胆碱酯酶抑制剂中毒大鼠肠屏障功能和形态结构变化及宾赛克嗪治疗作用的研究

目的 观察胆碱酯酶抑制剂类神经性毒剂中毒后大鼠肠屏障功能和组织形态结构的变化以及宾赛克嚷的治疗作用.方法 40只雄性Wistar大鼠按随机数字表法均分为对照组、维埃克斯染毒模型组及宾赛克嗪1、3、9 mg/kg治疗组.皮下注射维埃克斯13μg/kg染毒;宾赛克嗪组在染毒后5 min腹腔注射相应剂量药物.各组于染毒后3 h取血,检测血浆D-乳酸浓度及二胺氧化酶(DAO)活性;同时取小肠组织,观察肠黏膜形态和超微结构变化.结果 与对照组比较.模型组血浆D-乳酸浓度和DAO活性均明显升高[D-乳酸:(87.752±22.906)mg/L比(29.072±6.546)mg/L,DAO:(6.72±0.93)U/L比(2.99±0.43)U/L,均P<0.01];宾赛克嗪1、3、9 mg/kg组呈现剂量依赖性降低血浆D-乳酸浓度和DAO活性,其中宾赛克嗪9 mg/kg组可逆转染毒后血浆D-乳酸浓度[(45.290±11.141)mg/L]和DAO活性C(3.17±0.68)U/L]增高(均P<0.01).光镜下观察模型组大鼠空肠和回肠肠壁变薄,皱壁变短,结构紊乱,固有层毛细血管扩张充血,黏膜间质水肿等病理变化;电镜下观察模型组大鼠回肠上皮细胞发生坏死,细胞器损伤,紧密连接破坏等变化.宾赛克嗪1、3、9 mg/kg组呈现剂量依赖性抑制小肠的病理变化.结论 胆碱酯酶抑制剂中毒时出现肠黏膜上皮细胞损伤,肠黏膜屏障功能破坏,通透性增加;宾赛克嗪能抑制中毒肠黏膜屏障结构和功能的损伤.     

L-精氨酸对严重腹腔感染大鼠肠黏膜上皮的保护作用

目的 探讨L-精氨酸(L-Arg)对严重腹腔感染时肠黏膜上皮损伤的影响.方法 将18只Wistar大鼠随机分为两组,每组9只.采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备严重腹腔感染动物模型.L-Arg组于CLP后腹腔注射盐酸L-Arg(300 mg/kg);模型组给予等量生理盐水.两组均于术后24 h采血测定血清一氧化氮(NO)及诱生型一氧化氮合酶(iNOS)水平;光镜下观察小肠黏膜组织病理学变化,并检测肠黏膜上皮损伤指数.结果 CLP后大鼠均出现小肠黏膜病理损害,L-Arg组小肠黏膜病理损害明显减轻,肠黏膜上皮损伤指数(3.4±0.6)与模型组(4.1±0.5)比较差异有显著性(P＜0.05).L-Arg组血清NO水平[(76.1±26.2)μmol/L]虽低于模型组[(87.3±16.7)μmol/L],但差异无显著性;而L-Arg组iNOS水平[(30.6±7.4)U/L]显著低于模型组[(44.4±6.6)U/L],差异有显著性(P＜0.01).结论 L-Arg能降低严重腹腔感染大鼠血清iNOS水平,减轻严重腹腔感染时肠黏膜上皮的损伤.     

关于肠黏膜屏障功能衰竭临床分期标准的初步探讨

目的:初步建立肠黏膜屏障功能衰竭(IBF)的临床分期标准。方法:选取消化系统恶性肿瘤、肝硬化、炎性肠病等患者共50例作为病例组,选取25例健康志愿者作为对照组,均口服双糖探针后检测样本尿液中乳果糖/甘露醇(L/M)含量以评价肠道通透性,同时采集其新鲜粪便行菌群分析,记录其临床指标及实验室指标,分析病例组与对照组的临床表现、肠道通透性、肠菌群及免疫指标间的关系。结果:与对照组(0.02938±0.00725)相比,病例组尿L/M比值(0.06694±0.02343)显著增高,差异有统计学意义(t=9.874,P<0.01)。不同程度菌群失调患者肠道通透性差异无显著性(F=2.285,P=0.113)。随着患者腹胀及腹泻程度的增高,肠道通透性增高及中重度菌群失调的比例也增加。病例组C反应蛋白[(47.8±33.5)mg/Lvs(3.2±2.6)mg/L]、血浆内毒素[(5.806±4.219)EU/mLvs(0.018±0.056)EU/mL]及血清白细胞介素-6(22.19±8.45)pg/mLvs(6.24±0.13)pg/mL]水平较之对照组均有显著升高(均P<0.01)。结论:根据患者的临床症状、肠黏膜通透性、肠菌群状态及免疫指标间的关系,可初步建立IBF的临床分期标准。     

左旋精氨酸对严重腹腔感染患者肠屏障功能的影响

目的:探讨左旋精氨酸对严重腹腔感染患者肠屏障功能的影响。方法:将手术证实为严重腹腔感染的患者40例,随机分为常规治疗组(n=20)和精氨酸治疗组(n=20),精氨酸治疗组在常规治疗基础上添加左旋精氨酸0.3g/(kg·d)静脉滴注,连续5d。分别于术前及术后4d抽取两组静脉血检测血浆内毒素、血浆D-乳酸水平和血清C反应蛋白,同时观察两组患者的全身炎症反应综合征(SIRS)评分、术后并发症发生率、平均住院时间。结果:术后4d精氨酸治疗组较常规治疗组血浆内毒素[(0.27±0.11)EU/Lvs(0.39±0.13)EU/L]、血浆D-乳酸水平[(2.47±0.57)!g/Lvs(3.87±0.98)!g/L)]、C反应蛋白水平[(23.12±16.33)mg/Lvs(39.30±17.45)mg/L)]、SIRS评分(0.76±0.89vs1.41±0.94)均显著减轻(P<0.05);术后并发症、平均住院时间两组差异无显著性。结论:左旋精氨酸可减轻严重腹腔感染患者全身炎症反应,维护肠屏障功能。     

急性肝衰竭患儿细胞免疫及肠黏膜屏障功能临床研究

目的探讨急性肝衰竭患儿细胞免疫及肠黏膜屏障的功能变化。方法急性肝衰竭患儿30例为肝衰竭组,体检健康儿童30例为对照组,检测2组细胞免疫、调节性T细胞、血浆内毒素、二胺氧化酶水平变化。结果肝衰竭组患儿CD4~+细胞比率[(21.6±8.7)%]、CD4~+/CD8~+比值(1.33±0.42)、CD4~+CD25~+FOXP3~+调节性T细胞比率[(4.22±1.33)%]较对照组[(59.7±9.2)%、3.75±0.53、(8.35±2.89)%]明显减少(P0.01),CD8~+细胞比率[(29.8±5.4)%]、血浆内毒素[(21.71±4.47)EU/mL]、二胺氧化酶[(18.91±4.03)u/L]水平较对照组[(23.1±4.4)%、(3.10±1.73)EU/mL、(3.59±1.99)u/L]明显增高(P0.05)。结论急性肝衰竭患儿存在细胞免疫紊乱,参与肝衰竭的发生、发展,并加重肠道黏膜屏障功能受损。     

重症急性胰腺炎患者二胺氧化酶检测的临床意义

目的 探讨重症急性胰腺炎(SAP)血清二胺氧化酶(DAO)水平的变化,及其作为监测肠屏障功能指标的临床意义.方法 将46例SAP患者按急性生理学与慢性健康状况评分(APACHEⅡ)分为A(＜10分,15例)、B(10～20分,19例)、C(＞20分,12例)3组,D组为健康对照组(10例).采用双抗体夹心ELISA法测定所有入选者血清DAO水平的变化.结果 与对照组[(1.49±0.43) U/ml]比较,A组[(2.03±0.56) U/ml,t =2.59,P＜0.05]、B组[ (3.09±1.17) U/ml,t=4.12,P＜0.01]、C组[(2.17±0.81) U/ml,t =2.38,P＜0.05]SAP患者的血清DAO水平均明显增高,以B组增高最明显.SAP 3组间血清DAO水平两两比较,B组高于A组(t=3.22,P＜0.01)及C组(t =2.40,P＜0.05),C组较A组略高,但差异无统计学意义(t=0.51,P＞0.05).结论 血清DAO水平可作为SAP肠黏膜损伤早期诊断的敏感指标,SAP病情加重而DAO出现下降时,提示肠黏膜损伤加重.     

肠淋巴途径在大鼠重症急性胰腺炎致全身炎症反应中的作用

目的 通过肠系膜淋巴管结扎(MLDL)阻断肠淋巴液回流,观察肠淋巴途径在大鼠重症急性胰腺炎(SAP)致全身炎症反应中的作用.方法 将24只雄性SD大鼠按随机数字表法分为模型组、结扎组和假手术组,每组8只.采用胰胆管逆行注入牛黄胆酸钠溶液制备SAP合并多器官损伤模型;MLDL于制模前进行.术后24 h测定血中二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和内毒素水平及胰腺、肺脏、肝脏组织髓过氧化物酶(MPO)活性.处死大鼠取材,光镜下观察小肠组织形态学变化;培养肠系膜淋巴结细菌并计算细菌移位率.结果 与假手术组比较,模型组血中DA0、D-乳酸、TNF-α、IL-6和内毒素水平均显著升高[DAO:(0.64±0.17)kU/L比(0.37±0.07)kU/L,D-乳酸:(8.16±1.79)ng/L比(3.24±1.00)ng/L,TNF-α:(65.21±13.38)ng/L比(22.16±5.04)ng/L,IL-6:(7.95±1.83)ng/L比(4.26±1.23)ng/L,内毒素:(0.068±0.019)kEU/L比(0.033±0.009)kEU/L],肠系膜淋巴结细菌移位率显著提高(75.0%比0),胰腺、肺脏、肝脏MPO活性显著升高[胰腺:(5.14±1.24)U/g比(2.88±0.75)U/g,肺脏:(9.07±2.52)U/g比(4.38±1.29)U/g,肝脏:(6.36±1.63)U/g比(3.19±0.96)U/g,均P<0.01];与模型组比较,结扎组血中DA0((0.50±0.13)kU/L3、D-乳酸[(6.23±1.25)ng/L]、TNF-α[(48.50±13.23)ng/L3、IL-6((6.06±1.64)ng/L]和内毒素[(0.048±0.014)kEU/L]均显著降低,肠系膜淋巴结细菌移位率(12.5%)显著减少,胰腺、肺脏、肝脏MPO活性(胰腺:(4.01±1.05)U/g,肺脏:(6.58±1.96)U/g,肝脏:(4.64±1.34)U/g]显著下降(P<0.05或P<0.01).结论 MLDL可以降低SAP大鼠肠道细菌和内毒素移位,减轻胰腺、肺脏、肝脏组织炎症损伤,保护肠屏障功能.     

重组人干扰素α1b联合无乳糖饮食对小儿轮状病毒感染性肠炎肠黏膜损伤及心肌酶谱的影响

目的观察临床应用重组人干扰素α1b联合无乳糖饮食对小儿轮状病毒(RV)感染性肠炎肠黏膜损伤及心肌酶谱的影响。方法采用前瞻性研究方法,选取2015年10月至2018年2月四川大学华西医院资阳医院收治的轮状病毒感染性肠炎患儿86例,采用随机平行分组法随机分为对照组和观察组,每组各43例。对照组患儿给予重组人工干扰素α1b治疗,观察组患儿给予重组人工干扰素α1b+无乳糖饮食治疗。对比分析两组患儿治疗后临床疗效、心肌酶谱检测指标及血清中晚期糖基化终末产物(AGEs)、内毒素(EXT)以及二胺氧化酶(DAO)水平变化。结果观察组患儿治疗总有效率明显高于对照组(95. 3%vs. 85. 7%)(P 0. 05);治疗前,两组患儿心肌酶谱检测指标水平比较,差异无统计学意义(P 0. 05);治疗后,观察组患儿天门冬氨酸氨基转移酶(AST)(33. 43±3. 62 U/L vs. 39. 61±5. 63 U/L)、α-羟丁酸脱氢酶(α-HBDH)(130. 27±32. 46 U/L vs. 167. 07±31. 35 U/L)、乳酸脱氢酶(LDH)(210. 43±19. 91U/L vs. 232. 53±20. 64 U/L)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)(15. 74±2. 46 U/L vs. 21. 13±3. 00 U/L)以及肌酸激酶(CK)(110. 51±12. 24 U/L vs. 156. 82±16. 51 U/L)水平,差异具有统计学意义(P 0. 05)。治疗前,两组患儿血清中晚期糖基化终末产物(AGEs)、内毒素(EXT)、二胺氧化酶(DAO)水平比较,差异无统计学意义(P 0. 05);治疗后,观察组患儿AGEs(165. 43±21. 52 ng/L vs. 243. 64±35. 23 ng/L)、EXT(0. 37±0. 06 EU/ml vs. 0. 77±0. 15 EU/ml)、DAO(0. 62±0. 21 U/L vs. 1. 33±0. 65 U/L)水平明显低于对照组,差异具有统计学意义(P 0. 05)。结论临床应用重组人干扰素α1b联合无乳糖饮食对小儿RV感染性肠炎进行治疗能对心肌起到明显保护作用,有效改善肠黏膜损伤状态,提高治疗效果。     

肝硬化失代偿期患者肠黏膜通透性的变化

目的探讨肝硬化失代偿期患者肠黏膜通透性的变化。方法将64例肝硬化失代偿期患者分为Child-pugh B组（28例）和Child-pugh C组（36例）。测定治疗前、治疗后7d的尿乳果糖/甘露醇（L/M）比值、血浆内毒素（ET）水平和血浆二胺氧化酶（DAO）活性。结果治疗前Child-pugh C组尿L/M比值、血浆ET水平明显高于Child-pugh B组（P〈0.01）,但血浆DAO水平低于Child-pugh B组（P〈0.01）。治疗后7d,两组尿L/M比值、血浆ET水平相比较差异无统计学意义（P〉0.05）;Child-pugh C组DAO水平出现上升趋势而Child-pugh B组则出现下降趋势,两组相比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论尿L/M比值、血浆ET水平和DAO活性作为肠黏膜通透性的检测指标,能够准确反映肠黏膜通透性的变化。肠黏膜通透性升高可能是肝硬化患者病情恶化的关键因素之一。     

抑制c-Jun蛋白氨基末端激酶信号通路对内毒素血症大鼠肠屏障功能的保护作用

目的 探讨阻断细胞质内应激信号通路c-Jun蛋白氨基末端激酶(JNK)对内毒素血症大鼠肠屏障损伤的保护作用.方法 24只雄性SD大鼠,按随机数字表法分为对照组、内毒素血症模型组、JNK抑制剂组3组,每组8只.对照组仅给予生理盐水2 ml/kg+JNK抑制剂SP600125的溶剂PPCES液2.5 ml/kg;内毒素血症模型组静脉注射脂多糖( LPS) 10 mg/kg+PPCES液2.5 ml/kg;JNK抑制剂组静脉注射LPS 10 mg/kg+JNK抑制剂SP600125 10 mg/kg.记录各组大鼠活动和生存情况;并于12h后取大鼠同肠,光镜下观察肠道黏膜病理改变;同时取血,采用酶联免疫吸附试验( ELISA)测定血浆D-乳酸含量.结果 对照组大鼠活动正常,无死亡;模型组大鼠精神萎靡、活动减少,12h内死亡1只;JNK抑制剂组大鼠活动较模型组活跃,无死亡.回肠黏膜病理检查显示:与对照组相比,模型组大鼠回肠组织黏膜水肿,绒毛缩短,炎性细胞浸润;INK抑制剂组回肠组织病变较模型组减轻.模型组大鼠血浆D-乳酸含量(μg/L)较对照组显著升高(943.8±439.6比227.9±130.0,P＜0.05);JNK抑制剂能显著降低内毒素血症大鼠血浆D-乳酸含量(637.4±114.4比943.8±439.6,P＜0.05).结论 抑制细胞质内应激信号通路JNK能减轻内毒素血症大鼠肠屏障损伤.