华蟾毒精对人结直肠癌SW-480、HT-29、HCT-116细胞的放疗增敏作用

目的探讨华蟾毒精对人结直肠癌SW-480、HT-29、HCT-116细胞的放疗增敏作用。方法选用SW-480、HT-29、HCT-116这3种人结直肠癌细胞株,细胞经单纯放疗和联合药物处理24 h、48 h、72 h后CCK8法检测细胞增殖,并于处理后48 h流式细胞仪测定细胞周期和凋亡。结果与单独放疗作用相比,华蟾毒精和放疗联合应用能明显抑制人结直肠癌SW-480、HT-29、HCT-116细胞增殖,同时诱导和促进人结直肠癌细胞的凋亡发生,调整细胞周期的变化。结论华蟾毒精可以增加人结直肠癌SW-480、HT-29、HCT-116细胞的放疗敏感性,提高放疗对人结直肠细胞的放射治疗效果。     

胞黏蛋白对结直肠癌细胞增殖的影响及作用机制的初步探讨

目的:探讨胞黏蛋白在人结直肠癌细胞增殖中的作用及可能的作用机制.方法:分别采用RT-PCR法和免疫荧光法检测结直肠癌HT-29、HCT-116、SW620和SW480细胞中胞黏蛋白的表达情况.MTT法检测阻断剂SecinH3阻断胞黏蛋白,或小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)干扰胞黏蛋白-2(ARNO)表达后对HT-29细胞增殖的影响.蛋白质印迹法检测SecinH3阻断或ARNO-siRNA干扰对HT-29细胞中表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)通路分子激活情况的影响,对HCT-116细胞中胰岛素样生长因子Ⅰ型受体(insulin-like growth factor type Ⅰ receptor,IGF-IR)通路分子激活情况的影响.结果:胞黏蛋白的4个亚型在HT-29、HCT-116、SW620和SW480细胞中均有表达:其中以ARNO的表达量较高;SecinH3处理HT-29细胞后使细胞生长受到抑制,作用72 h后细胞增殖抑制率达(57.22±1.01)％,ARNO- siRNA干扰ARNO蛋白的表达亦能使该肿瘤细胞的增殖受到抑制,ARNO- siRNA转染HT-29细胞48 h后,其细胞增殖抑制率为(58.95±3.42)％.蛋白质印迹法检测结果提示,阻断剂SecinH3及ARNO-siRNA均能下调结直肠癌细胞中ARNO蛋白的表达,使HT-29细胞中EGFR信号通路、HCT-116细胞中的IGF-IR信号通路受到抑制,其相应的下游信号通路因子亦出现明显的下调.结论:胞黏蛋白与EGFR或IGF-IR信号通路的活化具有相关性,其有可能成为结直肠癌治疗的一个新的靶点.     

冬凌草甲素诱导结肠癌细胞凋亡的机制研究

目的:观察冬凌草甲素(oridonin)对人结肠癌细胞HCT-116和HT-29的凋亡抑制作用,同时探讨其诱导结肠癌细胞凋亡作用的机制.方法:应用Cell-counting kit-8检测冬凌草甲素对HCT-116和HT-29细胞的生长抑制作用及对细胞活力的影响;采用烟酸己可碱(hoechst)33342和碘化丙啶(propidium lodine,PI)荧光染色法,观察冬凌草甲素诱导结肠癌HCT-116和HT-29细胞凋亡的形态学变化;采用总NO检测试剂盒与活性氧(reactive oxygen species,ROS)检测试剂盒检测冬凌草甲素处理HCT-116和HT-29细胞时,细胞内NO与ROS水平的变化;同时应用ROS阻断剂N-乙酰基半胱氨酸(N-acetyl-cysteine,NAC)预处理HCT-116、HT-29细胞后再加入冬凌草甲素,观察细胞凋亡情况.结果:冬凌草甲素可明显抑制HCT-116和HT-29细胞的增殖、降低细胞活力;Hoechst 33342和PI双荧光染色发现冬凌草甲素可诱导HCT-116和HT-29细胞的凋亡.虽然冬凌草甲素不能改变HCT-116、HT-29细胞内的NO水平,但是可提高HCT-11和HT-29细胞内ROS水平;ROS阻断剂NAC可阻断冬凌草甲素诱导HCT-116和HT-29细胞凋亡. 结论:冬凌草甲素通过提高ROS水平诱导HCT-116和HT-29细胞的凋亡.     

过表达miR-7对结肠癌HCT-116细胞生物学行为的影响

 目的 探讨上调microRNA-7（miR-7）表达对结肠癌HCT-116细胞生物学行为的影响及可能机制。方法 HCT-116转染后分成miR-7 mimics组、Scramble（阴性对照）组和空白对照组。实时荧光定量PCR（RT-Fq-PCR）检测转染48 h后各组细胞中miR-7表达水平，CCK-8法检测转染72 h后各组细胞的增殖抑制情况，Transwell实验观察转染24 h后细胞侵袭能力，流式细胞仪行细胞周期和细胞凋亡检测。Western blot检测PI3K（p110）、p-Akt及p-mTOR的蛋白表达。结果 miR-7 mimics组miR-7表达水平明显上调，与其余两组比较差异有统计学意义（P<0.05）；与阴性对照组和空白对照组相比，miR-7 mimics组细胞增殖抑制率升高，侵袭能力降低，细胞周期分析提示G₀/G₁期的细胞比例增高，S期细胞明显减少，细胞凋亡率明显增加， 且PI 3K、p-Akt及p-mTOR的蛋白水平明显降低（P<0.05）。结论 上调结肠癌HCT-116细胞中miR-7表达能抑制肿瘤细胞的增殖与侵袭，其机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路有关。     

MicroRNA-4465对结肠癌细胞凋亡和侵袭的影响

目的 探讨microRNA-4465（miR-4465）在结肠癌细胞中的生物学作用及其潜在的调控机制。方法 qPCR检测SW480、HT-29和HCT-116三种结肠癌细胞中的miR-4465水平，然后在HCT-116细胞中过表达miR-4465，MTT法和流式细胞仪分别检测细胞活性和细胞凋亡，试剂盒检测Caspase-3活性，Transwell实验检测细胞侵袭，荧光素酶报告基因检测分别测定miR-4465与HMGA1、HMGA2或EZH2的靶向关系。Western blot和qPCR分别检测HMGA1、HMGA2、EZH2的蛋白和mRNA表达水平。结果 在SW480、HT-29和HCT-116三种结肠癌细胞中，miR-4465表达均显著下调（P<0.05）。过表达miR-4465能够降低结肠癌HCT-116细胞活性，提高细胞凋亡率，增强Caspase-3活性，抑制细胞侵袭（均P<0.05）。miR-4465直接靶向HMGA1、HMGA2或EZH2的3'-非翻译区（3'-UTR），进而负向调控其表达。结论 miR-4465过表达能够降低结肠癌细胞活性，促进细胞凋亡并抑制细胞侵袭，这可能与负向调控HMGA1、HMGA2或EZH2基因有关。     

苦参碱对视网膜母细胞瘤细胞增殖、凋亡及PI3K/Akt信号通路的影响

目的 探讨苦参碱（Mat）对视网膜母细胞瘤细胞Y79细胞增殖、凋亡及PI3K/Akt信号通路的影响。方法 Y79细胞经0.5、1.0、1.5 g/L Mat处理24 h后,采用CCK-8试剂盒检测细胞增殖情况,磷酯酰丝氨酸结合蛋白-异硫氢酸荧光素/碘化丙啶（Annexin V-FITC/PI）双标记流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blotting免疫印迹检测各浓度Mat处理后凋亡相关蛋白Bcl-2及Bax、PI3K/Akt信号通路重要蛋白PI3K p85亚基、Akt及其磷酸化形式p-Akt的蛋白水平。结果 不同浓度Mat作用Y79细胞24 h后,可呈浓度依赖性方式抑制细胞增殖,增加细胞凋亡率（P＜0.05）。Western blotting检测发现,Mat可明显增加促凋亡蛋白Bax表达,降低抗凋亡蛋白Bcl-2水平并可降低PI3K p85α亚基及磷酸化Akt的蛋白水平（P＜0.05）,对总Akt水平无明显影响。结论 Mat可抑制人视网膜母细胞瘤增殖并诱导其凋亡,可能与抑制PI3K/Akt 信号通路有关。     

FBXW7基因点突变对结直肠癌HCT-116细胞的增殖、迁移、侵袭和抗 凋亡能力的影响

目的： 探讨FBXW7基因点突变对结直肠癌细胞株HCT-116增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。 方法： 通过构建FBXW7 基因野生型及突变型过表达的重组载体,并将其转染HCT-116细胞,应用Western blotting检测转染后FBXW7蛋白表达情况。 CCK-8检测细胞增殖能力,平板细胞克隆形成实验(HTCA)检测肿瘤细胞克隆形成能力,流式细胞术检测细胞凋亡情况,划痕及 Transwell细胞迁移实验检测细胞迁移和侵袭能力。 结果： 转染野生型FBXW7基因的HCT-116细胞中FBXW7蛋白表达水平高 于对照组（转染突变型FBXW7基因的HCT-116细胞）、阴性对照组（转染空质粒载体pEZ-M90的HCT-116细胞）及空白对照组（未 进行任何特殊处理的HCT-116细胞） （均P<0.05）。转染野生型FBXW7的HCT-116细胞的增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力相较 于其余各组均显著下降（均P<0.05）,且细胞凋亡率显著升高（P<0.05）。 结论： FBXW7基因点突变可使其蛋白表达水平降低,从 而促进结直肠癌HCT-116细胞的增殖、迁移和侵袭,并抑制其凋亡。     

银杏内脂B对人骨肉瘤Saos-2细胞的抑制作用研究

目的 探讨银杏内脂B（GB）对骨肉瘤（OS）细胞增殖、凋亡和迁移侵袭的影响以及潜在机制。方法 将人骨肉瘤Saos-2细胞分别在含300、600和1200 μmol/L GB的培养液中培养24、48和72 h,采用CCK-8法检测Saos-2细胞的增殖情况,流式细胞仪检测Saos-2细胞凋亡率,Transwell小室迁移与侵袭实验检测GB对Saos-2细胞迁移和侵袭能力的影响;提取GB处理后Saos-2细胞的mRNA和蛋白,采用实时荧光定量PCR和Western blotting检测Bcl-2、Bax、MMP-2和MMP-9的基因及蛋白表达水平,Western blotting法检测Erk和Akt磷酸化及cleaved-caspase-3水平。结果 GB能明显抑制Saos-2细胞的增殖,且呈时间和浓度依赖性,600和1200 μmol/L GB可诱导Saos-2细胞凋亡,GB对Saos-2细胞的迁移及侵袭的抑制作用呈浓度依赖性;GB可升高Bax mRNA和蛋白水平,但降低Bcl-2、MMP-2和MMP-9的mRNA和蛋白水平;高浓度GB能抑制Erk和Akt的磷酸化且升高cleaved-caspase-3水平。结论 GB具有抑制Saos-2细胞增殖及迁移侵袭和诱导细胞凋亡作用,其机制可能与抑制Erk和Akt磷酸化有关。     

银杏内酯B通过阻抑PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制胃癌HGC-27 细胞的恶性生物学行为

目的：探讨银杏内酯B（GKB）是否通过阻抑PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制胃癌HGC-27细胞的增殖、凋亡、迁移及侵袭。方法：将HGC-27细胞分为对照、GKB低剂量（100 mg/L）、GKB高剂量（200 mg/L）、GKB高剂量（200 mg/L）+740Y-P（PI3K激活剂）、Ly294002（PI3K抑制剂）组。采用MTT、Edu、FCM、Transwell实验分别检测各组细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭能力,qPCR和WB法分别检测各组细胞中PI3K mRNA、Akt mRNA、mTOR mRNA和Ki-67、caspase-3、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR蛋白的表达。构建胃癌HGC-27细胞裸鼠移植瘤模型,观察GKB对移植瘤生长的影响,WB法检测移植瘤组织中Ki-67、caspase-3、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR蛋白的表达。结果：体外实验结果表明,与对照组相比,GKB低剂量组、GKB高剂量组、Ly294002组HGC-27细胞的增殖活力及细胞增殖率、迁移和侵袭细胞数,PI3K、Akt、mTOR mRNA表达,以及Ki-67、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR蛋白表达均显著降低（均P<0.05）;细胞凋亡率、caspase-3蛋白表达均显著升高（均P<0.05）;740Y-P可部分逆转GKB对HGC-27细胞的抑制作用（均P<0.05）。荷瘤裸鼠实验结果显示,GKB可显著抑制HGC-27细胞裸鼠移植瘤的生长（P<0.05）,且可下调PI3K/Akt/mTOR通路相关蛋白的表达。结论：GKB可通过阻抑PI3K/Akt/mTOR信号通路而抑制胃癌HGC-27细胞增殖、迁移与侵袭并促进其凋亡。     

IL-17A通过PI3K/Akt通路促进肺癌A549细胞的增殖、迁移和侵袭

目的:研究IL-17A对肺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其分子机制。方法:使用不同浓度的IL-17A（0、1、10、100 ng/mL）分别作用于A549细胞。CCK-8检测IL-17A对A549细胞增殖的影响;划痕修复实验和Transwell细胞侵袭实验检测IL-17A对A549细胞迁移和侵袭的影响;Western blot检测IL-17A对PI3K/Akt信号通路和凋亡通路蛋白表达的影响;流式细胞术检测IL-17A对A549细胞凋亡的影响;IL-17A和PI3K抑制剂LY294002共同作用于A549细胞,划痕修复实验观察对A549细胞迁移的影响。结果:IL-17A可以促进A549细胞的增殖,其对A549细胞增殖的促进作用随着IL-17A浓度的增加而增加。IL-17A能够促进PI3K和Akt磷酸化蛋白表达、抑制凋亡蛋白caspase3的表达,并抑制A549细胞的凋亡。LY294002可以明显减弱IL-17A对A549细胞迁移的促进作用。结论:IL-17A通过PI3K/Akt通路抑制A549细胞的凋亡,从而促进A549细胞的增殖、迁移和侵袭。     

miR-182靶向NUMB调控结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的机制研究

目的:研究miR-182对结直肠癌细胞HT-29增殖、迁移和侵袭的影响，并探讨其机制。方法:运用qRT-PCR检测人正常结肠上皮细胞HCoEpiC、结直肠癌细胞HT-29中miR-182、NUMB的表达；将anti-miR-con组（转染anti-miR-con）、anti-miR-182组（转染anti-miR-182）、pcDNA组（转染pcDNA）、pcDNA-NUMB组（转染pcDNA-NUMB）、anti-miR-182+si-con组（anti-miR-182和si-con共转染）、anti-miR-182+si-NUMB组（anti-miR-182和si-NUMB共转染）均用脂质体法转染HT-29细胞；Western blot检测各组细胞中NUMB的蛋白表达；Transwell检测各组细胞的迁移和侵袭；MTT法检测各组细胞的增殖；双荧光素酶报告基因检测实验检测各组细胞的荧光素酶活性。结果:与人正常结肠上皮细胞HCoEpiC相比，结直肠癌细胞HT-29中miR-182表达显著升高，NUMB表达显著降低（P<0.05）；抑制miR-182、过表达NUMB均可下调HT-29细胞的增殖、迁移、侵袭；NUMB是miR-182的靶标。敲减NUMB可逆转抑制miR-182对HT-29细胞增殖、迁移、侵袭的下调作用。结论:miR-182可促进结直肠癌细胞的增殖、迁移、侵袭，其机制可能与靶向NUMB有关，将可为miR-182靶向治疗结直肠癌提供依据。     

miR-142-5p对人上皮性卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨miR-142-5p靶向PTEN-PI3K/Akt信号调控人上皮性卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡的具体机制。方法:Real-time PCR检测miR-142-5p在人卵巢癌组织及各卵巢癌细胞系中的表达情况。利用MTT、细胞克隆形成实验观察miR-142-5p对SKOV3细胞增殖活力的影响；Caspase-3活力检测miR-142-5p对SKOV3细胞凋亡情况；信号通路抑制剂处理及Western blot检测miR-142-5p、PTEN与PI3K/Akt信号通路的关系及PI3K/Akt信号下游基因Akt、FOXO1、cyclin D1等的表达情况；Luciferase实验验证miR-142-5p和PTEN 3' UTR的结合。结果:人上皮性卵巢癌组织及其细胞系中miR-142-5p表达显著增加（P<0.05)。与对照组相比，SKOV3细胞转染miR-142-5p mimics后活细胞数量显著增加，增殖能力显著上升，细胞凋亡下降（P<0.05)；与之相反的，转染miR-142-5p inhibitor后SKOV3细胞增殖能力下调，凋亡增加。信号通路抑制剂处理显示miR-142-5p过表达激活PI3K/Akt信号通路。Luciferase实验显示miR-142-5p与PTEN 3' UTR直接结合。与对照组相比，miR-142-5p mimics组PTEN表达显著降低，p-Akt蛋白表达则显著上调（P<0.05），同时过表达PTEN后p-Akt表达则显著降低（P<0.05）。结论:miR-142-5p通过抑制PTEN基因表达活化PI3K/Akt信号通路，促进人上皮性卵巢癌组织及SKOV3细胞增殖存活，抑制细胞凋亡。     

扁塑藤素抑制人胶质母细胞瘤U251细胞增殖的机制探讨

目的:探讨扁塑藤素对人胶质母细胞瘤U251细胞增殖的影响及其机制。方法:2、4和8 μmol/L的扁塑藤素作用U251细胞24 h后，使用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测U251细胞活力；Cell cycle staining Kit检测U251细胞周期；免疫印迹法检测增殖细胞核抗原（PCNA）蛋白和p-PI3K、PI3K、p-AKT以及AKT蛋白表达。结果:2、4和8 μmol/L的扁塑藤素显著降低U251细胞的活力，且具有浓度依赖性。扁塑藤素可下调U251细胞PCNA蛋白的表达。扁塑藤素处理U251细胞后，G1期细胞数明显增加，S期细胞数明显减少。扁塑藤素处理可明显降低U251细胞p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT的比值。结论:扁塑藤素可能通过抑制PI3K/AKT信号通路的活化抑制人胶质母细胞瘤的细胞增殖。     

阿西替尼通过调控自噬对结肠癌HCT-116细胞增殖、凋亡的影响研究

目的研究阿西替尼(AXI)对结肠癌HCT 116细胞增殖、凋亡及自噬的影响。方法体外培养结肠癌HCT 116细胞,分为AXI 1组(150 μmol／L)、AXI 2组(300 μmol／L)、AXI 3组(600 μmol／L)及无任何添加的正常对照组(NC组)。四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测各组结肠癌HCT 116细胞增殖情况;AnnexinV FITC／PI法检测各组结肠癌HCT 116细胞凋亡情况;Western Blot检测结肠癌HCT 116细胞自噬相关蛋白LC3 Ⅱ、beclin1,雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路中p mTOR、p P70S6K蛋白水平、增殖相关蛋白CyclinD1、c Myc,以及凋亡相关cleaved caspase3、B细胞淋巴瘤 2(Bcl 2)、Bax蛋白表达水平。结果与NC组比较,AXI 1组和AXI 2组结肠癌HCT 116细胞增殖抑制率、凋亡率、LC3 Ⅱ、beclin1、Bax、cleaved Caspase3蛋白表达水平依次增加(P<005),p mTOR、p P70S6K、Cyclin D1、c Myc、Bcl 2蛋白表达水平依次减少(P<005)。AXI 2组和AXI 3组结肠癌HCT 116细胞增殖抑制率、凋亡率、LC3 Ⅱ、beclin1、p mTOR、p P70S6K、CyclinD1、c Myc、cleaved caspase3、Bcl 2、Bax蛋白表达水平比较,差异无统计学意义(P>005)。结论AXI可通过抑制mTOR通路激活,诱导结肠癌HCT 116细胞自噬,抑制其增殖,促进其凋亡,初步揭示了AXI对结肠癌细胞的作用机制,为结肠癌的靶向治疗提供了新思路。     

地塞米松影响结肠癌细胞对奥沙利铂与氟脲嘧啶化疗敏感性的实验研究*

目的:检测糖皮质激素受体在结肠癌组织及细胞株中的表达,探讨地塞米松共处理或预处理24h,结肠癌细胞株对奥沙利铂和氟脲嘧啶化疗敏感性的变化。方法:采用免疫组化检测糖皮质激素受体在61例结肠癌组织标本及4 种结肠癌细胞株中的表达;Hoechst33342 染色、流式细胞仪检测体外地塞米松对结肠癌细胞株的凋亡诱导作用;以MTT 法检测地塞米松共处理或预处理24h 后,结肠癌Lovo 细胞株对奥沙利铂和氟脲嘧啶化疗敏感性的变化。结果:在57.3% 的结肠癌组织标本中糖皮质激素受体呈阳性表达,在四种结肠癌细胞株中仅Lovo 和HCT-116表达糖皮质激素受体,HT- 29和SW- 480 细胞不表达。单独应用地塞米松后,对糖皮质激素受体阳性的Lovo 和HCT-116 细胞有较强的促凋亡作用,对不表达糖皮质激素受体的HT- 29和SW- 480 细胞作用则不明显。以1 ×10-4 mol/L的地塞米松处理Lovo 细胞24h,或与奥沙利铂共处理可使奥沙利铂的 IC 50从（13.7 ± 1.3）μ g/mL 降低至（5.9 ± 0.6）μ g/mL 和（4.8 ± 0.7）μ g/mL;同样处理可使氟脲嘧啶的IC 50从（72.2 ± 8.1）μ g/mL 降低至（21.1 ± 4.1）μ g/mL 和（18.6 ± 4.0）μ g/mL。结论:部分结肠癌组织及细胞株表达糖皮质激素受体。地塞米松体外作用能够促进糖皮质激素受体阳性的结肠癌细胞发生凋亡,与奥沙利铂和氟脲嘧啶预处理或共处理后可以增加结肠癌细胞的化疗敏感性。      

CDO1通过PI3K/AKT信号通路调控胃癌细胞增殖及细胞周期

目的:探讨半胱氨酸双加氧酶1(CDO1)对胃癌细胞增殖、细胞周期的调控机制。方法:用脂质体法将si-NC组（转染si-NC）、si-CDO1组（转染si-CDO1）、pcDNA组（转染pcDNA）、pcDNA-CDO1组（转染pcDNA-CDO1）、pcDNA-CDO1+DMSO组（转染pcDNA-CDO1并用DMSO处理）、pcDNA-CDO1+IGF-1组（转染pcDNA-CDO1并用IGF-1处理）转染至AKG细胞。用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（qRT-PCR）、免疫印迹（Western blot）、细胞计数试剂盒（CCK-8）、流式细胞术检测细胞CDO1、PI3K、Akt、p-Akt蛋白的表达、细胞增殖、细胞周期。结果:与人胃黏膜上皮细胞GES-1相比，胃腺癌细胞AKG中CDO1的表达明显降低（P<0.05）；与si-NC组相比，si-CDO1组AKG细胞的增殖明显上调，细胞发生明显的S期、G2/M期阻滞，过表达CDO1则具有相反的作用。重要的是，敲减CDO1可上调PI3K/AKT信号通路关键基因PI3K、p-Akt的表达，而过表达CDO1具有相反的作用。激活PI3K/AKT信号通路后，过表达CDO1对胃癌细胞的增殖、细胞周期的调控作用可被部分逆转。结论:CDO1可抑制胃癌细胞的增殖，调控细胞周期，其机制与抑制PI3K/AKT信号通路的活性有关，将为胃癌的治疗提供参考。     

miR-182激活PI3K/AKT信号通路促进肝癌HepG2细胞增殖、侵袭和迁移的机制研究

目的:探讨miR-182通过PI3K/AKT信号通路对肝癌HepG2细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其机制。方法:将体外培养的HepG2细胞分为对照组(未转染)、阴性组(转染阴性对照)、模拟物组(转染miR-182模拟物)和模拟物+抑制剂组(转染miR-182模拟物后,加入PI3K/AKT信号通路抑制剂LY294002),采用RT-PCR检测各组细胞中miR-182的表达水平,Western blot检测各组细胞中PI3K/AKT信号通路相关蛋白PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT和MMP-9、c-Myc、VEGF蛋白的表达,采用MTT法、克隆形成实验和Transwell小室分别检测各组细胞的增殖、侵袭和迁移能力。结果:与对照组相比,模拟物组细胞的存活率、克隆形成率和侵袭细胞数、迁移细胞数均明显升高,细胞中p-PI3K、p-AKT和MMP-9、c-Myc、VEGF蛋白的表达水平也均明显上升(P<0.05);而阴性组和对照组细胞相比无显著性差异(P>0.05)。与模拟物组相比,模拟物+抑制剂组细胞的存活率、克隆形成率和侵袭细胞数、迁移细胞数明显降低,细胞中p-PI3K、p-AKT和MMP-9、c-Myc、VEGF蛋白的表达水平也均明显下降(P<0.05)。结论:miR-182可通过激活PI3K/AKT信号通路上调MMP-9、c-Myc、VEGF蛋白的表达促进肝癌细胞的增殖、侵袭和迁移。