^131I—抗AFP McAb—MMC“双弹头”导向药物对荷瘤裸鼠的放…

应用双弹头免疫导向治疗药物＾１３１Ｉ－抗ＡＦＰ ＭｃＡｂ ＭＭＣ进行荷人原发性肝癌裸鼠的体内放射免疫显像及放射免疫治疗研究。药物经腹腔给予后，第３ｄ即选择性的定位于肿瘤；第１３ｄ抑瘤率高达８１．５％，远高于单纯＾１３１Ｉ－抗ＡＦＰ ＭｃＡｂ组和ＭＭＣ组，提示该药物对人原发性肝癌细胞的亲和力好、杀伤力强，为其进入临床治疗提供了依据。     

rHuIFN—γ对裸鼠异种植物人结肠癌导向治疗的促？…

本文应用＾１３１Ｉ标记的抗人结肠癌单克隆抗体（ｍＡｂ）Ｓｃ３Ａ及其Ｆ（ａｂ′）２作为导向治疗剂，加ｒＨｕＩＦＮ－γ治疗荷人结肠癌裸鼠获得明显的抑瘤效果。结果表明，ｒＨｕＩＦＮ－γ＋＾１３１Ｉ－Ｓｃ３Ａ ｍＡｂ或＾１３１Ｉ－Ｆ（ａｂ′）２的抑瘤作用分别为８４．５％和９１．９％，明显优于ＰＢＳ＋＾１３１Ｉ－Ｓｃ３Ａ ｍＡｂ或＾１３１Ｉ－Ｆ（ａｂ′）２治疗组（分别为６９．６％或６０．５％）；Ｆ（ａｂ′）     

rHuIFN-γ对裸鼠异种移植物人结肠癌导向治疗的促进作用

本文应用１３１Ｉ标记的抗人结肠癌单克隆抗体（ｍＡｂ）Ｓｃ３Ａ及其Ｆ（ａｂ′）２作为导向治疗剂，加ｒＨｕＩＦＮ－γ治疗荷人结肠癌裸鼠获得明显的抑瘤效果。结果表明，ｒＨｕＩＦＮ－γ＋１３１Ｉ－Ｓｃ３ＡｍＡｂ或１３１Ｉ－Ｆ（ａｂ′）２的抑瘤作用分别为８４．５％和９１．９％，明显优于ＰＢＳ＋１３１Ｉ－Ｓｃ３ＡｍＡｂ或１３１Ｉ－Ｆ（ａｂ′）２治疗组（分别为６９．６％或６０．５％）；Ｆ（ａｂ′）２组优于完整的ｍＡｂ组，提示ＩＦＮ－γ具有良好的导向辅佐作用。上述结果可为临床应用提供重要的实验依据。     

酸性同功铁蛋白单克隆抗体免疫学特性的研究

目的：探讨抗不同组织酸性同功铁蛋白（ＡＩＦ）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的免疫学特性。方法：和聚焦层析技术分别从人胎盘和原发性肝癌组织中分离出低ｐＩ值的ＡＩＦ,常规制备ＭｃＡｂ和进行免疫组织化学测定。结果：共筛先到５株抗人胎盘ＡＩＦ和２株抗人原发性肝癌（ＰＨＣ）ＡＩＦ）的ＭｃＡｂ即２ｆ８、４ｇ７、４ｇ８、５ｃ３、７ａ９和４ｃ９、４ｅ２。抗ＡＩＦ ＭｃＡｂｓ ５ｃ３和４ｅ２作用于同一抗株决定簇。使用ＭｃＡ     

~（131）I－HAb18肝癌单克隆抗体对荷肝癌裸鼠的导向治疗药效研究

￣（１３１）Ｉ－ＨＡｂ１８肝癌单克隆抗体对荷肝癌裸鼠的导向治疗药效研究米力，陈志南，曲萍，边惠洁，刘成刚（第四军医大学国家８６３肝癌导向药物项目组，西安７１００３２）单克隆抗体对肿瘤相应抗原具有高度的亲和性，用放射性核素标记ＭＣＡｂ．可选择性地杀伤瘤...     

单克隆抗体放射免疫显像和治疗副反应初探

报告了应用本科研制的＾１３１Ｉ－ＡＦＰ ＭｃＡｂ对肝癌ＲＩＩ ３３例和ＲＩＴ ２４例，给予的＾１３１Ｉ－ＡＦＰ ＭｃＡｂ量分别为ＲＩＩ：７４－１８５ＭＰｑ／ＩｇＧ０．１－１ｍｇ；ＲＩＴ：７４０－２９６０ＭＢｑ／ＩｇＧ０．５－５ｍｇ，治疗前后检测肝、肾功能，白细胞计数，临床观察给药后有无反应。分析结果３３例ＲＩＩ病人，给药后未见不良反应。２４例ＲＩＴ病人，治疗前后白细胞及肝、肾功能未见显著变化，３例     

^131I—McAbJHⅢFab′片段在荷瘤裸鼠体内的定位显像

用蛋白酶切技术制备ＭｃＡｂＪＨⅢＦａｂ′片段，回收率约１０％，片段活性相当于完整ＭｃＡｂ的１：１０＾２稀释浓度。同用氯胺Ｔ法标记ＭｃＡｂＪＨⅢＦａｂ′，对荷人肝细胞癌ＢＥＬ－７４０２裸鼠体内的放射免疫显像进行了研究，腹腔注射＾１３１Ｉ－ＭｃＡｂＪＨⅢＦａｂ′后２４～９６ｈ，肿瘤部位有放射性浓聚，以４８～７２ｈ影像最为清晰；而注射＾１３１Ｉ－ＭｃＡｂⅢ肿瘤部位也有积累现象，但本底消除更慢，＾１３１Ｉ     

人肝癌细胞GHC－3表面抗原性质的研究

以人肝庙细胞株ＧＨＣ－３细胞为抗原，免疫制备获得抗人肝癌细胞膜单克隆抗体ＨＬＭ＿３（ＨＬＭ＿３－ＭｃＡｂ）．应用ＨＬＭ＿３－ＭｃＡｂ研究分析肝瘤细胞表面抗原性质及其对ＧＨＣ－３细胞的生物效应，结果表明：ＨＬＭ＿３－ＭｃＡｂ可抑制已铺展的ＧＨＣ－３细胞生长；辣根过氧化物酶结合法探测受ＭｃＡｂ作用的细胞ＣｏｎＡ受体和ｒａｓ瘤基因产物ｐ２１．反应均明显减弱；交叉－阻断测试抗原及ＣｏｎＡ受体发现，无论是细胞先与ＭｃＡｂ结合后再与ＣｏｎＡ反应，抑或先与ＣｏｎＡ反应后再与ＭｃＡｂ结合，都显示ＧＨＣ－３细胞的膜抗原与腹表面的ＣｏｎＡ受体有密切关系。进一步作糖化学分析，从高效薄层色谱（ＨＰＴＬＣ）区带和扫描初步显示为不完全分化的中性糖脂。     

单克隆抗体间接荧光法分型检测单纯疱疹病毒的实验研究

本文选择３株抗单纯疱疹病毒型共同性和型特异性单克隆抗体，建立了分型检测单纯疱疹病毒的单克隆抗体间接荧光法（ＭｃＡｂ－１ＦＡ）．特异性试验和重复性试验证实，ＭｃＡｂ－ＩＦＡ特异性强、重复性好．用此法检测了不同部位来源的５１份临床分离株，分型检测结果与ＥＬＩＳＡ法检测结果一致．提示ＭｃＡｂ－ＩＦＡ有可能成为实验室分型检测单纯疱疹病毒可靠的方法．     

抗病毒蛋白MxA的诱导和检测方法的实验研究

目的 研究抗病毒蛋白ＭｘＡ的表达及其活性。方法用ＩＦＮα２ｂ或３型腺病毒（Ａ＿３）分别对ＷＩ－３８细胞或人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣｓ）作用 １２或２４ ｈ，并用Ｗｅｓｔｅｍ ｂｌｏｔ法或ＦＡＣＳ法，分别对Ｍ蛋白的表达进行定性和定量检测。采用微量细胞病变抑制法，对重组的ＭｘＡ和ＩＦＮα２ｂ进行抗病毒效应实验。结果 （１）低浓度的 ＩＦＮα２ｂ（＞ １×1０～＃ＩＵ／Ｌ）和Ａｄ＿３（＞２００ ＴＣＩＤ＿５０），均可诱导相应细胞表达 ＭｘＡ；（２）１０μｇ／Ｌ ＭｘＡ可抵抗２０个 ＴＣＩＤ＿（５０）的 ＨＳＶ－Ｉ、Ｐｏｌｉｏ． Ｖ感染 Ｖｅｒｏ细胞、Ａｄ＿３感染ＨｅＬａ细胞，抵抗２００个ＴＣＩＤ＿（５０）的ＶＳＶ感染Ｗｉｓｈ细胞。结论ＭｘＡ只能由干扰素（ＩＮＦα2ｂ）或病毒诱导产生，其具有广谱的抗病毒活性。     

131I标记重组人表皮生长因子体内抑制乳腺癌生长的实验研究

研究 1 31 I标记重组人表皮生长因子 (1 31 I- Recombinant hum an epiderm al growth factor,1 31 I- rh EGF)对荷人乳腺癌裸鼠肿瘤生长的抑制作用。1 31 I- rh EGF在荷人乳腺癌裸鼠体内的组织分布实验证实 1 31 I- rh EGF的生物活性及乳腺癌组织对 1 31 I- rh EGF的摄取 ,通过给药后荷人乳腺癌裸鼠肿瘤的生长实验观察 1 31 I- rh EGF对肿瘤生长的影响 ,用透射电镜和病理组织学检查分别观察 1 31 I- rh EGF治疗后肿瘤细胞的超微结构变化和组织病理学变化。1 31 I-rh EGF的组织分布显示 ,荷人乳腺癌裸鼠的肿瘤组织对 1 31 I- rh EGF有明显摄取。肿瘤生长观察结果显示 ,静脉注射和瘤体内注射 1 31 I- rh EGF均能明显抑制肿瘤的生长 ,抑瘤率 (82 .0 0 %和 80 .70 % )显著大于 1 31 I(7.4 9% )和 1 31 I- HSA(6 .91% ) (P<0 .0 5 )。透射电镜和病理学观察均显示 ,静脉注射和瘤体内注射 1 31 I- rh EGF均能明显杀伤、杀死肿瘤组织细胞。实验表明 ,1 31 I- rh EGF能抑制裸鼠体内的人乳腺癌细胞生长 ,可望成为受体介导放射性靶向治疗乳腺癌的新药物     

~(131)I标记抗人结肠癌单克隆抗体MC_3在荷瘤裸鼠体内分布及肿瘤放射免疫显像

抗人结肠癌单克隆抗体(McAb)MC_3用~(131)Ⅰ标记后在裸鼠人肠癌模型上进行肿瘤定位和放射免疫显像研究。结果显示:体外标记抗体特异性结合率为37.5%,裸鼠体内在48～120h的ECT照相可见在肿瘤部位均有放射性的特异性浓聚,其摄取量随时间延长逐渐增加,肿瘤显影清晰,显像的合适时间为96～120h。而给予非特异性的~(131)Ⅰ-NMIgG后,肿瘤部位未见放射性浓聚,而呈全身均匀性分布。120h肿瘤组织与肝脏及正常肠组织的比值分别为3.61和9.81,肿瘤定位指数为4.26。病理组织学检查显示注射~(131)Ⅰ-MC_3裸鼠肿瘤呈大片坏死,仅局部肿瘤边缘尚存少数完整的肿瘤组织。提示McAbMC_3用于肠癌的诊断和导向治疗可能有良好的前景。     

131I标记重组人表皮生长因子在裸鼠体内的辐射生物学效应研究

研究131I标记的重组人表皮生长因子(131I-rhEGF)对荷人乳腺癌裸鼠的辐射生物学效应。通过131I-rhEGF在小鼠体内的分布实验找寻131I-rhEGF的主要浓聚组织,再通过生化检查和活组织病理检查检测131I-rhEGF对荷人乳腺癌裸鼠主要浓聚131I-rhEGF的组织的辐射损伤。131I-rhEGF在小鼠体内的分布实验显示,131I-rhEGF主要浓聚在肾、肝、脾、血。生化检查和活组织病理检查结果显示,注射131I-rhEGF2次(每次注射量相当于50kg人体注射14.58GBq,间隔为14d)对荷人乳腺癌裸鼠的肿瘤有较强的杀伤作用,而对肾、肝、脾和造血组织均无辐射损伤。因此,131I-rhEGF在受体介导放射性靶向治疗乳腺癌的过程中对正常组织是安全的药物。     

抗人结肠癌单克隆抗体SC3A在荷瘤裸鼠体内的放射免疫定位研究

本文用~(131)I标记自制的抗人结肠癌单克隆抗体SC3A,进行荷人结肠癌裸鼠体内生物学分布和肿瘤的放射免疫显像研究。结果在注射~(131)I饲—SC3A后24～120h,肿瘤部位的放射性均显示出选择性浓聚,以72～120h的影像最为清晰;而注射~(131)I—鼠IgG则呈全身均匀性分布,无肿瘤部位选择性波聚影像。在72h,13种器官的T/NT均大于2,肿瘤LI为6.94,与扫描显像结果吻合。这些都表明SC3A在生物体内对结肠癌具有良好的选择性和导向作用,抗体可对其供临床体内进一步应用提供了依据。     

[~(125)I]-(A14)单碘胰岛素在荷人肝癌裸鼠体内的趋瘤特性研究

目的 :观察放射性碘标记胰岛素在荷人肝癌裸鼠体内的趋瘤或亲肿瘤 (tumor-seeking)特性。方法 :采用荷人肝癌裸鼠模型。用 [12 5I]- (A14)单碘胰岛素进行荷人肝癌裸鼠体内分布实验和抑制实验。结果 :体内分布实验显示肝癌组织摄取 [12 5I]- (A14)单碘胰岛素明显高于本底组织 (肌肉 ) ,肿瘤与血和肿瘤与肌肉的放射性比值随时间延长而增高。体内抑制实验发现肿瘤组织于 30min的抑制率为 35 .0 %。结论 :[12 5I]- (A14)单碘胰岛素在荷人肝癌裸鼠体内 ,通过受体介导作用 ,能被肝细胞癌组织特异性摄取。     

不良心理应激对人卵巢癌荷瘤裸鼠皮下移植瘤生长及表皮生长因子受体、磷酸化蛋白激酶B、血管内皮生长因子蛋白表达的影响

目的 通过观察不良心理应激人卵巢癌荷瘤裸鼠皮下移植瘤的体积、重量和瘤体组织中表皮生长因子受体（EGFR）、磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）、血管内皮生长因子（VEGF）蛋白表达情况的差异,探讨其对卵巢癌生长的影响及可能的分子机制。 方法 购置4～6周龄的雌性BALB/c裸鼠,称重,随机分两组,每组12只。A组：荷瘤组皮下移植人卵巢癌组织瘤块,不给予应激;B组：荷瘤+应激组皮下移植人卵巢癌组织瘤块,给予应激。定期测量皮下移植瘤的体积,结束应激实验后的第2天,处死全部组别（A组、B组）裸鼠,剥离肿瘤予以称重,利用免疫组织化学及Western blotting方法对A、B两组皮下移植瘤组织中的EGFR、p-Akt、VEGF蛋白表达情况进行检测。 结果 荷瘤+应激组皮下移植瘤体积及其重量显著高于荷瘤组（P＜0.01）;免疫组织化学实验提示,荷瘤+应激组中皮下移植瘤组织中的EGFR、p-Akt、VEGF蛋白表达水平高于荷瘤组（P<0.05）;Wester blotting提示,荷瘤+应激组皮下移植瘤组织中EGFR、p-Akt、VEGF蛋白表达水平显著高于荷瘤组（P<0.01）。 结论 不良心理应激可能通过EGFR及其介导的下游PI3K/Akt信号通路来促进卵巢癌的发生、发展。     

Treatment of prostate carcinoma with (galectin-3)-targeted HPMA copolymer-(G3-C12)-5-Fluorouracil conjugates

Galectin-3 (Gal-3), over-expressed on a variety of human tumor cells, is a potential binding site for targeted metastatic prostate cancer therapy. The aim of this study was to develop a G3-C12-mediated drug delivery system based on N-(2-hydroxypropyl) methacrylamide (HPMA) copolymers targeting to Gal-3-expressed human PC-3 prostate carcinoma cells. 5-Fluorouracil (5-Fu), an anti-tumor agent, was selected as a model drug. G3-C12, a binding peptide, which specifically binds to the carbohydrate-recognition domain (CRD) of Gal-3, was attached to HPMA copolymers as a targeting moiety. Compared with non-targeted conjugates (P-Fu), Gal-3-targeted HPMA copolymer-(G3-C12)-5-Fu conjugates (P-(G3-C12)-Fu) displayed a superior intracellular internalization followed by enhanced cytotoxicity and apoptosis-induction. Subsequently, the in vitro migration study on PC-3 cells indicated that P-(G3-C12)-Fu was able to efficiently inhibit the cell migration ability after wounding. On PC-3 tumor-bearing mice model, G3-C12-modified copolymers showed a higher tumor accumulation coupled with a faster clearance from blood circulation than non-modified ones. Finally, Gal-3-targeted conjugates significantly improved the anti-tumor activity of 5-Fu in nude mice bearing PC-3 tumor xenografts. Consequently, G3-C12 would be a promising targeting moiety for cell-specific prostate cancer therapy in future.     

肝癌单克隆抗体HAb18及其F（ab′）_2、Fab片段在小鼠体内的药代动力学研究

作者对１３１Ｉ标记的抗人肝细胞癌单克隆抗体ＨＡｂ１８及Ｆ（ａｂ′）２、Ｆａｂ片段在小鼠体内的药代动力学进行研究。结果表明：（１）３种标记物的药代动力学模式有很大差异，完整抗体ＨＡｂ１８的清除过程符合开放一空模型，清除速率与注射剂量有关。按照剂量从高至低，其Ｔ１／２（整体排泄）分别为４８．０８ｈ、４２．６５ｈ、４０．５４ｈ；Ｔ１／２（血液清除）依次为６１．４２ｈ、４８．０７ｈ、４１．０３ｈ。（２）抗体片段的清除速率明显快于完整抗体，清除过程呈双相下降，符合二室模型。Ｆ（ａｂ′）。整体排泄的Ｔ１／２ａ为５．２９ｈ，Ｔ１／２β为３９．３７ｈ；血液清除的Ｔ１／２ａ为４．２０ｈ，Ｔ１／２β为３４．６１ｈ。Ｆａｂ片段整体排泄的Ｔ１／２ａ为３．５１ｈ，Ｔ１／２β为２０．２２ｈ；血液清除的Ｔ１／２ａ为１．３９ｈ，Ｔ１／２β为２４．３９ｈ。提示：完整抗体适用于肿瘤导向治疗，显像诊断则以抗体片段为佳。     

Modeling Recombinant Immunotoxin Efficacies in Solid Tumors

Effectiveness of cancer therapy is improved by the use of recombinant immunotoxins (RITs) that target membrane proteins unique to malignant tumor cells. Although RIT antitumor activity in vivo can always be improved with larger doses, clinical restriction on the dose toleration makes it critical to explore how RIT antitumor activity can be maximized without resorting to dose elevation. In this work, a mathematical model was developed to explore functional correlations between the properties of several recombinant immunotoxins and their antitumor efficacies in vivo. Simulations were compared with experimental data of human tumor xenografts grown on nude mice to assess parameters critical to optimal antitumor activity. We dissected out or held constant as many parameters of the model as possible to investigate the effect of the remaining parameters on the behavior of the system as a whole. Empirical correlations between immunotoxin binding affinity and the target binding site density were obtained for several recombinant immunotoxins targeting either human A431 carcinoma or CD46 Burkitt’s lymphoma. Simulations reinforced the idea of binding site barrier for drug diffusion and suggested that optimal antitumor activity was achieved when the binding affinity is logarithmically dependent on the target binding site density.     

[125I]-(A14)单碘胰岛素在荷人肝癌裸鼠体内的趋瘤特性研究

目的：观察放射性碘标记胰岛素在荷人肝癌裸鼠体内的趋瘤或亲肿瘤（tumor-seeking）特性。方法：采用荷人肝癌裸鼠模型。用[¹²⁵I]-(A14)单碘胰岛素进行荷人肝癌裸鼠体内分布实验和抑制实验。结果：体内分布实验显示肝癌组织摄取[¹²⁵I]-(A14)单碘胰岛素明显高于本底组织（肌肉）,肿瘤与血和肿瘤与肌肉的放射性比值随时间延长而增高。体内抑制实验发现肿瘤组织于30 min的抑制率为35.0%。结论：[¹²⁵I]-(A14)单碘胰岛素在荷人肝癌裸鼠体内,通过受体介导作用,能被肝细胞癌组织特异性摄取。