原发性胆汁性肝硬化患者调节性T细胞及相关细胞因子与肝功能损伤的相关性研究

目的观察原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者不同时期外周血CD4+CD25+调节性T细胞亚群表达及细胞因子IL-2、IL-4、IL-10、TNF-α水平,探讨其与肝功能损伤的关系。方法以流式细胞术检测PBC患者外周血CD3+、CD4+、CD8+、CD4+CD25+、CD16+CD56T淋巴细胞;以双抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)法检测外周血细胞因子IL-2、IL-4、IL-10、TNF-α水平;以20例健康体检者作为正常对照组。结果 PBC患者外周血CD4+CD25+T细胞比例显著低于正常对照组(P<0.05),CD4+、CD8+T细胞群与正常人相比无显著性差异,NK细胞比例显著高于正常对照组(P<0.05)。肝功能严重损伤的PBC患者外周血CD4+CD25+T细胞比例显著低于肝功能轻度损伤者(P<0.05),PBC患者外周血CD4+CD25+T的数量与肝功能损伤指标ALP、GGT呈负相关。PBC患者血清IL-2、TNF-α与对照组比较明显升高,肝功能严重损伤的PBC患者IL-2和TNF-α水平明显高于肝功能轻度损伤者,血清IL-2和TNF-α水平与肝功能损伤指标ALP和GGT呈正相关。结论 PBC患者外周血CD4+CD25+T细胞比例及细胞因子浓度与肝功能损伤密切相关,因此推测T淋巴细胞免疫功能及细胞因子的紊乱在PBC发病机制中起一定作用。     

复发性生殖器疱疹患者血清细胞因子的表达及机体细胞免疫功能的研究

目的：检测复发性生殖器疱疹（RGH）患者血清细胞因子（IL-2、IL-12、TNF-γ）水平和外周血T淋巴细胞亚群（CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD4＋／CD8＋）的分布,探讨生殖器疱疹（GH）患者反复发作的免疫学机制。方法：60例RGH患者和60例健康壹体者为研究对象。采用流式细胞仪测定受试对象血清中IL-2、IL—12、TNF-γ水平和T淋巴细胞亚群水平。结果：RGH组血清细胞因子（IL-2、IL-12、TNF-γ）水平均显著低于对照组,相比较有显著性差异（P〈0．05）;RGH组患者外周血CD3十、CD4＋、CD4＋／CD8＋T细胞明显低于对照组,相比较有显著性差异（P〈0．05）;而CD8＋T细胞明显高于对照组,相比较有显著性差异（P〈0．05）。结论：RGH患者血清中的细胞因子分泌出现异常,患者体内存在细胞免疫功能失调及免疫抑制现象。     

免疫功能失调与急性冠脉综合征发病关系的研究

目的观察急性冠脉综合征（ACS）患者免疫功能变化情况,探讨其与斑块稳定性之间的关系。方法急性冠脉综合征（ACS）组、稳定型心绞痛（SA）组及正常对照组3组病例于清晨空腹抽取静脉血,采用流式细胞术测定外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Treg）、CD4^＋T细胞和CD8^＋T细胞表达百分比,采用ELISA方法测定外周血中细胞因子转化生长因子-β（TGF-β）、白介素-10（IL-10）水平。常规检测血糖及血脂水平。结果ACS组外周血中Treg表达百分比显著低于SA组和对照组（P〈0.05）,ACS组CD4^＋/CD8^＋T细胞表达百分比的比值显著高于SA组和对照组（P〈0.05）。ACS组的TGF-β、IL-10水平显著低于SA组和对照组（P〈0.05）。结论急性冠脉综合征患者体内存在效应性T细胞和调节性T细胞之间的失衡,免疫调节功能紊乱参与了动脉粥样斑块的发生发展过程。     

参地糖脉宁对糖尿病大鼠免疫系统的影响

目的观察参地糖脉宁对糖尿病大鼠外周血T淋巴细胞及其细胞因子和免疫器官系数的影响。方法将48只雄性SD大鼠随机分为糖尿病组（DM组）、糖尿病阿司匹林干预组（AD组）、糖尿病参地糖脉宁干预组（SD组）、对照纽（NC组）。流式细胞术检测CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋T细胞计数，酶联免疫吸附双抗体夹法（ELISA）测定各组大鼠肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及白细胞介素-6（IL-6），测定并计算免疫器官系数。结果DM组CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋T细胞和胸腺指数显著低于NC组（P〈0．01），而IL-6和TNF-α显著高于NC组（P〈0．01）；SD组和AD组的CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋T细胞和胸腺指数显著高于DM组（P〈0．05），TNF-α和IL-6显著低于DM组（P〈0．01）；与AD组比较，SD组上述指标有明显改善（P〈0．05）。结论参地糖脉宁对糖尿病大鼠免疫系统有保护作用。     

慢性肺源性心脏病患者CD4^＋CD25^＋Treg的改变

目的观察慢性阻塞性肺疾病（COPD）所致慢性肺源性心脏病（CPHD）患者急性加重期以及治疗病情缓解后外周血中调节型T细胞（CD4^＋CD25^＋Treg）和血浆中Th1型细胞因子INF-γ及Th2型细胞因子IL-4的水平变化,并与健康对照者外周血中相应指标进行比较。探讨慢性肺源性心脏病患者细胞免疫功能状态,为CPHD患者治疗开辟新的途径。方法对CPHD患者急性加重期及治疗病情缓解后、健康对照者采用流式细胞仪技术检测外周血中的CD4^＋CD25^＋Treg水平。采用酶标记免疫吸附测定法（ELISA）测定血浆中INF-γ、IL-4的浓度。结果 CD4^＋CD25^＋Treg在CPHD急性期组高于缓解组和健康对照组,缓解组低于健康对照组（P〈0.05）。CPHD患者血浆中INF-γ在急性期组高于缓解组和健康对照组,缓解组高于健康对照组（P〈0.05）。CPHD患者急性期组、缓解组与健康对照组三组之间血浆IL-4的差别无统计学意义。结论 CPHD患者急性加重期和治疗病情缓解后均存在免疫功能的低下和免疫功能的失调。     

复方“自身清”与西药联用治疗轻中活动度SLE22例临床研究

目的：研究复方“自身清”配合西药治疗SLE患者的临床疗效及对CD4＋CD25^＋调节性T细胞及细胞因子的影响。方法：选择43例气阴两虚、毒热内扰证轻中活动度SLE患者，随机分为用中药复方“自身清”为主治疗的治疗组22例和单纯西药治疗的对照组21例．观察2组患者临床症状、病情活动积分和外周血中CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋、CD4^＋CD25^＋Tr细胞比率及IL-2、IL-10治疗前后变化。结果：治疗组在改善病情活动积分方面明显优于对照组，且所需激素用量明显少于对照组。治疗后2组患者低下的CD3^＋T细胞和CD4^＋T细胞比率、CD4/CD8比值、IL-2／IL-10比值、细胞因子IL-2均明显升高，而异常升高的细胞因子IL-10、CD3^＋T细胞比率则明显下降；治疗后2组患者CD4^＋CD25^＋Tr细胞水平较治疗前均明显升高，其中治疗纽升高更为明显。结论：复方“自身清”可能通过上调CD4^＋CD25^＋Tr细胞水平来提高SLE患者的免疫耐受能力，纠正CDJCD8比例倒置来调整细胞免疫紊乱．降低细胞因子IL-10分泌的同时促进细胞因子IL-2的分泌而调整Th1／Th2细胞因子谱的偏移．最终达到控制并缓解病情的目的。     

生脉饮加味联合化疗治疗晚期非小细胞肺癌临床研究

目的：观察生脉饮加味联合化疗治疗气阴两虚型晚期非小细胞肺癌的临床疗效。方法：选取气阴两虚型晚期非小细胞肺癌患者共136例,采取随机数字表法分为试验组和对照组。对照组予以吉西他滨＋顺铂化疗,试验组在对照组基础上,加用生脉饮加味治疗。对比两组患者治疗前后外周血T细胞亚群及细胞因子水平变化情况、临床疗效、治疗期间不良反应发生率。结果：试验组治疗后CD3^＋、CD3^＋CD8^＋、NK、NKT和Treg水平均显著升高,CD3^＋CD4^＋水平显著降低;对照组治疗后CD3^＋水平升高,CD3^＋CD4^＋、CD3^＋CD8^＋、NK、NKT和Treg水平均显著降低,两组治疗后比较,差异有统计学意义（P〈0.01）。试验组患者治疗后IFN-γ、TNF-α、IL-2水平升高,对照组治疗后IFN-γ、TNF-α、IL-2水平均显著降低,两组比较,差异有统计学意义（P〈0.01）。试验组患者治疗后有效率为48.53%,对照组38.23%,两组比较无显著性差异。治疗期间试验组总体不良反应发生率47.06%,低于对照组的72.05%,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论：采取生脉饮加味联合化疗治疗气阴两虚型晚期非小细胞肺癌不仅可以提高患者的免疫水平,还可以降低不良反应发生率。     

青蒿琥酯对佐剂性关节炎木鼠的治疗作用及对外周血T淋巴细胞、肿瘤坏死因子-α及白介素-6的影响

目的 探讨青蒿琥酯对佐剂性关节炎大鼠治疗作用，及对外周血T淋巴细胞、TNF-α，IL-6水平的影响。方法 42只Wistar大鼠随机分为5组，即空白组、模型组（对照组）、青蒿琥酯Ⅰ组、青蒿琥酯Ⅱ组（各8只）、青蒿琥酯加甲氨喋呤组（10只）。除空白组外，余4组用完全弗氏佐剂造模制备成佐剂性关节炎模型。记录用药品干预后各组关节肿胀指数、及外周血T淋巴细胞、TNF-α、IL-6的水平。结果 与对照组比较，青蒿琥酯Ⅰ组、青蒿琥酯Ⅱ组及青蒿琥酯加甲氨喋呤组佐剂性关节炎大鼠关节肿胀指数显著降低（P〈0．05或P〈0．01），外周血T淋巴细胞（CD3^＋CD4及CD3^＋CD8）、TNF-α及IL-6水平均明显下降，差异有显著性或非常显著性（P〈0．05或P〈0．01）。结论 青蒿琥酯可诱导佐剂性关节炎大鼠病情缓解，与甲氨喋呤联用作用更强。且可降低佐剂性关节炎大鼠T淋巴细胞（CD3^＋CD4及CD3^＋CD8）、TNF-α、IL-6的水平；结果 可为青蒿素用于类风湿关节炎的治疗提供一定的实验依据。     

化湿中药对慢性乙型肝炎湿证患者激活和功能T淋巴细胞亚群水平的影响

目的 探讨化湿中药对慢性乙型肝炎（chronic hepatitis B,CHB）湿证患者临床疗效与激活和功能T淋巴细胞亚群水平变化的关系。方法 将CHB湿证患者75例非随机分为两组,治疗组（45例）采用化湿中药治疗,对照组（30例）采用核苷类似物治疗,观察治疗1年后两组临床疗效及激活和功能T淋巴细胞亚群水平变化。结果 CHB患者外周血CD8^＋CD28^＋、CD4^＋CD28^＋T细胞水平与健康人比较均明显下降（P〈0．01）;CD8^＋CD38^＋T细胞水平与健康人比较均明显升高（P〈0．05）;经治疗后,治疗组CD4^＋CD28^＋、CD8^＋CD28^＋T细胞水平较治疗前明显升高（P〈0．05）,CD8^＋CD38^＋T细胞水平较治疗前明显下降（P〈0．05）,对照组CD8^＋CD38^＋T细胞水平较治疗前明显下降（P〈0．05）。两组总有效率及显效率相比较,差异无显著性（P〉0．05）。CHB显效患者治疗后CD8^＋CD28^＋、CD4^＋CD28^＋T细胞水平明显升高（P〈0．05）,CD8^＋CD38^＋T细胞水平较治疗前明显下降（P〈0．05）;非显效患者治疗前后CD8^＋CD28^＋、CD4^＋CD28^＋、CD8^＋CD38^＋、CD4^＋CD25^＋T细胞水平无明显变化（P〉0．05）。结论 化湿中药对CHB湿证患者激活和功能T淋巴细胞亚群水平有一定的调节作用,这可能是抑制病毒复制、清除病毒的重要途径。     

鼻咽癌和肾综合征出血热患者外周血T淋巴细胞亚群的研究

目的：探讨鼻咽癌和肾综合征出血热患者外周血T细胞水平的变化。方法：用流式细胞仪直接免疫荧光法检测健康成人、鼻咽癌（放疗前后）和肾综合征出血热患者外周血T细胞亚群（CD3^3＋、CD4^＋、CD^8＋）的百分率,并进行比较。结果：鼻咽癌患者放疗前后外周血CD8^＋细胞百分率与健康对照组相比明显升高,CD4^＋／CD8^＋比值明显降低,均有显著性差别（P〈0．001）;肾综合征出血热患者与健康对照组相比CD4^＋细胞百分率降低（P〈0．01）、CD8^＋细胞百分率升高、CD4^＋／CD8^＋比值下降（P〈0．001）。结论：鼻咽癌和肾综合征出血热患者体内存在免疫调节功能异常。     

喘可治抑制哮喘大鼠炎症反应的机制研究

目的探讨喘可治抑制哮喘大鼠炎症反应的可能机制。方法选用Wistar大鼠90只,其中15只为正常对照组,另75只制作哮喘大鼠模型并随机分为用不同剂量喘可治治疗组、地塞米松治疗组、模型组,共5组。各组给予相应的处理措施,采用酶联免疫吸附法测定各组大鼠外周血脂氧素A4（LXA4）、巨噬细胞移动抑制因子（MIF）、白介素4（IL-4）、γ-干扰素（IFN-γ）含量,采用流式细胞仪测定淋巴细胞亚群比例。结果与正常组比较,模型组除CD4^＋CD25^＋T调节细胞外,其余指标差异均有统计学意义（P〈0．05）。高剂量喘可治治疗组大鼠血清LXA4、INF-γ浓度均明显增高,且高于中、低剂量喘可治和地塞米松治疗组,差异有统计学意义（P〈0．05）。各剂量喘可治治疗组MIF浓度均较模型组明显下降,差异有统计学意义（P〈0．05）。各剂量喘可治治疗组II．4浓度均较模型组明显下降,其中高剂量组下降最明显,差异有统计学意义（P〈0．05）。高、中、低剂量喘可治治疗组CD4^＋CD25^＋T调节细胞百分比均明显上升,其中高剂量组升高最明显,与模型组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。高、中剂量喘可治治疗组CD3^＋CD161a^＋NK细胞的百分比明显上升,与模型组、低剂量组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论高剂量喘可治腹腔注射可能影响哮喘模型大鼠外周血LXA4、MIF、IL-4、IFN-γ等多种抑炎因子或细胞因子的浓度,缓解哮喘大鼠的炎症反应,同时可能影响哮喘模型大鼠外周血Treg细胞和NK淋巴细胞亚群的比例,有利于预防和控制哮喘。     

生脉注射液对体外循环所致机体免疫功能改变的影响

目的 探讨围术期使用生脉注射液对体外循环所致机体免疫功能改变的影响及其作用机制。     

黄芪甲苷在体外对高迁移率族蛋白B1介导小鼠调节性T淋巴细胞免疫功能的影响

目的在前期实验基础上,明确经高迁移率族蛋白B1（HMGB1）刺激的小鼠调节性T细胞（Treg）对CD4^＋CD25^-T淋巴细胞免疫功能的影响,观察黄芪甲苷（AST IV）对HMGB1介导Treg免疫功能的拮抗作用。方法随机将CD4^＋CD25^-T细胞分为对照组、Treg组、（HMGB1＋Treg）组、（HMGB1＋AST IV＋Treg）组。4组均于培养后72 h检测脾脏CD4^＋CD25^-T细胞增殖活性及CD4^＋CD25^-T细胞孵育上清液中IL-4、IFN-γ表达水平。结果 Treg组CD4^＋CD25-T细胞增殖活性受到抑制（P〈0.01）,其上清中IFN-γ表达水平较对照组明显下降（P〈0.01）,IL-4表达水平较对照组显著增加（P〈0.01）;HMGBI＋Treg组CD4^＋CD25-T细胞增殖活性受抑制程度明显逆转（P〈0.01）,与Treg组比较,（HMGB1＋Treg）组IFN-γ表达水平明显升高（P〈0.01）,IL-4表达水平显著下降（P〈0.01）;与（HMGB1＋Treg）组比较,（HMGB1＋AST IV＋Treg）组CD4^＋CD25^-T细胞增殖受抑制程度显著加重（P〈0.01）,IFN-γ表达水平明显降低（P〈0.01）,IL-4水平显著上升（P〈0.01）。结论 HMGB1在体外可明显降低小鼠Treg免疫抑制能力,而黄芪甲苷可拮抗此抑制作用,表明其对HMGB1介导的促炎效应具有治疗作用。     

益气解毒方对中晚期鼻咽癌患者CD4~+CD25~+调节性T细胞和Th17细胞的影响

目的探讨益气解毒方对中晚期鼻咽癌患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞和Th17细胞的影响。方法用流式细胞仪检测18例经益气解毒方加常规治疗的中晚期鼻咽癌患者(观察组)及l5例常规治疗的中晚期鼻咽癌患者(对照组)外周血CD4+CD25+调节性T细胞和Th17细胞比例,RT-PCR法检测Foxp3 mRNA和ROR-γt mRNA转录水平,ELISA法检测血清白细胞介素-6(IL-6)和转化生长因子-β(TGF-β)水平。结果观察组患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞占CD4+T细胞的比例和Foxp3 mRNA的相对表达量均低于对照组(P0.05),而Th17细胞占CD4+T细胞的数量比例和ROR-γt mRNA的相对表达量均高于对照组(P0.05);观察组患者血清IL-6水平高于对照组(P0.05),而TGF-β水平低于对照组(P0.05)。结论益气解毒方可影响中晚期鼻咽癌CD4+CD25+调节性T细胞的比例与功能,增强Th17细胞的分化,其机制可能是通过调节IL-6和TGF-β水平而逆转鼻咽癌免疫耐受。     

健脾益肾方对维持性血液透析患者细胞免疫的影响

目的：观察中药健脾益肾方治疗尿毒症维持血透患者细胞免疫低下的临床疗效。方法：将65例尿毒症维持血透患者随机分为两组。治疗组予口服健脾益肾方,对照组予口服安慰剂。疗程6个月,分别于治疗前、治疗后3个月及治疗后6个月检测CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋、CD4^＋/CD8^＋、IL-1、IL-2、IL-6等指标。结果：治疗6个月后治疗组CD3^＋、CD4^＋、CD4^＋/CD8^＋及IL-2均显著升高,CD8^＋、IL-1、IL-6显著降低（P〈0.01）,与对照组比较有显著差异（P〈0.05或P〈0.01）。结论：健脾益肾方对尿毒症维持血透患者有提高细胞免疫功能的作用。     

补肾健脾消症方联合化疗治疗胃癌术后患者疗效观察

目的：探讨补肾健脾消症方对胃癌术后患者化疗过程中细胞免疫功能和生存质量的影响。方法：将60例胃癌术后患者随机分为单纯化疗组和联合化疗组各30例,并与健康对照组比较,观察化疗前后NK细胞活性、CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋、CD4^＋/CD8^＋比值,以及生存质量评分（Karnofky评分）情况。结果：1、与健康对照组比较,胃癌术后患者NK细胞活性、CD3^＋和CD4^＋显著降低（P〈0.05）,而CD8^＋明显升高（P〈0.05）,致CD4^＋/CD8^＋比值降低（P〈0.01）;2、同组治疗前后比较,单纯化疗组治疗后NK细胞活性、CD3^＋降低明显（P〈0.05）。两组治疗后比较,联合化疗组NK细胞活性、CD8^＋高于单纯化疗组（P〈0.05）,在CD3^＋、CD4^＋、CD4^＋/CD8^＋比较上差异更为明显（P〈0.01）;3、同组治疗前后比较,联合化疗组治疗后Karnofky评分明显高于治疗前（P〈0.05）,而单纯化疗组治疗前后无明显变化。两组治疗后比较,联合化疗组Karnofky评分明显高于单纯化疗组（P〈0.01）。结论：补肾健脾消症方可显著提高胃癌术后患者化疗过程中的细胞免疫功能和生存质量。