用逆转录-套式聚合酶链反应检测我国不同临床型肝炎/肝病患者中庚型肝炎病毒感染

目的为了研究庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）在我国的感染状况。方法根据已发表的ＨＧＶ的５’端非编码区（５’－ＵＴＲ区）及螺旋酶区（ＮＳ３区）两段高度保守的基因序列分别设计两套引物，用逆转录－套式聚合酶链式反应（ＲＴ－ｎｅｓｔｅｄＰＣＲ）检测ＨＧＶＲＮＡ。结果从北京、秦皇岛、河南等地采集各种肝病患者及职业献血员血清３５４份，ＨＧＶＲＮＡ阳性７９份，阳性率为２２．３％。其中已确定的临床型肝炎／肝病患者２５４例，ＨＧＶＲＮＡ阳性者为５０例，阳性率为１９．６％。原因不明的或非甲～戊型肝炎患者４３例，ＨＧＶＲＮＡ阳性者为１３例，阳性率为３０．２％。丙型肝炎阳性的职业献血员５７例，ＨＧＶＲＮＡ阳性者为１６例，阳性率为３０．２％。结论提示ＨＧＶ感染在我国多种人群中普遍存在，它不仅可能是引起非甲～戊型肝炎的重要病原之一，也可能是引起输血后肝炎的病原因子     

肝病患者中庚型肝炎病毒感染的检测

目的探讨临床肝病病人中庚型肝炎病毒（ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ）感染情况及临床特点。方法应用庚型肝炎病毒基因组５’ＵＴＲ两对寡核苷酸作为引物，建立逆转录套式聚合酶链反应，检测１６９例不同肝病患者血清标本中ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶＲＮＡ，并对其中１例ＰＣＲ扩增产物进行克隆及测序。结果１６９例各型肝病病人ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶＲＮＡ总的检出率为９５％（１６／１６９）。在２９例有手术输血史患者中，３１０％（９／２９）ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶＲＮＡ呈阳性，明显高于无手术输血史组（５％，Ｐ＜００１）。序列分析显示１株庚肝病毒５’ＵＴＲ部分基因片段与已知庚肝病毒株核苷酸同源性在８９１４％～９８９１％之间。结论ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ感染普遍存在于临床肝病患者中，病人感染ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ的临床表现未发现有特殊性，ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ可能不是非甲～戊型肝炎的主要致病因子。     

深圳地区不同人群庚型肝炎病毒感染的分子流行病…

在庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）基因５’端非编码区（５’－ＵＴＲ）设计两对套式引物，建立检测ＨＧＶＲＮＡ的逆转录－巢式聚合酶链反应（ＲＴ－ｎｅｓｔｅｄＰＣＲ）。对深圳地区１０６例职业献血员，１６８例肝炎病人及８０例静脉毒瘾者进行ＨＧＶＲＮＡ的检测，阳性率分别为８．５％，７．７％与４６．３％前两者与后者相比较差异均有显著性意义（Ｐ〈０．０１）。６１例慢性乙型肝炎与３３例慢性丙型肝炎病人ＨＧＶＲＮＡ阳性率分别     

肝病患者庚型肝炎病毒感染的研究

目的 研究肝病患者庚型肝炎病毒感染状况。方法 用酶链免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测１５４例门诊和住院肝病患者（均无输血史）的抗－ＨＧＶ,１５４例中有５４例同时采用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测ＨＧＶ ＲＮＡ,分别计算抗－ＨＧＶ和ＨＧＶ ＲＮＡ的阳性率。以ＨＧＶ ＲＮＡ阳性为ＨＧＶ感染的判断标准,来分析各类肝病患者ＨＧＶ感染状况。结果 １５４例肝病患者抗－ＨＧＶ阳性者３１例,阳性率２０．１３     

利用多组套式引物检测庚型肝炎病毒RNA

利用庚型肝炎病毒（ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ）ＮＳ３～５区序列合成了四组套式引物，建立了灵敏、特异的庚型肝炎病毒ＲＮＡ双扩增聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测方法。用此方法检测了１０份庚型肝炎病毒抗体阳性患者血清及１０份阴性的健康人血清。前者不同组引物的检出率为ＮＳ３（１）引物９份阳性，ＮＳ３（２）引物８份阳性，ＮＳ４引物４份阳性，ＮＳ５（１）引物５份阳性，ＮＳ５（２）引物９份阳性；后者各组引物检测均为阴性。结果表明，庚型肝炎病毒不同区域引物用于ＲＴ－ＰＣＲ检出率差异较大。ＮＳ３（１）及ＮＳ５（２）这两组引物检出率最高，更适合用于ＲＴ－ＰＣＲ检测庚型肝炎病毒ＲＮＡ。     

逆转录－巢式聚合酶链反应检测庚型肝炎病毒RNA方法的建立及初步应用

庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）基因组为单链、正股ＲＮＡ，全长９３９２ｂｐ。根据５’－非编码区基因序列设计合成两对引物。随机选取酶联抗－ＨＧＶ阳性病人血清３份，阴性病人血清６份，应用逆转录－巢式聚合酶链反应进行检测。结果２份抗－ＨＧＶ阳性血清可见较强的特异扩增带，１份抗－ＨＧＶ阳性血清可见较弱的特异扩增带，其余６份抗－ＨＧＶ阴性血清均无特异性扩增带。特异扩增片断大小与设计相符，并经序列分析及Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交给予证实。     

深圳地区不同人群庚型肝炎病毒感染的分子流行病学调查

在庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）基因５’端非编码区（５’－ＵＴＲ）设计两对套式引物，建立检测ＨＧＶＲＮＡ的逆转录－巢式聚合酶链反应（ＲＴ－ｎｅｓｔｅｄＰＣＲ）。对深圳地区１０６例职业献血员、１６８例肝炎病人及８０例静脉毒瘾者进行ＨＧＶＲＮＡ的检测，阳性率分别为８．５％、７．７％与４６．３％，前两者与后者相比较差异均有显著性意义（Ｐ＜０．０１）。６１例慢性乙型肝炎与３３例慢性丙型肝炎病人ＨＧＶＲＮＡ阳性率分别为８．２％与２１．２％。３３例慢性丙型肝炎病人中，１５例接触过血液或血制品的病人ＨＧＶＲＮＡ阳性率为４０．０％，明显高于１８例无血液或血制品接触史者（Ｐ＜０．０５）。本研究结果提示深圳地区职业献血员中ＨＧＶ携带者较常见；静脉毒瘾者是ＨＧＶ感染的高危人群；慢性丙型肝炎常重叠ＨＧＶ感染，主要与接触血液或血制品有关。故对献血员进行ＨＧＶ筛查将减少输血后ＨＧＶ感染的发生     

多重引物聚合酶链反应扩增丙型肝炎病毒基因及基 …

利用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）的５’－非编码区（５’－ＮＣＲ）、Ｃ及ＮＳ４基因区的３对引物分别及同时扩增，检测８０例抗－ＨＣＶ阳性患者的血清ＨＣＶ ＲＮＡ，并进行了ＨＣＶ基因分型研究。各不同引物所介导的ＰＣＲ检出ＨＣＶ ＲＮＡ的结果为：５’－ＮＣＲ基因区６０％（４８／８０），Ｃ基因区３７％（３０／８０），ＮＳ４基因区３０％（２４／８０）。以上３对引物同时扩增仅４２％（３４／     

逆转录—巢式聚合酶链反应检测庚型肝炎病毒RNA方法…

庚型肝炎病毒基因组为单链，正肌ＲＮＡ，全长９３９２ｂｐ。根据５‘－非编码区基因序列设计合成两对引物。随机选取酶联抗－ＨＧＶ阳性病人血清３份，阴性病人血清６份，应用逆转录－巢式聚合酶链反应进行检测。结果２份抗－ＨＧＶ阳性血清可见较强的特异扩增带，１份抗－ＨＧＶ阳性血清可见较弱的特异扩增带，其余６份抗－ＨＧＶ阴性血清均无特异性扩增带。     

利用双扩增聚合酶链反应检测非甲非乙型肝炎患者血清中丙型肝炎病毒RNA

利用丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）５’－端序列合成两对引物，建立了灵敏、特异的ＨＣＶＲＮＡ双扩增聚合酶链反应检测方法。用此方法及第二代Ａｂｂｏｔｔ酶联抗－ＨＣＶ检测试剂盒，检测了４４例非甲非乙型肝炎患者血清及１０名抗－ＨＣＶ阴性健康人。在４４例患者中，４１例（９３％）ＨＣＶＲＮＡ阳性，３６例（８２％）抗－ＨＣＶ阳性，３３例（７５％）ＨＣＶＲＮＡ、抗－ＨＣＶ全部阳性。３例ＨＣＶＲＮＡ阴性，但抗－ＨＣＶ阳性，另外，有８例抗－ＨＣＶ阴性，ＨＣＶＲＮＡ阳性。１０名健康人ＨＣＶＲＮＡ均为阴性。结果表明，大部分（９２％）抗－ＨＣＶ阳性患者带有ＨＣＶ，但为了检测所有病毒血症患者，抗－ＨＣＶ检测是不够的，利用双扩增ＰＣＲ方法检测ＨＣＶＲＮＡ对于抗－ＨＣＶ阴性患者的诊断是非常有用的。     

GBV-C/hepatitis G virus in acute nonA-E hepatitis and in acute hepatitis of defined aetiology in Italy

The role of GBV-C/HGV in the aetiology of acute non A-E hepatitis and its impact on the course of acute hepatitis of defined aetiology were investigated by detecting viral RNA by RT-PCR and antibody to the E2 protein of GB virus C (anti-E2) by EIA. Ninety-eight patients with acute nonA-E hepatitis, 35 patients with acute hepatitis A, 63 with acute hepatitis B, 29 with acute hepatitis C and 270 controls were enrolled in this study. The prevalence of GBV-C/HGV RNA was similar among patients with acute nonA-E hepatitis (3.1%), with acute hepatitis A (2.9%), and controls (3.7%), but significantly higher (P < 0.05) among those with hepatitis B or C (19.0% and 48.3%, respectively). Similar figures were obtained considering the total rate of GBV-C/HGV exposure (viral RNA or anti-E2 positivity). The majority (24/30 or 80%) of GBV-C/HGV RNA positive patients reported a parenteral source of exposure whereas the remaining 20% denied having known risk factors. The liver function test values and the rate of chronic hepatitis B and C were similar in patients co-infected and in those not co-infected with GBV-C/HGV. This study excludes a significant role of GBV-C/HGV infection in the aetiology of acute nonA-E hepatitis in Italy. Concomitant GBV-C/HGV and HBV or HCV infection does not worsen the clinical course of illness among patients with acute hepatitis.     

慢性乙型肝炎患者血清和肝组织中HBV DNA含量与庚型肝炎病毒感染的关系

目的：观察慢性乙型肝炎（CH－B）患者血清、肝组织中HBV DNA含量与庚型肝炎病毒（HGV）感染的关系，探讨HGV感染对CH－B患者乙型肝炎病毒（HBV）复制的影响。方法：应用逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）、免疫组织化学法、荧光定量PCR（FQ－PCR）技术方法对56份CH－B患者血清HGV RNA、肝组织HGV Ag、血清及肝组织中HBV DNA含量分别进行了检测，并将血清HGV RNA与肝组织HGV Ag的表达、HGV RNA、HGV Ag阳性与阴性患者HBV DNA含量分别进行了对比研究。结果：血清HGV RNA、肝组织HGV Ag阳性分别为10份（17．9％）、8份（14．3％）。血清HGV RNA阳性与肝组织HGV Ag表达显著相关（P＜0．01），但部分肝组织HGV Ag阴性患者亦有血清HGV RNA表达。血清HGV RNA、肝组织HGV Ag阳性与阴性患者血清及肝组织中HBV DNA含量差异无显著性（P＞0．05）。结论：HGV感染对CH－B患者HBV复制无影响。HGV可在肝脏中复制，但致病性可能较微弱。     

Detection of hepatitis G virus RNA in patients with hepatitis B,hepatitis C,and non-A-E hepatitis by RT-PCR using multiple primer sets

Hepatitis G virus(HGV)/GB virus C(GBV-C) is a newly identified virus associated with human hepatitis. The preliminary prevalence studies of HGV infection in Japan were entirely based on the detection of HGV RNA by RT-PCR. However, the selection of the different primer sets in such assay may influence sensitivity of the test because of the extensive genetic heterogeneity of HGV, and influence the estimation of the prevalence of HGV. To address this potential problem, we designed two primer sets from well conserved domains in the 5′NC and NS5 regions of HGV genome, and tested them together with the NS3-derived primer set in RT-PCR for their ability to detect HGV RNA in serial dilution of synthetic viral RNA templates. Subsequently, we used these three primer sets to detect HGV RNA in the sera of 371 Japanese patients with hepatitis B, hepatitis C, and non-A-E hepatitis. The results indicated that the primer set derived from the 5′NC region appeared to be most effective in detecting HGV RNA. The results also showed that only two out of the 126 patients (1.6%) with non-A-E hepatitis were positive for HGV RNA although the RNA were detected more frequently in patients with hepatitis B (2/38; 5.3%) and hepatitis C (17/207; 8.2%), suggesting that HGV is not a common causative agent for non-A-E hepatitis in Japan. J. Med. Virol. 52:385–390, 1997. © 1997 Wiley-Liss, Inc.     

庚型肝炎病毒致病性的初步研究

目的 探讨庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）的致病性。方法 应用ＲＴ－ｎＰＣＲ检测３６８例肝炎患者血清ＨＧＶ ＲＮＡ和血清酶的变化,并对其中１例单独庚型肝炎肝硬化病例进行肝脏活组织是检测。结果 在７１例急性黄疸型肝炎中检出单纯性ＨＧＶ ＲＮＡ阳性７例,１５５例慢性肝炎中检出单纯性ＨＧＶ ＲＮＡ阳性２２例,５１例肝硬化中检出单纯ＨＧＶ ＲＮＡ阳性３例。其中１例肝穿组织免疫组化证实为ＨＧＶ ＮＳ ５Ａｇ阳性。结论 争性黄疸型肝炎及乙、丙型肝炎病毒携带者,其慢性肝炎、肝硬化和肝癌中均可检出ＨＧＶ ＲＮＡ,ＨＧＶ感染可为单独感中与乙／丙型肝炎病毒混合或重叠感染,肝脏病理和免疫组化检查证实庚型肝炎病毒是一种嗜肝病毒,其定位主要存在于细胞浆内,可引起慢性病毒性肝炎甚至肝硬化。庚型肝炎病毒很可能具有致病性。