PSCA表达及其单抗对PC-3M细胞生长与凋亡影响的观察

目的：观察前列腺干细胞抗原（prostate stem cell antigen,PscA）在人雄激素非依赖性前列腺癌PC-3M细胞的表达状况以及PSCA特异性单克隆抗体（PSCA—mAb）对PC-3M细胞生长和凋亡的影响。方法：采用细胞免疫化学方法检测PSCA在PC-3M的表达;以O～1．0／tg／mL浓度的PSCA—mAb作用PC-3M细胞0～96h,采用细胞生长曲线、四甲基噻唑氮蓝（methyl thiazolyl tetrazolium,MTT）法、琼脂糖凝胶电泳和流式细胞术（flow cytometry,FCM）分析P＆3M细胞生长及凋亡的变化。结果：PSCA在PC-3M细胞膜和细胞质呈阳性表达;0．1／μg／mLPSCA—mAb作用时的细胞生长抑制率为（11．3±2．2）％,0．2／μg／mL为（27．5±3．4）％,0．4／μg／mL为（39．4±5．8）％,0．6μg／mL为（47．7±7．4）％,0．8μg／mL为（69．3±8．2）％,l.0〉g／mL为（70．8±9．3）％,细胞凋亡率为0．1／μg／mL为（8．7±1．4）％,0．2μg／mL为（12．3±2．8）％,0．4μg／mL为（21．6±3．2）％,0．6〉g／mL为（33．6±4．9）％,0．8g／mL为（41．4土5．8）％,1．0μg／mL为（42．3土6．1）％,均显著高于相应对照组细胞生长抑制率和凋亡率,P均〈0．01;PSCA-mAb作用PC-3M细胞24h的生长抑制率为（47．8士6．4）％,48h为（59．4±7．3）％,72h为（70．3±7．9）％,96h为（71．1±9．0）％,细胞凋亡率24h为（33．6±4．3）％,48h为（36．3±5．1）％,72h为（42．7±5．7）％,96h为（43．4±6．3）％,均高于相应的对照组细胞生长抑制率和凋亡率,P均〈O．01。MTT及FCM分析结果表明,PSCA-mAb在0．6μg／mL作用72h时,细胞生长抑审l率为（71．5±6．2）％,凋亡率为（44．4±5．5）％,均达到最大。结论：PSCA在人雄激素非依赖性前列腺癌PC-3M细胞呈阳性表达;PSCA-mAb能够时间一剂量依赖性地抑制PC一3M生长和诱导其凋亡。     

善得定抑制体外肺腺癌Spc-a1细胞生长的实验研究

[目的]研究生长抑素类似物善得定在体外对肺腺癌细胞株Spc-a1生长抑制和肺腺癌细胞凋亡的作用。[方法]以不同浓度（0．01，0．1，1．0，10，20μg／ml）善得定作用于肺腺癌细胞株Spc-a1 72h后，采用MTT法观察其抑瘤效应，采用TUNEL原位末端标记法检测肺腺癌细胞Spe—a1凋亡情况。[结果]善得定对肺腺癌Spc-a1细胞作用与药物剂量呈明显正相关（P=0．0001）；10μg／ml，20μg／ml善得定对肺腺癌细胞Spc—a1抑制率分别为6．264％、7．78％。善得定0．01μg／ml，0．1μg／ml，1．0μg／ml浓度时引起肺腺癌细胞株Spe—a1凋亡发生率分别为1．89％，3．56％，4．44％。[结论]在体外善得定可抑制肺癌细胞Spc—a1生长。     

氯丙嗪对耐药细胞系K562／AO2多药耐药逆转作用的研究

目的：研究氯丙嗪对耐药细胞系K562/AO2多药耐药逆转作用。方法：应用免疫组化观察K562／AO2细胞系的耐药蛋白表达情况，用MTT法测定不同浓度的氯丙嗪对K562/AO2细胞系耐药逆转作用，用流式细胞术测定不同浓度的氯丙嗪与K562／AO2细胞作用后细胞内罗丹明的蓄积情况，用半定量RT—PCR法测定氯丙嗪对K562／AO2细胞多药耐药基因(mdr-1)mRNA表达的影响。结果：K562／AO2细胞不但P-gP表达阳性，而且肺耐药相关蛋白(lung resistanceelated protein．LRP)表达也阳性；氯丙嗪能增强多柔比星对K562／AO2细胞的杀伤作用(单用ADM组、氯丙嗪0．75μg／mL+ADM组、氯丙嗪1．5μg／mL+ADM组和氯丙嗪3μg／mL+ADM组对K562／AO2的抑制率分别为5．2％、25．9％、39．1％和74．8％)；增加K562／AO2细胞内罗丹明的蓄积(对照组、氯丙嗪0．75μg／mL组、氯丙嗪1．5μg/mL组和氯丙嗪3μg／mL组细胞内的荧光强度的均值分别为1．87、10．28、48．75和65．63)；对K562／AO2细胞mdr-1 mRNA表达无明显影响(对照组mdr-1和β-actin的面积比为0．41，氯丙嗪组为0．42)。结论：氯丙嗪对K562／AO2细胞的耐药有较强的逆转作用，并呈剂量依赖关系。     

基质金属蛋白酶抑制剂LY52对人卵巢上皮癌细胞SKOV3中MMP-2,MMP-9表达及其侵袭转移能力的抑制作用

背景与目的：研究表明,肿瘤细胞MMP-2,MMP-9表达升高与其侵袭和转移能力有密切关系。因而,研究设计新的MMPs特异性抑制剂得到广泛重视。根据MMP-2,MMP-9结构特点,本实验设计合成全新结构的N1-取代咖啡酰吡咯烷类MMPs抑制剂——LY52,并观察该化合物对MMP-2,MMP-9表达的抑制作用及对人卵巢粘液囊腺上皮癌细胞SKOV3侵袭转移能力的影响。方法：MTT和细胞克隆法检测LY52对细胞生长抑制作用;明胶酶直接降解琥珀酰明胶法测定LY52抑酶作用活性：SDS-PAGE zymography分析对SKOV3细胞MMP-2,MMP-9表达的抑制作用;MTT法测定细胞与FN,LN和matfigel的粘附能力：Transwell小室法观察化合物对SKOV3细胞侵袭人工基底膜的抑制作用。结果：直接与细胞接触,LY52具有较弱的肿瘤细胞生长抑制作用。LY52直接抑制明胶酶活性,抑制作用IC50为11．9μg／ml。同时,LY52抑制SKOV3细胞MMP-2,MMP-9表达。以0．1、1、10、100、1000μg／ml剂量与SKOV3细胞孵育24h．对培养上清液MMP-2表达的抑制率为10．66％-31．47％：对MMP-9表达的抑制率为22．56％-56．71％。按上述剂量孵育1h。对SKOV3细胞与FN,LN和matfigel粘附能力的最大抑制率分别为29．79％,48．94％,50．92％。LY52显著抑制SKOV3细胞穿过人工基底膜能力,按上述剂量,LY52与细胞孵育24h,抑制率分别为7．5％,42．07％,66．54％,72．15％。82．84％。结论：LY52通过抑制SKOV3细胞MMP-2,MMP-9的表达．降低癌细胞侵袭转移能力。     

中药大枣对N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)诱发大鼠腺胃腺癌抑制作用的初步观察

一、用N-甲基-N′-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)100μg/ml诱发大鼠腺胃腺癌的发生率为35.7％(5/14);而空白对照组未见任何明显的病变及肿瘤发生。二、用MNNG100μg/ml处理大鼠的同时,连续15个月喂给中药大枣的Ⅲ组腺胃腺癌的发生率为15.4％(2/13),胃肠道恶性肿瘤总的发生率为38.4％(5/13);用MNNG100μg/ml处理大鼠7个月后,连续8个月投给大枣的Ⅳ组腺胃腺癌的发生率为21.7％(5/23),胃肠道癌瘤总的发生率为34.8％(8/23),与Ⅱ组(MNNG)胃肠道癌瘤的发生率71.14％(10/14)相比,经     

5-FU持续和间歇处理对 Bel-7402 肝癌细胞株的抑制作用

目的：评价体外5－FU持续和间歇处理对Bel-7402肝癌细胞株的生长抑制作用。方法：体外培养Bel-7402肝癌细胞株，用一系列不同浓度的5－FU对Bel-7402肝癌细胞株分别进行每天24小时持续处理及2小时间歇处理，4天后进行MTT试验，检测肿瘤细胞的生长抑制率，对两组的IC50进行比较。结果：5－F处理浓度依次10．0μg/L、25．0μg/L、50．0μg/L、75．0μg/L、100μg/L、250．0μg/L、500μg/L、750．0μg/L、1000．0μg/L、2500．0μg/L、5000．0μg/L、7500．0μg/L、10000．0μg/L、20000．0μg/L持续处理组的肿瘤细胞抑制率依次分别为1．34％、2．01％、7．21％、10．37％、18．64％、29．96％、35．06％、43．35％、50．66％、87．63％、93．63％、94．46％、99．27％、99．35％，IC50是991．7μg/L。5－FU处理浓度依次120．0μg/L、300．0μg/L、600．0μg/L、900．0μg/L、1200．0μg/L、3000．0μg/L、6000．0μg/L、9000．0μg/L、12000．0μg/L、18000．0μg/L、60000．0μg/L、90000．0μg/L、120000．0μg/L、240000．0μg/L2小时间歇处理组的肿瘤细胞抑制率依次分别为1．32％、1．78％、2．01％、2．89％、3．57％、5．94％、8．30％、10．36％、15．25％、17．27％、25．95％、32．63％、43．66％、67．81％、IC50为146600μg/L，为持续处理组的147．8倍。结论：低浓度的5－FU持续处理较高浓度的5－FU间歇处理对Bel-7402肝癌细胞有更强的抑制作用。     

隐形平阳霉素纳米金颗粒的体内外抗肿瘤活性的研究

目的研究隐形平阳霉素纳米金颗粒体外对人肿瘤细胞7721、7402、HepG-2和小鼠肝癌H22细胞的杀伤作用及体内对小鼠H22肿瘤生长的影响,对隐形平阳霉素纳米金颗粒进行抗肿瘤药效学评价。方法①采用MTT法测定了粒径为40nm的隐形平阳霉素纳米金颗粒对人肝癌细胞7721、7402、HepG-2和小鼠肝癌H22细胞的体外增殖的影响。取对数生长期入肝癌细胞7721、7402、HepG-2细胞接种至96孔板,每孔2×10^3个细胞。于37℃,5％CO2孵箱中培养24小时后,加入不同浓度的隐形平阳霉素纳米金颗粒,每组设三个平行孔,同时设相同浓度的平阳霉素及未结合平阳霉素的隐形纳米金颗粒对照组。培养72h后吸去培养液,每孔加入100μl0．5％MTT溶液。37℃孵育4h后,弃上清,每孔加150μl DMSO溶解甲簪后,于570nm波长下检测OD值并计算IC50值;②体内抑瘤实验。取接种于昆明鼠第8d的H22腹水肿瘤,用生理盐水配制成细胞数为3×10^5个／ml细胞悬液,接种于雌性昆明鼠背部皮下,每组10只。实验第3d静脉给药,连续给药8次。隐形平阳霉素纳米金颗粒的剂量分别为2．5mg／kg、5mg／kg（以结合的平阳霉素计）,平阳霉素的剂量分别为2．5mg／kg、5mg／kg,以相同剂量未结合平阳霉素的隐形纳米金颗粒和生理盐水为对照组。至第14d,测定瘤重并统计抑瘤率。结果①隐形平阳霉素纳米金颗粒在体外对肿瘤细胞的抑制作用。隐形平阳霉素纳米金颗粒和平阳霉素对肿瘤细胞7721、7402、HepG-2和H22的增殖有明显的抑制效应并有量效关系,隐形纳米金颗粒对肿瘤细胞的增殖无抑制效应（P〉0．05）。隐形平阳霉素纳米金颗粒对肿瘤细胞7721、7402、HepG-2和H22的IC50分别为56．04μg/ml、76．36μg／ml、37．64μg／ml、0．413μg／ml。平阳霉素对肿瘤细胞7721、7402、HepG-2和I-122的IC50分别为26．84μg／ml、20．62μg／ml、3．58μg/ml?     

RNA干扰BNIP3表达对LoVo细胞5-氟脲嘧啶化疗敏感性的影响

目的：观察RNA干扰介导BNIP3基因表达抑制对结肠癌细胞5-氟脲嘧啶（5-Fu）化疗敏感性的影响。方法：构建靶向BNIP3基因的siRNA的质粒表达载体,转染结肠癌LoVo细胞并筛选稳定表达细胞,用RT-PCR和Western blotting检测BNIP3基因表达,MTT法检测5-Fu的化疗敏感性,流式细胞仪检测5-Fu诱导的细胞凋亡,细胞生长曲线检测细胞增殖。结果：酶切和测序证实靶向BNIP3基因的siRNA的质粒表达载体（pGCsi3．0-BNIP3）构建成功;重组质粒转染的LoVo细胞BNIP3表达被有效抑制,其mRNA水平和蛋白水平表达抑制率分别为73．1％和75．4％;与对照组比较,转染重组质粒pGCsi3．0-BNIP3的LoVo细胞5-Fu的Ic50值显著升高（108．4±4．69μg／mlvs．50．08±2．85μg／ml,P〈0．05）,5-Fu诱导的细胞凋亡率显著减少（8．35±0．46％v19．75±2．37％,P〈0．05）,细胞增殖速度增加。结论：BNIP3表达下调导致结肠癌LoVo细胞对5-Fu化疗敏感性降低;BNIP3可能成为逆转结肠癌耐药的潜在治疗靶点。     

油酸、亚油酸及其硒化合物抗NIH／3T3细胞恶性转化的研究

研究利用天然的及合成的具有防癌抗癌作用的物质已成为癌症预防研究领域的1个重要方面．本文应用。NIN／3T3细胞体外转化试验，对油酸、亚油酸及其硒化合物(硒化油酸和硒化亚油酸，含硒量分别为1．4％和2％)的抗恶性转化作用进行了初步研究．实验结果表明：油酸和硒化油酸在0.326-0.630μg／ml剂量范围内、     

参麦注射液联合羟基喜树碱抑制血管生成作用的实验研究

背景与目的：某些小剂量中药和小剂量化疗药物可选择性地抑制血管内皮细胞的功能。因此本文探讨参麦注射液联合应用羟基喜树碱对体内外血管生成的抑制作用。方法：以人肝癌细胞HepGⅡ作为对照，采用MTT法和三维血管模型观察参麦注射液联合羟基喜树碱对体外人微血管内皮细胞（HMVEC）增殖和迁移的影响；利用鸡胚尿囊膜（CAM）模型观察参麦注射液联合羟基喜树碱对体内鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响。结果：40μl／ml参麦注射液和20ng／ml羟基喜树碱对血管内皮细胞增殖的抑制率分别为18％、31．7％，联合应用后的抑制率为43．6％；40μl／ml参麦注射液和20ng／ml羟基喜树碱对HepGⅡ细胞的抑制率分别为1．2％、0．9％，联合应用后的抑制率为19．4％；40μl／ml参麦注射液和20ng／ml羟基喜树碱对血管内皮细胞有抑制出芽的作用，联合应用具有显著的协同效应，且与作用时间呈正相关（r=0．988，P=0．007）；40μl／ml参麦注射液和20ng／ml羟基喜树碱对鸡胚尿囊膜新生血管抑制率分别为30％、40％，联合应用后的抑制率为60％。结论：①小剂量参麦注射液（40μl／m1）、羟基喜树碱（20ng／m1）在体内外具有抑制血管生成作用，而对肝癌细胞无明显抑制作用，显示出明显差异性细胞毒作用；②小剂量参麦注射液（40μl／m1）联合羟基喜树碱（20ng／m1）在体外具有抑制HMVEC增殖和迁移协同作用，体内具有抑制血管生成协同作用。     

杂色曲霉素和脱氧雪腐镰刀菌烯醇对小鼠致癌作用的研究

目的探讨杂色曲霉素(ST)对NIH小鼠的致癌作用,同时研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)对ST致癌作用的影响。方法将180只NIH小鼠随机分为ST 3μg/kg组、ST30μg／kg组、STμg/kg DON1．5pμg／kg组、ST30μg／kg DON1．5μg／kg组、DON1．5μg/kg组和对照组等6组,每组30只。各实验组按要求分别灌喂不同剂量的真菌毒素,对照组灌喂同等容量的生理盐水,3次／周,共24周。实验第58周和第74周处死小鼠,观察各器官组织病变。结果对照组小鼠各器官组织均未见明显病理改变。ST和DON处理组均有部分小鼠发生肺腺癌和腺胃黏膜上皮异型增生。ST3μg／kg组、ST30μg/kg组、ST3μg／kg DON1．5μg／kg组、ST30μg/kg DON1．5μg/kg组和DON1．5μg／kg组肺癌的发生率分别为25．0％、41．7％、62．5％、69．2％和37．5％,腺胃黏膜上皮异型增生发生率分别为50．0％、58．3％、37．5％、53.8％和25．0％。结论经口灌喂ST和DON可诱发NIH小鼠肺癌和腺胃黏膜异型增生。ST加DON可明显提高肺癌的发生率。     

藤梨根提取物对人胃癌MKN－45细胞增殖及凋亡的影响

目的：探讨太白山藤梨根提取物（Radix Actinidiae extractive,RAE）在体外对胃癌MKN-45细胞增殖与凋亡的影响。方法：用0．01—100μg／ml浓度范围内的RAE和胃癌MKN-45细胞共培养24、48、72、96小时,采用MTF法检测RAE对MKN-45细胞增殖的影响;用流式细胞仪检测其对MKN-45细胞凋亡及细胞周期分布的影响;DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡。结果：RAE在体外能够显著抑制胃癌MKN-45细胞的增殖,且呈现浓度和时间依赖性;RAE对胃癌细胞的作用表现为周期特异性,使细胞阻滞于Go／G1期,进一步诱导细胞凋亡。对照组凋亡率为0．53％,1μg／ml、10μg／ml、100μg／ml浓度的RAE干预胃癌细胞48小时后均出现凋亡峰,细胞凋亡率分别为3．27％、8．97％、12．6％。DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡,不同浓度RAE处理的细胞样品中均可看到梯形凋亡条带,并呈现浓度依赖性。结论：RAE在体外对人胃癌MKN-45细胞有显著的抑制细胞增殖及诱导细胞凋亡作用,其作用机制可能是使胃癌细胞周期阻滞于G0／G1期。     

体外不同胃癌细胞株对表阿霉素敏感性测定的意义

采用MTT方法测定体外MKN－45、SGC-7901、MKN－28胃癌细胞株对不同浓度表阿霉素的敏感性。结果显示0．6μg／ml的表阿霉素对胃癌细胞的抑制率在24小时分别为10.6％、20．9％和11％，到48小时明显增高至43．8％、66.7％和42％（P＜0.01）；表阿霉素浓度增至40μg／ml，72／小时之抑制率进一步上升为78.1％、77.4％和77.3％。分化差的癌细胞对表阿霉素敏感性高于分化好的癌细胞．实验提示，表阿霉素在胃癌化疗时，除考虑肿瘤生物学特性外，还应使用合理的给药方法，以增加与癌细胞接触的浓度和时间，提高有效率。     

蝎毒多肽提取物对前列腺癌细胞增殖的影响

目的观察蝎毒多肽提取物（PESV）对非激素依赖性前列腺癌DU-145和PC-3细胞的生长与增殖、细胞周期及cyclinE和p27蛋白表达的影响。方法采用噻唑蓝（MTT）法检测PESV对前列腺癌细胞PC-3和DU—145生长与增殖的影响，流式细胞术观察药物对细胞周期的影响，免疫组织化学法检测药物干预后，cyclinE和p27蛋白水平表达的变化。结果MTT显示，PBSV在浓度40-200μg／ml时对前列腺癌细胞毒性作用明显（40μg／ml时，DU—145细胞抑制率为30．5％，PC-3细胞抑制率为33．1％，与阴性对照组相比，P〈0．05），且随剂量加大作用增大，浓度在200μg／ml时，100％抑制，呈明显剂量效应关系；流式细胞术显示，PESV干预后G0／G1细胞的百分比增多，S期的前列腺癌细胞减少（DU-145细胞和PC-3细胞S期的比例分别为34．1％和17．1％，与阴性组比较，P〈0．01）；免疫组化显示，PBMV干预后，DU-145和PC-3细胞cyclinE蛋白表达水平下调，p27蛋白表达水平上调。结论PESV对前列腺癌细胞增殖具有抑制作用。对前列腺癌治疗具有潜在价值。     

硒化麒麟菜多糖抑制人喉癌细胞株Hep-2增殖的作用

 目的 通过比较研究海藻麒麟菜多糖粗提物、无机硒化合物-亚硒酸钠（Na2SeO3）及其共价化合物-硒化麒麟菜多糖对人喉癌细胞株Hep-2的作用，探索新的具有抗肿瘤活性的有机硒化合物。方法 应用不同剂量的样品作用于Hep-2细胞株后，用MTT比色分析法计算肿瘤抑制率。结果 硒化多糖对Hep-2细胞的抑制率高于相同多糖浓度的麒麟菜多糖和相同硒浓度的亚硒酸钠（P〈0．05）。硒化多糖的抑制率可高达71．53％，其多糖IC50，与硒IC50，分别为1805μg／ml和7．0μmol／L，分别低于麒麟菜多糖的多糖IC50，（3034μg／m1）和亚硒酸钠的硒IC50（9．0μmol／L）。结论 硒化麒麟菜多糖具有抗Hep-2细胞增殖的活性，其抑制作用明显优于亚硒酸钠及天然麒麟菜多糖的抗肿瘤活性。     

甲基莲心碱对乳腺癌MCF-7/Adr 细胞MDR逆转的研究

 目的 探讨甲基莲心碱（Neferine，Nef）对耐药人乳腺癌细胞增殖，细胞内ADM积聚浓度及mdr-1／P-gp表达的影响。方法 采用MTT法测定细胞毒作用，高效液相色谱法测定细胞内ADM积聚浓度，RT—PCR技术及蛋白质印迹技术检测mdr-1／P-gp表达。结果 10μg／ml Nef＋ADM组细胞的抑制率及细胞内ADM积聚浓度比ADM组高（P〈0.01）；20μg／ml Nef＋ADM组细胞抑制率及细胞内ADM积聚浓度较5μg／ml异博定＋ADM组及10μg／ml Nef＋ADM组均高（P〈0．01）。10μg／ml Nef＋ADM组MCF-7／Adr细胞mdr-1 mRNA及P-gp表达比ADM组明显下降（P〈0．01）。20μg／ml Nef＋ADM组细胞mdr-1mRNA及P-gp表达较10μg／ml Nef＋ADM组明显下调（P〈0．01）。结论 Nef能抑制耐药人乳腺癌细胞增殖。Nef能增加MCF-7／Adr细胞内ADM积聚浓度。Nef通过降低耐药人乳腺癌细胞mdr-1 mRNA及P-gp的表达逆转MDR。     

人参皂苷Rg3对人胰腺癌细胞Pim-3及Bad凋亡蛋白表达的影响

背景与目的：人参皂苷Rg3是一种抗肿瘤中药单体,有研究表明人参皂苷Rg3对肝癌、肺癌、结肠癌、胰腺癌等肿瘤细胞的浸润具有明显抑制作用。本实验目的是研究人参皂苷Rg3对人胰腺癌细胞株PANC-1中原癌基因Pim-3及磷酸化Bad蛋白pBad（Ser112）、Bad（Serl36）表达的影响。方法：用浓度为0、10、20、40和80μmol／L的人参皂苷Rg3处理PANC-1细胞24h后,用四甲基偶氮唑盐（MTF）法检测人参皂苷Rg3对PANC-1细胞增殖的抑制作用;用倒置显微镜和流式细胞术观察人参皂苷Rg3对PANC-1细胞凋亡的诱导作用;用Western blot法检测经不同浓度人参皂苷Rg3处理后的PANC-1细胞中pim-3、Bad、pBad（Ser112）和pBad（Ser136）的表达;定向克隆Pim-3的发夹状寡核苷酸（shorthairpinRNA,shRNA）到真核表达载体形成重组质粒pSilencer3．1-HINeo—Pim-3shRNA．将重组质粒通过脂质体介导转染PANC-1细胞,采用AnnexinV／PI流式细胞分析法检测转染后PANC-1细胞的凋亡．用Westernblot法检测转染后PANC-1细胞的pim-3及pBad（Serl12）的表达。结果：10、20、40和80btmol／L的人参皂苷Rg3对PANC-1细胞增殖的抑制率分别为20．2％、33．4％、52．8％、65．3％;经10～80μmol／L的人参皂苷Rg3处理后PANC-1细胞呈现明显的凋亡形态学改变,80μmol／L人参皂苷Rg3处理PANC-1细胞24h后,与正常对照组细胞凋亡率（3．3±2．1）％比较,处理组细胞凋亡率（12．2±1．3）％增加（P〈0．05）;人参皂苷Rg3处理PANC-1细胞24h后,Bad总蛋白表达没有明显变化。pim-3和pBad（Ser112）的表达均随人参皂苷Rg3浓度的增加而逐渐减弱。PANC-1细胞中pBad（Ser136）不表达;Pim-3shRNA转染PANC-1细胞后．与正常对照组比较,转染组早期凋亡率和总凋亡率均增加[（11．5±3．7）％VS．（5．8±2．2）％,P〈0．01;（20．8±2．6）％VS．（13．0±4．1）％,P〈O．05],转染组pim-3及pBad（S     

3D-CRT结合同步化疗治疗Ⅲ期非小细胞肺癌的随机分组研究

[目的]研究三维适形放射治疗（3D-CRT）大剂量分割同步给予铂类为主的化学药物治疗不能切除的Ⅲ期非小细胞肺癌（NSCLC）的可行性。[方法]自2000年8月至2003年6月，将90例符合入选条件的Ⅲ期非小细胞肺癌患者随机分为3组，1组30例，以铂类为主的化疗＋3D-CRT常规分割组；2组30例，为单纯3D-CRT常规分割组；3组30例，以铂类为主的化疗＋3D-CRT大剂量分割组。1、2组分割剂量1．8—2Gy／次，5次/周，总剂量66～66．6Gy／6～8周，3组4．5～5Gy／次，3次/周，总剂量45Gy／4～5周.[结果]1、2、3组的3年总生存率和无病生存率分别为33.3％、20．0％、36．6％和23.3％、16．6％、23．3％，中位生存期分别为31、20、32个月。1、3组明显好于2组（1组和2组比较．Х^2=3．87．P=0．0492；2组和3组比较，Х^2=4．28．P=0．0387）．2组的中位转移时间为22个月，与1组的31．5个月、3组的30．5个月比较，有显著性统计学意义（1组和2组比较Х^2=4．71，P=0．0301；2、3组比较Х^2=4．02，P=0．0449）。1、2、3组的中位复发时间分别为27．5、32、28个月，无显著性统计学差异（1、2组比较Х^2=0．42，P=0．5177；1、3组比较Х^2=0．001，P=0．9636；2、3组比较Х^2=0．44，P=0．5066）。急性放射性食管炎：1、2、3组的发生半分别为46．7％、43．3％、63．3％。1、2、3组发生放射性肺炎的例数接近（Х^2=1．440，P=0．487），以Ⅰ级反应为主。[结论]3D-CRT联合化疗降低了Ⅲ期非小细胞肺癌患者的远处转移率，提高了总生存率和无病生存率。大剂量分割结合同步化疗可缩短疗程．提高局部控制率．但发生早期和晚期放射性损伤的概率增加．     

Wnt3a 对非小细胞肺癌细胞生长的调控作用简

目的：观察重组人Wnt3a对非小细胞肺癌细胞生长的调节作用,为进一步探讨Wnt信号通路在非小细胞肺癌的作用提供实验依据。方法：本实验利用重组人Wnt3a处理H460、A549细胞系,通过自动细胞计数、软琼H酤铿觇溅实验、流式细胞周期分析,观察重组人Wnt3a处理对细胞生长和细胞周期的作用。结果：Wnt3a处理A549、H460细胞24h后,自动细胞计数结果显示细胞数上升显著[A549：（4．26±0．26）×10^5／ml vs（2．42±0．44）×10^5／ml,P〈0．01;H460：（3．98±0．21）×10^5／ml vs（2．07±0．10）×10^5／ml,P〈0．01];软琼脂克隆实验显示克隆形成效率显著提高[A549：（1．57±0．11）％vs（1．03±0．08）％,P〈0．01;H460：（1．53±0．11）％vs（0．79±0．10）％,P〈0．01];流式细胞仪细胞周期分析显示,Wnt3a处理组G0／G1期细胞比例下降,S期细胞比例上升。结论：在A549和H460细胞,重组人Wnt3a处理,可能调节细胞周期,促进细胞生长。     

PHA—CD3AK细胞的体外诱导及其生物学特性初步研究

目的：研究PHA—CD3AK细胞的体外诱导方法及其生物学特性,并与LAK细胞进行比较。方法：分离人外周血单个核细胞（PBMC）,采用植物血凝素（PHA）、单克隆抗体（anti—CD3McAb）和基因重组人白细胞介素2（rhIL-2）、共同诱导制备PHA—CD3AK细胞;应用流式法分析PHA—CD3AK细胞的免疫表型、乳酸脱氢酶法（LDH）检测PHA—CD3AK细胞的杀伤活性,并观察其形态;吉姆萨染色法观察其核型。结果：微量anti—CD3McAb（0．05μg／m1）辅以少量rhIL～2（300U／ml）和PHA（100μg／m1）共同培养,即能诱导和大量扩增PHA—CD3AK细胞,其扩增倍数显著高于LAK细胞,维持高扩增的时间也远较LAK细胞持久;当效靶细胞比为80：1时,PHA—CD3 AK细胞对体外肿瘤细胞（K562）杀伤的百分率为56．5％;免疫表型检测PHA—CD3 AK细胞中CD3^＋、CD4^＋、Cd8^＋细胞的比率分别为（86．5±5．89）％、（38．20±5．27）％、（42．63±3．50）％;核型为正常二倍体,染色体数目为46条。结论：PHA—CD3 AK细胞是以CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋细胞为主的异质细胞群,并具有淋巴母细胞样特征,PHA—CD3AK细胞为正常二倍体细胞。PHA—CD3AK细胞是易于体外诱导、扩增能力强,体外存活时间长、杀瘤活性高的一种具有广阔应用前景的肿瘤过继免疫效应细胞。