汉防己甲素延缓肾小球硬化机理的实验研究

目的 探讨汉防己甲素对肾小球硬化大鼠肾脏转化生长因子（TGF－β1）基因表达的影响。方法 27只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组,肾小球硬化模型组、汉防己甲素组和氨氯地平组,用单侧肾切除加2次注射阿霉素制备肾小球硬化动物模型,用Northern印迹杂交,观察肾皮质TGF－β1mRNA表达。结果 汉防己甲素使肾小球硬化大鼠肾皮质TGF－β1mRNA表达较模型组明显下调,肾小球细胞外基质较模型组明显减少。结论 汉防己甲素通过下调TGF－β1表达而减少肾小球ECM沉积,从而延缓肾小球硬化。     

火把花根对系膜增殖性肾炎模型大鼠单核细胞趋化因子-1与转化生长因子β1表达的影响

目的 观察火把花根对系膜增殖性肾炎（MsPGN）大鼠24 h尿蛋白转化生长因子-β1（TGF-β1）和单核细胞趋化因子-1（MCP-1）表达的影响,探讨其肾脏保护作用的机制。方法 采用抗胸腺细胞血清诱发的系膜增殖性肾炎大鼠模型,将Wistar大鼠随机分为正常对照组、肾炎模型组和火把花根治疗组,14 d后测量24 h尿蛋白,处死大鼠,用PAS染色观察肾脏病理变化;RT-PCR及Western blot检测肾组织中TGF-β1和MCP-1的mRNA及蛋白质表达情况。结果 火把花根治疗组大鼠24 h尿蛋白、肾组织TGF-β1和MCP-1mRNA和蛋白表达明显下降,肾组织病理改变明显改善,与模型组相比均差异有极显著性（均P＜0.01）,与正常对照组比较均差异无显著性（均P＞0.05）。结论 火把花根可显著改善系膜增殖性肾炎大鼠肾脏病变,抑制系膜细胞的增生,减少系膜基质的蓄积,其机制可能与抑制TGF-β1和MCP-1表达有关。     

补肾益寿片对Thy-1系膜增生性肾炎大鼠肾功能及TGF-β1表达的影响

目的探讨补肾益寿片对系膜增生性肾小球肾炎大鼠肾功能及转化生长因子-β1(TGF-β1)的影响。方法采用免疫法制备系膜增生性肾小球肾炎大鼠模型,测定大鼠24 h尿蛋白定量、血生化指标,光镜下观察肾组织病理形态学改变,并应用免疫组化方法检测各组大鼠肾组织中TGF-β1的表达。结果模型组与正常对照组比较,24 h尿蛋白定量、Scr、BUN及TGF-β1表达明显升高(P<0.01);补肾益寿片组24 h尿蛋白定量、Scr、BUN及TGF-β1均明显低于模型组(P<0.05);肾组织形态学观察显示补肾益寿片组个别区域肾小球系膜细胞轻度增生,系膜区轻度增宽,管腔无挤压现象,较模型组明显改善。结论补肾益寿片能降低系膜增生性肾小球肾炎大鼠蛋白尿、Scr、BUN及TGF-β1水平,减轻系膜细胞增生和系膜外基质增加,延缓或减轻肾组织损伤,保护肾功能。     

肾康注射液对单侧输尿管梗阻大鼠模型肾间质转化生长因子-β1和骨形成蛋白-7表达的影响

目的研究肾康注射液对单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠模型肾间质转化生长因子-β1（TGF-β1）和骨形成蛋白-7（BMP-7）表达的影响。方法将SD雌性大鼠54只随机分为正常对照组、UUO模型组、肾康治疗组，肾康治疗组用肾康注射液灌胃，分别在手术后第5，10，15天处死大鼠，在光镜下观察肾组织病理改变，应用免疫组织化学方法检测肾小管间质中TGF-β1，和BMP-7表达。结果与正常对照组相比，UUO模型组大鼠肾脏TGF-β1表达明显升高，BMP-7表达明显减少，但在予肾康注射液治疗后能显著下调UUO模型大鼠TGF-β1表达，上调BMP-7表达。结论肾康注射液可减轻肾小管间质纤维化，延缓慢性肾功能衰竭进展。     

海昆肾喜对糖尿病肾病大鼠肾脏保护作用及其对肾组织TGF-β1蛋白及mRNA表达的影响

目的 探讨海昆肾喜对糖尿病肾病大鼠肾组织转化生长因子-β1(TGF-β1)蛋白及mRNA表达的影响.方法 50只大鼠空腹一次性腹腔注射链脲佐茵素造成糖尿病模型,并按血糖高低随机分为2组、试验组灌胃海昆肾喜,给药12周.第4、8、12周末收集大鼠24h尿量及检测尿蛋白量.12周末处死大鼠,取血并分离血清检测肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)和甘油三酯(TG)等,取肾后固定包埋切片,采用HE、Mallory染色观察肾组织病理改变,并应用免疫组化检测肾组织TGF-β1及用原位杂交检测肾组织TGF-β1mRNA的表达.结果 海昆肾喜能够降低糖尿病大鼠的蛋白尿,增加体重.降低血清Scr和BUN,改善肾功能,调节TG,改善脂代谢紊乱,并且能够降低糖尿病大鼠肾小管上皮细胞、肾间质细胞浆TGF-β1及mRNA的表达.结论 海昆肾喜可能抑制TGF-β1蛋白及mRNA的过度表达,进而减缓糖尿病肾病的病程进展.     

α-平滑肌肌动蛋白及转化生长因子β1在系膜增生性肾炎大鼠中的表达及补肾中药的保护作用研究

目的 探讨α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及转化生长因子β1(TGF-β1)在系膜增生性肾小球肾炎大鼠肾组织中的表达及补肾益寿片对肾脏的保护作用.方法 采用免疫法制备系膜增生性肾小球肾炎大鼠模型,测定大鼠24 h尿蛋白定量、血生化指标,并应用免疫组化方法检测各组大鼠肾组织中α-SMA及TGF-β1的表达情况.结果 模型...     

局灶节段性肾小球硬化大鼠TGF-β1的表达及缬沙坦与罗格列酮的干预作用

目的:探讨局灶节段性肾小球硬化(FSGS)大鼠肾组织转化生长因子β1(TGF-β1)的表达及缬沙坦与罗格列酮干预治疗对其影响。方法:采用一侧肾切除加重复尾静脉注射阿霉素法建立局灶节段性肾小球硬化大鼠模型。随机分为正常对照组、缬沙坦治疗组、罗格列酮治疗组、缬沙坦与罗格列酮联合治疗组及模型组。动态检测24h尿蛋白定量(24hUP)及血生化值,计算内生肌酐清除率(Ccr);对肾组织进行病理形态学观察,计算肾小球硬化指数(SI)、肾小球细胞外基质与肾小球面积之比(ECM/GA),采用免疫组织化学方法检测肾组织TGF-β1的表达,并分析TGF-β1水平与SI、ECM/GA的相关性。结果:实验8周时各治疗组与模型组比较均显示24hUP降低,总蛋白、白蛋白增加,胆固醇降低,Ccr升高;SI、ECM/GA减低;免疫组化染色显示,各治疗组TGF-β1的表达均较模型组减少(P<0.05或P<0.01)。缬沙坦联合罗格列酮组尿蛋白降低、TGF-β1表达减少的作用均优于各单一药物治疗组(P<0.05或P<0.01)。结论:TGF-β1水平的变化与SI及ECM/GA同样可反映FSGS的程度,TGF-β1可以作为一个有价值的疗效评估指标。缬沙坦、罗格列酮均可能成为防治FSGS的不同靶点,缬沙坦与罗格列酮组合可以作为FSGS非激素治疗时联合用药的选择之一。     

百令胶囊对肾小管间质纤维化大鼠肾脏α-平滑肌肌动蛋白表达的影响及意义

目的观察百令胶囊对肾小管间质纤维化大鼠肾脏α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscleactin,α-SMA）表达的影响,探讨百令胶囊肾脏保护作用的可能机制。方法雄性3个月龄SD大鼠90只,随机分为：对照组（30只）,模型组（30只）,预防组（30只）,以腺嘌呤灌胃法建立大鼠肾小管间质纤维化模型,预防组加以1.5 g/（kg.d）百令胶囊溶于生理盐水灌胃以预防肾小管间质纤维化;对照组以等体积的2%淀粉溶液和生理盐水灌胃。分别于实验第7、12、17周时随机处死10只大鼠,进行血肌酐（creatinine,Cr）、尿素氮（blood urea nitrogen BUN）,24 h尿蛋白定量和尿N乙-酰-β-D氨-基葡萄糖苷（N-a-cetylβ--D-glucosam inidase,NAG）酶检测,光镜下观察肾组织的病理变化及免疫组织化学法检测肾脏转化生长因子-β1（transform ing growth factor-beta1,TGFβ-1）、α-SMA的表达情况。结果①功能学变化：与对照组比较,各时相点模型组、预防组大鼠尿蛋白、尿NAG酶、血Cr及血BUN均升高（P〈0.01）,但预防组低于模型组（P〈0.01）;模型组、预防组自身对照各指标均较前一时相点升高（P〈0.01）。②病理学变化：7周时模型组、预防组即有肾小管间质损害;模型组、预防组自身对照肾小管间质损害均较前一时相点加重（P〈0.01）,但7、12周时预防组肾小管间质损害均较模型组为轻（P〈0.01）,17周时两组间差异无统计学意义（P=0.670）。③免疫组化：各时相点模型组、预防组大鼠肾脏TGFβ-1、α-SMA的表达均高于对照组（P〈0.01）,但预防组均低于模型组（P〈0.01）,模型组、预防组自身对照均较前一时相点升高（P〈0.01）,17周时表达量最高。结论百令胶囊可能通过抑制α-SMA,在肾小管间质纤维化早期应用时起到保护作用。     

氟伐他汀对糖尿病大鼠肾组织TGF-β1表达的影响

目的探讨氟伐他汀对糖尿病大鼠肾组织TGF-β1表达的影响。方法将SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病组、糖尿病氟伐他汀治疗组,经氟伐他汀治疗糖尿病大鼠2,4,8周后,分别观察其对大鼠血胆固醇、血肌酐及24 h尿蛋白定量和肾组织TGF-β1表达的变化。结果与正常对照组相比糖尿病大鼠的24 h尿蛋白以及肾组织TGF-β1表达显著增加,经氟伐他汀治疗后8周,糖尿病大鼠的24 h尿蛋白明显下降,肾组织TGF-β1在蛋白和基因水平表达明显减少。结论糖尿病大鼠肾组织TGF-β1表达增加,氟伐他汀可能通过抑制糖尿病大鼠肾组织TGF-β1表达而达到延缓糖尿病肾病的进展。     

肾茶提取物含药血清对大鼠肾小球系膜细胞增殖及TGF-β1表达的影响

目的 探讨肾茶两种不同化学提取物对大鼠肾小球系膜细胞（MCs）增殖与TGF-β1分泌、TGF-β1 mRNA表达的影响.方法 对肾茶提取分离得到乙酸乙酯、正丁醇两种不同化学提取物,分别给大鼠灌胃后,采血制备含药血清.以肾茶提取物含药血清为干预因素,体外培养的肾小球系膜细胞（MCs）为研究对象,采用CCK-8、ELISA、RT-PCR技术,探讨其对脂多糖（LPS）诱导的系膜细胞增殖、TGF-β1分泌及TGF-β1 mRNA表达的影响.结果 不同剂量的肾茶正丁醇与乙酸乙酯提取物的含药血清均明显抑制LPS刺激的大鼠MCs增殖及TGF-β1分泌（P＜0.01或P＜0.05）;肾茶正丁醇提取物高、低剂量组与乙酸乙酯提取物高剂量组的含药血清可明显抑制LPS刺激的大鼠MCs TGF-β1 mRNA表达（P＜0.01或P＜0.05）.其中,肾茶正丁醇提取物抑制作用明显优于乙酸乙酯提取物,二者同剂量比较差异有统计学意义（P＜0.01）,且抑制作用呈一定的剂量相关性（P＜0.01）.结论 体外实验表明,肾茶二种提取物含药血清可抑制MCs的异常增生及TGF-β1的过度表达,其中正丁醇提取物作用优于乙酸乙酯提取物,为肾茶开发新制剂治疗肾小球疾病提供参考.     

乌丹降脂胶囊对 NAFLD 模型 SD 大鼠体内 Treg细胞的影响

目的：探讨乌丹降脂胶囊对大鼠非酒精性脂肪肝（ NASH）模型外周血中Treg细胞和相关细胞因子额含量,探讨乌丹降脂胶囊对Treg细胞的影响。方法40只SPF级SD大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、易善复组、乌丹降脂胶囊组,正常对照组以基础饲料喂饲,其他三组连续16周通过高脂饲料喂饲,建立非酒精性脂肪肝病模型,同时正常对照组、模型对照组,以生理盐水10 ml／（kg· d）灌胃;易善复组以易善复溶液灌胃10 ml／（kg· d）;乌丹降脂胶囊组以乌丹降脂胶囊灌胃10 ml／（kg· d）;连续灌胃14周后,检测全血Treg细胞的表达量及血清IL-6、IL-10及TGF-β1的含量。结果与正常对照组相比,模型组Treg细胞的表达量及血清IL-6、IL-10及TGF-β1的含量均升高;与模型组相比,乌丹降脂胶囊组及易复善组Treg细胞的表达量及血清IL-6、IL-10及TGF-β1的含量均明显降低,且差异有统计学意义（ P ＜0?．05）。结论乌丹降脂胶囊可能通过抑制炎症的发生使Treg细胞及其相关细胞因子表达量降低,从而对Treg细胞的功能紊乱进行调节。     

知芪益肾汤对实验性糖尿病大鼠肾功能的作用机制研究

目的探讨知芪益肾汤对糖尿病肾病（DN）大鼠肾脏的保护作用及其发生机制。方法腹腔注射链尿佐菌素（STZ）建立糖尿病模型,检测血糖、UAER、Ccr,应用免疫组化法检测CTGF及TGF-β1的蛋白表达。结果知芪益肾汤组UAER、Ccr显著低于糖尿病组（P〈0.01）,且肾脏CTGF及TGF-β1阳性表达相对面积较糖尿病组明显下调（P〈0.01）。结论早期应用知芪益肾汤对STZ诱导的糖尿病大鼠有肾保护作用。     

大蒜胶囊对糖尿病大鼠肾脏TGF-β_1表达影响及保护性研究

目的观察糖尿病大鼠肾脏TGF-β1表达及大蒜胶囊的治疗作用。方法采用STZ注射法制作糖尿病（DM）大鼠模型30只,随机分为正常对照组、DM组、大蒜胶囊组,各10只。灌胃给药8周后,采用免疫组化等技术测定24h尿白蛋白排泄（UAER）,肾小球滤过率（GFR）,肾皮质TGF-β1、Col-Ⅳ、FN的表达。结果（1）功能学变化：大蒜胶囊组大鼠的24hUAER和GFR显著低于DM组,差异均有统计学意义（P〈0.05）;（2）免疫组化：大蒜胶囊组大鼠肾皮质TGF-β1、FN、Col-Ⅳ的表达显著低于DM组,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论与DM组相比,大蒜胶囊组24hUAER、GFR及肾体质量指数明显降低,肾皮质TGF-β、FN、Col-Ⅳ的表达程度明显减轻。     

卡托普利和氯沙坦对自发性高血压大鼠TGF-β1表达的影响

目的：探讨血管紧张素转换酶抑制剂（ACEI）卡托普利和血管紧张素Ⅱ1型受体（AT1）拮抗剂氯沙坦对自发性高血压大鼠（SHR）主动脉和心肌组织转换生长因子β1（TGF-β1）mRNA表达的影响。方法：12周龄SHR随机分为3组．分别给卡托普利组、氯沙坦组以药物灌胃，不给药物的SHR为对照组，Wistar组给蒸馏水4周，给药前后测尾动脉血压．提取主动脉、心肌组织．RT—PCR半定量法测TGF-β1 mRNA表达。结果：SHR主动脉组织TGF-β1 mRNA表达显著增加．卡托普利和氯沙坦显著降低了SHR主动脉TGF-β1 mRNA的表达（P〈0．05或P〈0．01）。SHR与普通大鼠心肌组织TGF-β1 mRNA表达无差异。结论：早期SHR主动脉TGF-β1 mRNA表达增加，ACEI和AT1拮抗剂可减少主动脉TGF-β1 mRNA的表达．改善血管的重构。     

肾脏组织中TGF-β1和CTGF对NF-κB基因调控的影响

目的 研究阿霉素肾病大鼠模型中核因子-κB(NF-κB)、转化生长因子β1(TGF-β 1)和结缔组织生长因子(CTGF)的浓度与病理变化的意义,探讨其参与肾病综合征的发病机制.方法 36只大鼠随机分成两组:对照组、模型组,每组各18只.模型组采用尾静脉注射阿霉素方法建立阿霉素肾病模型.检测各组大鼠24 h尿蛋白定量及血清肾功能指标,研究各组大鼠肾组织病理学改变,采用免疫学方法(ELISA)检测NF-κB、TGF-β1及CTGF浓度的变化.结果 ①模型组于第2、4、6周尿蛋白定量均高于同期对照组,差异有统计学意义(P＜ 0.01).第2、4、6周时模型组血尿素氮(BUN)及肌酐(Scr)、胆固醇(TC)水平均高于同期对照组(P＜0.01).②肾组织病理学提示随时间延长,肾病病理进展.③模型组第2、4、6周NF-κB、TGF-β1和CTGF浓度结果均高于同期对照组(P＜0.01).结论 NF-κB、TGF-β1和CTGF浓度增高是肾小球硬化发生发展的重要因素,三者共同促进细胞外基质(ECM)的积聚,造成肾小球硬化.阻断NF-κB、TGF-β1和CTGF可能成为延缓肾小球硬化的治疗手段.     

Toll样受体4在肾间质纤维化中的表达及意义

目的探讨Toll样受体4（toll—like receptor4,TLR4）在肾间质纤维化大鼠模型中的表达及意义;研究黑骨藤追风活络胶囊对肾间质纤维化的作用及可能的机制。方法采用单侧输尿管梗阻（UU0）致肾问质纤维化大鼠模型。将36只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、黑骨藤追风活络胶囊（HGT）治疗组（243mg／kg／d）,手术后第7天、第14天分别处死各组中6只大鼠。用HE染色方法观察各组大鼠肾小管间质损伤程度,免疫组化方法观察各组大鼠肾组织中TLR4、转化生长因子-β1（transforming growthfactor-β1,TGF-β1）的表达情况。结果模型组TLR4、TGF-β1的表达及肾小管闻质损伤指数明显高于同期假手术组（P〈0．01）;黑骨藤追风活络胶囊治疗组TLR4、TGFβ1的表达及肾小管间质损伤指数明显低于模型组（P〈0．01）。结论TLR4及其介导的信号通路可能在肾间质纤维化中起促进作用;黑骨藤追风活络胶囊对肾间质纤维化有一定的防治作用。     

BXSB狼疮小鼠肾组织TGF-β1异常表达及甲泼尼龙干预作用

目的:研究转化生长因子-1β(TGF-1β)在BXSB小鼠狼疮肾炎(LN)中的作用及甲泼尼龙(MPS)是否可通过影响TGF-1β表达而改善LN。方法:用逆转录-聚合酶链反应技术(RT-PCR)和免疫组织化学方法检测BXSB狼疮小鼠及BALB/c小鼠肾组织TGF-1βmRNA及蛋白的表达情况,并用甲泼尼龙对BXSB小鼠进行体内干预,观察甲泼尼龙对BXSB小鼠肾脏TGF-1β表达的影响及各组小鼠24 h尿蛋白量的变化。结果:RT-PCR检测到BXSB小鼠肾组织TGF-1βmRNA表达明显高于BALB/c小鼠(P<0.01);其中,BXSB小鼠治疗组肾组织TGF-1βmRNA表达量显著低于对照组(P<0.01)。BXSB小鼠治疗组24 h尿蛋白量明显低于对照组(P<0.01)。免疫组织化学检测示TGF-1β表达于BXSB小鼠肾小球系膜细胞、肾小管上皮细胞、血管内皮细胞、肾间质及肾小球浸润的炎症细胞胞质内,其中BXSB小鼠治疗组较对照组表达明显减弱,而BALB/c小鼠仅在少数肾小管上皮细胞有微弱表达,且图像半定量分析显示各组有显著性差异(P<0.01)。结论:TGF-1β可能参与LN发病;甲泼尼龙可能通过抑制肾组织TGF-1β的表达来改善LN。     

灯盏花素对糖尿病大鼠血TGF-β1及肾脏结构影响的实验研究

目的探讨灯盏花素对糖尿病大鼠转化生长因子-β1（TGF-β1）表达和肾功能的影响。方法选健康雄性昆明种SD大鼠70只,随机分为正常对照组（N）20只、糖尿病组（DM）和灯盏花治疗组（EB）各25只,后两组用链脲菌素（streptozotocin,STZ）诱导建立糖尿病肾病大鼠模型,EB组行灯盏花素20mg·k^g-1·d^-1腹腔内注射,N组和DM组行等量生理盐水腹腔内注射,三组给药后2w和6w宰杀,收集标本检测尿肌酐、血糖、血肌酐、尿素氮和血清TGF-β1,观察各组肾小球平均面积（AC）和体积（VC）的变化。结果①TGF-β1比较：糖尿病组〉灯盏花组〉正常组;②灯盏花组及糖尿病组与正常组相比体重下降,肾指数、肾小球面积、体积升高,且灯盏花组较糖尿病组体重增加,肾指数、肾小球面积、体积下降（P〈0.05）;③血尿素氮、肌酐比较：糖尿病组〉灯盏花组〉正常组,灯盏花组较糖尿病组降低,且肌酐降低以2w组更明显（P〈0.01）。结论灯盏花素能够抑制糖尿病大鼠血清TGF-β1的表达和肾脏肥大。     

复方二黄颗粒对肾衰大鼠肾脏纤维化的抑制作用

目的：观察复方二黄颗粒对慢性肾衰竭大鼠的肾组织病理及 TGF-β1（转化生长因子-β1）、FN（纤维连接蛋白）、α-SMA （α-平滑肌肌动蛋白）表达的影响。方法成年雄性 SD 大鼠30只,随机分为假手术组、模型对照组、治疗组共3组;5／6肾切除喂养4周后,各组大鼠分别给予药物及等量生理盐水灌胃共8周后,处死所有大鼠,留取肾组织。观察各组大鼠的肾脏病理变化,并用免疫组化法观察肾组织 TGF-β1、FN、α-SMA 的表达,并进行统计学分析。结果复方二黄颗粒能改善肾衰大鼠的肾小球硬化、间质纤维化;并能抑制肾衰大鼠肾组织中 TGF-β1、FN、α-SMA 表达的上调,各组间比较有统计学意义（P ＜0．05）。结论复方二黄颗粒能改善慢性肾衰竭大鼠的肾脏纤维化。     

柴芩肾安方对IgA肾病大鼠TGF-β_1和Smad2表达的影响

目的探讨柴芩肾安方对IgA肾病(IgAN)大鼠肾组织转化生长因子β_1和Smad2表达的影响。方法采用灌服并静脉注射牛血清白蛋白复合感染葡萄球菌肠毒素B的方法制成大鼠IgAN模型,并用柴芩肾安方治疗,以氯沙坦为对照。第15周末,观察肾小球形态学变化和免疫复合物的沉积情况;免疫组织化学和逆转录-聚合酶链反应并结合计算机图像分析,分别检测肾组织TGF-β_1和Smad2蛋白及其mRNA的表达水平。结果模型组大鼠肾组织TGF-β_1和Smad2蛋白及其mRNA表达较正常组均明显升高(P<0.01);柴芩肾安方组大鼠上述指标较模型组均明显降低(P<0.01)。结论柴芩肾安方能够抑制肾组织TGF-β_1和Smad2蛋白及其mRNA的表达,从而延缓IgAN肾脏病变的慢性进展。