过氧化氢对大鼠心室肌细胞L-型钙通道电流的影响

目的:研究过氧化氢(H2O2)对单个大鼠心室肌细胞L-型钙通道电流(Ica,L)的影响。方法:用急性酶解法获得单个大鼠心室肌细胞;用标准的全细胞膜片钳技术记录钙通道电流,观察5mmol·L-1H2O2引起单个大鼠心室肌细胞Ica,L改变。结果:在5mmol·L-1H2O2作用下,大鼠心室肌细胞Ica,L峰值电流密度从4.89±0.52pA/pF增加至9.80±0.65pA/pF(P<0.05,n=10),电流-电压曲线下移,但激活电位、峰电位和翻转电位无明显改变;H2O2对Ica,L激活时间常数-电压曲线无明显影响,但可使其灭活时间常数-电压曲线明显向上移;H2O2对Ica,L稳态激活曲线无明显改变,但可使其稳态失活曲线明显左移,V0.5从(-26.85±5.3)mV左移至(-37.20±4.5)mV(P<0.05,n=5)。结论:H2O2可以增加大鼠心肌细胞Ica,L,且使其失活明显减慢。     

BMAL1对H2O2诱导的H9C2心肌细胞损伤的影响及机制探讨

目的 探讨节律基因BMAL1对过氧化氢（H2O2）诱导的H9C2心肌细胞损伤的影响及机制。方法 构建 BMAL1稳定过表达的H9C2细胞系后,实验分为2个部分。（1）实验1。对照组、H2O2组（0.2 mmol/L的H2O2处理24 h）、 BMAL1 过表达（BMAL1-OE）组（BMAL1 稳定过表达 H9C2 细胞）、BMAL1 过表达+H2O2（BMAL1-OE+H2O2）组 （0.2 mmol/L的H2O2处理BMAL1稳定过表达H9C2细胞24 h）。（2）实验2。H2O2组、BMAL1-OE+H2O2组、BMAL1过表 达+抑制 NRF2+H2O2（BMAL1-OE+ML385+H2O2）组（NRF2 抑制剂 2 μmol/L 的 ML385 预处理 BMAL1 稳定过表达 H9C2 细胞 24 h,再用 0.2 mmol/L 的 H2O2处理 24 h）、BMAL1 过表达+抑制 HO-1+H2O2（BMAL1-OE+Znpp+H2O2）组 （HO-1抑制剂5 μmol/L的Znpp预处理BMAL1稳定过表达H9C2细胞24 h,再用0.2 mmol/L的H2O2处理24 h）。CCK-8 法检测细胞活力,羟胺法检测超氧化物歧化酶（SOD）活性、TBA 法检测丙二醛（MDA）含量,Western blot 法检测 BMAL1、核因子 E2 相关因子 2（NRF2）和血红素加氧酶-1（HO-1）蛋白表达水平。结果 （1）与 Control 组相比, BMAL1-OE组BMAL1 mRNA表达水平升高,H2O2组细胞活力和细胞上清液SOD活性下降、MDA含量增加,BMAL1、 NRF2和HO-1蛋白相对表达水平降低（P＜0.05）;与H2O2组相比,BMAL1-OE+H2O2组细胞活力和细胞上清液SOD活 性增加,MDA 含量减少,而 BMAL1、NRF2 和 HO-1 蛋白相对表达水平升高（P＜0.05）;（2）与 BMAL1-OE+H2O2组相 比,BMAL1-OE+ML385+H2O2组和BMAL1-OE+Znpp+H2O2组细胞活力和细胞上清液SOD活性降低,MDA含量增加 （P＜0.05）。结论 BMAL1可能通过上调NRF2/HO-1信号轴,减轻H2O2诱导的大鼠心肌细胞氧化应激损伤。     

化学物质生殖毒性替代方法的研究现状

科技发展和人类进步,促进3R理论发展,即减少、替代和优化试验动物的使用。因此,众多努力用于毒理学替代方法的研究。生殖和发育毒性检测中使用的动物数量最多,但因哺乳动物生殖周期的复杂性,生殖发育毒性替代方法的研究进展缓慢。胚胎干细胞、微团检测和全胚胎培养试验,以及非洲蟾蜍胚胎试验,可作为发育毒性的筛检方法。利用人生殖细胞体外模型进行生殖毒性研究是一个挑战。跨领域技术、传感器技术、(Q)SARs及各种组学技术的迅速发展,都将使生殖发育毒性替代方法的研究得到新的发展和突破。     

还原型GSH、卡林-U、内障清对H2O2损伤的牛晶状体上皮细胞的影响

目的:观察还原型谷胱甘肽(GSH)、卡林-U、内障清对过氧化氢(H2O2)损伤的牛晶状体上皮细胞(BLEC)的保护作用。方法:通过MTT法,观察GSH、卡林-U或内障清与H2O2同时作用以及先加H2O2后再加GSH、卡林-U或内障清后BLEC生长情况。结果:加50μmol/L或125μmol/LH2O2组培养24,48h时吸光值明显低于阴性对照组(P<0.01);同时作用,除加400μmol/L或2mmol/LGSH组吸光值明显高于单加H2O2组外(P<0.05),其余各组与之比较差别均无统计学意义(P>0.05);先后作用,加各浓度GSH、卡林-U或内障清组吸光值与单加H2O2组比较差别无统计学意义(P>0.05)。结论:400μmol/L和2mmol/LGSH通过对H2O2的抑制保护BLEC。     

应用胚胎干细胞试验(EST)评价邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)的胚胎毒性

目的利用小鼠胚胎干细胞试验(EST)模型,初步评价邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)的胚胎毒性。方法采用悬滴悬浮法培养小鼠胚胎干细胞(m ESCs),观察受试物对m ESCs分化能力的影响,结合CCK-8法判断受试物对m ESCs及小鼠胚胎成纤维细胞(3T3)的细胞毒性结果,预测受试物的胚胎毒性。用已知强胚胎毒性化合物5-氟尿嘧啶(5-Fluorouracil,5-FU)、无胚胎毒性化合物青霉素-G(P-G)对模型进行有效性验证,并将经过验证的EST模型用于评价受试物DEHP的胚胎毒性。结果利用建立的EST模型对5-FU、P-G胚胎毒性进行评价,结果表明5-FU为强胚胎毒性,P-G为无胚胎毒性,与文献报道一致;DEHP对m ESCs和3T3的半数抑制浓度分别为IC50m ESCs=315μmol/L(126μg/ml),IC503T3=307μmol/L(122.8μg/ml),m ESCs的半数抑制分化浓度为ID50m ESCs=323μmol/L(129.2μg/ml),经EST模型判断公式计算得出该化合物为弱胚胎毒性化合物。结论建立的EST模型的有效性验证结果与ECVAM的结论一致,可用于胚胎毒性的筛选和评价;经EST模型评价DEHP的胚胎毒性为弱胚胎毒性。     

丙烯酰胺对斑马鱼胚胎发育过程中microRNA表达的影响

目的研究丙烯酰胺(ACR)对斑马鱼胚胎发育过程中小分子RNA(miRNA microRNA)表达的影响,探讨丙烯酰胺发育毒性机制。方法将斑马鱼胚胎分为10mmol/LACR染毒组,二甲亚砜(DMSO)组和空白对照组,分别处理受精后6 h的斑马鱼胚胎(6 hpf hours past fertilization);采用核苷酸锁定(LNA locked nucleic acid)修饰的microRNA探针进行胚胎整体原位杂交。结果10 mmol/L ACR可导致斑马鱼胚胎表现出多系统的畸形,胚胎表现出心率减慢,心包水肿,体轴缩短;胚胎整体原位杂交显示ACR诱导miRNA表达增加。结论ACR对斑马鱼胚胎发育过程中microRNA的表达有影响。     

盐碱胁迫下玄参幼苗的抗性生理响应研究

目的:研究不同浓度盐碱胁迫条件下玄参幼苗的抗性生理响应。方法:玄参幼苗置于光照培养箱中,控制温度(20±2)℃、光暗周期13 h/11 h、光照强度2 000 lx,以50、100、150、200、250 mmol/L碱(Na HCO3),50、100、150、200、250 mmol/L盐(Na Cl)浇灌,每4 d 1次,连续16 d。检测幼苗生长指标(株高、鲜质量、干质量)、叶绿素(Chl)含量、抗氧化指标[超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢(H2O2)、丙二醛(MDA)、膜透性(RMP)]水平、渗透调节生理指标[可溶性糖(SS)、可溶性蛋白(SP)、脯氨酸(Pro)]水平。试验设空白对照(蒸馏水)。结果:盐浓度大于50 mmol/L、碱浓度大于150 mmol/L时,幼苗株高降低,鲜质量减少,Chl含量减少;盐浓度大于100 mmol/L、碱浓度大于150 mmol/L时,幼苗干质量减少。盐浓度为50mmol/L、碱浓度为150 mmol/L时,SOD、POD活性最强;盐浓度为150 mmol/L、碱浓度为50 mmol/L时,CAT活性最强。随盐碱浓度升高,H2O2、MDA含量逐渐增加,SP含量逐渐减少;随盐碱浓度增加,RMP水平升高,即膜稳定性逐渐降低;当盐浓度大于100mmol/L、碱浓度大于150 mmol/L时,SS量停止积累;当盐碱浓度大于100 mmol/L时,Pro含量停止累积,但碱浓度下Pro含量明显高于盐浓度下。结论:盐碱胁迫使玄参植物组织产生活性氧,细胞质膜系统受到破坏。Chl、酶促抗氧化剂SOD、CAT、POD,渗透调节剂Pro、SS在对抗盐碱时均起到一定缓冲作用。玄参幼苗能耐受的最高盐浓度为50 mmol/L,最高碱浓度为150 mmol/L。     

en橙皮甙对H2O2诱导大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的研究橙皮甙对H2O2诱导的大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法培养并鉴定SD乳鼠心肌细胞;用H2O2诱导培养的大鼠心肌细胞凋亡,观察不同浓度橙皮甙（10^-8mmol/L、10^-5mmol/L、10^-3mmol/L）对SD乳鼠心肌细胞作用4、8、12h后,用Tunel法检测心肌细胞凋亡。结果橙皮甙组与模型组比较有抑制SD乳鼠心肌细胞凋亡的作用,且效应随橙皮甙浓度的增加和时间的延长而增强（P〈0.01）。结论橙皮甙对HO诱导的心肌细胞凋亡有抗凋亡保护心肌细胞的作用。     

玉米赤霉烯酮对小鼠胚胎体外发育的影响

目的研究玉米赤霉烯酮(F-2毒素)对小鼠胚胎体外发育的影响。方法将(8只/批)6～8周龄清洁级昆明妊娠4 d小鼠处死,挑选形态良好的8-细胞(8-细胞期是早期胚胎发育过程中便于观察及深入开展胚胎在发育生物学、胚胎移植、转基因动物等领域研究工作的最佳阶段)。胚胎,采用微滴培养法,将形态良好的8-细胞胚胎(10～15个/孔)移入0(溶剂对照)、10-8、10-6和10-4mol/L的F-2毒素培养液(含5%人输卵管液+10%胎牛血清)中,记录囊胚形成数及囊胚脱带数,并计算囊胚形成率和囊胚脱带率。每个剂量设5个平行。结果与溶剂对照组比较,F-2毒素浓度在10-4和10-6mol/L时囊胚形成率较低,差异均有统计学意义(P<0.05);F-2毒素浓度在10-8、10-6和10-4mol/L时,囊胚脱带率较低,差异均有统计学意义(P<0.05)。囊胚形成率和囊胚脱带率均随着F-2毒素浓度的升高呈下降趋势。结论 F-2毒素在小鼠胚胎发育过程中具有毒性作用。     

硝酸钇对小鼠胚胎干细胞神经发育的影响及机制研究

目的研究硝酸钇对小鼠胚胎干细胞神经发育的影响及可能作用机制。方法建立以胰岛素-转铁蛋白-硒-纤维连接蛋白(ITSFn)培养法为基础的胚胎干细胞神经发育毒性评价模型,通过MTT试验、彗星试验、流式细胞试验、RT-PCR和免疫印迹试验,检测不同浓度硝酸钇溶液对胚胎干细胞神经发育的影响。结果彗星试验和流式细胞仪检测结果显示,低剂量硝酸钇降低了神经元细胞凋亡率,而高剂量组神经元细胞凋亡率上升,各剂量组细胞凋亡率随着浓度增加呈现先降后升的趋势。RT-PCR和免疫印迹结果表明,低剂量硝酸钇可上调抗凋亡基因Bcl-2的表达,高剂量组则上调Bax的表达,抑制Bcl-2的表达。结论硝酸钇可通过调节凋亡相关基因Bcl-2和Bax表达影响小鼠胚胎干细胞的神经发育,但这种影响因剂量高低而具有两面性。     

N-乙酰半胱氨酸对活性氧诱导的大鼠心肌细胞凋亡的作用

目的探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对活性氧(ROS)介导的大鼠H9c2心肌细胞凋亡的抑制作用。方法用过氧化氢(H2O2)诱导H9c2心肌细胞,建立氧化损伤凋亡模型,并用NAC进行干预。四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞存活率,应用流式细胞仪分析H9c2心肌细胞内ROS水平及凋亡率。结果不同剂量H2O2(0、2、4mmol/L)作用于H9c2细胞8h后,随着H2O2剂量的增高,细胞存活率降低,ROS水平及凋亡率升高(P<0.01),5mmol/L NAC有效提高了细胞存活率,明显抑制细胞内ROS水平及凋亡的发生(P<0.01)。结论 NAC通过减少自由基的产生,拮抗了ROS介导的大鼠H9c2心肌细胞凋亡。     

家兔用于药物生殖发育毒性评价的研究进展

生殖发育毒性评价是药物安全性评价的重要组成部分。家兔属兔科兔形目,是药物生殖发育毒性评价的非啮齿类哺乳动物模型之一,但是其相关研究较啮齿动物少,对不同种属动物模型进行药物生殖发育毒性评价有助于提高风险评估的准确性。从生育力与早期胚胎发育毒性试验、胚胎-胎仔发育毒性试验、围产期发育毒性试验和体外生殖发育毒性评价等方面综述了家兔在药物生殖发育毒性评价中的研究进展,并探讨了家兔在药物生殖发育毒性评价研究中存在的问题及今后的发展方向,以期为今后研究提供参考。     

响应面法设计优化阿维菌素化学合成发酵培养基

目的 设计优化一种化学合成发酵培养基,为阿维菌素产生菌生理生化研究提供基础。方法 在单因素实验的基础上运用响应面分析的方法,对9种因素进行Plackett-Burman设计筛选得到3个显著因子,并对其进行最陡爬坡试验和Box-Behnken试验,利用Design-Expert V8.06分析软件进行回归分析得到最优组合。结果 优化后化学合成培养基的组成为：葡萄糖12g/L,麦芽糖18g/L,苏氨酸1.98g/L,50%乳酸钠0.5mL/L,K2HPO4·3H2O 0.3g/L,MgSO4·7H2O 0.5g/L,NaCl 0.5g/L,FeSO4·7H2O 0.01g/L,MnSO4·H2O 0.015g/L,MOPS 5g/L。结论 经验证,该培养基的产素能力比目前的清亮培养基提高了397.4%,并具有透明清亮且产素稳定等特点,为以后阿维链霉菌的理论和生产研究奠定了基础。     

高糖和胰岛素对内皮细胞产生一氧化氮的影响

目的：探讨高胰岛素和（或）高糖对培养的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）产生一氧化氮（NO）、血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）和超氧阴离子（O2-）的影响。方法：不同浓度的葡萄糖和胰岛素加入体外培养的人脐静脉内皮细胞，24h后取细胞培养液分别测定NO、AngⅡ和O2-的浓度。结果：5.5mmol／L葡萄糖对内皮细胞NO、O2-产生无明显影响，25mmol／L葡萄糖使NO、O2-产生增加；10、100、1000mu／L的胰岛素使NO产生增加，但对O2-产生无影响。而在25mmol／L葡萄糖存在的情况下加入不同浓度（10、100、1000mu／L）的胰岛素，可使内皮细胞NO产生减少，使O2-产生明显增加。5．5、25mmol／L葡萄糖及各浓度的胰岛素均可使AngⅡ升高。25mmol／L葡萄糖与10、100、1000mu／L胰岛素合用组AngⅡ浓度升高。加入19．5mmol／L甘露醇对N0、AngⅡ和O2-无明显影响，除外高渗对结果的影响。结论：NO、AngⅡ和O2-平衡失调在胰岛素抵抗引起心血管疾病的发生、发展过程中具有重要的病理意义。     

分泌型丛生蛋白通过抑制线粒体自噬缓解H2O2诱导的心肌细胞损伤 #br#

目的 探讨分泌型丛生蛋白（sCLU）对心肌细胞氧化损伤的影响及其机制。方法 采用大鼠心肌细胞 H9C2。实验1分为Control组（仅更换培养基）和H2O2组（100 µmol/L H2O2处理）。实验2分为Control组、pcDNA3.1组 （转染 pcDNA3.1 对照空质粒）、pcDNA3.1-sCLU 组（转染 pcDNA3.1-sCLU 过表达质粒）、H2O2组（100 µmol/L H2O2处 理）、H2O2+pcDNA3.1 组（pcDNA3.1 对照空质粒转染 48 h 后加入 100 µmol/L H2O2处理）、H2O2+pcDNA3.1-sCLU 组 （pcDNA3.1-sCLU 过表达质粒转染 48 h 后加入 100 µmol/L H2O2处理）。实验 3 分为 DMSO 组（加入 1% 体积分数 的 DMSO）、Mdivi-1 组（10 µmol/L 的 Mdivi-1 处理）、H2O2+DMSO 组（加入 1% 体积分数的 DMSO 处理 30 min 后加入 100 µmol/L的H2O2处理）、H2O2+Mdivi-1组（10 µmol/L的Mdivi-1处理30 min后加入100 µmol/L的H2O2处理）、H2O2+ pcDNA3.1-sCLU 组（pcDNA3.1-sCLU 过表达质粒转染 48 h 后加入 100 µmol/L H2O2处理）、H2O2+pcDNA3.1-sCLU+ Mdivi-1组（pcDNA3.1-sCLU过表达质粒转染48 h后加入10 µmol/L的Mdivi-1处理30 min,再加入100 µmol/L H2O2 处理）。采用MTT法检测细胞活力,TUNEL法检测细胞凋亡,试剂盒检测细胞中超氧化物歧化酶（SOD）活力和丙二 醛（MDA）水平。DFCH-DA荧光探针测定细胞活性氧（ROS）水平。实时定量聚合酶链式反应和酶联免疫吸附试验 检测细胞中sCLU表达,Western blot法检测CLU、PINK1、Parkin和LC3蛋白表达水平。结果 （1）实验1。与Control 组比较,H2O2组细胞中sCLU mRNA、细胞培养上清中sCLU蛋白及细胞中CLU蛋白相对表达水平均降低（P＜0.01）。 （2）实验2。与Control组比较,H2O2组细胞活力、SOD水平、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值均降低,细胞凋亡率、ROS水平、MDA 水平、PINK1和Parkin蛋白表达水平均升高（P＜0.05）;与H2O2组比较,H2O2+pcDNA3.1-sCLU组细胞活力、SOD水平、 LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值均升高,细胞凋亡率、ROS水平、MDA水平、PINK1和Parkin蛋白表达水平均降低（P＜0.05）。（3） 实验3。与DMSO组比较,Mdivi-1组细胞活力与细胞凋亡率差异无统计学意义;H2O2+DMSO组细胞活力下降,细胞 凋亡率升高（P＜0.05）。与H2O2+DMSO组比较,H2O2+Mdivi-1组、H2O2+pcDNA3.1-sCLU组和H2O2+pcDNA3.1-sCLU+ Mdivi-1 组细胞活力均升高,细胞凋亡率均下降（P＜0.05）。与 H2O2+Mdivi-1 组比较,H2O2+pcDNA3.1-sCLU 组和 H 2O2+pcDNA3.1-sCLU+Mdivi-1组细胞活力差异无统计学意义,细胞凋亡率降低（P＜0.05）。结论 sCLU对氧化应 激条下的心肌细胞具有保护作用,其机制可能与线粒体自噬的抑制有关。     

葡萄糖酸镁化学结构的确证研究

目的对葡萄糖酸镁的化学结构进行确证。方法采用多种光谱技术,包括紫外、红外、磁共振谱及质谱,解析葡萄糖酸镁的化学结构。结果化学元素分析结果表明,实测值与理论值的误差C、H元素在3‰之内,Mg元素3.4‰。紫外吸收特征0.1%的水溶液在194.7nm处有一最大吸收峰;0.1mmol/LHCl溶液在202.5nm处有一最大吸收峰;0.1mmol/LNaOH溶液在217.3nm处有一最大吸收峰。本品红外光谱与美国Sadtler葡萄糖酸镁的标准红外光谱图完全一致。质谱测试结果表明其分子离子峰为414。磁共振谱与本品结构相符。结论确证该化合物为葡萄糖酸镁,分子式为(C6H11O7)2Mg·2H2O。     

应用胚胎干细胞实验模型对人参皂甙Rb1、Rg1发育毒性的初步研究

目的 应用胚胎干细胞试验方法,对人参皂甙Rb1、Rg1发育毒性进行初步的安全性研究.方法 利用悬滴、悬浮培养方法,通过对不同浓度Rb1、Rg1作用条件下,胚胎干细胞在体外分化为心肌细胞能力的测定,结合相应噻唑蓝(MTT)法获得的Rb1、Rg1细胞毒性结果,判断受试物的发育毒性.结果 人参皂甙Rb1、Rg1半数分化抑制浓度(ID50 D3)分别为114±8.21μg/ml和80±5.75μg/ml,其发育毒性的判定依次无、弱.结论 人参皂甙Rg1为弱发育毒性物质,在较高浓度条件下,具有发育毒性作用.     

高通量血液透析对维持性血液透析患者钙磷代谢的影响分析

目的探究高通量血液透析对维持性血液透析(MHD)患者钙磷代谢的影响。方法84例MHD患者作为研究对象,依据双色球法分为研究组与对照组,各42例。对照组给予低通量血液透析,研究组给予高通量血液透析。比较两组透析前、透析6个月后的钙磷代谢情况。结果透析6个月后,研究组甲状旁腺激素(261.33±25.21)pg/L、钙磷乘积(34.64±3.12)mg²/dl²、血磷(1.56±0.20)mmol/L、血钙(2.11±0.55)mmol/L,均优于对照组的(398.37±27.63)pg/L、(47.23±4.24)mg²/dl²、(1.81±0.31)mmol/L、(1.79±0.62)mmol/L,差异有统计学意义(P<0.05)。结论MHD患者在血液透析过程中使用高通量血液透析,可有效改善患者钙磷代谢水平,利于患者疾病治疗,值得在患者血液透析过程中推广使用。     

Hydrogen peroxide mobilizes Ca^2＋ through two distinct mechanisms in rat hepatocytes

Aim： Hydrogen peroxide （H2O2） is produced during liver transplantation. Ischemia/reperfusion induces oxidation and causes intracellular Ca^2＋ overload, which harms liver cells. Our goal was to determine the precise mechanisms of these processes. Methods： Hepatocytes were extracted from rats. Intracellular Ca^2＋ concentrations （[Ca^2＋]i）, inner mitochondrial membrane potentials and NAD（P）H levels were measured using fluorescence imaging. Phospholipase C （PLC） activity was detected using exogenous PIP2. ATP concentrations were measured using the luciferin-luciferase method. Patch-clamp recordings were performed to evaluate membrane currents.
Results： H2O2 increased intracellular Ca^2＋ concentrations （[Ca^2＋]i） across two kinetic phases. A low concentration （400 μmol/L） of H2O2 induced a sustained elevation of [Ca^2＋]i that was reversed by removing extracellular Ca^2＋. H2O2 increased membrane currents consistent with intracellular ATP concentrations. The non-selective ATP-sensitive cation channel blocker amiloride inhibited HRO2-induced membrane current increases and [Ca^2＋]i elevation. A high concentration （1 mmol/L） of H2O2 induced an additional transient elevation of [Ca^2＋]i, which was abolished by the specific PLC blocker U73122 but was not eliminated by removal of extracellular Ca^2＋. PLC activity was increased by 1 mmol/L H2O2but not by 400 μmol/L H2O2.
Conclusions： H2O2 mobilizes Ca^2＋ through two distinct mechanisms. In one, 400 μmol/L H2O2-induced sustained [Ca^2＋]i elevation is mediated via a Ca^2＋ influx mechanism, under which H2O2 impairs mitochondrial function via oxidative stress, reduces intracellular ATP production, and in turn opens ATP-sensitive, non-specific cation channels, leading to Ca^2＋ influx. In contrast, 1 mmol/L H2O2-induced transient elevation of [Ca^2＋]i is mediated via activation of the PLC signaling pathway and subsequently, by mobilization of Ca^2＋ from intracellular Ca^2＋ stores.     

黄芪甲苷对大鼠和兔发育毒性的评价

目的应用标准致畸试验方法,评价黄芪甲苷对SD大鼠和新西兰兔的母体毒性,胚胎毒性、胎儿毒性和致畸性方法分别采用SD大鼠和新西兰兔作为实验动物,实验设低中、高3个剂量组。兔致畸敏感期试验剂量为0.5,1.0和2.mg/kg。大鼠致畸敏感期试验剂量为1.0,0.5和0.25mg/kg体重,两试验同时设阴性对照。孕兔每组12只以上,孕鼠每组2只,观察母体孕期增重,黄体数、着床率、活胎率、死胎率和吸收胎率,胎儿身长、体重和胎盘重,胎儿外观和内脏畸形、以及骨骼的发育情况。结果黄芪甲苷在0.5,1.0和2.0mg/kg剂量下对新西兰兔无母体毒性,表现为孕期增重与对照组比较差异无统计学意义。受试剂量下的黄体数和着床率与对照组比较差异无统计学意义。但各受试剂量下活胎率与对照组比较有差异具有统计学意义,表明黄芪甲苷在受试剂量下具有一定的胚胎毒性。在受试剂量下胎兔体重、身长和胎盘重与对照组比较差异无统计学意义;受试剂量下胎兔胸骨发育情况以及其他骨骼发育情况与对照组比较差异均无统计学意义。各剂量组未观察到明显的骨骼畸形、外观和内脏畸形,表明黄芪甲苷无致畸作用。黄芪甲苷在1.0mg/kg剂量时母鼠增重、活胎率和死胎率与对照组比较差异具有统计学意义,表明在1.0mg/kg剂量时对SD大鼠有一定的母体毒性和胚胎毒性。胎儿身长在受试剂量下与对照组比较差异无统计学意义;在0.25mg/kg和0.5mg/kg剂量组胎鼠体重和胎盘重略低于对照组,但无明显剂量-反应趋势;对胎鼠性别比无明显影响;受试剂量下胎鼠胸骨以及其他骨骼发育情况与对照组比较差异均无统计学意义。未见明显的大体畸形、骨骼畸形和内脏畸形,表明黄芪甲苷无致畸作用。结论黄芪甲苷在1.0mg/kg剂量时对SD大鼠有母体毒性,但对新西兰兔无母体毒性。对新西兰兔和SD大鼠均无致畸性。但在1.0mg/kg以上剂量对新西兰兔和SD大鼠均有一定的胚胎毒性。