血清胱蛋白酶抑制剂C测定的方法学研究进展及临床意义

胱蛋白酶抑制剂Ｃ(ｃｙｓｔａｔｉｎＣ ,简称ＣｙｓｔＣ)是一包含12 2个氨基酸残基的非糖化多肽链 ,分子量为 1335 9,等电点(ＰＩ) 9 3。它是半胱氨酸蛋白酶抑制剂超家族的成员之一 ,在细胞内蛋白质多肽代谢、激素原的蛋白分解过程、胶原代谢及肿瘤细胞穿透正常组织过程中发挥重要作用。ＣｙｓｔＣ可由机体所有有核细胞产生 ,产生率恒定。它可以强烈抑制某些半胱氨酸蛋白酶 ,如木瓜酶、组织蛋白酶Ｂ、Ｈ[1] 。循环中的ＣｙｓｔＣ经肾小球滤过 ,被近曲小管重吸收并完全代谢 ,是一种反映肾小球滤过率 (ＧＦＲ)变化的理想的内源性标志物。1　…     

健康人血清胱氨酸蛋白酶抑制物C浓度测定

胱氨酸蛋白酶抑制物Ｃ（ＣｙｓｔａｔｉｎＣ）又称γ－球蛋白或ｐｏｓｔ－ｒ－痕迹蛋白。它是由有核细胞稳定地产生的一种蛋白酶抑制剂。本文主要目的在于检测健康人血清ＣｙｓｔａｔｉｎＣ浓度的参考范围，并探讨血清ＣｙｓｔａｔｉｎＣ浓度与性别、年龄、体重之间的相关关系。１材料与方法１．１对象：１０５例健康人，男６５例，女４０例；年龄１０～３５岁２７例，≥３５岁７８例；ＢＭＩ（体重指数）≥２５ｋｇ／ｍ２８例，ＢＭＩ＜２５ｋｇ／ｍ２９７例。１．２方法：所有观察对象均抽取空腹静脉血，分离血清，用德国Ｂｅｈｒｉｎｇ公…     

血清中β-痕迹蛋白:在肌酐盲范围检测肾小球滤过率的新标志物

研究表明 ,血清中低分子量的蛋白质与传统的血肌酐测定相比 ,是更好的检测肾小球滤过率 (ＧＦＲ)的标志物。这类蛋白质有 :核糖核酸酶、α1 微球蛋白、β2 微球蛋白 (β2 Ｍ)和胱抑素(ｃｙｓｔａｔｉｎ)Ｃ。血肌酐通常在ＧＦＲ下降约 5 0 %时才增加 ,而这些蛋白 ,尤其是胱抑素Ｃ在血肌酐浓度未改变时 ,即所谓的“肌酐盲范围”就已经增加。近来 ,又发现一种从脑脊液中分离出的低分子量蛋白质 :β 痕迹蛋白 (β ｔｒａｃｅｐｒｏｔｅｉｎ ,ＢＴＰ) ,在肾病时血浆中浓度增高。为研究ＢＴＰ在早期检测ＧＦＲ下降的潜在临床实用性 ,作者做了ＢＴ…     

胱抑素C的临床意义与测定应用

1胱抑素C的发现和生物学特性胱抑素C(Cystatin C,CysC)是1961年Clausen于脑脊液中首次发现,因它与哺乳动物胱蛋白A和胱蛋白B的结构及活性相似,当时被称为胱蛋白C。80年代中期瑞典的Simonsen等科学家研究发现并被报道可作为评估GFR的指标。CysC,又被称为芈胱氨酸蛋白酶抑制蛋白C,以前也被称为γ-微球蛋白及γ-后球蛋白,中译名为胱抑素C,是种低分子量、碱性非糖基化的蛋白质,分子量为13.3KD,由122个氨基酸残基组成,带正电荷,等电点为9.3[1]。人的CysC基因片段位于20号染色体上,其基因序列在大多数组织中能稳定表达。CysC是半胱氨酸蛋白酶抑制剂超家族2中的一员。半胱氨酸蛋白酶包括木瓜蛋白酶家族中的组织蛋白酶(主要存在于溶酶体中)和Ca2+激活蛋白酶家族中的Ca2+激活蛋白(主要存在于细胞质内)。它们在细胞内肽类和蛋白质代谢特别是胶原代谢中起重要作用。这些肽切酶是肽键内切酶,其作用取决于酶活化位点上的氨基酸残端半胱氨酸的巯基。编码CysC的基因5’侧翼序列与“看家基因”的启动子区具有相同的特性,故可将胱抑素C基因看作是“看家基因”(house-keeping gene)...     

血清胱蛋白酶抑制剂C测定的方法学研究进展及临床意义

血清胱蛋白酶抑制剂C（cystatinc，简称Cyst C），近10年来，国内外诸多学者已对Cystatin C进行深入细致的研究。发现它是一个包含122个氨基酸残基的非糖化多肽键，分子量为13359，等电点（PI）9．3。它是半胱氨酸蛋白酸抑制剂超家族的成员之一，在细胞内蛋白质多肽代谢，激素原的蛋白分解过程，胶原代谢及肿瘤细胞穿透正常组织过程中发挥重要作用。人体内所有有核细胞均可产生Cystatin C，其合成不受肌肉量、年龄、性别、炎症等因素影响，产生速率基本恒定，其可以强烈抑制某些半胱氨酸蛋白酶，循环中的Cystatin C经肾小球滤过，被近曲小管重吸收并完全代谢，是一种反映肾小球滤过率（GFR）变化的理想的内源性标志物。     

249例儿童脑脊液胱抑素-C结果分析

胱抑素C（Cystatin C,简称CysC）亦称半胱氨酸蛋白酶抑制剂C,是一种由120个氨基酸组成,分子量为13kDa的低分子量、碱性非糖化蛋白质。CysC基因在包括肾、肝、胰、肠、胃、肺及胎盘等所有组织中持续地转录和表达。研究发现CysC是半胱氨酸蛋白酶抑制物家族的成员之一,     

胱抑素C的临床意义及其应用进展

胱抑素C(Cys C)是胱氨酸蛋白酶的一种抑制剂,是由机体所有有核细胞产生,产生率恒定,不受其他因素(如年龄、性别、饮食、炎症等)的影响.它是由Anastasi等在1983年首次在鸡蛋清中分离纯化得到的半胱氨酸蛋白酶抑制剂(CPI)后被命名为Cys C.是一包含122个氨基酸残基的非糖化多肽链,相对分子质量13.359×103,等电点(PI)9.3.在生理条件下,Cys C的重要功能是抑制内源性半胱氨酸酶的活性,并且可影响中性粒细胞的迁移,对于细胞内蛋白质的转换、骨胶原的降解、蛋白质的分离有重要意义.Cys C还参与肿瘤的侵袭和转移,参与炎症过程和一些神经性疾病[1].本文就Cys C在临床中的意义及其和其他项目联合检测的应用作一综述.     

血清胱抑素C的临床应用及研究

血清胱抑素C(Cyst C),又名半胱氨酸蛋白酶抑制剂C,是1984年从血清中分离出来的一种新型的半胱氨酸蛋白酶抑制剂,是半胱氨酸蛋白酶抑制剂超家族成员之一.     

补体C1抑制剂的研究进展

补体Ｃ１的抑制剂（Ｃ１Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ,Ｃ１ＩＮＨ）是丝氨酸蛋白酶抑制剂（ＳｅｒｉｎｅＰｒｏｔｅａｓｅＩｎｈｉｂｉｔｏｒｓ,Ｓｅｒｐｉｎｓ）“家族”的成员之一,对补体,凝血,纤溶,激肽释放等蛋白酶激活系统有重要的抑制功能,Ｃ１ＩＮＨ通过其分子表面的反应中心环与靶酶的活性中心结合形成共价复合物从而达到抑制靶酶活性的作用,Ｃ１ＩＮＨ的遗传基因位与常染色体ｐ１１．２－ｑ１３,遗传基因中的部分缺失,插入     

半胱氨酸蛋白酶抑制剂 Ｃ 重组蛋白的制备

摘要：目的 构建半胱氨酸蛋白酶抑制剂 Ｃ（ＣｙｓＣ）原核表达载体，用以快速获取低成本、高浓度、高纯度的 ＣｙｓＣ 纯化蛋白，为 制备应用于临床实验室检测的 ＣｙｓＣ 标准物质和质控品奠定基础。 方法 用 Ｃｏｄｏｎ Ａｄａｐｔａｔｉｏｎ Ｔｏｏｌ 将人的 ＣｙｓＣ 编码序列优化 为大肠杆菌偏好的密码子序列，再将合成的 ＤＮＡ 片段克隆至 ｐＥＴ?２８ａ（＋）原核表达载体。 将重组 ＣｙｓＣ 表达质粒转化至Ｅ． ｃｏｌｉ ＢＬ２１ 感受态中，优化诱导表达条件、确定最优表达条件组合及有效表达序列，并用融合标签对重组蛋白进行纯化。 结果 成 功构建重组 ＣｙｓＣ 原核表达质粒，明确 ＣｙｓＣ 表达序列，确定异丙基硫代半乳糖苷（ＩＰＴＧ）诱导重组蛋白表达浓度、诱导温度等 条件，纯化的 ＣｙｓＣ 蛋白可通过临床检测，且稀释倍数与检测浓度间呈现线性关系。 结论 成功构建重组 ＣｙｓＣ 的高效原核表 达系统，重组 ＣｙｓＣ 蛋白纯度大、浓度高、生产周期短，有望为 ＣｙｓＣ 标准物质和质控品的制备提供物质基础。