益气活血复方抗家兔血吸虫病肝纤维化研究

21只家兔随机分为正常对照组、中药治疗组及病理对照组各7只。治疗组经吡喹酮杀虫后,用益气活血口服液灌服3个月。结果发现该方对阻止肝门静脉主干直径继续扩大、改善肝组织病理、抑制贮脂细胞向成纤维细胞转化及 NAG 活性、减少肝胶原蛋白含量、提高肝胶原酶活力及促进肝胶原降解等具有较好效果.     

软肝片对中毒性肝纤维化大鼠的影响

利用CCl_4损伤性肝纤维化模型进行体内动物实验,观察选用莪术、鳖甲、三七、黄芪等中药组成的软肝片对胶原代谢的影响,结果表明该药可增强胶原酶活力,促使新增生胶原降,尤其是粗胶原纤维即Ⅰ型胶原的降解,阻断肝组织、血清中胶原的增加,尤其是Ⅰ型胶原的增加,使胶原Ⅰ/Ⅱ值在Ⅰ上下;对已形成的纤维化有溶解、吸收作用。     

促肝细胞DNA合成刺激因子对大鼠肝纤维化的影响

目的:观察促肝细胞DNA合成刺激因子(HDSSF)抗肝纤维化作用,探讨其可能的作用机理。方法:采用复合病因法构建大鼠肝纤维化模型,以HDSSF作为治疗药物,实验第10周末取各组大鼠肝组织:①病理检查;②测肝组织内羟脯氨酸(Hyp)含量;③用Nonhern印迹法检测Ⅰ、Ⅲ型前胶原及胶原酶mRNA水平。结果:HDSSF可明显改善肝组织的变性、坏死及纤维化程度,可使肝组织Hyp含量明显下降,并可在减少Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达的同时,增强胶原酶mRNA表达。结论:HDSSF有明显的抗肝纤维化作用,其机理除可减少胶原的合成外,还可能与促进胶原降解有关。     

肝纤维化时胶原降解酶活性变化的研究

通过溶液法检测不同肝纤维化时期鼠肝组织匀浆胶原酶（ｃｏｌｌａｇｅｎａｓｅ）的活性变化，以及血清Ｎ－乙酰β－Ｄ氨基葡萄糖苷酶（β－ＮＡＧ）和甘氨酰脯氨西酸二肽酶（ＧＰＤＡ）的活性变化，结合电镜和免疫组化等方法，观察肝纤维化时胶原降解酶活性变化与肝组织病理关系。结果显示随着肝纤维化病程的进展，胶原酶的活性在肝纤维化进入肝硬化的活动期状态较正常对照组有明显增高（Ｐ＜０．０５），而β－ＮＡＧ和ＧＰＤＡ在肝纤维化过程中活性以肝纤维化早期最明显（改正常对照分别为Ｐ＜０．０５和Ｐ＜０．０１）。同时组织病理也随着病程进展，Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原在肝内沉积，肝窦基底膜破坏，连续性基底膜的形成都与胶原降解酶的活性变化密切相关。     

复方益气活血化瘀中药对大鼠肝纤维化组织中胶原和转化生长因子β1表达的影响

目的应用二甲基亚硝胺（DMN）建立肝纤维化大鼠模型,研究以黄芪、丹参、三七为主的益气活血化瘀复方中药抗肝纤维化的作用机制。方法将Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、中药干预组。采用DMN腹腔内注射的方法建立肝纤维化大鼠模型;根据病理学检查评价各组动物肝纤维化程度;应用RT-PCR检测各组肝组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原和TGF-β1mRNA水平;应用免疫组化检测各组肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原和TGF-β1的表达。结果中药干预组大鼠肝纤维化程度、肝组织中Ⅰ型与Ⅲ型胶原和TGF-β1mRNA水平,以及肝组织中Ⅰ型与Ⅲ型胶原和TGF-β1的阳性表达均分别较模型组显著减轻与下降。结论益气活血化瘀复方中药能明显减轻肝组织病理改变和肝纤维化程度,抑制Ⅰ、Ⅲ型胶原和TGF-β1表达是其抗肝纤维化的部分机制。     

PTEN在CCl_4诱导肝纤维化大鼠模型中的作用及益气活血方对其的影响

目的探讨第10号染色体缺失性磷酸酶张力蛋白同原物基因(PTEN)在CCl_4诱导肝纤维化大鼠模型中的作用,阐明益气活血方调节PTEN阻止肝纤维化的分子机制。方法选用27只Wistar雄性大鼠,随机分为3组,每组9只。其中肝纤维化组以CCl_4诱导建立肝纤维化模型;益气活血方组在CCl_4造模同时自拟以黄芪、丹参、云苓等中药为主的益气活血方进行干预实验;对照组以橄榄油腹腔注射。HE染色、Masson染色及胶原(Col1A1和Col4)免疫组化染色观察不同组别大鼠肝纤维化及胶原沉积程度;qRT-PCR、免疫组化及Western Blot检测TGFβ1、PTEN及其下游基因AKT、mTOR及p70S6K表达。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果肝纤维化组大鼠肝组织病理学可见窦周纤维化、汇管区纤维组织增生及胶原沉积、纤维间隔形成,伴随促肝纤维化基因TGFβ1 mRNA及蛋白表达上调,PTEN表达下调,而PTEN下游信号因子AKT、mTOR、p70S6K mRNA及磷酸化蛋白表达上调,与对照组比较差异均有统计学意义(P值均0.01)。应用益气活血方组大鼠肝纤维化显著改善,PTEN表达较肝纤维化组明显增加(P0.01),TGFβ1 mRNA及蛋白表达明显抑制(P值均0.05),AKT、mTOR及p70S6K的mRNA及磷酸化蛋白表达较肝纤维化组明显减少(P值均0.05)。结论益气活血方可能通过调节PTEN及其下游信号因子的表达,阻止及逆转肝纤维化。     

桃仁提取物合虫草菌丝治疗血吸虫病肝纤维化的研究

应用桃仁捉取物合虫草菌丝治疗血吸虫病肝纤维化。治后,肝纤维化获得较明显的逆转,免疫功能、临床与病理也明显改善。其机理可能是桃仁提取物提高了肝组织胶原酶的活性,从而促进肝内胶原分解,使纤维化自行降解。免疫功能则可能与虫草菌丝作用有关。     

软肝缩脾丸对肝纤维化大鼠TIMP-1、2及工、Ⅲ型胶原mRNA及蛋白表达的影响

目的观察软肝缩脾丸对纤维化大鼠肝脏基质金属蛋白酶组织抑制因子-1、2(TIMP-1、TIMP-2)及Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA及蛋白表达的影响,从胶原降解的角度探索中药抗肝纤维化的可能机理.方法制备大鼠肝纤维化模型,并给予软肝缩脾丸治疗;用原位杂交和免疫组化的方法分别测定TIMP-1、TIMP-2及Ⅰ、Ⅲ型胶原的mRNA和蛋白表达.结果CC14模型组TIMP1、TIMP-2,Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA及蛋白水平明显高于治疗组.正常组大鼠肝组织无一例阳性.结论TIMP-1、TIMP-2与肝纤维化形成密切相关,软肝缩脾丸可以抑制纤维化肝脏TIMP-1、TIMP-2的表达,从而增强间质胶原酶的活性,促进Ⅰ、Ⅲ型胶原的降解,产生抗肝纤维化作用.     

正肝化瘀方对肝纤维化大鼠肝组织脂质过氧化的影响

[目的]观察正肝化瘀方对肝纤维化大鼠肝组织脂质过氧化的影响.[方法]36只SD大鼠随机分为正常组、模型组、治疗组,模型组、治疗组采用四氯化碳复合因素诱导大鼠肝纤维化模型.治疗组以正肝化瘀方灌胃,模型组、正常组同时以等量0.9％氯化钠灌胃.6周末,麻醉后开腹摘取肝、脾脏,天狼星红染色观察肝组织胶原沉积程度,比色法检测肝组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)活力和丙二醛(MDA)含量.[结果]模型组SOD、GSH活力明显下降,MDA含量明显增加;治疗组SOD、GSH活力较模型组有明显提高,MDA含量有所下降;2组比较,差异有显著性意义(P＜0.05).[结论]正肝化瘀方有抗脂质过氧化、减轻肝细胞损害及其脂肪变性的作用,其抗肝纤维化机制与通过脂质过氧化作用、促进自由基清除、减少胶原合成与沉积有关.     

软肝缩脾丸对肝纤维化大鼠TIMP-1、2及Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA及蛋白表达的影响

目的　观察软肝缩脾丸对纤维化大鼠肝脏基质金属蛋白酶组织抑制因子 -1、2 (TIMP -1、TIMP -2 )及Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA及蛋白表达的影响 ,从胶原降解的角度探索中药抗肝纤维化的可能机理。方法　制备大鼠肝纤维化模型 ,并给予软肝缩脾丸治疗 ;用原位杂交和免疫组化的方法分别测定TIMP -1、TIMP -2及Ⅰ、Ⅲ型胶原的mRNA和蛋白表达。结果　CCl4模型组TIMP -1、TIMP -2 ,Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA及蛋白水平明显高于治疗组。正常组大鼠肝组织无一例阳性。结论　TIMP -1、TIMP -2与肝纤维化形成密切相关 ,软肝缩脾丸可以抑制纤维化肝脏TIMP -1、TIMP -2的表达 ,从而增强间质胶原酶的活性 ,促进Ⅰ、Ⅲ型胶原的降解 ,产生抗肝纤维化作用。     

扶正化瘀方对二甲基亚硝胺大鼠纤维肝原代贮脂细胞形态及功能的影响

制备二甲基亚硝胺大鼠肝纤维化模型，体内给予扶正化瘀方治疗后，分离培养纤维肝原代贮脂细胞，通过相差显微镜、［~3H］TdR掺入、［~3H］Proline掺入及胶原酶消化法等观察该方对纤维肝贮脂细胞形态及细胞增殖、活力与胶原生成率等功能的影响。结果表明：该方对纤维肝贮脂细胞形态及活动力无明显影响，而显著抑制其细胞增殖及胶原生成率。提示该方抗肝纤维化的主要作用机理之一在于抑制贮脂细胞的病理学增生及其细胞外基质生成。     

复方861对大鼠肝星状细胞胶原合成及降解干预作用的体外研究

目的深入研究中药复方861抗肝纤维化的机理。方法向传一代肝星状细胞培养液中加入终浓度为10mg／ml的复方861作用48小时,收获细胞培养液观察Ⅰ,Ⅲ,Ⅳ型胶原及TGFβ1的分泌量并测定胶原酶活性;收获肝星状细胞并提取总RNA,斑点杂交法检测胶原、胶原酶及其抑制TIMP1mRNA水平的变化。结果复方861可明显抑制肝星状细胞Ⅰ,Ⅲ,Ⅳ型胶原及TGFβ1mRNA的表达及相应蛋白的分泌,同时可提高间质性胶原酶的活性并抑制TIMP1mRNA的表达。结论复方861在抑制胶原过度合成的同时,又可促进胶原的降解,从而使二者间的失衡得以纠正,达到抗肝纤维化的目的。     

肝纤维化血清学诊断进展

肝纤维化的血清学诊断方法近年来发展迅速。本文综述了近年来建立的一些主要肝纤维化血清学诊断指标,并对其诊断价值进行了评估。其中N—乙酰—β—氨基葡萄糖苷酶(β—NAG)及同功酶、PⅢP、Ⅰ型及Ⅳ型胶原、层粘连蛋白(LN)、透明质酸(HA)等在肝纤维化早期即可升高,有较大的测定意义。尤其是LN除能反映早期肝纤维化外,还对门静脉高压有预测价值。几项指标联合检测可以提高肝纤维化的检出率。     

软肝缩脾丸对肝纤维化大鼠TIMP—1、2及Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA及蛋白表达的影响

目的 观察软肝缩脾丸对纤维化大鼠肝脏基质金属蛋白质酶组织抑制因子－1、2（TIMP－1、TIMP－2）及Ⅰ、Ⅲ型胶原mRAN及蛋白表达的影响,从胶原降解的角度探索中药抗肝纤维化的可能机理。方案 制备大鼠纤维化模型,并给予软肝缩脾丸治疗;用原位杂交和免疫组化的方法分别测定TIMP－1、TIMP－2及Ⅰ、Ⅲ型胶原的mRAN和蛋白表达。结果 CCl4模型组TIMP－1、TIMP2,Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA及蛋白水平明显高于治疗组。正常组大鼠肝组织无一例阳性。结论 TIMP－1、TIMP－2与肝纤维化形成密切相关,软肝缩脾丸可以抑制纤维化肝脏TIMP－1、TIMP－2的表达,从而增强间质胶原酶的活性,促进Ⅰ、Ⅲ型胶原的降解,产生抗肝纤维化作用。     

复方红景天干预大鼠肝纤维化作用的实验研究

目的：从血清、组织、分子等水平探讨复方红景天抗大鼠肝纤维化的作用及其可能的机制，为抗肝纤维化研究提供新的选择。方法：用四氯化碳皮下注射法诱导SD大鼠肝纤维化模型，同时给予复方红景天颗粒口服进行干预性治疗，观察大鼠肝功能，血清纤维化相关酶活性ALT、AST、β-NAG、MAO，血清肝纤维化指标PCⅢ、CIV、HA以及肝组织羟脯氨酸含量和病理学变化，同时检测复方红景天对大鼠肝组织TGF β1、I型前胶原mRNA表达水平的影响。结果：口服复方红景天可改善大鼠肝功能，降低血清PCⅢ、CⅣ、HA水平，抑制β－NAG、MAO的活性，降低肝组织羟脯氨酸含量，明显改善大鼠肝组织病理变化，并降低大鼠肝组织TGFβ、I型前胶原mRNA的表达水平。结论：复方红景天可能通过抑制TGF β1、I型前胶原mRNA的表达从而减少胶原合成、保护肝细胞等机制有效干预CC14诱导的大鼠肝纤维化，值得深入研究。     

人参皂苷Rg1对纤维化肝脏肝细胞超微结构及其表达基质金属蛋白酶组织抑制剂-1的影响

基质金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP)-1随肝纤维化病情的发展表达增强,与基质金属蛋白酶(MMP)-1特异性结合,使间质胶原酶活性下降,造成细胞外基质(ECM)沉积增加,促进肝纤维化进一步发展.三七可以增强胶原酶活力,降解肝内的Ⅰ、Ⅲ型胶原,其发挥作用的主要成分为三七总甙~([1]);而三七总甙是一种混合物,含人参皂苷共7种,人参皂苷Rgl为其中主要成分之一.前期研究表明,人参皂苷Rg1对肝纤维化有明显的治疗作用~([2]).本研究通过RT-PCR检测人参皂苷Rg1对CCl_4所致肝纤维化模型大鼠肝组织TIMP-1mRNA及Ⅰ型胶原mRNA表达的影响,以探讨其抗肝纤维化的可能机制.     

虫草多糖脂质体对大鼠肝纤维化的胶原酶mRNA影响的研究

采用小剂量虫草多糖脂质体(虫草多糖量为15mg/100g,隔日一次)治疗CCI_4大鼠肝纤维化10周。运用地高辛自由引物法标记的1.7kb胶原酶探针行点渍印迹杂交检测大鼠肝组织中的胶原酶mRNA含量。结果表明:小剂量虫草多糖脂质体治疗组的大鼠肝组织中胶原酶mRNA含量非常显著高于非治疗组(P<0.01)。提示小剂量虫草多糖脂质体通过增加肝组织胶原酶mRNA的表达、促使Ⅰ,Ⅲ型胶原降解可能是抗纤维化的主要机制之一。     

实验性肝纤维化大鼠Ⅳ型胶原酶的表达

肝纤维化是以胶原为中心的细胞外基质(ECM)在肝脏异常的沉积。这种异常的沉积,更大程度是由于降解的绝对或相对减少而引起的。肝纤维化时,在ECM降解过程中起主导作用是基质金属蛋白酶(MMPs)。Ⅳ型胶原酶(MMP-2)是特异性Ⅳ型胶原降解酶,与肝纤维化的形成有关。现以四氯化碳(CCl4)大鼠肝纤维化模型,采用northern印迹杂交,明胶酶谱     

金属蛋白酶组织抑制因子1与肝纤维化

近年来,有关胶原降解方面的改变在肝纤维化形成中的作用日益引起重视。金属蛋白酶组织抑制因子(ｔｉｓｓｕｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｏｆｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ,ＴＩＭＰ)是一组胶原酶抑制物,通过与相应的胶原酶结合而抑制其对胶原的分解。ＴＩＭＰ1主要特异性地结合激活的间质胶原酶(ｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ1,ＭＭＰ1),从而抑制其对Ⅰ、Ⅲ型胶原的降解[1]。肝脏星形细胞(ｈｅｐａｔｉｃｓｔｅｌｌａｔｅｃｅｌｌｓ,ＨＳＣ)在体外培养时能够表达和分泌ＴＩＭＰ1[2]。为了研究ＴＩＭＰ1在肝纤维化过程中…     

血清Ⅳ型胶原对肝纤维化的诊断价值

本文采用双抗体夹心固相酶免疫法检测１５３例不同肝病患者的血清Ⅳ型胶原。结果显示，各种肝病的血清Ⅳ型胶原均有不同程度的升高，其中６９．２％慢迁肝、８４％慢活肝及９５．４５％肝硬化患者血清Ⅳ型胶原含量明显高于正常对照组。肝硬化患者血清Ⅳ型胶原平均值与其他各组比较均有显著性升高。慢活肝、慢迁肝与急黄肝及对照组比较有显著性差异。提示血清Ⅳ型胶原测定可作为判断肝纤维化或肝硬化的较好指标。