高效毛细管电泳法测定人血浆育亨宾浓度

目的 建立非水毛细管电泳法(NCAE) 测定人血浆育亨宾浓度的新方法 . 方法 运用非水毛细管电泳方法 , 熔融石英毛细管(75 μm ×50 cm) , 缓冲液为30 mmol•L 1醋酸铵的甲醇 乙腈液(4：1, V/V, 含1%冰醋酸), 检测波长：220 nm , 分离电压：25 kV, 柱温25 ℃, 用0.45 μm微孔滤膜过滤后进样, 压力进样：50 kPa×5 s, 采用峰面积内标法定量. 结果方法 最低检测浓度为0.01 μg•mL 1, 线性范围0.054 8～5.480 0 μg•mL 1, r＝0.999 1 , 线性关系良好. 日内RSD 为2.81%～5.22%, 日间RSD 为4.72%～6.52%. 结论该方法 测定人血清中育亨宾含量快速、准确和灵敏.     

左旋单甲基精氨酸对大鼠肾小球清蛋白通透性的影响

目的探讨一氧化氮(NO)合成酶抑制药对大鼠体外肾小球清蛋白通透性的影响及可能的作用机制。方法用标准筛技术游离正常雄性SD大鼠肾小球,应用视频显微术通过肾小球体积变化计算肾小球清蛋白的通透性（Palb）。大鼠体外肾小球分别与不同浓度（0.5,1.0,2.0 mmol•L 1）NO 单甲基 L 精氨酸(L NMMA)培养30 min;与2.0 mmol•L 1L NMMA培养不同时间（15,30,45 min）。体外肾小球与2.0 mmol•L 1L NMMA及500 μmmol•L 1NO供体diethylenetriamine NONOate（DETA NONOate)培养45 min;与2.0 mmol•L 1L NMMA 及5 mmol•L 1超氧化物歧化酶（SOD）培养45 min。观察不同情况下Palb。结果与对照组比较,大鼠体外肾小球与0.5 mmol•L 1L NMMA培养30 min对Palb无明显影响,与1.0或2.0 mmol•L 1L NMMA培养导致Palb显著增加（P＜0.01）,且2.0 mmol•L 1L NMMA对Palb影响更为显著。体外肾小球与2.0 mmol•L 1L NMMA培养15,30,45 min,Palb均较对照组明显增加（均P＜0.01）,且随时间延长Palb逐渐增加,培养45 min时Palb最大。体外肾小球与L NMMA及DETA NONOate一起培养45 min,Palb无明显增加;与L NMMA及SOD一起培养45 min,Palb亦无明显增加。结论 NO是肾小球清蛋白滤出的调节因子,生成减少导致Palb增加,过氧化物活性可能参与NO合成酶抑制药引起的清蛋白排泄增加。     

液相色谱-串联质谱法测定人血浆苯磺酸氨氯地平与阿托伐他汀钙浓度

［摘要］目的建立同时测定人血浆苯磺酸氨氯地平与阿托伐他汀钙的液相色谱 串联质谱（LC MS/MS）检测方法。方法以尼莫地平为内标,血浆样品采用甲基叔丁基醚提取,色谱柱为Agilent TC C18 柱（150 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为乙腈：5.0 mmol•L 1醋酸铵缓冲液（pH值=4.0）（25：75,V/V）;流速0.25 mL•min 1;苯磺酸氨氯地平、阿托伐他汀钙和内标尼莫地平分别选择m/z 409.1→238.0,559.2→440.2,419.1→343.1。结果苯磺酸氨氯地平与阿托伐他汀钙在0.05～20.00 μg•L 1范围内均线性关系良好,加样浓度分别为0.1, 2.0 ,18.0 μg•L 1时,样品提取回收率分别为76.78%,77.08%,76.27%与80.16%,79.69%,81.82%,日内和日间RSD均＜15%。结论该方法灵敏度高,操作简便、快速,适用于苯磺酸氨氯地平与阿托伐他汀钙临床药动学的研究。     

固相萃取离子色谱法测定反义寡核苷酸药物杂质

目的建立同时测定寡核苷酸原料药中杂质醋酸（MCAA）、二氯乙酸（DCAA）、氯离子（Cl－）含量的固相萃取离子色谱（IC）法。方法Ionpac AS 23（4 mm×250 mm）分析柱;Ionpac AG 23（4 mm×50 mm）保护柱;流动相：0.8 mmol•L－1 碳酸氢钠/4.5 mmol•L－1碳酸钠;抑制型电导检测器。结果MCAA、DCAA和Cl－的标准曲线方程分别为：Y＝ 5.230 7X + 0.014 （r＝0.999 7）,Y＝ 19.762X－0.007 2 （r＝0.999 9）和Y＝507.4X－0.746 2 （r＝0.999 8）;MCAA在0.002～0.400 μg•mL－1浓度范围内呈良好的线性关系,DCAA在0.000 624～0.156 μg•mL－1浓度范围内呈良好的线性关系,Cl－在2.4×10－3～1.5 mg•mL－1浓度范围内呈良好的线性关系,其检测限分别为0.02,0.312 ng•mL－1和0.01 μg•mL－1。结论该方法操作简便、快速,结果准确,可用于反义寡核苷酸原料药中杂质的控制。     

大鼠烯丙基半胱氨酸浓度的测定及组织分布

目的 建立高效液相色谱法测定血清和组织烯丙基半胱氨酸（SAC）浓度的 方法 , 并进行组织分布研究. 方法 采用Hypersil ODS2 色谱柱, 以50 mmol•L^-1 醋酸盐缓冲液 （pH 5.8 ）：甲醇：乙腈（50：22：28）为流动相; 柱温为35 ℃ , 荧光检测激发波长为350 nm , 发射波长为455 nm.样品的预处理后邻苯二甲醛（OPA）-2-巯基乙醇柱前衍生; 进样10 μL. 结果 血清样品在2～120 mg•L^-1浓度范围内, 线性关系良好; 组织样品在2～120 mg•g^-1浓度范围内, 线性关系良好.低、中、高3种浓度的萃取回收率为70.9%～83.5%; 相对回收率为90.2%～110.0%; 日内、日间RSD为4.1%～7.7%.肾脏达峰浓度Cmax为65.7 mg•kg^-1, 肝脏为58.1 mg•kg^-1, 脾脏为51.3 mg•kg^-1, 心脏为43.3 mg•kg^-1, 肺为35.1 mg•kg^-1, 脑组织为26.7 mg•kg^-1 ; 各组织AUC _0~8肾脏为171.9 mg•h•kg^-1, 心脏为113.9 mg•h•kg^-1, 肝脏为107.2 mg•h•kg^-1, 脾脏为90.4 mg•h•kg^-1, 肺为93.6 mg•h•kg^-1,脑组织为79.8 mg•h•kg^-1. 结论 该法简便、快速、准确、灵敏、选择性强, SAC在大鼠体内分布广泛, 其中肾脏分布较多, 而在脑组织中分布较少.     

反相高效液相色谱法测定比伐卢定的含量及有关物质

目的 建立反相高效液相色谱（RP-HPLC）法测定比伐卢定的含量及有关物质. 方法 以Diamonsil C18色谱柱（250 mm×4.6 mm, 5 μm）, 5 mmol•L-1 磷酸二氢钾（磷酸溶液调pH值至2.5）-乙腈（80：20）为流动相, 流速为1 mL•min-1, 检测波长为210 nm. 结果 比伐卢定在20.2～181.8 μg•mL-1浓度范围内线性良好, r＝0.999 9, 最低检测限为20 ng. 结论 该法操作简便、结果 准确, 可用于测定比伐卢定的含量及有关物质检查.     

非水毛细管电泳法测定甲磺酸酚妥拉明注射液中主药含量

目的建立快速测定甲磺酸酚妥拉明含量的非水毛细管电泳法 （NACE）。方法熔融石英毛细管（50 μm×50 cm）,缓冲液为60 mmol•L－1乙酸 1.5%醋酸 20%乙腈（78.5：1.5：20.0）的甲醇液,检测波长220 nm,分离电压25 kV,柱温25 ℃,用孔径0.45 μm微孔滤膜过滤后进样,压力进样：50 kPa×3 s。结果甲磺酸酚妥拉明法最低检测浓度为0.1 μg•mL－1,线性范围1～50 μg•mL－1,r＝0.999 7,线性关系良好。平均加样回收率98.03%,RSD为1.54%。结论NACE法可作为甲磺酸酚妥拉明的种快速测定方法。     

反相高效液相色谱法测定盐酸鲁拉西酮有关物质

目的建立测定盐酸鲁拉西酮有关物质的反相高效液相色谱法。方法使用YMC Pack Pro C18柱（150 mm×6.0 mm,5 μm）,流动相为甲醇 5 mmol•L－1磷酸氢二铵溶液［用稀磷酸调pH至7.0］（85：15）,检测波长为230 nm,流速为1.0 mL•min－1。结果盐酸鲁拉西酮与中间体和降解产物在上述色谱条件下能有效分离,且在2.772～1 108.800 μg•mL－1范围内线性关系良好（r＝0.999 9）。结论该方法测定结果准确,操作简单,灵敏度高,专属性强,可用于盐酸鲁拉西酮的有关物质检查。     

高效液相色谱法测定1,4-丁烷二磺酸腺苷蛋氨酸原料及制剂中的有关物质

目的 建立高效液相色谱（HPLC）法同时测定1,4-丁烷二磺酸腺苷蛋氨酸原料及注射用灭菌粉末中4种有关物质. 方法 色谱柱：Supelcosil LC-SCX强阳离子交换色谱柱（4.6 mm × 250 mm,5 μm）,流动相：0.1 mol•L^-1甲酸铵溶液（用甲酸调节pH值至2.8）,柱温：30 ℃,流速：1.0 mL•min-1,检测波长：260 nm. 结果 1,4-丁烷二磺酸腺苷蛋氨酸峰与各杂质峰均能良好分离. 杂质腺苷、腺嘌呤、S-腺苷-L-高半胱氨酸和甲硫腺苷的浓度分别在0.96 ～ 19.27,0.95 ～ 18.93,1.03 ～ 20.64和2.11 ～ 42.16 μg•mL^-1范围内与峰面积呈良好的线性关系,回收率分别为100.6%,100.1%,98.2%和99.3%,RSD分别为1.3%,0.8%,0.5%和1.1%（n＝12）. 结论 该方法灵敏、准确,专属性好,可用于1,4-丁烷二磺酸腺苷蛋氨酸原料和制剂中有关物质的检查.     

他克莫司致高钾血症1例

患者,男,50岁。因“肾移植手术后1个月余,血钾升高8 h”于2011年6月1日入院。既往史：因“慢性肾功能不全尿毒症期”于2011年4月22日行同种异体肾移植术,手术后恢复良好,出院后给予常规三联免疫抑制疗法：他克莫司3 mg,bid;麦考酚吗乙酯500 mg,bid,po;泼尼松龙30 mg,qd,po。既往高血压史20年,口服硝苯地平30 mg,bid。入院体检：体温 36.5 ℃,脉搏 74次•min－1,呼吸率 20次•min－1,血压 152/94 mmHg（1 mmHg＝0.133 kPa）。实验室检查：血肌酐 286 μmol•L－1,血尿素氮24.3 mmol•L－1,丙氨酸氨基转移酶 27 U•L－1,白细胞3.15×109•L－1,血钾8.2 mmol•L－1。给予血液透析治疗。6月2日血钾6.9 mmol•L－1。怀疑血钾升高为他克莫司引起,于6月3日停服他克莫司,改服环孢素150 mg,bid,po。6月5日血钾5 mmol•L－1。7月30日血钾4.4 mmol•L－1。未再发现血钾升高。