白细胞介素-18在骨关节炎滑膜细胞中的表达及意义

目的 了解白细胞介素(IL)-18在骨关节炎(OA)患者和非OA患者滑膜细胞中表达的差异.方法 取OA患者(22例)与非OA患者(8例)关节滑膜组织,分别原代培养滑膜细胞,采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)定量检测2组滑膜细胞培养上清液中IL-18蛋白的表达水平,采用免疫细胞化学方法 定性观察IL-18在2组滑膜细胞问表达的差异,统计学处理采用t检验.结果 ELISA检测OA患者细胞培养上清液中IL-18的含量为(63.9±21.4)pg/ml, 非OA患者细胞培养上清液中IL-18的含量为(17.7±1.5)pg/ml,2组比较差异有统计学意义(t=10.044,P<0.01);免疫细胞化学方法 显示在OA患者滑膜细胞中IL-18蛋白的表达呈阳性.胞质为棕黄色深染,而在非OA患者滑膜细胞中胞质淡染.结论 IL-18在OA关节滑膜细胞中表达上调, 提示IL-18可能直接参与了OA的发病过程.     

鳖甲煎丸对肾小球系膜细胞转化生长因子表达的影响

目的探讨鳖甲煎丸药物血清及脂多糖(LPS)对人肾小球系膜细胞(MCs)转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA表达的影响。方法应用细胞培养技术,进行人MCs培养,采取血清药理学方法,制备鳖甲煎丸药物血清,利用LPS为刺激因子,将培养的MCs分为空白组、鳖甲煎丸组、LPS组和LPS鳖甲煎丸组。应用逆转录-多聚酶链反应技术(RT-PCR)观察TGF-β1mRNA在各组中的表达情况。结果鳖甲煎丸组TGF-β1mRNA的表达明显低于空白组(P<0.01);LPS刺激后TGF-β1mRNA表达增强,与空白组比较有明显差异(P<0.01);LPS鳖甲煎丸组明显低于LPS组(P<0.01);鳖甲煎组明显优于LPS鳖甲煎丸组(P<0.01)。结论鳖甲煎丸能够抑制正常条件下及LPS刺激条件下TGF-β1mRNA在MCs中的表达,从而延缓肾小球硬化的进展。     

15脱氧前列腺素J2抑制脂多糖活化的巨噬细胞对胰岛细胞的损伤作用

目的 探讨脂多糖(LPS)活化的巨噬细胞对胰岛细胞的损伤作用及15脱氧前列腺素J2(15d-PGJ2)的保护作用. 方法应用ELISA法测定细胞培养上清中白细胞介素-1β(IL-1β)水平.应用放射免疫分析法、硝酸还原酶法分别测定培养上清中胰岛素、一氧化氮(NO)的浓度,bcl-2/bax在胰岛细胞中的表达应用免疫组化技术和定量分析检测. 结果巨噬细胞经LPS处理后,IL-1β生成明显增多,与对照组相比有显著性差异(P<0.01);15d-PGJ2+LPS组与15d-PGJ2组及对照组相比,IL-1β亦明显升高,而低于LPS组,差异均有显著意义(P<0.05).体外巨噬细胞和胰岛细胞共同培养加入LPS处理后抑制高糖刺激的胰岛素的释放及促进NO的产生,与对照组相比差异有显著意义(P＜0.05),第6天与15d-PGJ2+LPS组相比有显著性差异(P＜0.05),LPS组bax表达上调,bcl-2表达下调,而15d-PGJ2+LPS组无明显改变. 结论 15d-PGJ2能拮抗LPS活化的巨噬细胞对胰岛细胞的损伤,其机制可能与抑制巨噬细胞细胞因子的产生,抑制bax/bcl-2的异常表达有关.     

核因子κB在类风湿关节炎滑膜组织中的表达与意义

目的检测核因子κB(NF-κB)及白细胞介素(IL)-1β、基质金属蛋白酶(MMP)-9在类风湿关节炎(RA)、骨关节炎(OA)及正常滑膜组织中的表达差异。方法反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测46例滑膜组织(RA17例,OA24例,正常5例)中p65、p50、NF-κB抑制因子(IκB)及IL-1β、MMP-9的mRNA水平。免疫组织化学检测39例滑膜组织(RA14例,OA21例,正常4例)中p65的表达情况。对8例RA、6例OA滑膜组织进行滑膜细胞培养,提取核蛋白进行免疫印迹,检测p65含量。结果RA组p65、IL-1β、MMP-9的mRNA水平显著高于正常对照组(分别为P<0.05、P<0.01、P<0.05),与OA组比较差异无显著性。RA、OA与正常组之间p50、IκB的mRNA水平差异无显著性。NF-κBp65免疫组织化学染色组显示RA滑膜衬里层细胞、衬里下层浸润的炎症细胞、血管内皮细胞均有着色。RA组NF-κB活性系数显著高于OA组、正常对照组(P<0.001)。免疫印迹发现RA滑膜细胞核蛋白中p65含量显著高于OA组(P<0.05)。结论RA滑膜组织中NF-κB的表达与活化水平显著高于OA及正常滑膜组织。RA组IL-1β与MMP-9的mRNA水平显著高于正常对照。     

AT2R通过NF-κB信号对人膝骨关节炎滑膜组织成纤维样细胞中IL-6、IL-1β表达的影响

目的探讨血管紧张素Ⅱ型受体(AT2R)在膝骨关节炎(OA)滑膜组织中表达及其调控成纤维样滑膜细胞(FLS)中炎症因子白细胞介素(IL)-6、IL-1β表达的潜在机制。方法以54例OA患者手术切除膝关节滑膜组织为OA组,以36例正常膝关节滑膜标本为对照组,采用Western印迹检测滑膜组织中AT2R蛋白表达;分别从正常膝关节滑膜标本和膝关节炎滑膜组织中分离正常人成纤维样滑膜细胞(H-FLS)和OA患者成纤维样滑膜细胞(OA-FLS)。并用Western印迹检测CD14、CD90、波形蛋白(Vimentin)表达;Western印迹检测IL-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α对H-FLS和OA-FLS中AT2R表达影响;OA-FLS细胞沉默AT2R和激活AT2R后,qPCR检测IL-6、IL-1β表达变化,荧光素酶报告基因实验检测核因子(NF)-κB活性变化;噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖能力变化。结果与对照组相比,OA组中AT2R表达显著增加(P0.05)。与Blank组相比,TNF-α组、IL-1β组及IL-1β+TNF-α组H-FLS细胞及TNF-α组、IL-1β+TNF-α组OA-FLS细胞中AT2R表达均显著增加(P0.05)。与NC组相比,siAT2R组IL-6、IL-1βmRNA表达明显增加(P0.05),而AT2R agonist组IL-6、IL-1βmRNA表达显著降低(P0.05),与Control组相比,TNF-α组、siAT2R组NF-κB p65活性显著增加(P0.05),AT2R agonist组NF-κB p65活性明显被抑制(P0.05)。与Blank组相比,在48 h、72 h时TNF-α组、siAT2R组OA-FLS细胞增殖能力显著增强(P0.05),而AT2R agonis组细胞增殖能力被显著抑制(P0.05)。结论 AT2R激动剂可能成为临床治疗OA患者的一种新的治疗方法策略。     

15脱氧前列腺素J_2抑制脂多糖活化的巨噬细胞对胰岛细胞的损伤作用

目的　探讨脂多糖 (LPS)活化的巨噬细胞对胰岛细胞的损伤作用及 15脱氧前列腺素J2 (15d PGJ2 )的保护作用。　方法　应用ELISA法测定细胞培养上清中白细胞介素 1β(IL 1β)水平。应用放射免疫分析法、硝酸还原酶法分别测定培养上清中胰岛素、一氧化氮 (NO)的浓度 ,bcl 2 /bax在胰岛细胞中的表达应用免疫组化技术和定量分析检测。　结果　巨噬细胞经LPS处理后 ,IL 1β生成明显增多 ,与对照组相比有显著性差异 (P <0 0 1) ;15d PGJ2 LPS组与 15d PGJ2 组及对照组相比 ,IL 1β亦明显升高 ,而低于LPS组 ,差异均有显著意义 (P <0 0 5 )。体外巨噬细胞和胰岛细胞共同培养加入LPS处理后抑制高糖刺激的胰岛素的释放及促进NO的产生 ,与对照组相比差异有显著意义(P <0 0 5 ) ,第 6天与 15d PGJ2 LPS组相比有显著性差异 (P <0 0 5 ) ,LPS组bax表达上调 ,bcl 2表达下调 ,而 15d PGJ2 LPS组无明显改变。　结论　 15d PGJ2 能拮抗LPS活化的巨噬细胞对胰岛细胞的损伤 ,其机制可能与抑制巨噬细胞细胞因子的产生 ,抑制bax/bcl 2的异常表达有关。     

IL-1和TGF-β1在膝骨关节炎滑膜中的表达及意义

目的进一步探讨膝骨关节炎（OA）的发生机制。方法选择80例OA患者的关节滑膜标本,连续性组织切片;同法选择20例非正常死亡及外伤性截肢的青年滑膜组织作为对照组。两组采用免疫组化方法检测TGF-β1和IL-1在滑膜组织中的表达情况,双盲法计数阳性表达率。结果IL-1、TGF-β1蛋白在OA滑膜组织中的表达增加,且二者表达随着OA病情加重而增强。结论IL-1、TGF-β1可能参与了OA滑膜的病理过程,对滑膜炎症分别起促进和抑制作用。     

TGF-β1通过抑制小胶质细胞活化对帕金森病大鼠神经保护作用及机制

目的探究转化生长因子(TGF)-β1通过抑制小胶质细胞活化对帕金森病(PD)大鼠的神经保护作用及机制。方法将大鼠分为对照(Control)组、PD组、TGF-β1 25 ng/μl组、TGF-β1 50 ng/μl组、TGF-β1 100 ng/μl组,阿扑吗啡(APO)旋转诱导实验评估大鼠行为学变化;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清肿瘤坏死因子(TNF)-α、一氧化氮合酶(iNOS)水平;免疫组化检测黑质部络氨酸羟化酶(TH)、CD11b表达;蛋白免疫印迹(WB)检测TGF-β1、Smad3蛋白表达。体外培养新生乳鼠小胶质细胞,脂多糖(LPS)诱导活化,分为空白组、LPS组、TGF-β1 2 ng/μl组、TGF-β1 5 ng/μl组、TGF-β1 10 ng/μl组;噻唑蓝(MTT)法检测小胶质细胞活性;免疫荧光法检测小胶质细胞形态变化;WB检测细胞中TGF-β1、Smad3蛋白表达。结果与Control组相比,PD组APO诱导圈数显著升高,血清中TNF-α、iNOS水平显著升高,黑质部神经元数量显著减少,小胶质细胞数显著升高,黑质部TGF-β1、Smad3蛋白表达显著降低(均P0.05);与PD组相比,TGF-β1 25、50、100 ng/μl组APO诱导圈数显著降低,血清中TNF-α、iNOS水平降低,黑质部神经元数量显著增加,小胶质细胞数显著减少,黑质部TGF-β1、Smad3蛋白表达显著增加(均P0.05)。与空白组相比,LPS组小胶质细胞抑制率显著降低,TGF-β1、Smad3蛋白表达显著降低,CD11b蛋白表达显著升高(均P0.05)。与LPS组相比,TGF-β1 2、5、10 ng/μl组小胶质细胞抑制率显著升高,TGF-β1、Smad3蛋白表达显著升高,CD11b蛋白表达显著降低(均P0.05)。结论外源TGF-β1可抑制PD大鼠小胶质细胞活化,进而发挥对神经的保护作用,其机制可能与激活TGF-β1/Smad3信号通路有关。     

氨基胍对博莱霉素致大鼠肺纤维化的干预作用及机制

目的探讨氨基胍(AG)对博莱霉素(BLM)诱导SD大鼠肺纤维化中的干预作用。方法将116只SD大鼠随机分成5组:正常对照组、BLM组、AG组、激素组和AG+激素组。经气道给予BLM或生理盐水后,每天给不同组别相应的药物或生理盐水连续28 d。分别在第7,14,21,28天随机处死各组老鼠5只。处死前,取肺泡灌洗液用硝酸还原酶法测一氧化氮(NO)的表达。用碱水解法测肺组织中羟脯氨酸的含量及用RTPCR检测肺组织中转化生长因子(TGF)-β1 mRNA的相对表达量。结果①与BLM组比较,AG组、激素组和AG+激素组支气管肺泡灌洗液(BALF)中NO的表达在第7,14天下降(P<0.05),肺组织羟脯氨酸含量减少(P<0.05)。②各治疗组肺组织TGF-β1 mRNA的相对表达量和BLM组比较在7,14,21 d明显增加(P<0.05)。结论 AG可以降低BLM诱导的肺纤维化程度,作用机制可能是通过抑制TGF-β1的基因表达。     

黄体酮对小胶质细胞活化的影响

目的 观察黄体酮对体外培养小胶质细胞活化的抑制作用.方法 取新生sD大鼠皮层,分离、纯化、培养小胶质细胞,脂多糖(LPS)诱导其活化,ELISA法检测活化前后细胞培养上清液内TNFα、IL-1β水平的变化.结果 黄体酮干预组小胶质细胞培养上清液内TNFα、IL-1β的表达水平明显低于LPS处理组.结论 黄体酮可以显著减少上清液内炎症介质的水平,抑制体外培养小胶质细胞的活化.     

State of knowledge of helminth fauna of freshwater fishes of Poland

A total 89 fish and lamprey species has been recorded from Polish freshwater habitats. Twenty-seven of them (30.3%) have not been surveyed for parasitic helminthes. Some of the latter fishes are either rare or not easily accessible. Other live only in specific habitats in scattered localities. An important obstacle for studying parasite faunas of some fishes may be their status on an endangered species. Among the non-surveyed fishes, are those which have been relatively recently introduced to Poland or migrated there on their own. The present paper attempts to review all hitherto not studied helminthologically fish species, their habitats, localities and current protection status.     

高血压降压治疗目标的再认识

根据传统的高血压水平的定义,1993年WHO高血压治疗指南提出血压控制目标为<140/90mm Hg(1mm Hg=0.133kPa),但是并非所有患者都必须将血压降至同一水平,而应根据患者情况进行个体化治疗。Framingham进行的一项长达10～12年的心血管事件研究发现,第5年后,正常上限血压[收缩压(SBP