固相酶色谱法用于熊胆、蛇胆等成分差异的比较

市售的熊胆固原动物稀少而价格很高,加之动物胆都具有很强的苦味,故容易造假和掺假。本文采用3α-羟基类固醇脱氨酶为填料的固相酶色谱法,可同时分离测定结合型胆酸和游离胆酸,该方法对于熊胆的鉴别及质量评价是一个有效的手段。一、仪器装置和条件     

高速逆流色谱法提取分离天然产物中生物碱的应用

生物碱类化合物在植物中广泛存在，具有一系列药理活性，并已被广泛用于治疗各种疾病。由于生物碱通常存在于多组分混合物中且含量较低，较难通过传统方法进行提取分离。高速逆流色谱法是一种不存在固态支撑相的液-液色谱技术，具有进样量大、成本低、不存在不可逆吸附等优势。相比于传统的生物碱提取分离方法，高速逆流色谱法可选的溶剂体系和洗脱模式可以保证一次性分离多种不同极性生物碱，可实现生物碱类化合物的高回收及大量制备。该研究通过借鉴相关文献，讨论了高速逆流色谱(HSCCC)相比于传统分离手段的优缺点，并对近年来采用高速逆流色谱法分离生物碱类化合物所用的溶剂系统和洗脱模式进行了总结，旨在为生物碱类化合物的高速逆流色谱分离提供一些参考。     

25个牛黄样品胆汁酸的多组分含量研究

本研究采用反相高效液相色谱法，以甲醇：水（７５：２５）为流动相，对牛黄的甲醇提取液直接进样分析，一次进样即能分离游离型胆酸（ＣＡ），去氧胆酸（ＤＣＡ），鹅去氧胆酸（ＣＤＣＡ）以及结合型甘氨酸胆酸（ＧＣＡ）。方法简便易行，回收率好。     

HPLC法测定灌胃虎杖提取物大鼠粪便及尿液中大黄素和大黄素甲醚

蒽醌类化合物具有消炎、抗菌、致泻、利尿以及抗肿瘤、抗病毒等作用，是大黄、虎杖、何首乌、决明子等中药的主要活性成分。蒽醌类化合物有游离型和结合型两种存在形式。结合型蒽醌不吸收，在肠道内被细菌代谢后产生泻下作用，因此结合型蒽醌在肠道内的吸收、代谢与其药动学有关。已有的药动学研究均为测定血清或血浆中的蒽醌类成分，由于代谢物中成分复杂，干扰较多，因此本实验建立了测定大鼠灌胃虎杖提取物后的粪便和尿液中的游离型和结合型大黄素总量的非水反相液相色谱法。     

微柱离心-HPLC测定胰岛素脂质体的包封率

目的使用微柱凝胶离心分离结合高效液相色谱法(HPLC)定量的方法,建立胰岛素脂质体包封率的测定方法。方法采用了改良的薄膜分散法来制备胰岛素脂质体。使用Sephadex G-50填充凝胶离心微柱,分别使用去离子水及磷酸缓冲液作为洗脱液,分离载药脂质体和游离胰岛素后,经HPLC测定胰岛素浓度并计算包封率。结果通过洗脱曲线确定了洗脱方式,上样体积为600μL,使用去离子水洗脱5次(每次600μL)可将载药脂质体完全洗脱,再使用pH 7.4磷酸盐缓冲液洗脱6次可将其中的游离药物完全洗脱。实现了完全分离载药脂质体与外水相游离药物,经HPLC测定并计算得出3批胰岛素脂质体的平均包封率为36.03%。结论对于亲水性多肽药物脂质体,微柱离心可以实现有效分离脂质体与游离药物的目的,结合HPLC测定其中胰岛素的含量,可以作为测定胰岛素脂质体包封率的有效方法。     

微柱离心-HPLC测定胰岛素脂质体的包封率

目的使用微柱凝胶离心分离结合高效液相色谱法(HPLC)定量的方法,建立胰岛素脂质体包封率的测定方法。方法采用了改良的薄膜分散法来制备胰岛素脂质体。使用Sephadex G-50填充凝胶离心微柱,分别使用去离子水及磷酸缓冲液作为洗脱液,分离载药脂质体和游离胰岛素后,经HPLC测定胰岛素浓度并计算包封率。结果通过洗脱曲线确定了洗脱方式,上样体积为600μL,使用去离子水洗脱5次(每次600μL)可将载药脂质体完全洗脱,再使用pH 7.4磷酸盐缓冲液洗脱6次可将其中的游离药物完全洗脱。实现了完全分离载药脂质体与外水相游离药物,经HPLC测定并计算得出3批胰岛素脂质体的平均包封率为36.03%。结论对于亲水性多肽药物脂质体,微柱离心可以实现有效分离脂质体与游离药物的目的,结合HPLC测定其中胰岛素的含量,可以作为测定胰岛素脂质体包封率的有效方法。     

齐墩果酸脂质体包封率的测定

目的:建立齐墩果酸脂质体的包封率测定方法。方法:采用薄膜分散法制备脂质体,葡聚糖凝胶柱色谱法分离脂质体和游离药物,以蒸馏水和0.5%SLS为洗脱介质分别洗脱脂质体和游离药物,采用高效液相色谱法测定脂质体中齐墩果酸的含量。结果:齐墩果酸在0.302～30.2 mg·L-1,线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率为99.92%,RSD 1.59%;葡聚糖凝胶柱色谱法分离游离药物平均柱回收率为100.22%,RSD 1.23%,平均柱加样回收率为99.04%,RSD 0.99%;样品的平均包封率为83.4%。结论:齐墩果酸脂质体包封率测定方法准确可信,可用于测定齐墩果酸脂质体的包封率。     

HPLC测定2种大黄中4类功效组分含量

目的:建立用高效液相色谱法快速测定2种大黄游离型蒽醌、结合型蒽醌、番泻苷、鞣质单体4类14种与功效紧密相关组分含量方法,为全面评价大黄药材质量提供依据。方法:采用高效液相色谱法测定,Agilent Zorbax SB-C18色谱柱(4.6mm×250 mm,5μm);流动相Ⅰ:0.1%磷酸水-甲醇梯度洗脱,流动相Ⅱ:四氢呋喃-水-冰醋酸(2∶80∶1.5)与乙腈梯度洗脱,流动相Ⅲ:0.5%冰醋酸水-甲醇梯度洗脱;流速分别为1.0,0.8,1.0 mL.min-1,检测波长分别为254,350,270 nm,柱温25℃。结果:测定了两种大黄的4类功效组分含量,各组分均在30 min内均得到良好分离;不同成分在各自的线性范围内线性关系良好,平均回收率均在97.09%～103.2%,RSD均在0.15%～3.0%(n=6)。结论:方法简便、准确、重复性好,可作为大黄全面质量控制。     

3,4—二氯苯丙烯酰另丁胺对分离的神经细胞内游离钙离子的影响

目的 研究新的桂皮酰胺类化合物，３，４－二氯苯丙烯酰另丁胺（简称ＡＥＤ８８０１）对分离的神经细胞内游离钙离子的影响，方法 采用Ｃａ＾２＋指示剂Ｆｕｒａ－２作为细胞钙离子的荧光探针，利用ＲＦ－５０００型双波长荧光分光光度计检测分离的神经细胞内游离钙离子及其变化，并观测ＡＥＤ８８０１对静息态细胞内钙离子，高Ｋ＾＋去极化状态及ＮＭＤＡ刺激情况下的细胞内钙离子变化的影响。结果 在卢状态下，细胞内钙离子浓度     

高效液相色谱法测定护龄神及百令胶囊中腺苷的含量

采用高效液相色谱法测定护龄神及百令胶囊中腺苷的含量，并和传统的薄层分离洗脱，紫外分光光度法测定结果相比较，高效液相色谱法具有样品处理简单，测定迅速、准确，精密度高，重复性好等特点。本法测定回收率在98％以上。     

薄层扫描法测定葛根药材中葛根素含量

本实验采用薄层色谱法将葛根素与其它成分分离，然后应用双波长薄层扫描法来测定其含量，平均加样回收率98.72%，RSD=0.86%（n=5）。     

薄层扫描法测定蒙成药中胆酸的含量

采用双波长薄层扫描法测定蒙成药沙日·毛都－８中胆酸的含量。测定波长λｓ＝６００ｎｍ，参比波长λＲ＝４００ｎｍ，该法平均回收率９７．９４％，ＲＳＤ为０．７１％，实验方法操作简便，分析快速，准确可靠，重现性好。     

大孔树脂预分离─薄层光密度法测定疏肝止痛片中芍药甙含量

本文采用大孔树脂GDX104预分离，结合TLC双波长扫描，测定疏肝止痛片中芍药甙的含量。经对样品测定及稳定性、加样回收率考查，该方法准确，稳定，结果可靠。     

柱前衍生高效液相色谱法测定新疆金鸡菊中游离氨基酸

目的建立柱前衍生高效液相色谱法测定新疆金鸡菊中游离氨基酸。方法采用异硫氰酸苯酯为柱前衍生试剂,高效液相色谱法测定新疆金鸡菊中游离氨基酸的含有量。色谱柱为Shim-pack VP-ODS(5μm,250 mm×4.6mm),梯度洗脱,柱温35℃,UV 254 nm波长处检测。结果本方法测定18种氨基酸的线性范围分别为8～720μg/mL,r值均大于0.99;平均回收率分别为94.08%～105.3%。结论应用本法对新疆金鸡菊中的游离氨基酸进行测定,灵敏度高,结果准确可靠。     

RP-HPLC法分析不同种属和采集地点苔藓植物中双联苄类化合物成分

目的：建立一种反相高效液相色谱法以快速分析四种苔藓植物中双联苄类化合物, 并对不同种属不同采集地点的苔藓植物中双联苄类化合物进行分析比较, 以考察种属及采集地点对该类化合物的种类和含量影响。方法：采用 Hypersil C18柱（150 mm×4.6 mm,I.D. 5μm）分离, 以乙腈-水（各含0.05%甲酸）为流动相, 线性梯度洗脱,于280 nm波长下检测。结果：共检测出6种双联苄类化合物, 并且种属和采集地点差异对该类化合物的种类和含量有不同程度的影响。结论：建立了一种有效的分析及测定不同苔类植物中双联苄类化合物的方法,并可为苔藓植物化学成分研究提供参考信息。     

高效液相色谱法测定丹黄口服液中三种有效成分

 本文采用反相高效液相色谱法，以离子抑制技术分离了复方中成药制剂丹黄口服液中3种有效成分：黄岑甙、阿魏酸、丹参素。并用外标法测定了它们在丹黄口服液中的含量。     

清开灵注射液和珍珠母水解液中钙的测定及形态初探

目的：测定清开灵注射液（胆酸，珍珠母，水牛角，黄芩等）及其原料药材珍珠母水解液中游离钙和结合钙含量。方法：采用原子吸收分光光度法和离子色谱法进行钙含量的测定。结果：清开灵注射液及珍珠母水解液中都存在游离和结合两种状态的钙；分别在pH6.0,pH6.5,pH7.0下制备得到供试样品，清开灵注射液中结合钙与游离钙的比值分别为7.0（RSD为9.3%)，8.0(RSD为8.0%),12.1(RSD为9.2%)，珍珠母水解液中结合钙与游离钙的比值分别为4.0(RSD为12.0%),4.0(RSD为10.8%),4.1(RSD为15.7%)。结论：钙的存在状态及其含量比值是进一步规范清开灵注射液质量标准，研究清开灵治疗脑水肿机理的重要参数。     

双波长薄层扫描法测定安宫牛黄丸中去氧胆酸和胆酸的含量

 本文采用双波长薄层扫描法测定安宫牛黄丸中牛黄的有效成分去氧胆酸（deoxycholic acid)和胆酸（cholio acid)的含量，回收率分别为99%和98%，该法橾作简便，结果准确。     

十种蛇胆胆汁酸成分薄层层析分析

本文通过应用薄层色谱法对蟒蛇,百花锦蛇,眼镜王蛇,眼镜蛇,金环蛇,银环蛇,三索线蛇,水律蛇,过树榕蛇,五步蛇等十种蛇胆的结合型胆甾酸及其水解产物的薄层层析分析,结果表明:十种蛇胆均含有牛磺胆酸、牛磺鹅去氧胆酸、牛磺去氧胆酸以及石胆酸、胆固醇和游离的胆酸,可能含有甘氨胆酸、甘氨去氧胆酸等,平均以牛磺胆酸斑点面积最大。除上述成分外,尚有待鉴定的其他成分斑点。     

薄层扫描法测定肾宝中淫羊藿甙的含量

 本品采用硅藻土柱色谱法提取肾宝中淫羊蒮甙。在含0.5%MC-Na硅胶H板上分离，醋酸乙酯-甲酸-丁酮-水(10:1:1:2)为展开剂，用岛津CS-930型双波长薄层扫描仪进行含量测定。法准确，稳定，灵敏，简便，取样量少。相关系数0.9999，平均回收率99.5%，变异系数1.3%。