Epstein—Barr病毒膜抗原在昆虫细胞sf9中的表达,纯 …

将Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒｒ（ＥＢ）病毒膜抗原基因（ＥＢＶ－ＭＡ）称ＭＡ１和截去穿膜区的ＭＡ基因称ＭＡ２分别插入杆状病毒表达载体ｐＶＬ－９４１。将两种重组质粒分别与杆状病毒ＤＮＡ共转染ｓｆ９细胞后获得Ｂａｃｕｌｏ－ＭＡ１和Ｂａｃｕｌｏ－ＭＡ２两种重组病毒，表达产物分别位于重组病毒感染的细胞表面或释放到细胞培养液中。免疫荧光方法检查，在感染的细胞表面表达产物与抗ＭＡ的单克隆抗体特异性地结合，ＳＤＳ－Ｐ     

慢性乙型肝炎患者血清sICAM-1水平及意义

目的：探讨慢性乙型肝炎（ＣＨＢ）患者血清可溶性细胞间粘附分子－１（ｓＩＣＡＭ－１）水平与肝损害的关系。方法：用ＥＬＩＳＡ检测正常人、慢性无症状ＨＢｓＡｇ携带者（ＡｓＣ）和ＣＨＢ患者血清ｓＩＣＡＭ－１。结果：ＣＨＢ患者血清ｓＩＣＡＭ－１明显高于正常人和ＡｓＣ;ＣＨＢ患者血清ｓＩＣＡＭ－１水平与其血清门冬氨酸转氨酶（ＡＳＴ）和总胆红素均呈明显正相关,与凝血酶原活动度呈明显负相关;重度ＣＨＢ患者血清ｓＩ     

Ⅱ型糖尿病患者血清sICAM-1和sVCAM-1检测及其临床意义

应用酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）,测定了４７例Ⅱ型糖尿病患者和２０例健康对照者血清可溶性细胞间粘附分子－１（ｓＩＣＡＭ－１）和可溶性血管细胞粘附分子－１（ｓＶＣＡＭ－１）含量。结果表明：①血清ｓＩＣＡＭ－１和ｓＶＣＡＭ－１水平,在Ⅱ型糖尿病组及有、无微血管病变组均显著高于健康对照组（Ｐ＜０．０５～０．０１）,有微血管病变组又高于无微血管病变组（Ｐ＜０．０５～０．０１）;②Ⅱ型糖尿病患者血清ｓＩＣＡＭ－１和ｓＶＣＡＭ－１之间呈正相关关系（ｒ＝０．５３,Ｐ＜０．０１）。提示：血清ｓＩＣＡＭ－１和ｓＶＣＡＭ－１参与Ⅱ型糖尿病的发病过程。     

一种新的gp130结合分子的序列分析和真核表达

目的对以ＧＳＴ－ｇｐ１３０融合蛋白为探针，筛选人胎盘ｃＤＮＡ文库而得到的一个分子（ＧＡＭ，ｇｐ１３０ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｍｏｌｅｃｕｌｅ）ｃＤＮＡ序列进行测定并做真核表达。方法进行噬菌体制备及克隆测序，并做同源性检索和构型、亲水性分析，ＣＯＳ细胞转染和３５Ｓ－蛋氨酸标记。结果所得ＧＡＭ分子与另一已克隆成功但功能还不清楚的称为ｈＡＥＳ－１的分子同源性达９７．７％。此外，ＧＡＭｃＤＮＡ还与果蝇ｅｎｈａｎｃｅｒｏｆｓｐｌｉｔ基因相关的分子有较高同源性。ＧＡＭ分子具有一个５８８个核苷酸的开放读框，编码１９６个氨基酸。将ＧＡＭ分子ｃＤＮＡ转染ＣＯＳ细胞后，细胞裂解液电泳可见一分子量约为２４×１０３的表达带，与预期的分子量相符合。结论ＧＡＭ分子与ｈＡＥＳ－１分子在开放读框内仅相差一个氨基酸（且不排除测序的个别错误），其分子量也与已报道的ｈＡＥＳ－１分子量相同，故认为两者很可能是同一分子。     

GAMdDNA稳定转染的M1细胞系的建立与鉴定

目的 为搞清ＧＡＭ在ｇｐ１２３０介导的信号转导中所起的作用。方法 选择ＩＬ－６ 出现分化和增殖抑制的Ｍ１细胞系，分别用正向和反向插入ＧＡＭＣＤＮＡ的真核表达载体ＰＥＥ－ＢＯＳ与ｐＳＶ２－ｎｅｏ质粒共转染，经Ｇ４１８选择培养筛选得到稳定转染的细胞，并用半工ＰＣＲ方法产了ＧＡＭ基因与这两种细胞基因组ＤＮＡ的整合。结果 流式细胞仪分析表明正向ＧＭＡＣＤＮＡ转染的Ｍ１细胞中ＧＭＡ的表达水平明显升高在ｇｐ１     

细胞间粘附分子-1和血管细胞间粘附分子-1的结构与功能

细胞粘附分子（ｃｅｌｌ　ａｄｈｅｓｉｏｎ　ｍｏｌｅｃｕｌｅ，　ＣＡＭ）是一类调节细胞与细胞、细胞与细胞外基质（ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ　ｍａｔｒｉｘ，　ＥＣＭ）间相互结合、起粘附作用的膜表面糖蛋白。细胞间粘附分子－１（ｉｎｔｅｒｃｅｌｌｕｌａｒ　ａｄｈｅｓｉｏｎ　ｍｏｌｅｃｕｌａｒ－１，　ＩＣＡＭ－１）和血管细胞间粘附分子－１（ｖａｓｃｕｌａｒ　ｃｅｌｌ　ａｄｈｅｓｉｏｎ　ｍｏｌｅｃｕｌａｒ－１，　ＶＣＡＭ－１）均属于ＣＡＭ中免疫球蛋白超家族（ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎ　ｓｕｐｅｒｆａｍｉｌ…     

E－选择素cDNA克隆和表达

从内皮细胞总ＲＮＡ中用ＲＴ－ＰＣＲ方法扩增出Ｅ－选择素ｃＤＮＡ全长编码区，并将其克隆到ｐＵＣ１８载体中，构建了重组质粒ｐＵＣ１８／Ｅ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ，对此质粒进行了酶切及ＤＮＡ序列分析鉴定。将Ｅ－ｓｅｌｅｃｔｉｎｃＤＮＡ插入到天坛株痘苗病毒载体ＳｍａＩ位点，构建了表达质粒ｐＪＳＡ１１７５／Ｅ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ。采用Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ方法，ｐＪＳＡ１１７５／Ｅ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ转染ＴＫ－１４３细胞，用ＢｕｄＲ和ＬａｃＺ双筛选，获得带有人Ｅ－选择素ｃＤＮＡ的重组痘苗病毒。经活细胞荧光染色和ＡＰＡＭ检测，重组痘苗病毒能有效地表达人Ｅ－选择素ｃＤＮＡ。     

一例MELAS的线粒体DNA突变

为了检测中国ＭＥＬＡＳ患者的致病因素，采用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交、ＰＣＲ、亚克隆及ＤＮＡ测序等技术，对１例中国线粒体脑肌病、乳酸中毒、中风样发作综合征（ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌｅｎｃｅｐｈａｌｏｍｙｏｐａｔｈｙｗｉｔｈｌａｃｔｉｃａｃｉｄｏｓｉｓａｎｄｓｔｒｏｋｅ－ｌｉｋｅｅｐｉｓｏｄｅｓ，ＭＥＬＡＳ）患者的线粒体ＤＮＡ（ｍｔＤＮＡ）进行了突变分析。检测到ＭＥＬＡＳ患者特有的Ａ→Ｇ３２４３碱基替换，这一替换导致了一个新的ＡｐａⅠ酶切位点的形成。此突变型ｍｔＤＮＡ在检测的骨骼肌及血液标本中均被发现。突变型ｍｔＤＮＡ在检测的骨骼肌及血液ｍｔＤＮＡ标本中所占的比例分别为８０％和６０％。推测这一影响到ｍｔＤＮＡ中ｔＲＮＡｌｅｕ（ＵＵＲ）基因二氢尿嘧啶环的核苷酸突变是此例ＭＥＬＡＳ的重要致病因素。此外，在所测ｍｔＤＮＡ５６１ｂｐ（２９５０～３５１０）范围内还发现了１个Ｇ→ＴＮＤ１３４２３中性突变。     

ICAM-1抗体诱导小鼠胸腺上皮细胞分泌IL-6

目的研究胸腺细胞和ＩＣＡＭ－１抗体对胸腺上皮细胞分泌ＩＬ－６的作用。方法用促ＩＬ－６依赖株增殖法检测ＩＬ－６活性，用原位杂交法检测ＩＬ－６ｍＲＮＡ的表达。结果不同的胸腺细胞亚群均能促进ＭＴＥＣ１分泌ＩＬ－６，而且作用无明显差异。ＩＣＡＭ－１抗体能够促进ＭＴＥＣ１分泌ＩＬ－６，其促进作用呈剂量依赖关系。放线菌酮预处理ＭＴＥＣ１以后，ＩＣＡＭ－１抗体和胸腺细胞均不再能促进ＭＴＥＣ１分泌ＩＬ－６。原位杂交证实，经胸腺细胞和ＩＣＡＭ－１抗体活化后，ＭＴＥＣ１表达ＩＬ－６ｍＲＮＡ明显增多，并且表达ＩＬ－６ｍＲＮＡ的ＭＴＥＣ１数量也增多。提示胸腺细胞和ＩＣＡＭ－１抗体能促进ＭＴＥＣ１合成新的蛋白和ｍＲ－ＮＡ。结论胸腺微环境内，胸腺细胞可以通过粘附分子与胸腺上皮细胞相互作用，并可促进胸腺上皮细胞分泌ＩＬ－６。     

血栓性疾病患者血浆可溶性细胞间粘附分子1水平与微血栓形成

目的为进一步探讨血栓性疾病患者血流中微血栓形成的发生机理。方法采用酶联免疫吸附（ＥＬＩＳＡ）法,检测４３例血栓性疾病（脑血栓１９例,肺栓塞１７例,下肢静脉血栓７例）患者血浆可溶性细胞间粘附分子１（ｓＩＣＡＭ－１）水平。结果血栓性疾病患者血浆ｓＩＣＡＭ－１水平明显高于正常健康组（白色微小血栓形成组Ｐ<０．０１,单纯红细胞聚集组Ｐ＜０．０５）,尤以白色微小血栓形成组最为显著。结论血栓性疾病患者血浆ｓＩＣＡＭ－１水平与微血栓形成密切相关,因此检测血浆ｓＩＣＡＭ－１水平,对血栓性疾病的早期诊断、疾病预防和药物疗效观察有意义,是一个重要标志物。     

细胞因子,地塞米松对肾小球系膜细胞表达细胞间粘附分子—1的影响

探讨细胞因子和地塞米松对肾小球系膜细胞表面表达细胞间粘附分子－１（ＩＣＡＭ－１）的影响。通过体外系膜细胞培养的方法，分别加入不同的细胞因子，观察其浓度及作用时间产生的影响；并用ＥＬＩＳＡ法检测不同浓度的地塞米松对系膜细胞表达ＩＣＡＭ－１的影响。结果显示系膜细胞表达ＩＣＡＭ－１的强弱与细胞因子的作用呈剂量、时间依赖关系；随着地塞米松浓度的增加，ＩＣＡＭ－１表达逐渐减弱，与未加地塞米松组相比相关均非常     

系统性硬化病血管内皮活性因子测定的临床意义

目的：从蛋白分子水平探讨血管内皮活性因子同系统性硬化病的关系。方法：选择４２例ＳＳｃ病人采用放射免疫测定法检测血浆内皮素（ＥＴ）、血栓素Ｂ２（ＴＸＢ２）、６－酮－前列腺素Ｆ１α（６－Ｋ－ＰＧＦ１α）,采用Ｇｒｉｓｓ方法检测血浆一氧化氮（ＮＯ）水平,关免疫法检测细胞间粘附分子－１（ＩＣＡＭ－１）、选择素（Ｐ－Ｓ）。结果;所有ＳＳＣ患者均存在高ＥＴ、ＴＸＢ２、ＩＣＡＭ－１、Ｐ－Ｓ血症,存在低ＮＯ、６－     

体外培养的人胸腺上皮细胞与胸腺细胞的相互作用

人胸腺上皮细胞（ＴＥｃ）的体外培养和传代，使研究人ＴＥｃ的特性和功能成为可能。人ＴＥｃ体外培养成功的关键是抑制成纤维细胞的生长。体外培养的人ＴＥｃ除表达角蛋白外，还表达ＨＬＡ－Ｉ类抗原、ＬＦＡ－３，ＩＣＡＭ－１和ＣＤ４０等表面抗原；可分泌ＩＬ－１，ＩＬ－６，ＩＬ－８，ＧＭ－ＣＳＦ，Ｇ－ＣＳＦ和Ｍ－ＣＳＦ等多种细胞因子和胸腺素；静息的胸腺细胞与ＴＥＳ的结合由ＣＤ２／ＬＦＡ－３介导，激活的胸腺细胞与ＴＥＣ的结合由ＣＤ２／ＬＦＡ－３和ＬＦＡ－１／ＩＣＡＭ－１共同介导；ＴＥＣ对成熟的胸腺细胞有辅助增殖的作用，对不成熟的胸腺细胞有直接激活作用：胸腺细胞可通过直接作用和分泌细胞因子的间接作用来调节ＴＥＣ的细胞因子分泌和表面抗原表达。     

反义Gαq/11亚基ODNs对平滑肌细胞DNA合成和PC蛋白表达的影响

目的：探讨Ｇｑ蛋白介导血管活性多肽对ｖＳＭＣＤＮＡ合成及增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）蛋白表达的影响。方法：用硫代修饰的Ｇαｑ／１１亚基反义寡聚脱氧核苷酸（Ｇαｑ／１１ＡＳ－ＯＤＮｓ），以６μｍｏｌ／Ｌ的浓度加入含１０－７ｍｏｌ·Ｌ－１ＥＴ－１刺激无血清ＤＭＥＭ培养基中体外培养ｖＳＭＣ。用３Ｈ－ＴｄＲ掺入法测定ｖＳＭＣＤＮＡ合成、免疫细胞化学技术检测ｖＳＭＣＰＣＮＡ蛋白表达。结果：Ｇαｑ／１１ＡＳ－ＯＤＮｓ可明显抑制ｖＳＭＣＤＮＡ的合成，在１２ｈ，２４ｈ时抑制率分别为８４２％和８５３％；Ｇαｑ／１１ＡＳ－ＯＤＮｓ亦明显降低ｖＳＭＣＰＣＮＡ蛋白的表达。而相同浓度的正义Ｇαｑ／１１ＯＤＮｓ只呈现少量抑制作用。结论：本实验提示Ｇαｑ／１１ＡＳ－ＯＤＮｓ有可能进一步应用于由血管活性多肽刺激引起的ｖＳＭＣ增生性疾病如经皮冠脉腔内血管成形术（ＰＴＣＡ）后再狭窄的防治的研究     

HIV糖蛋白gp120可增强胶质细胞中ICAM－1基因的表达─Janus激酶信号转导物、转录激活剂（STAT－1α）和PKC信号转导途径的作用（文摘）

ＨＩＶ糖蛋白ｇｐ１２０可增强胶质细胞中ＩＣＡＭ－１基因的表达─Ｊａｎｕｓ激酶信号转导物、转录激活剂（ＳＴＡＴ－１α）和ＰＫＣ信号转导途径的作用（文摘）［英／ＳｈｒｉｋａｎｔＰ…／／ＪＩｍｍｕｎｏｌ１９９６；１５６：１３０７］．ＩＣＡＭ－１是一种由细胞...     

质粒DNA促进HBsAg—抗HBs复合型疫苗诱生的免疫应 …

目的 研究ＨＢｓＡｇ－抗ＨＢｓ－质料ＤＮＡ复合型疫苗的免疫原性及其诱生细胞免疫应答的类型。方法 分别以ＨＢｓＡｇ、ＨＢｓＡｇ－抗－ＨＢｓ（ＩＣ）、ｐＩ／ＡｍｐＨＢｓ、ＩＣ－ｐＩ／ＡｍｐＨＢｓ及ＩＣ－ｐＩ／Ａｍｐ免疫小鼠，检测抗－ＨＢｓ的效价，分析抗－ＨＢｓ ＩｇＧ亚类（ＥＬＩＳＡ）；取免疫小鼠脾细胞，体外抗原刺激，用竞争性ＲＴ－ＰＣＲ方法检测ＩＦＮ－γ及ＩＬ－４ ｍＲＮＡ转录水平。结果 ＩＣ－ｐＩ     

BIOLOGIC HEMOSTATIC GLUE IN GENERAL SURGERY

ＢＩＯＬＯＧＩＣＨＥＭＯＳＴＡＴＩＣＧＬＵＥＩＮＧＥＮＥＲＡＬＳＵＲＧＥＲＹＢＩＯＬＯＧＩＣＨＥＭＯＳＴＡＴＩＣＧＬＵＥＩＮＧＥＮＥＲＡＬＳＵＲＧＥＲＹＨｕＹｉ－ｚｅ（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＳｕｒｇｅｒｙ，ＳｅｃｏｎｄＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉ...     

STUDY AND APPLICATION OF BELT MULTI-POINT PULSE THERAPEUTIC APPARATUS

ＳＴＵＤＹＡＮＤＡＰＰＬＩＣＡＴＩＯＮＯＦＢＥＬＴＭＵＬＴＩ－ＰＯＩＮＴＰＵＬＳＥＴＨＥＲＡＰＥＵＴＩＣＡＰＰＡＲＡＴＵＳＪｉａＸｕｅＱｉ１，ＧｕｏｓｈｅｎｇＹａｎｇ，ＹｉｎｇＣｈｅｎＺ，ＹｕｍｅｉＤｏｎｇ，ＢｉｎｇｅＦｕ（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＢ...     

人补体C1—抑制物基因在COS—7细胞中的表达

利用全长人Ｃ１－ＩＮＨ ｃＤＮＡ片段构成建功可在ＣＯＳ－７细胞中瞬间表达重组人Ｃ１－ＩＮＨ的表达质粒ｐＳＶＬＣ１。通过ＤＥＡＥ－Ｅｅｘｔｒａｎ法转染ＣＯＳ－７细胞，经体外标记、免疫沉淀和Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹后发现，转染细胞可分泌一条分子量约１１０ｋＤ的免疫活性蛋白带。     

地塞米松对HUVEC表达粘附分子的影响

研究地塞米松、ｒＩＬ－１ｒａ对内皮细胞表达粘附分子的影响,为炎症反应的病理过程提供理论依据。用ｒＴＮＦα、ｒＩＬ－１和ＬＰＳ诱导培养的人脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ）,以地塞米松或ｒＩＬ－１ｒａ处理ＬＰＳ或ｒＩＬ－１诱导的ＨＵＶＥＣ,采用Ｃｅｌｌ－ＥＬＩＳＡ法检测粘附分子ＩＣＭＡ－１和ＥＬＡＭ－１的表达。结果：ｒＴＮＦα、ｒＩＬ－１和ＬＰＳ提高ＨＵＶＥＣ表达ＩＣＡＭ－１和ＥＬＡＭ－１;地塞米松、ｒＩ