ELISA弓形虫IgG抗体试剂盒的研制

弓形虫病 (Ｔｏｘｏｐｌａｓｍｏｓｉｓ)是一种人兽共患的寄生虫病。病原体为弓形虫 (Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａｇｏｎｄｉｉ) ,属球虫类原虫 ,广泛分布于世界各地 ,人和动物普遍易感。许多欧美国家的血清试验阳性率达 2 5～ 50 %。我国自 1 980年以来 ,在全国范围内进行了人和动物弓形虫病的流行病学调查 ,所调查地区均发现弓形虫感染 ,说明我国弓形虫感染和弓形虫病分布十分广泛 ,人体感染弓形虫后 ,体内最先产生的是循环抗原 (ＣＡｇ) ,最早出现的抗体是ＩｇＭ抗体 (病期的 7～ 8天 ) ,它是早期弓形虫感染诊断的主要指标 ,随后出现ＩｇＡ抗体…     

眼疾患者弓形虫感染情况检测

应用ＥＬＩＳＡ及ＰＣＲ方法同时检测眼疾患者血液及房水中弓形虫 (Ｔｏｘｏｐｌａｓｍ ,Ｔｏｘ)特异抗体 (ＩｇＧ、ＩｇＭ)、循环抗原 (Ｃａｇ)及ＤＮＡ(简称Ｔｏｘ 四项 ) ,了解眼疾患者中Ｔｏｘ感染的发生率与性别、年龄、病种的关系 ,并验证本检测方法的可重复性及房水检查在Ｔｏｘ眼疾中的意义。我院住院及门诊患者共 2 0 3例。用ＥＬＩＳＡ法检测Ｔｏｘ特异性ＩｇＧ、ＩｇＭ、Ｃａｇ ,试剂盒为深圳市绿瀚生物技术有限公司生产。ＰＣＲ方法检测Ｔｏｘ ＤＮＡ ,试剂为上海复星高科技有限公司生产 ,弓形虫ＰＣＲ专用。2 0 3人中有 15 0份…     

弓形虫抗原、抗原测定对慢性头痛的临床意义探讨

本文对 6 0例有猫狗密切接触的慢性头痛患者进行了血清弓形虫循环抗原 (ＣＡｇ)、抗体 (ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＧ)酶联免疫分析检测 ,并对测定结果予以讨论 ,以探讨此法对弓形虫感染引致慢性头痛的临床诊断意义。材料和方法一、病例选择 :6 0例患者均按《中国医学百科全书·神经医学》头痛章节的标准诊断为慢性头痛[1] ,其疼痛主要特点和性质类似于“肌收缩性头痛”或“功能性及精神性头痛” ,并经包括脑ＣＴ或ＭＲＩ等检查 ,排除了偏头痛、脑血管疾病头痛、颅内压力改变性头痛 ,脑肿瘤性、脑外伤性、颅内感染性、癫痫性头痛及头面部、五官疾…     

ELISA法测定EB病毒IgG/EA抗体在血清学诊断鼻咽癌中的意义

近年研究表明 ,鼻咽癌 (ＮＰＣ)的发展与ＥＢ病毒感染密切相关[1] 。本室应用酶联免疫吸附法 (ＥＬＩＳＡ)测定血清抗ＥＢ病毒早期抗原 (ＥＡ)的ＩｇＧ抗体 (ＩｇＧ ＥＡ)水平 ,与间接免疫酶染色法测定ＥＢ病毒壳抗原(ＶＣＡ)ＩｇＡ抗体进行比较 ,研究结果报道如下 :1　材料与方法1 1　血清样品来源　 32 6例 2 7～ 6 0岁健康人为我院体检者 ,其中男性 2 33人 ,女性 93人。 134例为入院初诊鼻咽癌患者 ,年龄 31～ 5 5岁 ,其中男性 10 4人 ,女性 30人。1 2　血清ＩｇＡ ＶＣＡ滴度测定　采用上海生物制品研究所的ＩｇＡ ＶＣＡ免疫酶染色法试…     

流行性出血热病人特异性循环免疫复合物的检测

应用ＥＬＩＳＡ（双抗体夹心法）检测了３３例４～７病日流行性出血热（ＥＨＦ）病人血清中特异性循环免疫复合物（ＣＩＣ）水平；并比较了联合抗过敏加输新鲜血浆疗法治疗前后的血清特异性ＣＩＣ消长情况。结果表明，ＥＨＦ病人可检出ＥＨＦ病毒抗原的特异性ＩｇＥ型和ＩｇＧ型ＣＩＣ。联合抗过敏加输新鲜血浆治疗后的病人血清中特异性ＩｇＥ型和ＩｇＧ型ＣＩＣ均明显降低。     

弓形虫IgM抗体检测方法的研究

本文以鼠抗人μ链单克隆抗体捕获被测人血清中ＩｇＭ抗体，再以辣根过氧化物酶标记的弓形虫抗原进行直接酶联免疫吸附试验，检测人血清中特异性抗弓形虫ＩｇＭ抗体，并以阻断试验证实该方法的特异性。与风疹病毒ＩｇＭ抗体阳性血清，巨细胞病毒ＩｇＭ抗体阳性血清和类风湿因子等无交叉反应。与进口试剂盒以酶联免疫吸附试验双夹心法（ＤＳ－ＥＬＩＳＡ－Ｔｏｘ－ＩｇＭ）进行比较检测了临床血清样品１０５３份，两者阳性符合率为９５．５６％，ＤＳ－ＥＬＩＳＡ阴性血清在Ｄ－ＥＬＩＳＡ法亦阴性，而且后者灵敏度略高。酶标记抗原和包被抗体的酶标板在４℃中保存６个月仍稳定。试剂盒操作简便，快速，适用于弓形虫病的早期诊断。     

肝病患者血清弓形虫抗原、抗体的检测及临床意义

本文总结了２７４例肝病患者血清弓形虫抗原、抗体的检测结果 ,以此来探讨肝病和弓形虫之间的关系及临床价值。材料和方法一、对象 :（一）对照组 :本院健康成人体检者１５０人（男９５ ,女５５） ,年龄为２０岁～６０岁 ,均无器质性病变。（二）肝病组 :本院门诊及传染病医院住院病人共２７４例（男１６６ ,女１０８） ,年龄为１８岁～７５岁 ,且有临床症状 ,并经化验、Ｂ超等证实为肝病者。二、方法 :由上海放射免疫分析技术研究所提供试剂盒 ,用酶免法检测弓形虫循环抗原（ＣＡｇ）、ＩｇＭ和ＩｇＧ抗体 ,操作按说明书。结果结果见表１。…     

TORCH抗体检测方法比较及其临床意义

ＴＯＲＣＨ抗体系指弓形虫Ｔｏｘ（Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａｇｏｎｄｉｉ）、风疹病毒ＲＶ（Ｒｕｂｅｌｌａｖｉｒｕｓ）、巨细胞病毒ＣＭＶ（Ｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ）、单纯疱疹病毒ＨＳＶ２（Ｈｅｒｐｅｓｓｉｍｐｌｅｘｖｉｒｕｓ）一组由非细菌性微生物感染机体引起的血清特异性抗体 ,包括ＩｇＭ和ＩｇＧ。由ＴＯＲＣＨ引起的感染目前认为主要危害孕妇可导致流产、死胎和胎儿畸形［１］。以往这方面工作以ＴＯＲＣＨＩｇＭ抗体研究较多 ,而同时分析ＩｇＭ和ＩｇＧ抗体与孕期关系者国内尚未见报道。本文收集了来我院就诊的９１９例…     

血清CG、HA RIA在慢性HBsAg携带者中的应用价值

应用ＲＩＡ的方法对 40 2例慢性ＨＢｓＡｇ携带者进行了血清甘胆酸 (ＣＧ)、透明质酸 (ＨＡ)检测 ,旨在探讨慢性ＨＢｓＡｇ携带者肝脏功能的变化及其临床意义。资料和方法一、对象 :(一 )实验组 :按 1995年 5月北京第五次全国传染病寄生虫学术会议讨论修订的《病毒性肝炎防治方案 (试行 )》标准选择的慢性ＨＢｓＡｇ携带者 40 2例 (男 2 74,女 12 8) ,年龄 11～78岁 ,平均 39.5岁。检测ＣＧ、ＨＡ的同时均做了ＨＢｅＡｇ和ＨＢｓＡｇ·ＩｇＭ复合物ＲＩＡ。(二 )正常对照组 :10 3例 (男 83 ,女 2 0 ) ,年龄 19～ 5 2岁 ,平均 32 3岁。均系…     

HBsAg携带者弓形虫感染情况分析

弓形虫病广泛流行于世界各地 ,当人体遭受各种疾病而免疫力降低时容易感染此病 ,且多为隐性感染。为了解ＨＢ ｓＡｇ携带者弓形虫感染情况 ,我院采用酶联免疫吸附试验(ＥＬＩＳＡ)对来我院 2 430例体检青年 (包括 30 7例ＨＢｓＡｇ携带者 )进行了弓形虫血清学检验。现将结果报告如下。对象和方法一、对象 :自 2 0 0 0年 11月～ 2 0 0 1年 2月来我院体检青年2 430例 (男 132 8,女 110 2 ) ,年龄 2 2～ 33岁 ,其中ＨＢｓＡｇ携带者 30 7例。二、方法 :空腹抽取静脉血 3ｍｌ于干燥试管中 ,离心分离血清 ,- 2 0℃保存备用。用酶联免疫法检测了弓…     

胃肠道癌患者血清中抗癌胚抗原(CEA)抗体的检测及意义

目的：探讨循环中抗癌胚抗原（ＣＥＡ）特异性抗体的情况，评价ＣＥＡ及抗体的联合检测在胃肠道癌诊断中的作用。方法：用放免法检测血清中 ＣＥＡ含量，用酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）检测抗 ＣＥＡ ＩｇＧ抗体，用竞争抑制法检测抗体的特异性。结果：胃肠道癌患者血清 ＣＥＡ含量升高者（≥１５ ｎｇ／ｍｌ）为 ３０．９％（２１／６８），抗 ＣＥＡ ＩｇＧ抗体阳性者为３５．３％（２４／６８），ＣＦＡ及抗 ＣＥＡ抗体的联合检测可使阳性率提高到５４．３％（３７／６８）；胃肠道良性疾病患者（多发性息肉、溃疡、胰腺炎等）血清ＣＥＡ升高者为３．３％（１／３０），抗 ＣＥＡ　ＩｇＧ抗体阳性者为 ３．３％（１／３０）；健康对照组血清 ＣＥＡ升高者为 ０，抗 ＣＥＡ ＩｇＧ抗体阳性者为 ２．５％（１／４０）。结论：胃肠道癌患者血清中抗癌胚抗原（ＣＥＡ）抗体的检出率较高，这些抗体可作为胃肠道癌的一种肿瘤标志物。     

妊娠妇女麻疹、风疹和破伤风抗体及HBsAg携带率调查

为了解妊娠妇女麻疹、风疹和破伤风的免疫水平及乙肝表面抗原 (ＨＢｓＡｇ)的携带情况 ,随机检测了 131名妊娠早期体检妇女的血清 ,采用间接ＥＬＩＳＡ检测麻疹ＩｇＧ和风疹ＩｇＧ抗体 ,采用间接血凝试验检测破伤风凝集抗体 ,采用酶标方法检测ＨＢｓＡｇ。结果显示 ,麻疹和风疹抗体阳性率较高 ,分别为 97.7%和 95 .4 % ;麻疹抗体几何平均滴度 (ＧＭＴ)为 114 0 .4 ,水平较高 ,但仍有 19.1%为麻疹阴性或低于保护水平 ,高抗体 (≥ 1∶32 0 0 )的比例占38.9%。不同年龄组 (2 2～ 32岁 )抗体水平不同 ,有出疹史的抗体水平明显高于没有出疹史的 (…     

慢性肾小球肾炎患者血清抗心磷脂抗体的变化

为了解抗心磷脂抗体 (ＡＣＡ)与肾小球肾炎的关系 ,本文测定了 6 8例慢性肾小球肾炎患者血清ＡＣＡ ,并加初步分析。1　检测对象和方法1 1　受检者　临床确诊的慢性肾小球肾炎 6 8例 ,按内生肌酐清除率及治疗方法分为肾功能正常组、尿毒症未透析组和尿毒症血透组 ,具体病例数见表 1,另以正常健康人2 2例作为对照组。1 2　检测方法　常规取患者血清 ,用酶联吸附法结合指数(ＢＩ)方式测定血清ＡＣＡＩｇＡ、ＡＣＡＩｇＧ和ＡＣＡＩｇＭ。药盒由福建太阳生物技术公司提供。所得数据值以 ｘ±ｓ表示 ,并作ｔ检验和相关分析。2　结果2 1　慢性…     

蒿甲醚对实验兔弓形虫病的疗效观察

选用兔经腹腔感染ＲＨ株弓形虫速殖子，蒿甲醚（Ａｒｔ）疗效考核包括观察动物存活情况及血清中循环抗原（ＣＡｇ）的动态变化。结果显示，兔感染弓形虫后１ｄ即可测到ＣＡｇ，未治疗组兔血清ＣＡｇ于感染后４ｄ开始升高，７ｄ急剧上升达峰值，而后较快下降至低水平，到３０ｄ，只有部分兔血清ＣＡｇ开始转阴。而经Ａｒｔ治疗的动物，血清ＣＡｇ水平于感染后４ｄ即达高峰，然后很快下降，在７～２３ｄ相继全部转阴。另外，Ａｒｔ可１００％保护急性感染弓形虫兔免于死亡。表明检测ＣＡｇ有助于判断药物疗效，并提示Ａｒｔ可望成为治疗弓形虫病的有效药物     

高危新生儿及孕母弓形虫感染调查及随访

目的：调查本地区高危新生儿母婴弓形虫感染率，并通过治疗后随访了解其生命质量。方法：采用ＥＬＩＳＡ方法同时检查９０例高危新生儿及其孕母血清循环抗土地改革是性抗体ＩｇＭ和ＩｇＧ。对阳笥高危新生儿予以螺肇霉素治疗。治疗结束后复查血清循环抗原（ＣＡＧ）特异性ＬｇＭ和ＬｇＧ并于３月、６月、２岁随访，常规体格检查，丹佛氏智测及眼底生儿其母组阳性率３．３６％，低于高危新生儿组，６例阳性患儿治疗后复查Ｇ display     

抗B-CLL Id x抗CD3双特异性抗体的制备及其特性研究

应用无筛选标记细胞株杂交瘤·杂交瘤细胞直接融合法制备了２株分泌抗慢性Ｂ淋巴细胞白血病（Ｂ－ＣＬＬ）Ｉｄｘ抗ＣＤ３双特异性抗体（ＢｓＡｂ）的四价体瘤细胞株。采用间接ＥＬＩＳＡ试验与间接免疫荧光试验证明了该ＢｓＡｂ能分别与Ｂ－ＣＬＬ患者血清及带ＣＤ３标记的细胞特异性结合,经细胞结合试验证明该ＢｓＡｂ同时具备与Ｉｄ及ＣＤ３两种抗原结合能力,经酶桥联法证明该ＢｓＡｂ亚类为ＩｇＧ１×ＩｇＧ２ａ,用ＭＴＴ法证实ＢｓＡｂ能诱导Ｔ细胞活化增殖     

幽门螺杆菌感染患者血清可溶性粘附分子1研究

采用ＥＬＩＳＡ法检测了 2 0 5例慢性胃病患者血清ｓＩＣＡＭ 1(ＳｏｌｕｂｌｅＩｎｔｅｒｃｅｌｌｕｌａｒＡｄｈｅｓｉｏｎＭｏｌｅｃｕｌｅ 1,ｓＩＣＡＭ 1)水平 ,收集因上消化道症状来本院作胃镜检查的慢性胃病患者 2 0 5例 ,年龄 2 1～ 70岁 ,平均年龄 4 5 .4 3± 12 .2 4岁 ,男 132例 ,女 73例 ,诊断均经电子胃镜及病理学检查确诊。其中慢性浅表性胃炎 5 4例 ,慢性萎缩性胃炎 10 9例 ,消化性溃疡 4 2例。每例经尿素酶试验、14Ｃ 尿素呼气试验、幽门螺杆菌 (Ｈｐ)ＩｇＧ抗体检测和血清ｓＩＣＡＭ 1检测。上述四项Ｈｐ检测至少两项阳性…     

McAb检测囊虫病人循环抗原的研究

应用ＭｃＡｂ双抗体夹心－ＥＬＩＳＡ检测脑囊虫病人血清和脑脊液（ＣＳＦ）中循环抗原（ＣＡＧ）。血清经ＰＥＧ沉淀浓缩沸浴和ＣＳＦ经沸浴处理后，ＣＡｇ的阳性率分别为９２．７３％和９０．７４％，总阳性率为９２．０７％，灵敏度６８．７ｎｇ／ｍｌ。对照组中除２例包虫病人血清有交叉反应外，其余均为阴性。平行检测病人ＣＳＦ的ＣＡｇ和ＣＡｂ，以及同步检测血清和ＣＳＦ中的ＣＡｇ，表明它们之间有互补和相互验证的作用，可提高阳性率。对囊虫病人治疗前后血清ＣＡｇ的动态检测，表明血清ＣＡｇ的阴转率随疗程的增加而提高。这些结果说明ＣＡｇ检测不仅可用于囊虫病的诊断，而且可作为疗效考核的重要手段。也说明ＭｃＡｂ双抗体夹心ＥＬＩＳＡ检测ＣＡｇ具有敏感性高、特异性强、重复性好等优点。     

Epstein-Barr病毒壳抗原的纯化及其在检查血清抗体中的应用

为了建立纯化Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒｒ（ＥＢ）病毒壳抗原（ＥＢＶ－ＶＣＡ）的方法，用于酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测人血清中的相关抗体，我们用重组昆虫病毒在感染的ｓｆ９细胞中表达ＥＢＶ－ＶＣＡ。感染的细胞经裂解后，层析纯化表达产物。用纯化的ＶＣＡ作为抗原包被ＥＬＩＳＡ板或硝基纤维膜，检查血清中ＶＣＡ／ＩｇＡ和ＶＣＡ／ＩｇＧ抗体，为ＥＢＶ感染的检测和ＮＰＣ的诊断发展了一个敏感、特异和简便的方法。     

Epstein—Barr病毒壳抗原的纯化及其在检查血清抗体…

为了建立纯化Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒｒ（ＥＢ）病毒壳抗原（ＥＢＶ－ＶＣＡ）的方法，用于酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测人因清中的相关抗体，我们用重组昆虫病毒在感染的ｓｆ９细胞中表达ＥＢＶ－ＶＣＡ。感染的细胞经裂解后，层析纯化表达产物。用经的ＶＣＡ作为抗原包虫被ＥＬＩＳＡ板或硝基纤维膜，检查血清中ＶＣＡ／ＩｇＡ和ＶＣＡ／ｇＧ抗体，为ＥＢＶ感染的的检测和ＮＰＣ的诊断发展了一个敏感、特异和简便的方法。