桃红四物汤对UVA辐射后人真皮微血管内皮细胞表达氧自由基及ICAM-1的影响

目的:通过测定紫外线照射人真皮微血管内皮细胞(HDMEC)建立的光损伤模型中清除自由基的酶SOD、CAT和细胞间黏附分子ICAM-1的含量,探讨中药汤剂桃红四物汤对UVA诱导的人真皮微血管内皮细胞光损伤后自由基形成和细胞间黏附分子的影响,进而探讨桃红四物汤对光损伤模型中人真皮微血管内皮细胞的保护作用,并从细胞分子层次阐明桃红四物汤拮抗光损伤的作用机理,为皮肤光损伤应用桃红四物汤来治疗提供了进一步深入研究的依据。方法:建造HDMEC细胞的培养与传代模型,通过ELISA方法检测抗氧化损伤标志物超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、细胞间黏附分子(ICAM-1)来研究桃红四物汤在离体人类细胞层次上对于治疗光老化的作用。结果:UVA照射可使HDMEC细胞分泌CAT、SOD降低并提高ICAM-1表达水平。且桃红四物汤高、中、低剂量含药血清均能够促进HDMEC细胞分泌CAT、SOD升高并抑制ICAM-1表达水平,高剂量组效果最好。     

桃红四物汤对UV辐射致人真皮微血管内皮损伤后TGF-β、Smad2/3表达影响的实验研究

目的:旨在研究桃红四物汤对模拟UVA照射后损伤HDMEC的保护作用。方法:以5J/cm2UVA辐射HDMEC建立紫外线光损伤的人真皮微血管内皮细胞模型,分别给予不同浓度的桃红四物汤,检测不同浓度药物作用下的细胞凋亡及分泌TGF-β、Smad2/3蛋白的情况。结果:与空白对照组比较,模型对照组细胞凋亡数显著上升,细胞培养上清液中TGF-β含量降低,细胞TGF-β、Smad2/3表达降低;与模型对照组比较,桃红四物汤含药血清干预的各组细胞凋亡数均显著下调,培养上清液中TGF-β含量增加,细胞TGF-β、Smad2/3表达升高,以高剂量组和阳性对照组上升最为明显。结论:桃红四物汤含药血清能有效保护UVA诱导的真皮微血管内皮细胞损伤,其机制可能与激活TGF-β/Smad信号通路有关。     

桃红四物汤大鼠含药血清对光老化人皮肤模型成纤维细胞增殖影响与维甲酸等效性随机平行对照

[目的]观察桃红四物汤大鼠含药血清对光老化人皮肤模型成纤维细胞增殖影响与维甲酸等效性。[方法]使用随机平行对照方法,将健康雄性清洁级SD大鼠20只(体重200~250g),鼠龄4~5周使用随机数字表分为两组,10只/组;空白血清组、桃红四物汤组。使用长波紫外线照射复制光老化HSF模型。实验细胞分组:空白对照组,正常培养HSF细胞10瓶;长波紫外线照射40瓶随机分为4组,UV模型组、空白血清组、桃红四物汤血清组、维甲酸组,10瓶/组。干预培养,各组均37℃,CO2培养箱培养12h,模型组:新鲜细胞培养液5m L;桃红四物汤组:10%含药血清培养液5m L;维甲酸组:维甲酸乙酯溶液5m L;空白血清组:10%空白大鼠血清培养液5m L。连续给药干预培养12h,观测成纤维细胞增殖活性(MTT法)。[结果]成纤维细胞增殖活性各组均明显低于空白对照组(P0.01);桃红四物汤组、维甲酸组均显著高于模型组(P0.05),空白血清组与模型组无显著性差异(P0.05),桃红四物汤组与维甲酸组无显著性差异(P0.05),桃红四物汤组、维甲酸组均高于空白血清组(P0.05)。[结论]桃红四物汤、维甲酸均可提升UVA辐射体外建立光老化人皮肤模型成纤维细胞(P0.01),桃红四物汤与维甲酸具有等效性(P0.05)。     

绞股蓝总皂苷含药血清对皮肤光老化HaCaT细胞分泌炎症因子IL-1β、IL-6的影响

目的:研究绞股蓝总皂苷含药血清对皮肤光老化HaCaT细胞分泌炎症因子IL-1β、IL-6表达的影响.方法:选取20只大鼠,随机分为四组,每组5只,分别设为空白血清组、低剂量绞股蓝总皂苷含药血清组、中剂量绞股蓝总皂苷含药血清组、高剂量绞股蓝总皂苷含药血清组,采用UVB照射人工模拟光老化HaCaT细胞模型,照射后用含不同浓度绞股蓝总皂苷的大鼠血清进行干预,12h后采用ELISA方法检测各组细胞分泌IL-1β、IL-6的表达水平.结果:与空白对照组比较,UVB模型组细胞IL-1β、IL-6表达显著上调;与UVB模型组比较,低剂量绞股蓝总皂苷含药血清组、中剂量绞股蓝总皂苷含药血清组、高剂量绞股蓝总皂苷含药血清组细胞中IL-1β、IL-6表达显著下调(P＜0.01).结论:绞股蓝总皂苷含药血清可能通过抑制UVB辐射人皮肤角质细胞诱导炎症信号分子防护皮肤光老化.     

桃红四物汤含药血清对过氧化氢损伤的人脐静脉内皮细胞的保护作用

目的:研究桃红四物汤含药血清对过氧化氢损伤的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的保护作用.方法:SD大鼠灌胃给予桃红四物汤提取液(生药1.75 g·mL-1),每天2次,按10 mL·kg-1连续给药3d后,制备桃红四物汤含药血清.MTT法考察桃红四物汤含药血清(终浓度为5％,10％,15％)预处理对H2O2诱导细胞活力减少的作用;显微镜观察细胞形态学变化;以丙二醛(MDA)和乳酸脱氢酶(LDH)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性以及AO/EB染色考察桃红四物汤含药血清对HUVECs凋亡及抗氧化能力的影响;Western blot法检测细胞Caspase-3的表达.结果:与空白血清对照组比较,经400 μmol·L-1H2O2刺激后细胞活性显著降低,含药血清组可显著提高SOD活力、降低MDA和LDH含量,并抑制Caspase-3表达.AO/EB染色及相差倒置显微镜也观察到桃红四物汤含药血清能降低H2O2诱导的细胞凋亡.结论:桃红四物汤含药血清对H2O2诱导的HUVECs损伤有显著地保护作用.     

绞股蓝总皂苷干预光老化人皮肤角质形成细胞炎症分泌因子的研究

目的:研究绞股蓝总皂苷对光老化人皮肤角质形成细胞分泌炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α表达的影响。方法:选取10只大鼠,随机分为2组,每组5只,分别设为空白血清组、绞股蓝总皂苷含药血清组,分别用以制备空白大鼠血清和绞股蓝含药血清。应用UVB人工照射方法制备光老化人皮肤角质形成细胞模型,用含绞股蓝总皂苷的大鼠血清进行干预,12h后采用ELISA方法检测各组细胞培养上清液中IL-1β、IL-6和TNF-α的水平。结果:与空白对照组比较,UV模型组细胞IL-1β、IL-6和TNF-α表达显著上调(P<0.01);与UV模型组比较,绞股蓝总皂苷含药血清组细胞中IL-1β、IL-6和TNF-α表达均显著下调(P<0.01);与空白血清组比较,绞股蓝总皂苷含药血清组细胞中IL-1β、IL-6和TNF-α表达均显著下调(P<0.01)。结论:绞股蓝总皂苷可抑制UV辐射人皮肤角质细胞分泌炎症因子,抑制皮肤光老化。     

桃红四物汤对巨噬细胞TGF-β1和 TNF-α mRNA转录的影响

目的:观察桃红四物汤含药血清对体外模拟骨坏死环境下的巨噬细胞的转化生长因子(TGF-β1)和肿瘤坏死因子(TNF-α)的mRNA转录水平的影响。进一步明确巨噬细胞在骨坏死修复中的机制。方法:普通级新西兰兔,雌雄各半,随机分为3组,每日ig 1 g.mL-1的桃红四物汤药液,高剂量组15 g.kg-1、低剂量组7.5 g.kg-1,对照组15 mL.kg-1的生理盐水,每日1次,连续ig 2周。U937经佛波醇肉豆蔻酸乙酸酯(PMA)诱导后的巨噬细胞以5×105接种于6孔板中,以坏死骨微粒制备模型组,并予以30%的含药血清干预48 h后收集细胞,RT-PCR检测各组巨噬细胞TGF-β1和TNF-αmRNA转录水平的变化。结果:桃红四物汤低、高剂量含药血清组TGF-β1mRNA的转录水平较空白血清组均趋呈现增高的趋势,组间差异具有统计学意义(P<0.05),其中低剂量为3.366 7,高剂量为4.186 7;TNF-αmRNA的转录水平较空白血清组则呈现减弱的趋势,组间差异具有统计学意义(P<0.05),其中低剂量为1.603 3,高剂量为1.356 7。结论:桃红四物汤可以提高坏死骨微粒刺激下的巨噬细胞TGF-β1mRNA水平,降低TNF-αmRNA水平,影响巨噬细胞的功能是其促进坏死骨修复的作用机制之一。     

右归丸对肝肾亏虚型退变髓核细胞活力及相关炎性因子表达的影响

目的:研究右归丸含药大鼠血清对肝肾亏虚型退变髓核细胞活性及IL-1、TNF-α表达的影响。方法:选取48只雌雄各半质量为180～220 g SD大鼠,按随机数字表法分为空白对照组、桃红四物汤组及右归丸组,各组药物干预后取血清冻存备用。选3例辨证肝肾亏虚型的腰椎间盘突出且需要手术的患者,获取髓核组织细胞并进行细胞培养。各组冻存的含药血清分别配置成5%、10%、20%浓度梯度干预髓核细胞,运用MTT法获取细胞OD值并制作细胞生长曲线,选取各组最佳含药血清浓度。将2代髓核细胞分为空白血清组、桃红血清组、右归血清组。选用各组最佳浓度血清分别连续干预3、7、14 d, Western Blot检测2代髓核细胞中IL-1、TNF-α的表达水平。结果:10%空白血清、20%桃红四物汤含药血清及20%右归丸含药血清有利于髓核细胞生长。分别在第3、7、14天与空白血清组比较,桃红血清组、右归血清组髓核细胞中IL-1、TNF-α的表达水平明显降低,差异有统计学意义(P0.05),且右归血清组相比桃红血清组IL-1、TNF-α降低更加明显,差异有统计学意义(P0.05)。结论:右归丸大鼠含药血清干预肝肾亏虚型退变髓核细胞可显著提高细胞增殖活力,下调炎性因子IL-1、TNF-α的表达,右归丸含药血清干预肝肾亏虚型退变髓核细胞效果优于桃红四物汤含药血清,从侧面进一步论证了辨证论治理论的科学性。     

桃红四物汤对糖尿病视网膜病变引起的细胞损伤及HIF-1α表达的影响

目的 探究桃红四物汤对高糖诱导的人视网膜微血管内皮细胞(hRMECs)的保护作用及潜在的分子机制。方法 (1)取hRMECs,设置5组：空白对照组加5 mmol/L葡萄糖培养,高糖模型组加30 mmol/L葡萄糖培养,桃红四物汤低、中、高剂量组分别加30 mmol/L葡萄糖和相应浓度桃红四物汤含药血清培养,通过Transwell和划痕实验检测细胞的侵袭和迁移能力,血管生成实验检测细胞的成管能力,ELISA试剂盒检测细胞中血管内皮生长因子(VEGF)水平,Western blot法检测细胞中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白表达情况。(2)另外设置4组：空白对照组加5 mmol/L葡萄糖培养,高糖模型组加30 mmol/L葡萄糖培养,桃红四物汤组加30 mmol/L葡萄糖和高剂量桃红四物汤含药血清培养,桃红四物汤+HIF-1α过表达组采用HIF-1α过表达的hRMECs细胞加30 mmol/L葡萄糖和高剂量桃红四物汤含药血清培养,考察HIF-1α过表达对桃红四物汤的功能回复作用。结果 (1)与空白对照组比较,高糖模型组细胞侵袭和迁移能力均明显增强(P均<0.05),成管数量明显...     

桃红四物汤对人脑微血管内皮细胞OGD损伤的保护作用及机制

目的:通过建立糖氧剥夺(OGD)诱导的人脑微血管内皮细胞(h-BMECs)损伤模型,观察桃红四物汤对细胞的保护作用及机制。方法:体外建立人脑微血管内皮细胞糖氧剥夺损伤模型,随机分为正常组、模型组、桃红四物汤高、中、低质量浓度组(0.8,0.4,0.2 g·L-1)和阳性药尼莫地平组。噻唑蓝(MTT)比色法检测h-BMECs细胞活性,酶联免疫吸附法(ELISA)测定细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)水平、细胞中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测内皮细胞血管内皮生长因子(VEGF)和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达水平。结果:桃红四物汤可显著提高拟缺血损伤的人脑微血管内皮细胞活性,降低LDH漏出率(P0.05,P0.01),改善细胞形态,降低MDA水平(P0.05),增强SOD活性(P0.05,P0.01)。增加内皮细胞VEGF和HIF-α蛋白的表达(P0.05,P0.01)。结论:桃红四物汤对拟缺血损伤人脑微血管内皮细胞具有保护作用,其机制与增强细胞抗氧化能力,通过HIF-α途径增强VEGF表达有关,显示中药组方可发挥整体调节的治疗优势。     

ASO血瘀证血清对血管内皮细胞损伤的影响及桃红四物汤的调节作用

目的 探讨动脉硬化闭塞症（arteriosclerosis obliterans, ASO）血瘀证血清对血管内皮细胞损伤的影响及桃红四物汤的调节作用。 方法 建立脐静脉内皮细胞培养体系,制成ASO血瘀证血清内皮细胞损伤模型,分别加入桃红四物汤低、中、高浓度大鼠含药血清,MTT法观察内皮细胞增殖活性,透射电镜观察内皮细胞超微结构,激光共聚焦显微镜观察细胞内钙离子浓度和细胞骨架的变化,酶联免疫吸附（ELISA）观察各组内皮细胞培养液上清中内皮素（ET）、一氧化氮（NO）和转化生长因子β1（transforming growth factor β1, TGF-β1）的含量。 结果 ASO血瘀证血清组内皮细胞增殖活性下降,细胞结构破坏明显,钙离子浓度升高,培养液中ET、NO 及TGF-β1含量明显升高 （ P <0.01）,ET/NO比例失衡。与桃红四物汤含药血清共孵育后,内皮细胞增殖活性和细胞结构的损伤明显改善,ET、NO及TGF-β1水平下降 （ P <0.05,  P <0.01）,ET/NO比例趋于正常。 结论 桃红四物汤治疗血瘀证ASO的主要机制为改善血管内皮细胞的损伤和分泌功能失调。     

阳和汤体外对大鼠成骨细胞及破骨细胞增殖的影响

目的探讨阳和汤含药血清对成骨细胞、破骨细胞的影响作用。方法 SD大鼠连续7 d灌胃阳和汤,腹主动脉采血,制备含药血清。分离并培养原代成骨细胞、成骨细胞株UMR106、原代破骨细胞、破骨前体细胞RAW264.7。随机分为阳和汤含药血清低剂量组、中剂量、高剂量,空白血清组,各组加入相应含药血清进行培养,分别于24、48、72h收获细胞,采用MTT法测定药物对细胞增殖的影响;比色法测定破骨细胞TRAP酶活性。结果阳和汤含药血清中剂量、高剂量组在24、48、72h均能提高成骨细胞的增殖率,与空白血清组比较有显著差异;阳和汤含药血清低剂量组在48、72h也能明显提高细胞增殖率,与空白血清组比较有显著差异;阳和汤含药血清低剂量组对破骨前体细胞RAW264.7增殖率24、48、72h均没有影响,与空白血清组比较差异均无统计学意义;阳和汤含药血清中、高剂量组破骨前体细胞RAW264.7增殖率均低于空白血清组,24、48、72h比较差异有统计学意义;阳和汤含药血清低剂量组对破骨细胞的TRAP活性24、48 h影响不大,但72h TRAP活性低于空白血清组;阳和汤含药血清中、高剂量组48、72h破骨细胞TRAP活性均显著低于空白血清组。结论阳和汤能抑制体外培养的破骨前体细胞增殖,降低破骨前体细胞TRAP活性,对成骨细胞的增殖有促进作用。     

人参黄芪含药血清对人脐静脉内皮细胞活性的影响

目的:通过观察养心汤中君药(人参、黄芪)对人脐静脉内皮细胞增殖率的影响,探讨其防治冠心病不稳定型心绞痛的作用机制。方法:实验细胞分为空白血清组、模型组、参芪低剂量组、参芪中剂量组、参芪高剂量组5组。应用MTT法检测细胞活性。结果:H2O2培养液可使人脐静脉内皮细胞收缩变圆,细胞间隙增宽,部分细胞脱落。随参芪含药血清浓度的增加,细胞越成片贴壁生长,细胞形态和间隙越接近正常。经MTT法检测,与空白血清组相比,模型组增值率明显降低,差异具有统计学意义(P0.05);各参芪组间比较,参芪高剂量组增殖率显著升高,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:参芪含药血清能预防H2O2对人脐静脉内皮细胞造成的损伤,并能够促进内皮细胞增殖,这可能是其防治冠心病不稳定型心绞痛的作用机制之一。     

桃红四物汤含药血清对脂多糖诱导人脐静脉内皮细胞TNF-α、MCP-1和IL-1β表达的影响

目的:研究桃红四物汤含药血清对脂多糖(LPS)诱导刺激下人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的保护作用。方法:SD大鼠灌胃给予桃红四物汤提取液(生药1.75 g·m L-1),每天2次,按10 m L·kg-1连续给药3d后,制备桃红四物汤含药血清。MTT法检测桃红四物汤含药血清(终浓度为5%、10%和15%)预处理对LPS诱导细胞生存率减少的作用;real-time RT-PCR检测TNF-α、MCP-1和IL-1βmRNA表达情况;Western Blot方法检测MCP-1和NFκB蛋白表达;检测活性氧(ROS)含量,研究桃红四物汤含药血清对HUVEC抗氧化能力的影响。结果:与空白血清对照组比较,经LPS(1μg·m L-1)刺激后细胞ROS含量明显增高而生存率显著降低,同时细胞炎性因子TNF-α、MCP-1和IL-1βmRNA表达增高;含药血清组可显著提高HUVECs活力、降低ROS含量和TNF-α、MCP-1和IL-1βmRNA表达。结论:桃红四物汤含药血清对LPS诱导的HUVECs损伤有显著地保护作用。     

复方芪麻胶囊含药血清对血管紧张素Ⅱ诱导损伤脐静脉内皮细胞相关因子的影响

目的:观察复方芪麻胶囊含药血清对血管紧张素Ⅱ诱导损伤脐静脉内皮细胞相关因子的影响。方法:体外培养脐静脉内皮细胞,根据培养基的不同分为空白组、模型组、5%复方芪麻胶囊含药血清组、10%复方芪麻胶囊含药血清组、20%复方芪麻胶囊含药血清组和阿托伐他汀钙组。分组培养24 h后,检测各组脐静脉内皮细胞的细胞活性、培养基中一氧化氮(nitric oxide,NO)水平、细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)及细胞凋亡率。结果:与空白组比较,AngⅡ刺激后的脐静脉内皮细胞活性及NO水平显著下降,差异具有统计学意义(P0.05),同时ROS水平及细胞凋亡率显著升高,差异具有统计学意义(P0.05);各浓度的复方芪麻胶囊含药血清均不同程度提高细胞活性及NO水平并降低细胞内ROS水平及细胞凋亡率,其中以10%复方芪麻胶囊含药血清组效果最显著,差异具有统计学意义(P0.01)。结论:复方芪麻胶囊含药血清对AngⅡ诱导损伤脐静脉内皮细胞具有保护作用。     

下瘀血汤对肝癌细胞生物活性及Nanog信号通路表达的影响

目的:研究下瘀血汤对肝癌细胞的作用以及对Nanog信号通路的影响。方法:将HepG2细胞分为空白血清组、低剂量含药血清组、中剂量含药血清组;高剂量含药血清组,通过MTT、流式细胞仪、Transwell测肝癌细胞增殖、凋亡及侵袭情况,实时PCR、蛋白质印迹法测Nanog mRNA、Bcl-2、胱天蛋白酶-3水平。结果:空白血清组肝癌细胞的OD值及侵袭数量高于中剂量、高剂量含药血清组(P<0.05),肝癌细胞凋亡率低于低剂量、中剂量、高剂量含药血清组(P<0.05),高剂量含药血清组肝癌细胞OD值及侵袭数量最少、凋亡最高;空白血清组肝癌细胞中Nanog mRNA及Bcl-2蛋白表达高于低剂量、中剂量、高剂量含药血清组(P<0.05),胱天蛋白酶-3的蛋白表达水平低于低剂量、中剂量、高剂量含药血清组(P<0.05),与低剂量、中剂量剂量含药血清组比较,高剂量含药血清组肝癌细胞中Nanog mRNA及Bcl-2蛋白表达明显降低(P<0.05),胱天蛋白酶-3蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论:下瘀血汤通可抑制肝癌细胞的活性及其侵袭力、促进癌细胞的凋亡,其作用机制可能调控与Nanog信号通路,从而促进胱天蛋白酶-3的表达、抑制Bcl-2水平有关。     

右归丸方含药血清对BMSC增殖、骨向分化的干预作用研究

目的:观察右归丸含药血清对骨髓基质干细胞的骨向分化诱导作用,通过右归丸含药血清对骨髓基质干细胞Akt、mTOR磷酸化水平的影响,探讨右归丸含药血清促骨髓基质干细胞骨向分化的部分作用机制。方法:制备高中低3个剂量的右归丸大鼠含药血清,提取大鼠骨髓基质干细胞,传至第3代,将细胞随机分为5组:空白对照组、空白血清组、低剂量含药血清组、中剂量含药血清组、高剂量含药血清组。分别给予不同浓度血清及PBS干预24 h后,检测各组细胞中碱性磷酸酶活性、骨钙素表达水平及Akt、mTOR磷酸化水平。结果:空白对照组与空白血清组之间比较,ALP、Osteocalcin、p-Akt、p-mTOR表达水平无统计学差异(P>0.05),与空白对照组和空白血清组比较,3个剂量含药血清组细胞中ALP活性及Osteocalcin、p-Akt、p-mTOR表达水平均不同程度提高(P>0.01),但中剂量和高剂量含药血清组ALP活性及Osteocalcin、p-Akt、p-mTOR表达水平均无显著性差异(P>0.05)。结论:右归丸含药血清具有一定的促进骨髓基质干细胞骨向分化的作用,该作用可能是通过提高Akt、mTOR的磷酸化水平而实现的。     

桃红四物汤对肺纤维化大鼠血清炎症因子的影响

目的:探讨桃红四物汤对肺纤维化模型大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)表达的影响,探索其治疗肺纤维化的潜在机理.方法:将50只SPF级雌性大鼠随机分为空白组、模型组、甲泼尼龙组、桃红四物汤低剂量组、桃红四物汤高剂量组,除空白组外,余各组均给予气管内滴注博来霉素的方式...     

补中益气汤含药血清对A549/DDP中p-Akt和P-gp表达的影响

目的:研究补中益气汤含药血清逆转人肺腺癌顺铂耐药细胞株(A549/DDP)耐顺铂(DDP)作用及其对磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(p-Akt)和P-糖蛋白(P-gp)表达的影响.方法:采用血清药理学方法制备含药血清,随机对照法将24只SD大鼠分为空白对照组(给生理盐水10 mL·kg-1),补中益气汤高、中、低剂量组(11.34,5.67,2.84 g·kg-1,10 mL·kg-1),每日ig给药1次,连续7d后提取血清.将A549/DDP分为空白血清组,补中益气汤高、中、低剂量含药血清组,阻滞剂组,高剂量含药血清联合阻滞剂(LY294002)组,MTT法检测各组细胞对DDP的IC50,并计算耐药逆转倍数.免疫细胞化学法检测各组细胞中p-Akt和P-gp蛋白的表达;逆转录-多聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测各组细胞中Akt和P-gp的mRNA表达.结果:与空白血清组比较,补中益气汤中剂量以上的含药血清可明显降低A549/DDP对DDP的IC50(P＜0.05),并呈浓度依赖效应,与阻滞剂联合效果最佳(P＜0.05);与A549/DDP空白血清组相比,补中益气汤中、高剂量含药血清组,阻滞剂组和高剂量联合阻滞剂组的p-Akt和P-gp的表达显著下降(P ＜0.01,P＜0.05),其中以高剂量联合阻滞剂组下降最多(P＜0.01);与A549/DDP空白血清组相比,中、高剂量含药血清组,阻滞剂组和高剂量联合阻滞剂组的P-gp的mRNA表达量都显著减少(P＜0.01,P＜0.05),中、高剂量含药血清组,高剂量联合阻滞剂组的p-Akt的mRNA表达量也显著减少(P＜0.05).结论:补中益气汤含药血清可逆转A549/DDP细胞的顺铂耐药,与LY294002联合应用效果更佳,其逆转机制可能与减少细胞内p-Akt和P-gp的表达,增强A549/DDP对DDP的敏感性有关.     

基于Hippo-YAP信号通路探讨桃红四物汤对BMSCs增殖与成骨分化的影响

目的 分离培养大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),运用桃红四物汤含药血清和Hippo信号通路抑制剂Verteporfin干预,进而观察BMSCs增殖和成骨分化的能力.方法 采用全骨髓贴壁法体外培养BMSCs,选用10倍等效剂量的桃红四物汤灌服大鼠制备桃红四物汤含药血清,采取0.9％氯化钠注射液灌胃大鼠制取空白组对照血清...