲低患者血清值，结果与临床相符。