采用四代试剂结合核酸检测方法早期发现HIV感染者的检测策略

目的在用艾滋病病毒(HIV)抗体诊断试剂盒(简称第三代试剂)筛查的基础上,采用HIV抗原抗体(HIV Ag/Ab)诊断试剂(简称第四代试剂)结合核酸检测方法,对天津男男性行为人群(MSM)筛查HIV结果进行评价,建立发现筛查阳性感染者的策略。方法对天津市2013年MSM的血液样品2320例,采用第三代试剂进行初筛,对筛查阴性的样品采用第四代试剂与核酸检测进一步筛查。结果2320例样品中,仅用第三代试剂检出HIV抗体阳140例,加用第4代试剂检出阳性146例,再加用核酸方法检出阳性151例,第四代试剂结合核酸的方法比只采用第三代试剂的方法,多检出11例早期感染的阳性样品,阳性率从6.03%提高至6.51%。结论在感染率较高的MSM中,采用第四代试剂结合集合核酸方法,可以提高HIV感染者的检出率,最大限度地发现早期感染者,减少二代传播,建议将第四代试剂作为高危人群HIV筛查的首选试剂。     

两代酶联免疫试剂在男男性行为人群HIV检测中的应用

目的通过使用第四代与第三代艾滋病病毒(HIV)抗体酶联免疫试剂检测结果及核酸检测结果的比较,评估其在天津市男性性行为人群(MSM)HIV感染筛查中的应用效果。方法对天津市某区自愿咨询检测点进行咨询检测的男男性行为人群用EDTA抗凝管采集血液样品,同时使用两代HIV抗体筛查试剂进行检测,阳性者进行确证检测,两种筛查试剂检测结果均为阴性的样品,采用集合核酸检测方法进行检测。结果共计检测MSM人群血液样本2 065份,共对87份样品进行了确证试验,1 978份HIV抗体筛查阴性样品经核酸检测,有1份集合样品呈阳性。HIV抗体确证试验为阴性和不确定的6份样品,进行单份核酸检测,有4份HIV-1RNA阳性,病毒载量检测结果均符合HIV急性感染特征。此次研究中的MSM人群HIV感染率为4.16%(86/2 065),95%可信区间3.34%～5.12%。发现5例HIV急性感染者,估计该人群年发病率为3.16%,95%可信区间1.01%～7.35%。使用第三代抗体试剂进行筛查时,总费用为148 360元,其敏感性为94.2%(81/86)、特异性为100%,发现HIV感染者的单位成本为1 832.6元。使用第四代抗体试剂进行筛查时,总费用为166 080元,其敏感性为98.8%(85/86)、特异性为99.9%(1 977/1 979),发现HIV感染者的单位成本为1 953.9元。结论此次研究估测该人群的HIV感染年发病率为1.01%～7.35%,提示其高危性行为程度较高。在该人群中,使用第四代试剂筛查时,HIV感染者发现数比使用第三代试剂增加4.9%,发现HIV感染者的单位成本增加6.2%,提示具有推广应用价值。     

使用四代HIV抗原抗体试剂筛查联合蛋白印迹或核酸补充实验的检测策略临床评价

目的对使用四代艾滋病病毒(HIV)抗原抗体试剂筛查,联合蛋白印迹试验(WB)或核酸补充实验的检测策略进行临床效果评价。方法第四代HIV抗原抗体检测试剂筛查阳性样本282例,采用第三代HIV抗体检测试剂复检,复检阳性样本进行WB确证,复检阴性样本同时进行WB检测及HIV核酸检测。结果 282例样本,经WB检测HIV抗体阳性195例,占69.1%,阴性71例,占25.2%,抗体不确定16例,占5.7%。71例WB阴性样本,HIV核酸检测阳性5例。16例WB不确定样本,经核酸检测阳性11例。四代阳性+三代阳性样本206例中,WB确认为HIV抗体阳性195例,占94.7%;9例不确定样本的WB带型主要为p24gp160。四代阳性+三代阴性样本76例,WB检测HIV抗体阴性69例,其中5例经核酸检测为阳性,核酸值均1×106拷贝/mL。结论四代阳性+三代阳性样本,WB确证阳性符合率高;四代阳性+三代阴性样本,WB检测存在漏检的问题,需要补充核酸试验确证。WB不确定样本,核酸检测可以实现早期诊断的目的。     

用HIV抗原/抗体联合试剂筛查吸毒者中窗口期HIV感染者

目的筛查窗口期艾滋病病毒(HIV)感染者,并验证HIV抗原/抗体联合试剂(第四代试剂)的检测性能。方法用HIV抗原/抗体联合试剂对经HIV抗体筛查呈阴性反应的吸毒者样本进行检测,并与HIV抗原检测及HIV-1 RNA检测的结果作比较,以证实其为窗口期感染样本。结果1 934份HIV抗体阴性样本中发现3例窗口期HIV感染者;所用第四代试剂检出窗口期样本的敏感性为100%,特异性为99.28%,假阳性率为0.77%。结论用第四代试剂检测虽然可以在某种程度上缩短检测窗口期,但该试剂有一定的假阳性结果,尤其是在S/CO值较低时其假阳性比率增高,故检测时应注意S/CO值的高低,如有条件可进一步做HIV-1 RNA检测。     

HIV抗体确证试验假阳性1例分析

目的 通过对1例艾滋病病毒(HIV)抗体确证试验阳性者进行随访检测,探讨目前HIV抗体筛查和确证检测技术存在的问题.方法 对受检对象进行HIV抗体筛查和确证试验,并于3、6个月和1年随访检测.结果 首次筛查试验PA试剂为阴性,第3代梅里埃ELISA试剂为阳性,确证试验WB试剂检测带型gp120p24,判为HIV-1抗体阳性.比较试验第4代梅里埃ELISA试剂为阳性,金豪、吉比爱ELISA试剂为阴性,雅培硒标试剂为弱阳性.病毒载量检测结果为阴性.3次随访检测,筛查试验结果与首次检测基本一致,确证试验带型分别为gp120p24、p24和p24p55,1年后的病毒载量检测结果为阴性,受检对象随访后结果定为阴性.4次血样集中检测显示,筛查试剂批间无明显差异,但不同试剂间有差异;确证WB试剂不同批号间带型存在差异.结论 目前应用的WB确证试剂存在一定的批间差异,对弱阳性带型或阳性带型不常见的样本,需更换试剂批号重复进行确证检测;确证试验结果处于临界阳性状态者需进行流行病学史调查;WB确证试验若同时出现1条env带和p24带判为HIV抗体不确定,并进行随访.     

HIV临床检测技术进展及应用

HIV感染的实验室检测在AIDS防治中至关重要。为提高HIV相关检测的灵敏度和特异度，陆续出现了可同时检测HIV抗原和抗体的第四代试剂、用于病毒载量检测的实时荧光定量PCR技术、新近感染检测的IgG捕获BED酶联免疫法等方法。这些方法不断接受临床评估及验证。     

HIV抗原抗体筛查结合核酸定量补充实验检测策略的临床应用评价

目的对艾滋病病毒(HIV)4代区分抗原抗体试剂筛查结合核酸定量补充实验的HIV检测策略临床应用进行评价。方法 2015年9月1日至2017年5月31日,HIV4代区分抗原抗体试剂筛查有反应的病例样本1 122例,用3代试剂双份复检、蛋白印迹法(WB)抗体确证,抗体不确定或阴性的样本采用核酸定量检测或随访检测。按2015版《全国艾滋病检测技术规范》中区分抗原抗体的抗体诊断策略对数据进行统计,分析4代试剂早期感染检出能力和HIV核酸定量检测作为补充实验的可行性。结果 1 122例样本中,非性病门诊筛查样本中,有反应的66例,均为Ag~-/Ab~+;性病门诊筛查样本中,有反应的1 056例,其中4代试剂筛查Ag~+/Ab~+病例3例,Ag~+/Ab~-32例。性病门诊的32例Ag~+/Ab~-病例中,3代试剂Ab~-病例13例,占性病门诊初筛有反应病例的1.23%;26例进行了核酸定量检测,核酸检测率占81.3%(26/32);抗体确证结果显示,WB阳性6例,WB阳性率为18.8%(6/32)。所有32例病例经WB抗体确证和/或核酸定量检测,结合CD4~+T淋巴细胞和流行病史,均诊断为HIV感染。4代试剂筛查单独抗原有反应的,与HIV诊断阳性符合率为100%。按新的策略,共74例需进行核酸定量补充实验或随访检测,对补充实验选用核酸定量和随访的病例人数进行卡方检验,χ2=3.28,P=0.07,选择做核酸检测和随访检测的病例不具有统计学意义。结论 HIV区分抗原抗体试剂用作初筛结合核酸定量检测,作为补充实验的检测策略可提高HIV早期感染的检出率,在高危人群中具有推广的可行性,不同实验室宜根据检测对象的特点对HIV检测策略进行临床评估后选用。     

HIV抗体确证试验假阳性1例分析

目的通过对1例艾滋病病毒（HIV）抗体确证试验阳性者进行随访检测,探讨目前HIV抗体筛查和确证检测技术存在的问题。方法对受检对象进行HIV抗体筛查和确证试验,并于3、6个月和1年随访检测。结果首次筛查试验PA试剂为阴性,第3代梅里埃ELISA试剂为阳性,确证试验WB试剂检测带型gp120p24,判为HIV-1抗体阳性。比较试验第4代梅里埃ELISA试剂为阳性,金豪、吉比爱ELISA试剂为阴性,雅培硒标试剂为弱阳性。病毒载量检测结果为阴性。3次随访检测,筛查试验结果与首次检测基本一致,确证试验带型分别为gp120p24、p24和p24p55,1年后的病毒载量检测结果为阴性,受检对象随访后结果定为阴性。4次血样集中检测显示,筛查试剂批间无明显差异,但不同试剂间有差异;确证WB试剂不同批号间带型存在差异。结论目前应用的WB确证试剂存在一定的批间差异,对弱阳性带型或阳性带型不常见的样本,需更换试剂批号重复进行确证检测;确证试验结果处于临界阳性状态者需进行流行病学史调查;WB确证试验若同时出现1条env带和p24带判为HIV抗体不确定,并进行随访。     

第4代HIV抗原抗体酶联检测试剂质量评估

目的:探讨第4代人类免疫缺陷病毒(HIV)抗原抗体酶联检测试剂在血液筛查中的质量。方法:分别使用第3代酶联试剂和第4代试剂检测HIV1 0.5NCU/ml质控血清、卫生部HIV室间质评标本及72 693例无偿献血者标本的HIV标志物。结果:对质控血清的检测显示第4代试剂灵敏度大于第3代;对72 693例献血者标本HIV初筛检测,第3代试剂初筛阳性32例,阳性率0.044 0%,第4代试剂初筛阳性为53例,阳性率0.072 9%,显示2种试剂初筛阳性结果差异有统计学意义(χ2=5.18,P0.05),但2种试剂的敏感性均为100%。在特异性方面,第4代试剂(99.94%)略低于第3代试剂(99.97%)。结论:未开展核酸检测的采供血机构,使用第4代HIV抗原抗体酶联试剂用于血液的常规筛查,能有效降低HIV传播风险,保证血液安全。     

HIV-1病毒载量检测在WB阴性病例诊断中的应用

目的探讨艾滋病病毒(HIV)抗体蛋白印迹试验(WB)结果阴性标本的病毒载量检测情况,评价病毒载量试验对"HIV抗体阴性"病例随访诊断的价值。方法对2017-2019年34例筛查阳性、WB检测结果为HIV抗体阴性的样本,先用四代酶联免疫吸附试验(ELISA)检测试剂和三代ELISA检测试剂进行检测,两种方法均阳性或一种方法阳性再进行WB检测,结果为阴性的样本两种补充实验同时进行,首先立即联系患者采集两支EDTA-K3抗凝血,分别于24小时内进行病毒载量和CD4+T淋巴细胞(简称CD4细胞)检测,然后于4周随访采集血清进行WB检测。结果 34例WB检测结果阴性患者中,病毒载量20拷贝/mL 12例,20～5 000拷贝/mL 8例,5 000拷贝/mL14例;4周随访WB结果阳性10例,阴性11例,不确定13例;CD4细胞200个/μL 4例,200～500个/μL 18例,500个/μL 12例;其中1例接受过抗病毒药物治疗,其余均无抗病毒治疗史。病毒载量结果与抗体随访结果以及CD4细胞计数的相关性均一致。结论结合两种补充实验方法,23例阳转或需继续随访,为防止HIV感染者被遗漏,筛查阳性、WB检测结果阴性的疑难样本应立即检测病毒载量,以多种检测结果为依据,结合流行病学和临床资料综合判定才是最科学最准确的判定方法。     

61例HIV抗体筛查呈反应性蛋白印迹试验阴性样本核酸检测结果分析

<正>目前国内检测艾滋病病毒(HIV)抗体最常用的方法有酶联免疫吸附试验(ELISA)、快速检测(RT)、蛋白印迹试验(WB)等。ELISA试剂问世以来,性能不断改进,现有的第四代ELISA试剂在第三代基础上增加了p24抗原检测,从而实现了HIV抗原/抗体的同步检测~([1])。虽然WB是我国HIV的确证实验,但WB在早期感染者的检测中存在漏检风险~([2]),这严     

样品热灭活对HIV抗体筛查和确证试验结果的影响研究

目的研究血浆样品经热灭活(56℃30min)后,其艾滋病病毒(HIV)抗体筛查和确证试验结果是否会受到影响。方法取5份HIV抗体阳性血浆样品,各分为2管,其中1管进行热灭活处理,然后对这2组样品分别进行10倍系列稀释,用1种HIV抗体酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂检测,比较S/CO比值。取300份血浆样品,分为灭活组和普通组,分别用5种HIV抗体ELISA试剂(其中第三代试剂3种、第四代试剂2种)和3种HIV抗体快速检测试剂进行筛查检测,出现筛查阳性反应的样品进一步做确证试验。结果随着稀释度的增加,5份HIV抗体阳性样品灭活前后的ELISA检测结果(S/CO比值)都逐渐减小,直至转为阴性反应,其中4份样品灭活后比灭活前早一个稀释度转阴,1份同时转阴,提示灭活过程会略微降低HIV抗体的浓度。用5种ELISA试剂、3种快速检测试剂检测300份样品,样品灭活前后的检测结果差异均无统计学意义;对出现筛查阳性反应的所有样品,灭活前后的确证试验检测结果一致。结论经56℃30min热灭活后,尽管HIV阳性血浆样品中的HIV抗体浓度略有降低,但对于未经稀释的常规临床血浆样品来说,热灭活处理不会明显影响目前常用筛查、确证试剂的检测结果。     

HIV1/2抗体筛查初复检不一致样本的补充实验结果分析

正艾滋病在我国的流行仍呈增长趋势,早期、准确、可靠的诊断和寻求有效治疗是防止其广泛传播的关键所在~([1])。目前艾滋病诊断最主要的方法是艾滋病病毒(HIV)抗体的检测,根据《全国艾滋病检测技术规范》~([2])要求,HIV抗体检测主要分为筛查试验(初筛和复检)和确证实验。初筛试验通常采用敏感性较高的试剂尽可能发现HIV感染者,确证实验则采用特异性较高的方法纠正初筛试验中的假阳性反应结果。为了探讨筛查实验室上送的HIV1/2抗体检测结果为"一有反应一     

一种国产HIV-1病毒载量试剂与进口试剂的比较研究

正血浆病毒载量检测是艾滋病防治工作中一项重要的实验室检测指标,与疾病的发生、发展及预后有密切关系,主要用于评估艾滋病病毒(HIV)感染进程、抗病毒治疗效果监测及HIV感染的辅助诊断~([1])。目前国内主要使用3种进口试剂进行病毒载量(VL)检测,进口试剂的敏感性及特异性均较好,但价格昂贵~([2-4])。随着治疗就是预防艾滋病策略被广泛地接受~([5-6]),我国免费抗艾滋病病毒治疗的病人数大幅度     

HIV抗体不确定检测结果的条带特征及随访情况

正随着艾滋病病毒(HIV)检测覆盖面不断扩大,样本来源更加复杂,HIV抗体不确定检出率越来越高~([1])。目前检测HIV感染最常用的方法是抗体检测,HIV抗体检测分为筛查试验和确证试验,筛查试验目的是最大限度地发现感染者,用敏感性高的筛查试剂,不可避免地会出现假阳性反应,因而需要一种特异性更高的抗体确证试验来确定是否感染,徐州市疾病预防控制中心艾滋病确证实验室承担了辖区内筛查试验阳性     

HIV抗体筛查试验阳性-确证试验阴性标本的分析

目的了解HIV抗体筛查试验假阳性现象的特点及引起假阳性反应的原因。方法对2004～2009年本实验室常规监测检测中筛查试验阳性-确证试验阴性标本的相关资料进行分析。结果394例筛查试验阳性-确证试验阴性标本主要来源于没有或甚少高危行为的各类普通人群;采用"明胶颗粒凝集试剂(PA)+ELISA"或双ELISA试剂组合检测,83%以上为一阴一阳结果,近70%的标本ELISAS/CO值在1～4之间;采用"吉比爱ELISA+第3代梅里埃ELISA"或"吉比爱ELISA+第4代梅里埃ELISA"组合检测,S/CO值同处于1～6范围的标本分别占78.95%和64.0%。结论HIV抗体筛查检测假阳性存在主、客观原因;实验室应采取应对措施最大限度地保证结果的准确以及对检测结果进行正确的解释。     

一种国产HIV-1病毒载量试剂与进口试剂的比较研究北大核心CSCD

血浆病毒载量检测是艾滋病防治工作中一项重要的实验室检测指标,与疾病的发生、发展及预后有密切关系,主要用于评估艾滋病病毒（HIV）感染进程、抗病毒治疗效果监测及HIV感染的辅助诊断^（[1]）。目前国内主要使用3种进口试剂进行病毒载量（VL）检测,进口试剂的敏感性及特异性均较好,但价格昂贵^（[2-4]）。随着治疗就是预防艾滋病策略被广泛地接受^（[5-6]）,     

核酸定量检测试验应用于HIV-1感染诊断的评价

正1型艾滋病病毒(HIV-1)感染的诊断依赖于实验室检测,不同的检测方法由于标志物的不同而有不同的窗口期。常规的酶联免疫吸附试验(ELISA)+蛋白印迹试验(WB)的检测策略存在早期感染漏检的风险。在可疑人群中应用更高效的检测策略,可以有效地诊断HIV-1的早期感染。对2018年本确证实验室复检的第四代HIV筛查试剂有反应而WB结果为阴性或不确定的样本进行HIV-1核酸定量检     

某综合性医院2014-2019年核酸定量检测诊断HIV感染的应用效果分析

目的分析核酸检测作为补充实验用于诊断艾滋病病毒(HIV)感染在综合性医院就诊人群的效果及影响因素。方法收集某综合性医院2014年10月至2019年9月5年间临床常规HIV筛查人群的实验室检测结果,HIV筛查试验阳性且蛋白印迹试验(WB)不确定及阴性者以HIV核酸定量检测[病毒载量(VL)]作为补充实验。以VL5 000拷贝/mL作为HIV感染的诊断标准,分析病毒载量辅助HIV诊断感染者的例数、占比、感染者VL的分布及临床特征。结果 5年间,大型三甲综合性医院就诊人群HIV筛查阳性者中,共发现429例经WB结果为不确定及阴性者,病毒载量5 000拷贝/mL以上者共17例,占比3.96%;病毒载量水平5 000拷贝/mL者412例,其中20～5 000拷贝/mL者4例,占0.93%;20拷贝/mL者3例,占0.70%;未检出靶标者(TND)405例,占94.41%。随访到的44例中,7例病毒载量5 000拷贝/mL,随访时WB全部转阳;37例病毒载量5 000拷贝/mL,随访时WB全部未转阳。病毒载量5 000拷贝/mL的占比与筛查试验S/CO值、快速检测(胶体硒法)结果、WB带型等因素均有关。结论核酸定量检测作为HIV感染诊断补充实验,有助于综合性医院就诊人群中HIV早期或晚期感染的及时诊断。     

男男性行为者HIV感染急性期筛查诊断和治疗工作模式探索

目的应用艾滋病病毒(HIV)核酸检测技术,对男男性行为者(MSM)中HIV初筛检测阳性,蛋白印迹试验(WB)确证结果为不确定者和HIV初筛检测阴性者进行筛查,及时诊断MSM中的HIV急性期感染者,尽快启动抗病毒治疗,探索我国MSM中HIV急性期感染筛查诊断和治疗的工作模式。方法 2015年7月至2016年6月,通过方便样本的招募方式,选取天津地区的MSM 2 000人,同时使用艾滋病第三代和第四代快速检测试剂进行平行检测,阴性样本统一进行集合核酸(HIV Pooled PCR)检测,对酶联免疫吸附试验(ELISA)结果为阴性、WB检测结果为阴性和不确定者接受扩增核酸检测(NAAT),结果为阳性者且检测值≤1 000拷贝/mL,进行1-2周随访,并在随后接受核酸和WB检测,阳性检测者检测值1 000拷贝/mL,则重复扩增核酸检测步骤,并最终按照检测结果判定HIV急性期感染者。结果共招募符合条件的调查对象1 914人,第三代和第四代快速检测试剂同时检测出阳性73人。4例WB不确定结果样本经过两次NAAT检测被诊断为HIV感染。通过集合核酸检测发现3例结果为阳性的样本。共6例HIV急性期样本接受抗病毒治疗,6例接受治疗样本的病毒载量分别降至46拷贝/mL、230拷贝/mL、72拷贝/mL、20拷贝/mL、622拷贝/mL和48拷贝/mL。结论使用第三代快速检测试剂开展HIV急性期检测工作仍具有较大实际意义和可行性,同时在日常HIV检测工作中应充分重视和发挥核酸检测,减少MSM在HIV检测过程中,从其WB确证结果不确定到随访至其WB检测结果阳性中间传播HIV的风险。